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    2019年福清市規(guī)模羊場羊傳染性鼻腫瘤橫斷面調(diào)查

    2021-09-01 01:58:26毛坤明
    中國獸醫(yī)雜志 2021年4期
    關(guān)鍵詞:福清市羊場傳染性

    毛坤明

    (福建省福清市畜牧獸醫(yī)中心 , 福建 福清 350300)

    羊傳染性鼻腫瘤(Enzootic nasal tumor,ENT)是由羊傳染性鼻腫瘤病毒(Enzootic nasal tumor virus, ENTV)引起的一種慢性、進(jìn)行性、接觸性傳染病。羊傳染性鼻腫瘤潛伏期長,一年四季均可發(fā)生,無有效阻斷措施和治療措施,病死率一般為 30%~50%,有的高達(dá) 80%~100%[1-2]。該病主要以半歲以上的青年羊及成年羊發(fā)病為主,通過其分泌物感染其他羊。因尚無有效方法進(jìn)行病毒分離體外培養(yǎng),因此國際上對(duì)該病的研究較少,我國在20世紀(jì)90年代到21世紀(jì)初略有報(bào)道,本省幾乎沒有這方面的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。近年來,該病在本省各養(yǎng)羊相對(duì)較密集地區(qū)均有不同程度發(fā)生,且呈現(xiàn)感染上升、危害加大趨勢,初步了解,重點(diǎn)地區(qū)場群流行率可達(dá)20%~30%,病死率高,導(dǎo)致較多養(yǎng)羊場倒閉,危害嚴(yán)重?;诖?,在福清市規(guī)模化羊場開展了該病流行率測量的橫斷面研究,為科學(xué)防控該病提供第一手?jǐn)?shù)據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 目標(biāo)群 福清市內(nèi)存欄量50頭以上的規(guī)模羊場。

    1.2 抽樣策略 按照兩階段抽樣策略,第1階段按估計(jì)流行率計(jì)算場群抽樣數(shù):預(yù)期流行率為50%,可接受誤差8%,置信水平95%;第2階段按估計(jì)流行率計(jì)算場內(nèi)個(gè)體抽樣數(shù):設(shè)定預(yù)期個(gè)體流行率為5%,可接受誤差4%,置信水平95%。對(duì)抽取的個(gè)體,采集鼻腔分泌物(棉簽拭子),于保存液(Hank’s緩沖液,含丙三醇100~150 mL/L)中保存。

    1.3 病例定義 羊傳染性鼻腫瘤陽性個(gè)體:經(jīng)實(shí)驗(yàn)室PCR檢測為病原學(xué)陽性的羊只;羊傳染性鼻腫瘤陽性場群:檢測出1只及1只以上個(gè)體陽性羊只的羊場。

    1.4 檢測方法 使用RT-PCR方法進(jìn)行檢測[3],雖無權(quán)威數(shù)據(jù)以評(píng)價(jià)該方法的敏感性和特異性,但參照RT-PCR的技術(shù)特點(diǎn),經(jīng)咨詢專家,該方法的敏感性(Se)和特異性(Sp)應(yīng)不低于90%。為減少工作量,實(shí)際檢測過程中5合1檢測。將5個(gè)樣品作為1個(gè)群體考慮,經(jīng)計(jì)算,合樣檢測會(huì)顯著降低個(gè)體診斷敏感性和特異性。

    1.5 問卷調(diào)查 設(shè)計(jì)針對(duì)養(yǎng)殖場/戶的結(jié)構(gòu)性問卷,內(nèi)容包括羊場的生產(chǎn)管理、地理信息、歷史疫情、傳播相關(guān)風(fēng)險(xiǎn)因素等。田間調(diào)查和問卷填寫由經(jīng)培訓(xùn)的獸醫(yī)人員統(tǒng)一進(jìn)行。

    1.6 數(shù)據(jù)處理和分析方法 應(yīng)用Excel進(jìn)行數(shù)據(jù)匯總,應(yīng)用Epi Info(Version 7.2.2.6)和SPSS(Version 22)進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。其中表觀流行率(Apparent prevalence,AP)為檢測的陽性數(shù)占所有檢測數(shù)的比值,真實(shí)流行率(True prevalence,TP)根據(jù)公式TP=(AP+Sp-1)/(Se+Sp-1)計(jì)算,真實(shí)流行率的95%置信區(qū)間(Confidence interval,CI)根據(jù)公式CI=P±Z×[p×(1-p)/n]-1計(jì)算,其中P是真實(shí)流行率,Z為標(biāo)準(zhǔn)正態(tài)分布概率p=0.05所對(duì)應(yīng)的值,n為抽樣數(shù)量。

    2 結(jié)果

    2.1 樣本量 排查福清市存欄量50頭以上的規(guī)模羊場,并于抽樣前2周電話確定抽樣框共129家,其中最小存欄50頭,最大存欄500頭左右。最終隨機(jī)抽樣70個(gè)場群,涉及20個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn),包含山區(qū)、平原、沿海等不同地形地貌,共采集3 526份樣品(其中部分羊場因行情不好,且受羊鼻腫瘤病影響,于采樣前縮減了存欄,見表1)。

    表1 采樣情況及檢測結(jié)果匯總Table 1 Summary of sampling and test results

    2.2 個(gè)體流行率 該病病程初期表現(xiàn)為鼻腔流出少量稀薄的漿液性鼻液,隨后出現(xiàn)呼吸困難和持續(xù)性的鼻漏,進(jìn)一步發(fā)展為腫瘤,侵及眼窩、擠壓眼球、視力減退和喪失,食欲減退、消瘦,易繼發(fā)細(xì)菌感染而死亡。5合1檢測樣本706份,陽性樣本108份(圖1),個(gè)體表觀流行率15.3%。根據(jù)個(gè)體診斷試驗(yàn)的敏感性和特異性,計(jì)算個(gè)體真實(shí)流行率為6.6%(95%CI:4.8%~8.5%)。

    圖1 羊傳染性鼻腫瘤部分病例PCR擴(kuò)增Fig.1 Amplification of partial cases of ENT by PCR從左到右:DNA marker 2 000; 空白對(duì)照; 陽性擴(kuò)增產(chǎn)物From left to right: DNA marker 2 000; Blank control; Positive amplification products

    2.3 群體流行率 70個(gè)場群中檢出符合病例定義的陽性場群25個(gè),場群表觀流行率35.7%,場群真實(shí)流行率為35.7%(95%CI:24.4%~47.0%,群體敏感性和特異性均按100%計(jì)算)。

    2.4 空間分布 因隨機(jī)抽樣且抽樣場點(diǎn)數(shù)不足,全市24個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)中,4個(gè)未涉及,抽樣的20個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)中,14個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)發(fā)現(xiàn)該病陽性場點(diǎn),另6個(gè)未發(fā)現(xiàn)陽性場點(diǎn)的鄉(xiāng)鎮(zhèn)也不能排除無陽性場點(diǎn)存在(表2)。從空間分布看,相對(duì)陰性場點(diǎn),25個(gè)陽性場點(diǎn)的分布并無非常明顯的特征,半數(shù)以上離交通主干道較近。

    表2 抽樣場群和陽性場群的空間分布Table 2 Spatial distribution of sampling herds and positive herds

    2.5 風(fēng)險(xiǎn)因素分析 抽樣檢測時(shí)設(shè)計(jì)調(diào)查問卷,除了解養(yǎng)殖基本信息外,從動(dòng)物防疫角度加入了一些可能的風(fēng)險(xiǎn)因素。經(jīng)Epi Info分析,近3年是否引種(OR=10.3,95%CI:3.3~32,P<0.05)、是否交叉放牧(OR=6.9,95%CI:2.3~20.5,P<0.05)和3 km內(nèi)是否有別的羊場(OR=5.4,95%CI:1.13~26,P<0.05)為可能的風(fēng)險(xiǎn)因素(表3)。因福建省特有的飲食習(xí)慣,以山羊消費(fèi)為主,與北方活羊和羊肉差價(jià)懸殊,造成引種頻繁,引種成為該病傳播的最大風(fēng)險(xiǎn)因素。

    表3 風(fēng)險(xiǎn)因素2×2分析Table 3 2× 2 analysis of risk factors

    2.6 風(fēng)險(xiǎn)因素回歸分析 應(yīng)用SPSS對(duì)3個(gè)可能的風(fēng)險(xiǎn)因素進(jìn)行分析,見表4。在相關(guān)性分析中,“3 km內(nèi)有羊場”“交叉放牧”“引種”的相關(guān)系數(shù)分別為0.281(P=0.02)、0.457(P<0.05)和0.527(P<0.05),均具有顯著相關(guān)性。單因素回歸分析中,“周圍3 km有羊場”“交叉放牧”“引種”分別為P=0.01、P<0.05和P<0.05。將這3個(gè)參數(shù)納入邏輯回歸模型,公式為:

    p為養(yǎng)殖場發(fā)生羊鼻腫瘤的概率,X1為“引種”,X2為“交叉放牧”,X3為“周圍3 km有羊場”。Hosmer-Lemeshow 擬合優(yōu)度檢驗(yàn)卡方值χ2=15.680(df=4,P=0.003)。針對(duì)建立的Logistic回歸模型繪制了ROC曲線,曲線下方面積為0.841(95%CI:0.718~0.963)(圖2)。模型擬合不理想(P<0.05),預(yù)示找到的3個(gè)風(fēng)險(xiǎn)因素雖然對(duì)羊鼻腫瘤病的發(fā)生具有較強(qiáng)相關(guān)性,但建立的二元邏輯回歸模型還不足以高效預(yù)測羊鼻腫瘤病的感染。

    表4 風(fēng)險(xiǎn)因素Logistical回歸分析Table 4 Logistical regression analysis of risk factors

    圖2 風(fēng)險(xiǎn)因素Logistical回歸方程ROC曲線Fig.2 ROC curve for logistical regression analysis of risk factors

    3 討論

    近年來,該病在福建省內(nèi)呈現(xiàn)逐漸增多的趨勢,場群表觀流行率35.7%,場群真實(shí)流行率為35.7%(95%CI:24.4%~47.0%),發(fā)病品種均為山羊,品種間無差異(OR=0.5,P=0.07),3月齡至4歲均可發(fā)病,其中以1~2歲居多。羊群多呈零星發(fā)病,個(gè)體表觀流行率15.3%,個(gè)體真實(shí)流行率為6.6%(95%CI:4.8%~8.5%),致死率達(dá)100%。在羊群里具有明顯的傳染性,但傳播速度較慢,病程大多數(shù)持續(xù)1~4個(gè)月,個(gè)別的長達(dá)1年。該病的主要風(fēng)險(xiǎn)因素為引種(OR=10.3,95%CI:3.3~32)、交叉放牧(OR=6.9,95%CI:2.3~20.5)和周圍3 km有羊場(OR=5.4,95%CI:1.13~26)。建議該病的防控主要從引種和交叉放牧方面進(jìn)行控制。

    調(diào)查時(shí),風(fēng)險(xiǎn)因素設(shè)置的比較少,可能有的風(fēng)險(xiǎn)因素被忽略或遺漏。計(jì)算個(gè)體流行率時(shí)使用的是合樣檢測結(jié)果,可能和真實(shí)個(gè)體流行率有出入。因該病種為慢性傳染病,調(diào)查顯示的暴露因素和發(fā)病之間的相關(guān)性存在不確定性,這可能是邏輯回歸曲線擬合效果不佳的原因之一。

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