豬冷凍精液技術(shù)應(yīng)用探析

金 強(qiáng)

(甘肅省臨洮縣八里鋪鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站，甘肅 定西 730050)

人工授精是提高動(dòng)物繁殖效率的重要方式。由于豬冷凍精液不像牛羊冷凍精液那樣可以快捷和方便地生產(chǎn)，其使用和推廣效率不高，制約了養(yǎng)豬業(yè)的進(jìn)一步發(fā)展。目前，歐美發(fā)達(dá)國(guó)家已經(jīng)有成熟的豬冷凍精液產(chǎn)品，但是其精子活力和受胎率與正常交配相比存在一定的差距。近年來(lái)，我國(guó)豬冷凍精液技術(shù)的發(fā)展進(jìn)步明顯，部分產(chǎn)品已經(jīng)成功推向了市場(chǎng)。本文通過(guò)闡釋豬冷凍精液的生產(chǎn)和使用，以期對(duì)豬冷凍精液技術(shù)的推廣使用提供積極借鑒。

1 豬冷凍精液的制作

1.1 精液采集

制作冷凍精液首先要進(jìn)行精液采集，精液采集分為手握采精和自動(dòng)采精兩種。精液采集后不能馬上稀釋，也不能放置太長(zhǎng)的時(shí)間。假如精液長(zhǎng)時(shí)間未稀釋，會(huì)導(dǎo)致精子活力下降，影響精液質(zhì)量。

1.2 外觀檢查

精子外觀檢查是通過(guò)視覺、嗅覺等對(duì)精液的形態(tài)和氣味進(jìn)行判定。正常精液呈乳白色，精子密度越低顏色越淺，假如生殖器出血或者化膿感染，精液的顏色會(huì)變成暗紅或者土黃色。正常精液帶有一定的腥味，每次射精量達(dá)到400 mL左右才可進(jìn)行冷凍[1]。

1.3 顯微鏡檢查

用顯微鏡檢查精子活力的指標(biāo)包括活率、形態(tài)和密度，精子的活率是指直線行駛的精子占精子總數(shù)的比率，數(shù)值越高表明活力越大。精子密度常用血細(xì)胞計(jì)數(shù)法和便攜式精子密度儀來(lái)測(cè)定，根據(jù)精子含量可分為密、中、稀三種。血細(xì)胞計(jì)數(shù)法測(cè)定精子密度在臨床上較常見，方法是將精液滴到蓋玻片，用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板對(duì)精子進(jìn)行計(jì)數(shù)。這種方法測(cè)定精子密度較準(zhǔn)確，但是消耗的時(shí)間長(zhǎng)。便攜式精子密度儀能通過(guò)計(jì)算機(jī)快速測(cè)定精子的密度，但是投入較大，一般豬場(chǎng)難以負(fù)擔(dān)。只有形態(tài)正常的精子才具有生物學(xué)功能，形態(tài)檢查能找出畸形和頂體異常精子，這兩類精子不適合輸精[2]。

1.4 精液稀釋

精液稀釋會(huì)影響精液的冷凍效果。精液稀釋需要添加營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)(葡萄糖)、緩沖劑(磷酸鹽、檸檬酸鈉)、抗氧化劑(維生素E、谷胱甘肽)、抗凍劑(甘油、乙酰胺)以及其他添加劑。精液稀釋要保持相對(duì)平衡，根據(jù)精子的活率、密度適當(dāng)比例稀釋。

1.5 冷凍保存

豬精液冷凍常采用細(xì)管，其干凈、冷凍效果好、便于貯運(yùn)。液態(tài)氮是生產(chǎn)實(shí)踐中最常用的冷源，具有冷凍效果好、保存時(shí)間長(zhǎng)等特點(diǎn)。注意細(xì)管應(yīng)浸泡在液氮中。

2 豬冷凍精液解凍

豬冷凍精液常用水浴解凍，解凍溫度有 5 ℃、30 ℃和60 ℃。熱水解凍是目前生產(chǎn)中最常用的解凍方式，通常是將保存豬冷凍精液的細(xì)管從液氮中取出，然后快速放到水浴鍋中解凍。解凍所需時(shí)間根據(jù)解凍溫度的高低進(jìn)行調(diào)整，解凍溫度高，解凍所需時(shí)間短。豬冷凍精液解凍后用稀釋液進(jìn)行稀釋，稀釋前預(yù)熱稀釋液，預(yù)熱溫度為30 ℃左右。解凍后通過(guò)顯微鏡檢查精子的活力。解凍液對(duì)精子活力有較大的影響，研究表明用安鈉咖注射液[3]、葡萄糖、檸檬酸鈉等配成的稀釋液解凍效果好，精子的活力高，具有較高的臨床使用價(jià)值。

3 豬冷凍精液輸精方式

豬冷凍精液輸精方式通常分為常規(guī)輸精和深部輸精兩種，常規(guī)方式的輸精部位在子宮頸，要求有效精子數(shù)達(dá)到30億個(gè)以上，輸精量100 mL。輸精部位在子宮頸容易導(dǎo)致輸入的精液倒流，造成精液浪費(fèi)。研究表明，通過(guò)子宮頸輸精真正到達(dá)受精部位的精子只有1 000個(gè)左右[4]。因此，為了提高授精效率，必須加大精子的輸入量，保證精子較強(qiáng)的活力。深部輸精的輸精部位較深，包括子宮體、子宮角和輸卵管。輸卵管輸精需要與微創(chuàng)手術(shù)結(jié)合。子宮角輸精部位在子宮角三分之一處，這種輸精方式費(fèi)力，輸精成本較高，對(duì)輸精人員的綜合素質(zhì)要求較高，常用于科研實(shí)驗(yàn)中，實(shí)際生產(chǎn)使用較少[5]。用冷凍精液進(jìn)行配種常采用宮體輸精法，方法是擠壓輸精瓶使橡膠軟管在子宮內(nèi)翻出，這樣精液可直接通過(guò)子宮頸進(jìn)入子宮內(nèi)。這種輸精方式所需輸精量和有效精子數(shù)少，可降低輸精成本。