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    基于Rho信號通路的針灸效應研究進展

    2021-03-27 02:46:22鄭海珍江西中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院南昌330006
    江西中醫(yī)藥 2021年12期
    關鍵詞:胃竇電針針灸

    ★ 鄭海珍(江西中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院 南昌 330006)

    針灸作為中醫(yī)學的重要組成部分,因其簡、便、效、廉的特性逐漸被國內外認可。為更好地繼承與發(fā)揚針灸事業(yè),針灸效應機制的研究是其中的重要環(huán)節(jié)。近年來,圍繞信號通路研究針灸效應已是研究熱點,可以更靶向地反應針灸作用機制。Rho信號通路是經典的分子信號軸,圍繞該信號通路對針灸效應的研究較多。因此,本文綜合概述近10年PubMed和CNKI數(shù)據(jù)庫的相關文獻,以期為臨床和科研工作提供參考。

    1 Rho信號通路

    在Ras相關單體GTP酶中,小G蛋白Rho GTP酶是目前研究最多的。Rho相關卷曲螺旋形成蛋白激酶(ROCK)是迄今功能最明確的Rho效應物。ROCK活化后可調節(jié)細胞的多種行為與功能,包括收縮、游走粘附以及生長分裂等。Rho/ROCK信號通路分子包括Rho GTP酶、ROCK和肌球蛋白磷酸酶(MYPT)。Rho被外界信號激活后,發(fā)生膜轉位,將信號傳遞給ROCK使其分子中的854位絲氨酸和697位蘇氨酸磷酸化而激活,再依次將其底物MYPT磷酸化而使之失活。失活的MYPT不能將肌球蛋白輕鏈(MLC)脫磷酸,使胞質MLC磷酸化水平上升,肌球肌動蛋白交聯(lián)增加,進而促進肌動蛋白微絲骨架聚合、平滑肌收縮[1]。

    2 針灸對不同疾病下Rho信號通路的作用

    2.1 腦缺血再灌注損傷 林秀華[2]發(fā)現(xiàn)腦缺血再灌注模型(CIRI)大鼠ROCK活性增強,針刺能明顯抑制其ROCK的表達。譚峰等[3]發(fā)現(xiàn)電針可能是通過下調腦梗死大鼠中樞神經生長抑制因子RhoA的表達來發(fā)揮腦保護作用。陳浩[4]發(fā)現(xiàn)電針能明顯上調CIRI模型大鼠缺血腦組織內PRG5蛋白表達水平、PRG5陽性細胞數(shù),下調RhoA蛋白表達,進而改善神經缺損和運動功能。陳素輝[5]發(fā)現(xiàn)電針百會、足三里能顯著下調CIRI大鼠RhoA/ROCK通路及其下游靶分子MLC1、MYPT1的表達,減輕軸突損傷,且作用與ROCK激酶抑制劑法舒地爾相當。此外,研究發(fā)現(xiàn),電針可下調急性腦梗死大鼠紋狀體、橋腦Nogo-A/RhoA中樞神經再生抑制信號通路RhoA和ROCK2等蛋白及其mRNA的表達,抑制神經軸突損傷[6-7]。針刺聯(lián)合康復治療能顯著改善局灶性腦缺血后大鼠神經功能,或與下調大鼠缺血區(qū)皮層和海馬中Nogo信號通路RhoA、ROCK2表達有關[8-9]。

    2.2 脊髓及神經損傷 董傳菲[10]發(fā)現(xiàn)夾脊電針(EA)結合神經松動術可下調新西蘭家兔坐骨神經損傷后NogoA和RhoA的表達,加快坐骨神經損傷恢復。XiaoW P等[11]發(fā)現(xiàn),與脊髓損傷(SCI)組比較,EA、ROCK阻斷劑Y27632和EA+Y27632處理組脊髓中Nogo-A、NgR、RhoA、ROCK2 mRNA和蛋白表達均顯著降低,MLCP mRNA和蛋白表達升高,p-MYPT1蛋白表達降低,p-MYPT1/MYPT1比值和caspase3表達降低,改善了下肢運動功能,EA+Y27632處理優(yōu)于EA或Y27632單獨處理。遲蕾[12]也發(fā)現(xiàn)夾脊EA可降低急性SCI大鼠微環(huán)境內RhoA、Nogo-A、ROCK2、MLC等抑制因子表達,促進軸突再生,效果與ROCK2抑制劑Fasudil類似。Min Y等[13]發(fā)現(xiàn)EA可抑制SCI后RhoA和ROCK2的mRNA和蛋白表達,促進運動功能恢復;單唾液酸神經節(jié)苷脂促進了SCI后運動功能的恢復,但不影響RhoA和ROCK2的表達;二者聯(lián)合并沒有進一步改善運動功能,也沒有抑制RhoA和ROCK2的表達。Wu M F等[14]采用EA刺激急性SCI大鼠模型,結果發(fā)現(xiàn)BBB運動量表和斜面測試評分明顯升高,脊髓組織中凋亡細胞數(shù)量明顯減少,電針組大鼠的RhoA、Nogo-A mRNA和蛋白表達水平均較未予電針組降低,提示電針治療可減少SCI神經元凋亡,降低RhoA、Nogo-A mRNA和蛋白的表達,從而促進神經功能修復。

    2.3 阿爾茨海默病史 史寶光等[15]用電針刺激快速老化SAMP8小鼠的百會、腎俞、太溪穴8周后發(fā)現(xiàn),電針組小鼠老化行為學變化得到顯著改善,可能與腦神經樹突長度及分支數(shù)目明顯增多、海馬突觸后腦源性神經營養(yǎng)因子(BDNF)等蛋白表達水平上升、RhoA和ROCK2表達降低有關。聶坤等[16]發(fā)現(xiàn),與非穴組比較,“益氣調血,扶本培元”針法可以明顯改善SAMP8小鼠水迷宮行為學結果,明顯增加癡呆鼠皮層脂筏蛋白數(shù)量,包括微管組裝相關蛋白、微絲動力蛋白家族為主的細胞骨架蛋白及Rho家族和Ras家族成員為主的小G蛋白分子,這表明依賴細胞骨架的小G蛋白分子物質運輸環(huán)節(jié)是針刺治療阿爾茨海默病的效應靶點。

    2.4 糖尿病胃輕癱 陳小麗等[17]在觀察按部位選穴針刺對糖尿病胃輕癱(DGP)大鼠的干預效果時發(fā)現(xiàn),與模型組比較,針刺組的小腸推進率和胃竇平滑肌組織RhoA、ROCK、MYPT1、p-MYPT1蛋白的表達量明顯升高;與配伍遠端穴及非經非穴組比較,配伍局部穴組的大鼠的胃竇平滑肌組織以上蛋白指標的表達量明顯增高,胃竇平滑肌組織RhoA灰度值表達下降;配伍局部穴組大鼠的飲食量較模型組減少,DGP癥狀顯著改善,這表明配伍局部穴組治療DGP的針刺效果優(yōu)于遠端取穴和非經非穴組。崔晶晶[18]在觀察針刺和益氣健脾中藥復方對DGP的效果和機制后發(fā)現(xiàn),與模型組比較,各干預組大鼠癥狀積分降低、體重升高;中醫(yī)各組血糖顯著降低,西藥組血糖有一定的降低趨勢;針刺結合中藥組(針藥組)胃排空率升高顯著,優(yōu)于其他治療組;各干預組胃竇組織RhoA、ROCK2、p-MYPT1、p-MLC蛋白表達水平均升高,其中針藥組p-MYPT1、p-MLC蛋白升高顯著,優(yōu)于其他治療組。綜上表明,針刺可能是通過上調DGP大鼠胃竇RhoA/ROCK信號通路,促進胃平滑肌收縮,增強胃腸動力,從而減輕癥狀。

    2.5 自發(fā)性高血壓 張宏如等[19-20]發(fā)現(xiàn)麥粒灸能顯著降低自發(fā)性高血壓大鼠(SHRs)血壓,抑制主動脈內膜增生,增加血清NO含量,顯著下調RhoA、ROCK1、VEGF、VEGFR2、MLC基因和蛋白表達。李克嵩[21]也發(fā)現(xiàn)針刺可提高SHRs的NO含量以及NOS活性,降低ET-1、AngⅡ、TNF-α表達水平,降低RhoA、Rock1、Rac1、Cdc42蛋白含量及其基因表達水平,提高eNOS蛋白含量及其基因表達水平。Lai X等[22]探討了SHRs太沖穴位干預后神經系統(tǒng)蛋白質組學的反應,結果發(fā)現(xiàn),與非穴干預比較,太沖針刺干預收縮壓明顯降低,太沖組熱休克蛋白90等蛋白表達下調,Rho GDP解離抑制劑1和超氧化物歧化酶等蛋白表達上調,提示針刺可增加SHRs髓質中抗氧化酶含量,可能是針刺發(fā)揮降壓作用的部分原因。綜上表明,抑制Rho/ROCK通路可能是針灸降壓的機理。

    2.6 高脂血癥 張瑞[23]發(fā)現(xiàn)艾灸能顯著降低高脂血癥模型鼠血清TC、TG、LDL-C等含量,升高HDL-C和ApoA1含量,顯著減少主動脈Rho、ROCK2表達和陽性面積、蛋白表達、mRNA表達,增高TGF-β1和IL-10含量,下調IL-6和IL-17含量,作用與辛伐他汀類似。這表明艾灸可下調Rho/ROCK信號通路,雙向調節(jié)炎癥因子水平,以減緩動脈粥樣硬化病理進程。陶歡等[24]采用“脂三針”干預高脂血癥SD大鼠3周后發(fā)現(xiàn),與模型組比較,針刺能明顯改善大鼠一般狀態(tài),降低血脂TC等含量,增加HDL-C含量,增加血清NO含量,減少ET-1含量,改善主動脈病理損傷,顯著降低RhoA、ROCK2、MLCP蛋白表達。這表明針刺可降低血脂,抑制血管內皮損傷,可能與下調Rho/ROCK通路活性有關。

    2.7 心肌缺血-再灌注損傷 Han Y等[25]將大鼠隨機分為心肌缺血-再灌注損傷模型組,內關、足三里電針預處理組,尾靜脈注射抗miR-133a-5p組,電針+抗miR-133a-5p預處理組,結果發(fā)現(xiàn)電針預處理組可顯著減少梗死面積和心肌細胞凋亡,增強心功能,降低細胞凋亡因子p38MAPK、Bax和Caspase-3的表達;用miR-133a-5p拮抗劑阻斷電針預處理后,這種現(xiàn)象逆轉。這表明電針預處理可通過miR-133a-5p下調RhoA/p38MAPK通路,以保護MIRI大鼠免受心肌細胞凋亡的影響。

    2.8 創(chuàng)傷性腦損傷 林吉歡[26]研究針刺干預創(chuàng)傷性腦損傷(TBI)大鼠模型的效應機制,研究發(fā)現(xiàn)針刺能顯著改善大鼠神經功能缺損,降低大鼠IL-1β、IL-6、TNF-α的表達,減少神經炎性指標CD86陽性面積率,降低RhoA、ROCK2蛋白和基因表達。這表明針刺能夠抑制TBI后大鼠損傷區(qū)腦皮層RhoA/ROCK2信號通路,改善神經炎性變化,促進腦損傷恢復。

    2.9 神經性耳鳴 鄒春花等[27]采用針刺和聰耳通竅湯治療神經性耳鳴患者,觀察治療前后患者血液中5-HT及Rho/ROCK信號通路的變化,結果發(fā)現(xiàn)針藥合用組有效率顯著優(yōu)于單一組,患者血液中5-HT、ROCK蛋白明顯下降。這表明針藥合用治療神經性耳鳴療效顯著,其治療效果可能與抑制5-HT/Rho/ROCK信號通路有關。

    3 小結

    綜上,Rho/ROCK通路介導了神經細胞的生長、遷移、小膠質細胞活化、平滑肌收縮、細胞凋亡等生理病理過程,介導了腦缺血再灌注損傷、脊髓及神經損傷、創(chuàng)傷性腦損傷、阿爾茨海默病、心肌缺血-再灌注損傷等疾病的病理過程。目前該通路研究最多的分子包括RhoA、ROCK2、p-MYPT1、p-MLC及Rho GTPase家族Cdc42和Rac1等,少數(shù)學者采用通路抑制劑,如Y27632,以進一步明確針灸效應的靶向作用。針灸干預措施主要以針刺為主,艾灸極少。目前研究主要是以單獨通路為主,較少采用通路間交互作用影響的研究思路,未來研究可嘗試增加對Rho/ROCK的上游和下游影響的分子機制探索,以豐富網(wǎng)絡針灸學理念,也要增加安慰對照類研究,為穴位效應特異性的機理研究提供更多數(shù)據(jù)支持。

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