嗜酸乳桿菌對(duì)壞死性小腸結(jié)腸炎患兒免疫功能與腸道菌群的影響

陳強(qiáng)鋒 楊均秀 黎子武

【摘要】 目的：探討嗜酸乳桿菌對(duì)壞死性小腸結(jié)腸炎患兒免疫功能與腸道菌群的影響。方法：選取2015年1月-2020年10月在本院診治的壞死性小腸結(jié)腸炎患兒72例為研究對(duì)象，根據(jù)隨機(jī)信封1∶1抽簽原則將患兒分為研究組與對(duì)照組，各36例。對(duì)照組給予美沙拉嗪治療，研究組在對(duì)照組的基礎(chǔ)上給予嗜酸乳桿菌治療，兩組均治療3個(gè)月，檢測(cè)患兒免疫功能與腸道菌群的變化情況。結(jié)果：研究組總有效率為86.11%，雖高于對(duì)照組的72.22%，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。治療后，研究組雙歧桿菌、乳桿菌含量均高于對(duì)照組（P<0.05），腸桿菌、腸球菌含量均低于對(duì)照組（P<0.05）。治療后，兩組血清白介素-6（IL-6）、IL-8含量均低于治療前（P<0.05），且研究組治療后IL-6、IL-8含量均低于對(duì)照組（P<0.05）。治療后兩組CD4+T淋巴細(xì)胞比例均高于治療前（P<0.05），研究組治療后CD4+T淋巴細(xì)胞比例高于對(duì)照組（P<0.05），治療前后兩組CD3+T淋巴細(xì)胞比例在組內(nèi)與組間比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)論：嗜酸乳桿菌在壞死性小腸結(jié)腸炎患兒的應(yīng)用中能改善免疫功能，有利于維持腸道菌群平衡，從而抑制炎癥因子的表達(dá)，提高治療效果。

【關(guān)鍵詞】 嗜酸乳桿菌 壞死性小腸結(jié)腸炎 免疫功能 腸道菌群 美沙拉嗪 炎癥因子

Effects of Lactobacillus Acidophilus on Immune Function and Intestinal Flora in Children with Necrotizing Enterocolitis/CHEN Qiangfeng， YANG Junxiu， LI Ziwu. //Medical Innovation of China， 2021， 18（33）： -122

[Abstract] Objective： To investigate the effects of Lactobacillus acidophilus on the immune function and intestinal flora of children with necrotizing enterocolitis. Method： A total of 72 cases with necrotizing enterocolitis who were diagnosed and treated in our hospital from January 2015 to October 2020 were selected as the research objects. All the children were divided into the study group and the control group with 36 children in each groups accorded to the random envelope 1∶1 lottery principle. The control group were treated with Mesalazine， and the study group were treated with Lactobacillus acidophilus on the basis of the control group. Both groups were treated for 3 months， the changes in the immune function and intestinal flora of the children were detected. Result： The total effective rates of the study group were 86.11%， which were higher than 72.22% of the control group， but the difference was not statistically significant （P>0.05）. After treatment， the contents of Bifidobacterium and Lactobacillus in the study group were higher than those in the control group （P<0.05）， and the contents of Enterobacter and Enterococcus were lower than those in the control group （P<0.05）. The levels of serum interleukin-6 （IL-6） and IL-8 after treatment in the two groups were lower than those before treatment （P<0.05）， and those in the study group were lower than those in the control group after treatment（P<0.05）. The ratio of CD4+T lymphocytes in the two groups after treatment were higher than those before treatment （P<0.05）， and that in the study group was higher than that in the control group （P<0.05）. The ratio of CD3+T lymphocytes in the two groups before and after treatment were compared within and between groups， the difference were not statistically significant （P>0.05）. Conclusion： The application of Lactobacillus acidophilus in children with necrotizing enterocolitis can improve immune function and maintain the balance of intestinal flora， thereby inhibiting the expression of inflammatory factors and improving the therapeutic effect.

[Key words] Lactobacillus acidophilus Necrotizing enterocolitis Immune function Intestinal flora Mesalazine Inflammatory factors

First-author’s address： Foshan Fosun Chancheng Hospital Co.， Ltd， Foshan 528000， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2021.33.029

壞死性小腸結(jié)腸炎在臨床上比較常見，也是較為嚴(yán)重的胃腸道急癥之一，多發(fā)病于小兒[1-2]。隨著人們飲食結(jié)構(gòu)的改變和生活水平的提高，壞死性小腸結(jié)腸炎的發(fā)病人數(shù)呈上升趨勢(shì)，且該病易反復(fù)發(fā)作，對(duì)患兒身心健康造成嚴(yán)重負(fù)面影響[3]。該病在臨床上主要表現(xiàn)為血便、腹脹、嘔吐、腹瀉等癥狀，若未及時(shí)給予對(duì)癥治療，容易導(dǎo)致患兒出現(xiàn)呼吸衰竭、休克癥狀。糖皮質(zhì)激素、免疫抑制劑、水楊酸等為壞死性小腸結(jié)腸炎的主要治療藥物，但是長(zhǎng)期應(yīng)用西藥治療存在不良反應(yīng)，且部分患兒不耐受，不適用于壞死性小腸結(jié)腸炎的長(zhǎng)期治療[4-5]。研究認(rèn)為，腸道是機(jī)體最重要的防御屏障，也是機(jī)體最重要的消化吸收器官，正常腸道還具有維持機(jī)體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)、防止致病性抗原侵襲等作用，腸道內(nèi)的細(xì)菌包括益生菌、致病菌等[6]。腸道微生態(tài)系統(tǒng)與機(jī)體保持著平衡狀態(tài)，若平衡關(guān)系被打破，損傷超過機(jī)體的自我修復(fù)水平，可誘發(fā)壞死性小腸結(jié)腸炎[7-8]。嗜酸乳桿菌分布于糞便、口腔、腸道等環(huán)境中，也是眾多乳酸菌中極其重要的益生菌之一，具有調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能、增強(qiáng)腸道屏障、抑制致病菌黏附等作用，也可保護(hù)結(jié)腸黏膜的完整性，改善腸道組織學(xué)損傷，并降低炎癥因子的表達(dá)[9]。本研究探討嗜酸乳桿菌對(duì)壞死性小腸結(jié)腸炎患兒免疫功能與腸道菌群的影響，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2015年1月-2020年10月在本院診治的壞死性小腸結(jié)腸炎患兒72例為研究對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn)：符合壞死性小腸結(jié)腸炎的診斷標(biāo)準(zhǔn);2個(gè)月～6歲，具有本研究使用藥物指征;意識(shí)及精神狀態(tài)均正常;臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并惡性腫瘤者;合并嚴(yán)重心、腦、肝及腎等器官疾病者;患兒家長(zhǎng)不配合本研究者。根據(jù)隨機(jī)信封1︰1抽簽原則將患兒分為研究組與對(duì)照組，各36例。本研究經(jīng)本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，且患兒家屬簽署知情同意書。

1.2 方法 對(duì)照組給予美沙拉嗪治療，口服美沙拉嗪（生產(chǎn)廠家：黑龍江省葵花藥業(yè)有限公司，批準(zhǔn)文號(hào)：國藥準(zhǔn)字H20067505，規(guī)格：0.25 g/片）0.25 g，2次/d，治療3個(gè)月。研究組在對(duì)照組基礎(chǔ)上給予嗜酸乳桿菌治療，口服嗜酸乳桿菌（生產(chǎn)廠家：通化金馬藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司，批準(zhǔn)文號(hào)：國藥準(zhǔn)字H10940114，規(guī)格：0.25 g/包）0.25 g，

3次/d，治療3個(gè)月。所有患兒均給予心理輔導(dǎo)、對(duì)癥治療、營(yíng)養(yǎng)支持等常規(guī)治療。

1.3 觀察指標(biāo)及判定標(biāo)準(zhǔn) （1）療效標(biāo)準(zhǔn)，治愈：便隱血試驗(yàn)顯示陰性，臨床癥狀消失;顯效：便隱血試驗(yàn)顯示陰性，臨床癥狀有所消失;無效：便隱血試驗(yàn)顯示陽性，臨床癥狀無好轉(zhuǎn)甚至惡化?？傆行?治愈+顯效。（2）治療后收集患兒的新鮮糞便，稀釋后進(jìn)行需氧培養(yǎng)2 h，然后進(jìn)行42～48 h的厭氧培養(yǎng)，檢測(cè)腸桿菌、腸球菌、雙歧桿菌、乳桿菌含量。（3）治療前后抽取患兒的清晨空腹靜脈血2～3 mL，離心分離血清，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法檢測(cè)血清白介素-6（Interleukin-6，IL-6）、IL-8含量，檢測(cè)試劑盒均購自北京索萊寶科技有限公司。（4）取上述血液樣本，分離全血組織樣本，采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)CD3+T與CD4+T淋巴細(xì)胞比例。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 24.00軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以（x±s）表示，組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，組內(nèi)比較采用配對(duì)t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，比較采用字2檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組一般資料對(duì)比 兩組性別、年齡、病程、身高及體重對(duì)比，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性，見表1。

2.2 兩組治療效果對(duì)比 研究組總有效率為86.11%，雖高于對(duì)照組的72.22%，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（字2=2.105，P=0.147），見表2。

2.3 兩組治療前后腸道菌群情況對(duì)比 治療前，兩組腸道菌群水平對(duì)比，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）;治療后，研究組的雙歧桿菌、乳桿菌含量均高于對(duì)照組（P<0.05），腸桿菌、腸球菌含量均低于對(duì)照組（P<0.05）。見表3。

2.4 兩組治療前后血清炎癥因子變化對(duì)比 治療前，兩組血清IL-6、IL-8含量比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）;治療后，兩組血清IL-6、IL-8含量均低于治療前（P<0.05），且研究組治療后血清IL-6、IL-8含量均低于對(duì)照組（P<0.05）。見表4。

2.5 兩組治療前后CD3+T、CD4+T淋巴細(xì)胞比例變化對(duì)比 治療前，兩組CD3+T、CD4+T淋巴細(xì)胞比例比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）;治療后，兩組CD4+T淋巴細(xì)胞比例均高于治療前（P<0.05），研究組治療后CD4+T淋巴細(xì)胞比例高于對(duì)照組（P<0.05），兩組治療前后CD3+T淋巴細(xì)胞比例在組內(nèi)與組間對(duì)比，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見表5。

3 討論

壞死性小腸結(jié)腸炎是一種常見于小兒的消化系統(tǒng)疾病，該疾病具有誘發(fā)病因不確切、病情發(fā)展迅速等特點(diǎn)[10]。早期在臨床上主要表現(xiàn)為腹脹、嘔吐、便血等，隨著病情的進(jìn)展，可嚴(yán)重影響患兒正常生理功能，部分患兒還會(huì)伴發(fā)腸穿孔、不完全腸梗阻、排便異常等并發(fā)癥，嚴(yán)重情況下可導(dǎo)致患兒死亡[11]。目前臨床上多采用氨基水楊酸類治療壞死性小腸結(jié)腸炎，能夠有效緩解患兒的臨床癥狀，但長(zhǎng)時(shí)間用藥會(huì)增加患兒的依賴性，且不良反應(yīng)較多，停藥后患兒容易復(fù)發(fā)。IL-6、IL-8作為多功能的關(guān)鍵細(xì)胞因子，能刺激B細(xì)胞分化，誘導(dǎo)免疫球蛋白分泌，隨著患兒的病情加重而逐漸增加[12]。本研究結(jié)果顯示，研究組總有效率為86.11%，雖高于對(duì)照組的72.22%，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），可能與本研究選擇病例數(shù)較少有關(guān);兩組治療后血清IL-6、IL-8含量均低于治療前（P<0.05），且研究組治療后血清IL-6、IL-8含量均低于對(duì)照組（P<0.05），表明嗜酸乳桿菌在壞死性小腸結(jié)腸炎患兒的應(yīng)用中能抑制炎癥因子的表達(dá)，提高治療效果。嗜酸乳桿菌為一種微生態(tài)制劑，能夠抑制病菌的繁殖，增加腸道通透性，從而加速損傷上皮的修復(fù)，有效清除體內(nèi)毒素，促進(jìn)腸道內(nèi)細(xì)菌平衡狀態(tài)的恢復(fù)[13]。且嗜酸乳桿菌可增強(qiáng)機(jī)體清除氧自由基能力，抑制花生四烯酸的代謝途徑，從而減少炎性介質(zhì)的合成[14]。

由于小兒胃液和胰液分泌能力相對(duì)較低，胃腸道功能尚未完全發(fā)育成熟，更容易使細(xì)菌在腸道內(nèi)生長(zhǎng)和發(fā)育，并出現(xiàn)細(xì)菌移位形成炎癥，最終誘發(fā)壞死性小腸結(jié)腸炎[15]。嬰幼兒的壞死性小腸結(jié)腸炎發(fā)病率較高，黏膜受損、腸道喂養(yǎng)以及腸道內(nèi)細(xì)菌等均是誘發(fā)壞死性小腸結(jié)腸炎的重要因素[16]。美沙拉嗪在處于pH≥6的環(huán)境中聚甲基丙酸或乙基纖維素外層才會(huì)溶解，有利于在小腸末端及結(jié)腸處釋放從而發(fā)揮抗炎作用，促進(jìn)腸道菌群平衡。本研究結(jié)果顯示，治療后研究組雙歧桿菌、乳桿菌含量均高于對(duì)照組（P<0.05），腸桿菌、腸球菌含量均低于對(duì)照組（P<0.05）。分析原因?yàn)?，嗜酸乳桿菌可通過直接補(bǔ)充正常生理菌叢抑制致病菌，促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化、吸收，改善腸道微生態(tài)環(huán)境，阻止致病菌的定植和入侵，抑制腸源性毒素的產(chǎn)生和吸收，進(jìn)而保持腸道正常狀態(tài)，使其內(nèi)部的細(xì)菌趨于平衡[17]。

嗜酸乳桿菌等腸道內(nèi)優(yōu)勢(shì)菌群，與人體營(yíng)養(yǎng)吸收、生物拮抗及免疫等生理功能密切相關(guān)。嗜酸乳桿菌可激活過氧化物酶體增殖物激活受體-γ，從而發(fā)揮抗炎作用，還可通過改善腸道微生態(tài)平衡加速損傷上皮修復(fù)[18]。本研究結(jié)果顯示，兩組治療后CD4+T淋巴細(xì)胞比例均高于治療前（P<0.05），研究組治療后CD4+T淋巴細(xì)胞比例高于對(duì)照組（P<0.05），兩組治療前后CD3+T淋巴細(xì)胞比例在組內(nèi)與組間對(duì)比，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），表明嗜酸乳桿菌在壞死性小腸結(jié)腸炎患兒的應(yīng)用中能改善免疫功能。

綜上所述，嗜酸乳桿菌在壞死性小腸結(jié)腸炎患兒的應(yīng)用中能改善免疫功能，有利于維持腸道菌群平衡，從而抑制炎癥因子的表達(dá)，提高治療效果。本研究也存在一定的不足，如未進(jìn)行長(zhǎng)時(shí)間的隨訪分析，將在后續(xù)研究中進(jìn)行探討。

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（收稿日期：2021-04-02） （本文編輯：占匯娟）