馬 梅
鄭州大學(xué)第五附屬醫(yī)院病理科,鄭州 450000
宮頸病變是女性常見宮頸疾病,高發(fā)于45歲以上女性,患者發(fā)病后,病程遷延可發(fā)展為宮頸癌。人乳頭瘤病毒(HPV)感染是宮頸上皮內(nèi)瘤變及宮頸癌致病的主要因素,HPV E6E7致癌基因的過度表達是宮頸病變發(fā)展的主要因素[1-2]。近年來,臨床醫(yī)學(xué)對宮頸病變進行早期篩查,已不再局限于細胞形態(tài)學(xué),而轉(zhuǎn)向了病毒分子學(xué),即對癌基因及其蛋白表達水平進行檢測。第一代檢測技術(shù)主要檢測HPV DNA,其運用具有一定局限性,而第二代檢測技術(shù)變?yōu)闄z測HPV E6E7信使核糖核酸(mRNA),對預(yù)測機體感染后病變、反應(yīng)病毒感染、癌基因整合及轉(zhuǎn)錄翻譯情況有一定優(yōu)勢[3]。鑒于此,本研究選取了70例疑似宮頸病變患者,進一步探討HPV E6E7 mRNA表達水平與宮頸病變病理級別的相關(guān)性,報告如下。
選擇2018年1月—2019年1月間于鄭州大學(xué)第五附屬醫(yī)院收治的70例可疑宮頸病變患者的臨床資料,患者年齡20~77歲,平均年齡(48.26±5.15)歲;已婚59例,未婚11例,文化程度:小學(xué)及以下13例,初中19例,高中18例,大學(xué)及以上20例。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準。
納入標準:(1)患者因接觸性出血、性交痛、白帶增多或有腥臭味、異常陰道流血或排液等癥狀到我院就診;(2)均于本院擇期行HPV E6E7 mRNA定量檢測及病理學(xué)診斷;(3)患者及家屬簽署知情同意書。排除標準:(1)妊娠及哺乳期婦女;(2)合并子宮惡性腫瘤;(3)3 d內(nèi)進行過陰道用藥或沖洗;(4)表達障礙或精神疾病者。
HPV E6E7 mRNA定量檢測:消毒,患者取膀胱截石位,用無菌棉球擦拭宮頸分泌物,用HPV取樣管收集宮頸口及宮頸管脫落細胞,裝入保存液中。采用科蒂亞生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的QuantiVirusTM冷光儀及配套試劑盒定量測量HPV E6E7 mRNA。判定標準為拷貝數(shù),拷貝數(shù)≥1copies/mL為陽性,拷貝數(shù)<1copy/mL為陰性。病理學(xué)檢查:在患者移行帶3、6、9、12處采用宮頸管搔刮術(shù)取樣,送至病理科醫(yī)師處進行標本制片及閱片診斷。
(1)比較不同病理級別患者HPV E6E7 mRNA表達量的分布情況。(2)評估病理級別與HPV E6E7 mRNA表達量的相關(guān)性。病理級別包括:宮頸上皮內(nèi)瘤變(CIN)Ⅰ級、Ⅱ級及Ⅲ級、宮頸癌Ⅰ期及Ⅱ期。
宮頸病變病理級別與HPV E6E7 mRNA表達水平相關(guān)性采用Pearson相關(guān)性分析,數(shù)據(jù)采用SPSS 24.0軟件進行統(tǒng)計分析,計量資料以均數(shù)±標準差(±s)表示,組間比較采用F檢驗;計數(shù)資料以例數(shù)和百分比(%)表示,組間比較采用χ2檢驗,以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
隨病理分級增加,HPV E6E7 mRNA表達量升高,不同病理級別HPV E6E7 mRNA表達量比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
經(jīng)Pearson相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn),宮頸病變病理級別與HPV E6E7 mRNA總表達水平呈正相關(guān),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(r=0.651,P=0.035)。
宮頸病變在經(jīng)歷宮頸上皮增生、宮頸上皮不典型增生、原位癌等階段后,演變成宮頸癌。該病起初由HPV感染導(dǎo)致,HPV具有宿主特異性,可感染人體特異部位的皮膚及粘膜使上皮細胞排列紊亂、分化不良、異常增殖、核大深染,因此導(dǎo)致惡變[4-5]。HPV主要通過性接觸傳播,因此宮頸病變患者的年齡、機體免疫力、性伴侶個數(shù)、生育情況等均與宮頸病變有關(guān)。研究表明,在我國,超過半數(shù)女性有感染HPV可能,因此對HPV進行早期發(fā)現(xiàn)、病毒載量測定及疾病準確分型,對控制患者病情進展,預(yù)防宮頸癌發(fā)病有重要意義[6-7]。
表1 不同病理級別HPV E6E7 mRNA表達量分布(±s) copies/mL
表1 不同病理級別HPV E6E7 mRNA表達量分布(±s) copies/mL
病理級別表達量CINⅠ級11 672.35±243.61 CINⅡ級26 391.56±1253.78 CINⅢ級28 640.59±1463.21宮頸癌Ⅰ期49 218.63±2683.25宮頸癌Ⅱ期95 638.49±2842.65 F P 3 086.906 0.000
過往臨床常用的檢測方式為HPV DNA,其原理為觀察宮頸上皮細胞形態(tài)及測定細胞內(nèi)HPV DNA病毒載量,該方法具有操作方便、檢測用時較短、成本低的優(yōu)勢。但在臨床實踐中,該方法誤診率較高。由于大部分患者感染HPV后臨床癥狀輕,存在亞臨床感染,HPV DNA檢查僅可用于確定病因,而不能判斷病毒的活動程度,導(dǎo)致該方法逐漸被淘汰。而HPV E6E7 mRNA作為一種新型檢測方法,被證實有一定優(yōu)勢。本研究結(jié)果顯示,隨病理分級增加,P25、P50、P75、QR的HPV E6E7 mRNA表達量均升高,宮頸病變病理級別與HPV E6E7 mRNA表達水平呈正相關(guān),表明HPV E6E7 mRNA表達水平可作為評估宮頸病變病情嚴重程度的重要指標,具有較高臨床應(yīng)用價值。分析其原因在于,HPV病毒由多種基因組成,E6和E7是其中兩種癌基因,其過度表達可驅(qū)動宮頸細胞持續(xù)惡性轉(zhuǎn)化。HPV E6E7 mRNA檢測的是有轉(zhuǎn)錄活性的病毒,可檢測E6及E7兩種癌基因的表達量,若HPV E6E7 mRNA拷貝值越高,表明基因表達相對活躍,疾病進展可能性大[8]。因此,通過HPV E6E7 mRNA檢測,可有效判斷病毒有無整合到宿主細胞中,準確反應(yīng)病毒感染狀態(tài)及患者病理狀態(tài),便于預(yù)測宮頸病變發(fā)展為宮頸癌的危險程度。
綜上所述,HPV E6E7 mRNA表達水平可作為評估宮頸病變病情嚴重程度的重要指標,具有較高臨床應(yīng)用價值。