抗C1q抗體在狼瘡腎炎血清中的表達及臨床價值

周 倩 陳 曦

（綿陽市中心醫(yī)院，四川綿陽 621000）

系統(tǒng)性紅斑狼瘡（system lupus erythematosus，SLE）是一種病因尚不明確、以多種器官受累伴自身抗體形成的自身免疫性疾病，其臨床表現(xiàn)主要為發(fā)熱、面部出現(xiàn)明顯紅斑、多形性皮疹、多發(fā)性口腔潰瘍、關(guān)節(jié)炎以及中樞神經(jīng)系統(tǒng)癥狀等[1]。腎臟是SLE 最為常見的累及器官之一，而狼瘡腎炎也是SLE 較為常見的一種并發(fā)癥，臨床發(fā)病率高達60%～87%，已經(jīng)成為影響SLE 預(yù)后的主要危險因素之一。C1q 抗體是一種固有免疫補體經(jīng)典途徑的始動因子補體1（C1）的組成成分，是補體C1 的第一組分的首個反應(yīng)亞基[2]?？笴1q 抗體與C1q 特異性結(jié)合后形成免疫復(fù)合物，激活補體系統(tǒng)及消耗大量補體，進而造成腎小球的損傷及系膜濾過功能異常，最終導(dǎo)致蛋白尿和管型的發(fā)生。為了進一步明確抗C1q 抗體在狼瘡腎炎中的鑒別反映能力，了解抗C1q 抗體的工作效能，本研究以綿陽市中心醫(yī)院收治的68 例系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者、同期健康體檢者及自身免疫疾病者進行對比研究，現(xiàn)將結(jié)果報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取綿陽市中心醫(yī)院2018 年11 月至2019 年6 月收治的68 例狼瘡患者作為研究對象并設(shè)為觀察組，其 中 男 性10 例，女 性58 例；年 齡23 ～47 歲，平均年齡（32.1±1.8） 歲；病程1 個月～12 年，平均病程（36.5±6.5） 月；病理分型：Ⅱ型+Ⅲ型24 例，Ⅳ型29 例，Ⅴ型15 例。選取同期自身免疫疾病者68 例設(shè)為疾病對照組，其中男性13 例，女性55 例；年齡21 ～44 歲，平均年齡（31.8±2.2）歲。再選取同期健康體檢者68 例，其中男性15 例，女性53 例；年齡20 ～42 歲，平均年齡（31.5±2.5）歲。三組受檢者的性別構(gòu)成比、年齡等一般資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義，（P ＞0.05），具有可比性。納入標(biāo)準(zhǔn)：所有患者均符合《2010 年中國系統(tǒng)性紅斑狼瘡診斷與治療指南解讀》的診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]；均處于狼瘡腎炎的活動期。排除標(biāo)準(zhǔn)：原發(fā)性、繼發(fā)性急性或慢性腎臟疾病者；既往自身免疫系統(tǒng)疾病者、痛風(fēng)者等。

1.2 儀器和試劑

酶標(biāo)儀采用德國Roche 全自動生化免疫分析儀Cobas8000 儀，抗C1q 抗體試劑盒來自上海北加生化試劑有限公司。

1.3 方法

抗C1q 抗體采用免疫透射比濁法進行檢測。抽取三組受檢者外周靜脈血約3 ～5 mL，以轉(zhuǎn)速3 000轉(zhuǎn)/分～4 000 轉(zhuǎn)/分進行離心約10 ～15 min，快速分離血清后冷凍于-80℃冰箱內(nèi)保存。首先，將待檢測的樣品用磷酸稀釋液以1 ∶100 進行稀釋，在已經(jīng)包被C1q 抗原的微滴定板上，分別放入稀釋后的100μL 樣品稀釋液，標(biāo)準(zhǔn)液和質(zhì)控血清，在室溫條件下進行孵育約30 min，而后用沖洗液約300μL×3 洗滌除去無用成分。其次，再向其中分別加入酶標(biāo)液100μL，室溫條件下孵育約30 min，再次用300μL×3 沖洗液洗滌除去無用成分。再者，加入顯色底物約100μL，室溫黑暗狀態(tài)下孵育約30 min，最后，加入終止液，再次室溫條件下進行孵育15 min 后，在酶標(biāo)儀中進行比色。樣品顏色的深淺與抗C1q 抗體水平呈正相關(guān)，數(shù)值不小于20 U/mL 表示抗C1q 抗體檢測結(jié)果呈陽性，否則為陰性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析

數(shù)據(jù)均采用SPSS 20.0 統(tǒng)計學(xué)軟件進行分析，兩組或多組間的抗C1q 抗體陽性率采用四格表的χ2檢驗，不同病理類型的抗C1q 抗體水平比較采用t 檢驗，P ＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 血清抗C1q 抗體在三組受檢者中的陽性率比較

觀察組血清抗C1q 抗體檢測陽性35 例，陽性率為51.47%；疾病對照組血清抗C1q 抗體檢測陽性5 例，陽性率為7.35%；健康對照組血清抗C1q 抗體檢測陽性0 例，陽性率為0.00%。觀察組的血清抗C1q 抗體檢測陽性率明顯高于疾病對照組（χ2=47.013，P=0.000）和健康對照組（χ2=68.456，P=0.000）。

2.2 不同病理類型系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者血清抗C1q 抗體陽性率比較

系統(tǒng)性紅斑狼瘡腎炎IV 型的抗C1q 抗體陽性率相對高于Ⅱ型+Ⅲ型及Ⅴ型的抗C1q 抗體陽性率，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P ＜0.05），見表1。

3 討論

狼瘡屬于一種自身免疫性疾病，其發(fā)生發(fā)展多與細胞的凋亡和補體的激活系統(tǒng)相關(guān)。在細胞凋亡的過程中，核小體、核酸及蛋白等多種亞細胞成分作為機體免疫的刺激性抗原，誘導(dǎo)體內(nèi)產(chǎn)生大量自身抗體和免疫復(fù)合物，從而導(dǎo)致全身多種器官受累，而腎臟是SLE 最主要的受累器官之一。文獻報道[4]，SLE 患者并發(fā)腎炎是導(dǎo)致其死亡的主要原因之一，早診斷、早發(fā)現(xiàn)對于患者的治療意義重大。

表1 不同病理類型系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者血清抗C1q 抗體陽性率比較[例（%）]

補體C1q 的構(gòu)型是由六個亞單位組成的對稱六聚體，也是構(gòu)成補體C1 的主要成分之一。當(dāng)免疫球蛋白（IgM）或人體免疫球蛋白G（IgG）的Fc 段與兩個以上的C1q 相結(jié)合時，C1q 就會相應(yīng)地發(fā)生構(gòu)型上的變化，從而激活C1r和C1s，進而引發(fā)補體經(jīng)典激活系統(tǒng)，加強吞噬細胞的清除作用，加速清除額外的免疫復(fù)合物，并進一步發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用和參與后續(xù)的炎性反應(yīng)?？笴1q 抗體是補體 C1q 抗原決定簇膠原樣區(qū)域暴露，刺激機體產(chǎn)生自身免疫應(yīng)答，其機制十分復(fù)雜，至今尚無明確的結(jié)論。近年來的大量研究顯示[5]，血清抗C1q 抗體與系統(tǒng)性紅斑狼瘡腎臟的受損具有較為密切的聯(lián)系，可以作為判斷系統(tǒng)性紅斑狼瘡的活動性實驗指標(biāo)。

本研究結(jié)果顯示，觀察組血清中抗 C1q 抗體的陽性率為51.47%，高于疾病對照組7.35%和健康對照組0.00%，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P ＜0.05）。推測原因可能是系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者身體中的大量補體被激活，C1q 的水平增多，進而導(dǎo)致抗原決定簇膠原樣區(qū)域大量暴露，使抗C1q 抗體增多。增多的C1q 抗體與體內(nèi)的補體C1q 相結(jié)合，阻礙了正常的補體激活，導(dǎo)致體內(nèi)免疫復(fù)合物的清除速度達不到要求，由此沉積下來的循環(huán)免疫復(fù)合物增多，血清中補體C1q 的水平降低。再者，C1q 抗體能夠?qū)е卵a體C1q 與免疫復(fù)合物相互聚集，進而與腎小球基底膜的陰離子蛋白大量結(jié)合并沉積在腎臟中，加重腎臟的損害。此外，抗C1q抗體對于抑制C1q 清除自身抗原也發(fā)揮了一定程度的作用。

本研究結(jié)果顯示，IV 型系統(tǒng)性紅斑狼瘡腎炎的抗C1q抗體陽性率為72.41%，明顯高于Ⅴ型40.00%和Ⅱ型+Ⅲ型33.33%（P ＜0.05）。IV 型系統(tǒng)性紅斑狼瘡腎炎為彌漫增生型，其病變較為嚴(yán)重且廣泛存在，在光鏡下可以看到幾乎所有的腎小球有不同程度的損害，且系膜細胞和內(nèi)皮細胞嚴(yán)重增生，細胞核破碎的現(xiàn)象也相對較為明顯。任沭麗等[6]的研究指出，抗C1q 抗體在一定程度上反映了腎臟的病理改變，而IV 型的臨床癥狀相對較為嚴(yán)重，其陽性率為77.8%，特異性為81.5%。張彥平等[7]的研究顯示，Ⅳ型系統(tǒng)性紅斑狼瘡的陽性率為68.8%，Ⅱ型+Ⅲ型為23.5%，Ⅳ型高于Ⅱ型+Ⅲ型。另有研究顯示[8]，經(jīng)過免疫熒光檢查，Ⅳ型系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者腎小球的區(qū)域內(nèi)IgG、IgM、IgA、C1q 等均呈現(xiàn)顆粒狀沉積滿堂亮的現(xiàn)象。

綜上所述，系統(tǒng)性紅斑狼瘡的發(fā)生發(fā)展較為復(fù)雜，多種器官受累是其主要的臨床表現(xiàn)，其中腎臟受累是較為常見的臨床癥狀。狼瘡腎炎患者機體的抗C1q 抗體表達相對較高，抗C1q 抗體的檢測在一定條件下可以反映系統(tǒng)性紅斑狼瘡疾病的活動性，有效指導(dǎo)臨床區(qū)分其病理分型，特別是對于彌漫增殖型系統(tǒng)性紅斑狼瘡（Ⅳ型）。動態(tài)監(jiān)測患者治療前后抗C1q 抗體水平的變化可以在一定程度上為臨床系統(tǒng)性紅斑狼瘡腎炎的治療提供重要的參考。