地諾單抗在骨巨細(xì)胞瘤中的應(yīng)用研究進(jìn)展

田 齊，田 征，陳江濤，Sakarie Mustafe Hidig(索馬里)

(1.新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院骨腫瘤外科，新疆 烏魯木齊 830000；2.新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院急診外科，新疆 烏魯木齊 830000)

骨巨細(xì)胞瘤(Giant cell tumor of bone，GCTB)是一種原發(fā)溶骨性破壞的交界性骨腫瘤，通常發(fā)生在20～40歲[1]，在原發(fā)性骨腫瘤中約占5%，具有一定的局部侵襲性及復(fù)發(fā)性[2]。此外，GCTB還具有一定的肺部轉(zhuǎn)移傾向，其肺轉(zhuǎn)移發(fā)生率為1%～9%[3]。由于腫瘤與正常組織有清晰的邊界，因此臨床上治療GCTB的方法主要以擴(kuò)大刮除術(shù)為主，術(shù)中配合以高速磨鉆、無(wú)水乙醇等以盡量完全消滅腫瘤，尤其對(duì)于關(guān)節(jié)周圍病變，這種輔助佐劑聯(lián)合擴(kuò)大病灶刮除術(shù)是首選方法。在腫瘤組織破壞范圍較大甚至侵襲周圍軟組織的情況下，應(yīng)首選腫瘤組織整塊切除。病灶內(nèi)刮除術(shù)復(fù)發(fā)率非常高，約13%～49%，但是刮除術(shù)聯(lián)合佐劑的術(shù)后復(fù)發(fā)率較低(12.5%)，腫瘤病灶整塊切除的術(shù)后復(fù)發(fā)率大約0%～5%。GCTB發(fā)病機(jī)制即核因子-κB受體活化蛋白(RANK)/核因子受體激活配體(RANKL)通路的發(fā)現(xiàn)表明針對(duì)RANKL的單克隆抗體地諾單抗可以用于手術(shù)前新輔助降期以及無(wú)法手術(shù)或術(shù)后可能導(dǎo)致嚴(yán)重并發(fā)癥的患者，并且已有研究驗(yàn)證了地諾單抗對(duì)溶骨性破壞腫瘤的治療效果。但是也有研究[4]表明，地諾單抗治療后復(fù)發(fā)率反而更高，甚至有可能發(fā)生惡性轉(zhuǎn)變?，F(xiàn)對(duì)地諾單抗在GCTB中的應(yīng)用研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

1 地諾單抗治療前后GCTB組織學(xué)與分子學(xué)變化

破骨細(xì)胞相關(guān)的骨保護(hù)素(OPG)與RANK機(jī)制是對(duì)地諾單抗的進(jìn)一步研究。Branstetter等[5]發(fā)現(xiàn)GCTB通常由RANKL陽(yáng)性基質(zhì)細(xì)胞、RANK陽(yáng)性腫瘤巨細(xì)胞及新骨基質(zhì)、編織骨組成。研究[6]表明，單核基質(zhì)細(xì)胞是GCTB主要成分，因?yàn)槠洳粌H增殖能力更大，而且比多核巨細(xì)胞表達(dá)更重要的細(xì)胞因子和分化標(biāo)志物。RANK/RANKL通路是GCTB主要發(fā)病機(jī)制[7]?；|(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生的趨化因子包括基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1(SDF-1)和單核細(xì)胞趨化蛋白-1(MCP-1)，將單核細(xì)胞募集到腫瘤部位，然后通過(guò)巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)和白細(xì)胞介素(IL)-34來(lái)促進(jìn)其增殖和分化[8]。RANK激活后維持GCTB溶骨性表型，而地諾單抗是一種RANK配體抑制劑，可減小腫瘤體積并促進(jìn)骨形成，增加病變內(nèi)骨密度。研究發(fā)現(xiàn)，敲除組蛋白3.3(H3.3-G34W)后細(xì)胞中RANKL表達(dá)減少，破骨細(xì)胞形成和活性也可能減少。地諾單抗治療后有巨細(xì)胞減少以及新骨組織沉積，因此可能會(huì)與原發(fā)腫瘤有相似的組織學(xué)表現(xiàn)。研究發(fā)現(xiàn)，經(jīng)地諾單抗治療的巨細(xì)胞瘤(tGCT)具有與原發(fā)骨肉瘤或者惡變GCT相似的組織結(jié)構(gòu)，在治療早期其結(jié)構(gòu)兼有高度細(xì)胞增長(zhǎng)、異型性、無(wú)規(guī)則性骨沉積等特點(diǎn)，但缺乏惡性成分所具有的異型性、有絲分裂活性和彌漫性生長(zhǎng)。Roitman等[9]也發(fā)現(xiàn)tGCT組織學(xué)類似于未分化的多形肉瘤。Sanchez-Pareja等[10]報(bào)道1例尺骨遠(yuǎn)端巨細(xì)胞瘤，在影像學(xué)和臨床表現(xiàn)提示為肉瘤轉(zhuǎn)化后過(guò)早停用了地諾單抗，組織學(xué)表明發(fā)生假性肉瘤變。地諾單抗引起腫瘤組織變化可能與抑制RANKL有關(guān)。Charles等[11]認(rèn)為破骨細(xì)胞通過(guò)分泌轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(TGF-β1)和胰島素樣生長(zhǎng)因子-1(IGF-1)等與成骨細(xì)胞偶連，促進(jìn)成骨細(xì)胞及骨重建。當(dāng)這種偶聯(lián)失衡時(shí)，將可能會(huì)導(dǎo)致骨骼疾病的發(fā)生。破骨細(xì)胞可能會(huì)抑制基質(zhì)細(xì)胞成骨分化，當(dāng)基質(zhì)細(xì)胞脫離破骨細(xì)胞時(shí)，GCTB基質(zhì)細(xì)胞能夠分化未成熟的成骨細(xì)胞并誘導(dǎo)成骨，因此在抑制破骨細(xì)胞以后增加了基質(zhì)細(xì)胞的成骨能力，可能會(huì)發(fā)生惡變。

2 地諾單抗治療后GCTB臨床表現(xiàn)

由于GCTB基質(zhì)細(xì)胞表達(dá)RANKL，地諾單抗特異性抑制RANKL，從而抑制破骨細(xì)胞引起的溶骨性破壞。研究表明，地諾單抗停藥標(biāo)準(zhǔn)為產(chǎn)生腫瘤反應(yīng)，即至少90%巨細(xì)胞消失或治療區(qū)域到第25周影像學(xué)仍無(wú)進(jìn)展表現(xiàn)。一項(xiàng)研究中，169例手術(shù)無(wú)法切除的GCTB患者中的163例(96%)在13個(gè)月后無(wú)明顯進(jìn)展；100例手術(shù)可切除但可能有嚴(yán)重并發(fā)癥的GCTB患者中有74例(74%)未行手術(shù)治療，26例手術(shù)患者中有16例(62%)行降級(jí)手術(shù)，因此地諾單抗是GCTB一種有效的新治療方式，不僅可以為無(wú)法手術(shù)患者提供一種選擇，同時(shí)也可以用于術(shù)前降期。Rutkowski等[12]對(duì)222例GCT患者在術(shù)前行地諾單抗治療，有106例(48%)未再手術(shù)，有84例患者(38%)行降期手術(shù)，作者認(rèn)為對(duì)可切除GCTB的患者，可通過(guò)地諾單抗術(shù)前降期聯(lián)合手術(shù)切除或病灶內(nèi)刮除來(lái)控制疾病，術(shù)中配合以高速磨鉆等，既提高了腫瘤切除完整性，又保留了關(guān)節(jié)。

3 地諾單抗新輔助聯(lián)合刮除術(shù)后局部復(fù)發(fā)

GCTB病變特點(diǎn)是腫瘤進(jìn)行性生長(zhǎng)和骨溶解，邊緣相對(duì)清晰，受累的骨皮質(zhì)通常變薄及膨脹，伴或不伴有軟組織擴(kuò)張而破裂，因此在手術(shù)刮除時(shí)很容易人為穿破骨皮質(zhì)，尤其是在關(guān)節(jié)周圍造成關(guān)節(jié)及其軟骨損傷。地諾單抗術(shù)前新輔助可以促進(jìn)腫瘤周圍成骨，減小腫瘤體積，簡(jiǎn)化手術(shù)難度，易于行瘤段整體切除或腫瘤病灶內(nèi)刮除。但是近期相關(guān)研究表明地諾單抗新輔助治療會(huì)提高局部復(fù)發(fā)率。Chinder等[13]發(fā)現(xiàn)，使用地諾單抗組局部復(fù)發(fā)率明顯高于未使用組。研究發(fā)現(xiàn)，單純刮除組222例中局部復(fù)發(fā)率為16%，而地諾單抗新輔助刮除組25例患者中局部復(fù)發(fā)率高達(dá)60%。因此，我們認(rèn)識(shí)到要慎重使用地諾單抗。地諾單抗會(huì)在腫瘤邊緣形成較厚的骨殼，其中可能含有殘留的腫瘤細(xì)胞，因此區(qū)分腫瘤真實(shí)邊界并刮除干凈非常重要。Chinder等[13]發(fā)現(xiàn)，術(shù)前新輔助治療患者新生骨周邊可見(jiàn)多個(gè)蜂窩狀殘留腫瘤細(xì)胞陷窩，因此建議刮除術(shù)中配合高速磨鉆、苯酚或液氮等盡量徹底清腫瘤。有關(guān)研究[14]表明液氮直接灌注療法對(duì)周圍骨的滲透深度可能是最高的，更利于清除腫瘤。Medellin等[15]發(fā)現(xiàn)4例術(shù)前新輔助治療患者在術(shù)后均有局部復(fù)發(fā)，多因素分析提示地諾單抗是唯一的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。Tsukamoto等認(rèn)為刮除前聯(lián)合新輔助治療增加局部復(fù)發(fā)概率。Rutkowski等[16]發(fā)現(xiàn)，地諾單抗新輔助治療的89例中有19例(21%)術(shù)后局部復(fù)發(fā)，其中行局部病灶刮除術(shù)后有16例(32%)，行瘤段廣泛切除術(shù)后僅3例(7.7%)局部復(fù)發(fā)。 研究發(fā)現(xiàn)，地諾單抗在顯著減少或消除破骨細(xì)胞樣巨細(xì)胞后骨溶解被抑制，腫瘤間質(zhì)細(xì)胞被非增生性、不同類型、密集編織的新生骨替代。因此，Mak等[17]認(rèn)為給予地諾單抗時(shí)腫瘤基質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)被抑制，但停止給藥時(shí)基質(zhì)細(xì)胞又開(kāi)始增長(zhǎng)。Lau等[18]在與二膦酸鹽比較的試驗(yàn)中證明，當(dāng)?shù)刂Z單抗與成骨細(xì)胞/基質(zhì)細(xì)胞膜上RANKL結(jié)合時(shí)不會(huì)觸發(fā)細(xì)胞內(nèi)信號(hào)，對(duì)基質(zhì)細(xì)胞沒(méi)有抑制作用。因此，地諾單抗新輔助治療的高復(fù)發(fā)率可能有以下幾個(gè)主要原因：①地諾單抗作用機(jī)制在于抑制巨核細(xì)胞分化，而非抑制基質(zhì)細(xì)胞，因此在停止給藥后基質(zhì)細(xì)胞繼續(xù)增殖容易導(dǎo)致GCTB復(fù)發(fā)；②地諾單抗治療后腫瘤組織被新生骨組織替代，使得真實(shí)腫瘤邊界難以辨別，不易被刮除[19]；③腫瘤周邊不規(guī)則成骨形成較厚的骨殼，因此不易將包裹在里邊的腫瘤完全刮除；④破骨細(xì)胞與成骨細(xì)胞偶連，當(dāng)破骨細(xì)胞被抑制時(shí)基質(zhì)細(xì)胞成骨作用迅速增強(qiáng)。

4 地諾單抗所致GCTB惡變

GCTB是一種具有局部侵襲性的交界性腫瘤，具有一定向惡性腫瘤轉(zhuǎn)變的傾向。惡性骨巨細(xì)胞瘤(MGCTB)是一種罕見(jiàn)的肉瘤。Dahlin等[20]對(duì)交界性GCTB、原發(fā)性惡性GCTB及繼發(fā)性惡性GCTB做了相關(guān)描述和區(qū)分。Agarwal等[4]報(bào)道了第1例地諾單抗治療后出現(xiàn)肉瘤惡性轉(zhuǎn)變的GCTB。Liu等[21]在回顧性分析20例繼發(fā)性惡性GCTB患者時(shí)發(fā)現(xiàn)有15例骨肉瘤、4例多形性未分化肉瘤和1例纖維肉瘤。MGCTB占所有GCTB的1.8%～7%。Palmerini等[22]報(bào)道原發(fā)性MGCTB發(fā)生率為1.6%，而繼發(fā)性的發(fā)生率為2.4%，原發(fā)惡性GCTB與良性GCTB同時(shí)存在，而繼發(fā)性惡性GCTB是由良性GCTB發(fā)生惡變而來(lái)的肉瘤。Broehm等[23]報(bào)告了2例GCTB在地諾單抗治療后轉(zhuǎn)化為骨肉瘤，其中1例是在用藥期間發(fā)現(xiàn)的。Park等[24]報(bào)道1例骨盆GCTB患者地諾單抗聯(lián)合切除手術(shù)7個(gè)月后發(fā)現(xiàn)有骨肉瘤轉(zhuǎn)變。在1項(xiàng)研究中，10例地諾單抗新輔助組中有3例復(fù)發(fā)，且有1例為肉瘤樣轉(zhuǎn)化。在1項(xiàng)納入532例GCTB患者的研究中，地諾單抗治療后有4例發(fā)生肉瘤惡性轉(zhuǎn)變。但是目前還沒(méi)有文獻(xiàn)明確證明地諾單抗與GCTB惡變之間的關(guān)系。Tsukamoto等[25]報(bào)道1例左側(cè)坐骨GCTB在刮除術(shù)后局部復(fù)發(fā)的患者，在地諾單抗治療6個(gè)月時(shí)病理證明為高度骨肉瘤，作者懷疑由于抑制RANKL可能誘發(fā)GCTB惡性轉(zhuǎn)化，主要機(jī)制可能有三種：①信號(hào)蛋白3A(SEMA3A)會(huì)抑制破骨細(xì)胞和增加成骨細(xì)胞骨形成，而在成骨肉瘤細(xì)胞(Saos-2)中，RANKL上調(diào)了SEMA3A等免疫抑制活性基因的表達(dá)，因此地諾單抗會(huì)使SEMA3A基因表達(dá)缺失，導(dǎo)致骨骼和軟骨發(fā)育異常，有可能發(fā)生骨肉瘤惡性轉(zhuǎn)變；②因?yàn)镽ANKL會(huì)上調(diào)核因子ⅠB(NF-ⅠB)，而NF-ⅠB下調(diào)會(huì)激活分化較低的腫瘤表型，因此NF-ⅠB低表達(dá)可能導(dǎo)致骨肉瘤的發(fā)生；③RANKL的表達(dá)在B細(xì)胞/T細(xì)胞分化和樹(shù)突細(xì)胞(DC)生存中起著重要作用，抑制RANKL最終會(huì)增加感染的可能性，甚至由于免疫抑制而導(dǎo)致新的惡性腫瘤。

5 地諾單抗用藥時(shí)間

過(guò)早停用地諾單抗后有很高的局部復(fù)發(fā)率，而且地諾單抗最佳治療時(shí)間還沒(méi)有明確的標(biāo)準(zhǔn)。Palmerini等[26]發(fā)現(xiàn)，10例GCTB患者停用地諾單抗后有4例在8個(gè)月后出現(xiàn)腫瘤復(fù)發(fā)。研究發(fā)現(xiàn)132例患者在腫瘤控制良好情況下停用了地諾單抗，結(jié)果有34例在停藥39個(gè)月后出現(xiàn)腫瘤進(jìn)展或復(fù)發(fā)，停藥后1年復(fù)發(fā)概率為23.6% ，因此認(rèn)為對(duì)無(wú)法手術(shù)切除的患者需要更長(zhǎng)時(shí)間地應(yīng)用地諾單抗來(lái)控制腫瘤。Matcuk等[27]分享了1例橈骨遠(yuǎn)端巨細(xì)胞瘤患者，在地諾單抗治療的2年內(nèi)影像學(xué)檢查無(wú)明顯腫瘤生長(zhǎng)，但是在停藥2個(gè)月后發(fā)現(xiàn)腫瘤急劇增大，繼續(xù)給予地諾單抗，腫瘤仍持續(xù)生長(zhǎng)，且伴有骨溶解和軟組織惡化。因此，地諾單抗治療后腫瘤復(fù)發(fā)甚至惡變需要進(jìn)一步研究來(lái)確定用藥時(shí)間，對(duì)于手術(shù)無(wú)法切除的GCTB患者，建議終身使用地諾單抗以減少停藥后復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)，或者停藥前必須徹底清除腫瘤病灶。

6 結(jié) 語(yǔ)

地諾單抗是一種特異性針對(duì)靶向RANK的抑制性藥物，對(duì)腫瘤分期高、難切除的GCTB具有明顯的療效，很多研究已經(jīng)證實(shí)能夠在術(shù)前降低腫瘤分期，使病灶內(nèi)刮除或切除容易進(jìn)行，并能夠盡量保留術(shù)后肢體功能，尤其對(duì)于關(guān)節(jié)周圍病變，在保留功能的同時(shí)能夠控制腫瘤進(jìn)展。但是最近有許多研究表明地諾單抗應(yīng)用后有很多問(wèn)題：首先，行局部病灶刮除術(shù)前使用地諾單抗降期會(huì)使腫瘤與正常骨邊界不容易區(qū)分，因此我們建議如果單純行局部病灶刮除術(shù)可以徹底清除腫瘤時(shí)就盡量避免使用地諾單抗。其次，地諾單抗對(duì)GCTB具有抑制作用而非殺滅作用，在停藥后腫瘤基質(zhì)細(xì)胞會(huì)持續(xù)過(guò)度增殖，即使繼續(xù)使用地諾單抗也不能有效控制，甚至最后失去行手術(shù)治療的機(jī)會(huì)，因此我們建議使用地諾單抗的患者最好終身使用地諾單抗。最后，地諾單抗治療后有惡變轉(zhuǎn)化為肉瘤的可能，但是目前機(jī)制尚不明確，需要更加深入的研究來(lái)確定地諾單抗的用藥適應(yīng)證及使用時(shí)間(用藥維持時(shí)間以及術(shù)前/術(shù)后使用)等，在盡量最大限度保留肢體功能的同時(shí)避免腫瘤術(shù)后復(fù)發(fā)或惡變。