分子伴侶介導(dǎo)的自噬在阿爾茨海默病中作用的研究進(jìn)展

陳俊慧，谷有全，姚利和，張 薇，王懷祥

1. 蘭州大學(xué)第一醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，蘭州 730013；2. 蘭州大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院，蘭州 730013；3. 蘭州大學(xué)第二醫(yī)院口腔科，蘭州 730030；4.甘肅省張掖市甘州區(qū)人民醫(yī)院重癥醫(yī)學(xué)科，張掖 734000

阿爾茨海默病（Alzheimer's disease，AD）是一種常見的中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病。其起病隱匿且呈漸進(jìn)性發(fā)展，臨床主要表現(xiàn)為記憶力下降、認(rèn)知功能減退等，最終可導(dǎo)致患者完全喪失生活自理能力。AD 的病理特征主要表現(xiàn)為由細(xì)胞外β 淀粉樣蛋白（amyloid β-protein，Aβ）沉積導(dǎo)致的老年斑（senile plaque，SP），以及由細(xì)胞內(nèi)Tau 蛋白（Tau protein）過度磷酸化導(dǎo)致的神經(jīng)原纖維纏結(jié)（neurofibrillary tangles，NFTs）［1-2］。目前，世界范圍內(nèi)AD 患者約有5 000 萬，預(yù)計到2050 年將增加到1.52 億；且全球每年因AD 造成的衛(wèi)生經(jīng)濟負(fù)擔(dān)約達(dá)1 萬億美元［3］。與此同時，臨床上仍缺乏能夠有效治愈或阻止該疾病進(jìn)展的方法。因此，研究AD疾病的動態(tài)變化并探討AD病理發(fā)生發(fā)展的機制，對尋找預(yù)防和治療該疾病的新靶點至關(guān)重要。

自噬（autophagy）是一種在進(jìn)化過程中高度保守的細(xì)胞生理過程，是真核細(xì)胞內(nèi)清除衰老或受損細(xì)胞器和長壽命蛋白質(zhì)的主要途徑，在維持細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)態(tài)和細(xì)胞組分再利用方面發(fā)揮重要作用。根據(jù)向溶酶體轉(zhuǎn)運底物的不同機制，自噬被分為以下3種類型：①巨自噬，即自噬體的雙膜囊泡包裹細(xì)胞質(zhì)內(nèi)容物并遞送至溶酶體，以完成降解［4］。②微自噬，即溶酶體膜直接包裹長壽蛋白質(zhì)等，并在溶酶體內(nèi)降解［4］。③分子伴侶介導(dǎo)的自噬（chaperone-mediated autophagy，CMA），即分子伴侶與胞質(zhì)內(nèi)蛋白質(zhì)結(jié)合并轉(zhuǎn)至溶酶體膜上，由溶酶體跨膜蛋白將該蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運至溶酶體腔內(nèi)，再由溶酶體酶進(jìn)行降解［5-10］。越來越多的證據(jù)顯示，CMA 是異常蛋白質(zhì)早期降解的重要途徑，且該途徑的失活可能會促進(jìn)早期AD的進(jìn)展。

1 CMA 的發(fā)生過程和涉及的伴侶、受體與底物

1.1 CMA的發(fā)生過程

CMA 是一種依賴溶酶體的選擇性蛋白降解途徑，可分為4 個步驟［11］：①熱休克同源蛋白70 （heat shock cognate protein 70，HSC70）與底物蛋白結(jié)合，并轉(zhuǎn)運至溶酶體膜上［12］。②溶酶體相關(guān)膜蛋白2A（lysosomalassociated membrane protein 2A，LAMP2A）與底物蛋白結(jié)合，并使其發(fā)生去折疊化［13］。③底物蛋白被LAMP2A多聚體運送至溶酶體腔內(nèi)。④在溶酶體腔內(nèi)，底物蛋白被溶酶體酶溶解。

1.2 CMA的伴侶、受體及其底物

1.2.1 伴侶蛋白 HSC70 位于細(xì)胞內(nèi)和溶酶體中［11-12］。胞質(zhì)內(nèi)HSC70（cyt-HSC70）通過與底物蛋白的KFERQ［賴氨酸（Lys，K）-苯丙氨酸（Phe，F(xiàn)）-谷氨酸（Glu，E）-精氨酸（Arg，R）-谷氨酰胺（Gln，Q）］識別基序相互作用［14］，將底物蛋白運送至溶酶體膜上。在這一運送過程中，除HSC70 外，熱休克蛋白40 （heat-shock protein 40，HSP40）、HSC70 相互作用蛋白（HSC70-interacting protein，HIP） 和HSC90 輔伴侶蛋白（HSPorganizing protein，HOP）等其他輔助伴侶均可與HSC70形成伴侶復(fù)合物，促進(jìn)底物蛋白的轉(zhuǎn)運。隨后，溶酶體腔內(nèi)的HSC70（lys-HSC70）負(fù)責(zé)將底物蛋白從溶酶體膜轉(zhuǎn)運到溶酶體腔內(nèi)。

1.2.2 受體蛋白 LAMP2A 是一種溶酶體相關(guān)膜蛋白。前體LAMP2mRNA通過選擇性剪接可獲得3種蛋白產(chǎn)物，即LAMP2A、LAMP2B 和LAMP2C，且僅有LAMP2A 可在CMA的發(fā)展過程中發(fā)揮作用。單體LAMP2A存在于溶酶體膜上，可與膜結(jié)合的伴侶蛋白HSC70、HSP90、HSP40、HIP和HOP形成伴侶復(fù)合物，參與底物蛋白的去折疊過程。該過程發(fā)生在底物蛋白從溶酶體膜向溶酶體腔內(nèi)轉(zhuǎn)運之前。此外，在溶酶體膜上底物蛋白復(fù)合物與單體LAMP2A 結(jié)合可驅(qū)動LAMP2A 的多聚化，該多聚體可負(fù)責(zé)將底物蛋白復(fù)合物轉(zhuǎn)運至溶酶體腔內(nèi)。

1.2.3 底物 CMA 底物是一類含有KFERQ 基序的蛋白質(zhì)。KFERQ 是一組包含酸性氨基酸［天冬氨酸（Asp，D）、Glu］ 殘基、堿性氨基酸［Arg、賴氨酸（Lys，K）］殘基、疏水性氨基酸［Phe、異亮氨酸（Ile，I）、亮氨酸（Leu，L）、纈氨酸（Val，V）］殘基和1 個Gln 組成的五肽基序［11-14］。該基序主要介導(dǎo)底物蛋白與HSC70 的相互作用，存在于約40%的胞質(zhì)蛋白［如鈣調(diào)磷酸酶調(diào)節(jié)因子1（regulator of calcineurin 1，RCAN1）］中。此外，某些蛋白可通過翻譯后修飾等產(chǎn)生KFERQ 基序，從而擴大了CMA的底物數(shù)量。

2 CMA參與的一般生理過程

CMA 可參與機體的多種生理過程，具體如下：①應(yīng)激反應(yīng)中的代謝過程。在應(yīng)激條件下，如長期饑餓（12～20 h）、氧化應(yīng)激或暴露于有毒化合物等，CMA 可最大程度地被激活［15-18］，通過選擇性降解組織中非關(guān)鍵蛋白來保護(hù)關(guān)鍵蛋白不被降解［17，19］。②蛋白質(zhì)的代謝過程。通過CMA 途徑，對帶有CMA 靶向基序的發(fā)生失活、錯誤折疊或去折疊的蛋白質(zhì)進(jìn)行降解，防止其在胞內(nèi)的過度積累［17，19］。③糖、脂質(zhì)的代謝過程。CMA 通過選擇性降解糖、脂質(zhì)代謝相關(guān)途徑中的關(guān)鍵酶或相關(guān)基因等，調(diào)節(jié)糖、脂質(zhì)的代謝［20-23］。④其他調(diào)節(jié)過程。在特定的抗原呈遞細(xì)胞中，CMA 有助于主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ（major histocompatibility complex Ⅱ，MHCⅡ）介導(dǎo)的內(nèi)源性抗原的呈遞；CMA還可通過降解肌細(xì)胞增強因子2D（myocyte enhancer factor 2D，MEF2D）的存活因子來保護(hù)神經(jīng)元，調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄因子PAX2（paired box gene 2）的降解來控制腎臟中的細(xì)胞增殖［15，24］。

3 CMA在AD病理變化中的作用

3.1 CMA對Aβ直接或間接的降解作用

Aβ 聚集在細(xì)胞外是AD 的關(guān)鍵病理過程，被認(rèn)為是神經(jīng)元變性的主要原因。Aβ 是由淀粉樣前體蛋白（amyloid precursor protein，APP）在細(xì)胞內(nèi)被β 分泌酶（beta-secretase 1， BACE1） 和 γ 分泌酶 （gammasecretase） 相繼水解加工后形成。有研究證據(jù)提示，CMA 可能是APP 降解的重要途徑。Park 等［25］研究顯示，APP 的C 端含有1 個KFERQ 基序（763KFFEQ768），其可增加APP 或其裂解產(chǎn)物成為CMA 底物的可能性。Dou等［26］設(shè)計并合成了含有3 個CMA 基序的Aβ 寡聚體結(jié)合肽，通過實驗發(fā)現(xiàn)該結(jié)合肽可幫助Aβ 寡聚體進(jìn)入溶酶體進(jìn)行降解，從而減少該寡聚體在細(xì)胞外的聚集；該策略可能對AD 的治療具有重要意義。同時也有觀點［15，27］認(rèn)為，CMA 不能直接降解APP，而是通過調(diào)節(jié)其他降解途徑或通過某種中間物質(zhì)介導(dǎo)來間接促進(jìn)Aβ寡聚體的降解。Bourdenx 等［5］研究證實，在給予CMA激活劑誘導(dǎo)后，成熟淀粉樣沉積物的數(shù)量會有所下降、體積有所減小，提示CMA 減輕了AD 的病理變化。綜合上述研究可以發(fā)現(xiàn)，CMA 可以以直接或間接的方式促進(jìn)Aβ 寡聚體的降解，減少細(xì)胞外Aβ 的聚集，進(jìn)而抑制AD 病程的進(jìn)展。

3.2 CMA對Tau蛋白的降解作用

Tau 蛋白（Tau protein）是一種高度可溶的天然未折疊蛋白，幾乎不含二級結(jié)構(gòu)。其結(jié)構(gòu)域可分為包含微管結(jié)合基序的碳末端和從微管表面伸出的氮末端。Tau蛋白能夠發(fā)揮細(xì)胞骨架元件的作用，并參與軸突的運輸。異常Tau 蛋白可從微管中解離，組裝形成最初的成核物質(zhì)，該物質(zhì)進(jìn)一步沉積可形成有毒的寡聚體和成對的螺旋絲，其中成對的螺旋絲是NFTs 的主要組成成分；而NFTs 是AD 主要病理特征之一［28］。Tau 蛋白序列中存在CMA 的2個靶向基序，即336QVEVK340和347KDRVQ351，可與胞質(zhì)伴侶HSC70 結(jié)合，因此CMA 是Tau 蛋白降解的重要途徑。Bourdenx等［5］研究結(jié)果顯示，在神經(jīng)元細(xì)胞中，CMA途徑失活可導(dǎo)致蛋白質(zhì)的沉積，而該異常沉積則易導(dǎo)致蛋白質(zhì)發(fā)生錯誤折疊。因此，CMA 途徑的失活是引起蛋白質(zhì)發(fā)生錯誤折疊的關(guān)鍵原因。Bourdenx 等［5］和Caballero等［6］的研究結(jié)果顯示，Tau蛋白的異常聚集是早期AD 的一種病理改變，由于CMA 是Tau 蛋白降解的重要途徑，故CMA 活性的上調(diào)可阻止該蛋白發(fā)生沉積；繼而提示，CMA途徑的調(diào)節(jié)或?qū)⑹俏磥碇委烝D的一個新方向。

3.3 CMA對RCAN1的降解作用

鈣調(diào)磷酸酶（calcineurin，CaN）是一種Tau 蛋白的去磷酸化酶，而由RCAN1編碼的RCAN1.1L 蛋白可抑制CaN 的活性。Liu 等［27］研究表明，RCAN1 含有CMA 識別基序，可由CMA 途徑進(jìn)行降解。且CMA 途徑是RCAN1 的重要降解方式［29-31］。在AD 疾病中，CMA 途徑的失活可導(dǎo)致RCAN1 水平升高，進(jìn)而抑制CaN 的去磷酸化作用，使過度磷酸化的Tau蛋白大量積累，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)NFTs沉積。此外，RCAN1水平的升高還可以加快APP的多個水解過程，造成細(xì)胞外Aβ 寡聚體的沉積，從而促進(jìn)AD疾病的進(jìn)展［32］。

4 CMA 與Tau 蛋白翻譯后修飾產(chǎn)物的關(guān)系

如前所述，Tau 蛋白的聚集是AD 早期的病理改變之一，而CMA 是早期Tau 蛋白降解的重要途徑。當(dāng)Tau 蛋白未被及時清除時，則易發(fā)生相關(guān)修飾，如磷酸化、乙?；?、泛素化等。而Tau 蛋白修飾后的產(chǎn)物是通過CMA途徑降解還是轉(zhuǎn)換到其他途徑降解，成為了當(dāng)下研究的重要問題，這也將為探索AD進(jìn)展的具體機制及治療方式提供新的思路。

4.1 CMA與磷酸化Tau蛋白的關(guān)系

磷酸化是最為常見的Tau蛋白的翻譯后修飾，發(fā)生在NFTs 形成之前。Tau 蛋白的磷酸化可降低其對微管的親和力，導(dǎo)致神經(jīng)元細(xì)胞骨架不穩(wěn)定。該磷酸化常通過以下2 種途徑發(fā)生。①PI3K-AKT-GSK-3β 通路：磷脂酰肌醇3-激酶（phosphatidylinositol 3-kinase，PI3K）通路的激活可使絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶（serine/threonineprotein kinase，AKT）發(fā)生磷酸化，隨后磷酸化的AKT可引起糖原合酶激酶-3β（glycogen synthase kinase-3β，GSK-3β）發(fā)生磷酸化，從而抑制GSK-3β 的活性。由于GSK-3β 可促進(jìn)Tau 蛋白多個位點磷酸化導(dǎo)致Tau 蛋白過度磷酸化，故當(dāng)PI3K 通路被阻遏時，Tau 蛋白將發(fā)生過度磷酸化［33］。②CDK5-P25 途徑：細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶5（cyclin-dependent kinase 5，CDK5）是CDKs 家族的成員之一，主要在神經(jīng)系統(tǒng)中發(fā)揮作用，參與AD早期NFTs的病理形成。當(dāng)神經(jīng)元受到應(yīng)激或死亡信號刺激時，大量Ca2+進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)導(dǎo)致鈣蛋白酶被激活。激活后的鈣蛋白酶將細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶5 調(diào)節(jié)亞基1（cyclindependent kinase 5 regulatory subunit 1，P35）切割成P25，后者可激活CDK5，從而導(dǎo)致Tau 蛋白的過度磷酸化。同時，CDK5 磷酸化的增加也可上調(diào)GSK-3β 的活性，使Tau蛋白發(fā)生過度磷酸化［34］。

過度磷酸化的Tau 蛋白易沉積在細(xì)胞內(nèi)形成NFTs。因此，降解過量的磷酸化Tau 蛋白是阻止NFTs 形成的重要途徑之一。相關(guān)實驗［35］證實，Tau 蛋白被磷酸化的位點不同，則使得其與溶酶體作用時發(fā)生障礙的形式不同，如不能與溶酶體膜結(jié)合或不能從溶酶體膜轉(zhuǎn)移到腔內(nèi)，從而不能參與CMA 途徑的降解。此時，該磷酸化Tau 蛋白需通過與微管相關(guān)蛋白1 輕鏈3α （microtubule associated protein 1 light chain 3 alpha，MAP1LC3A） 即LC3相互作用，經(jīng)巨自噬途徑被降解［36］。在生理條件下，未修飾的Tau 蛋白主要通過CMA 途徑降解來維持在胞內(nèi)的動態(tài)平衡。而磷酸化后的Tau蛋白主要通過巨自噬途徑進(jìn)行降解，但經(jīng)由該途徑降解的效率遠(yuǎn)低于CMA 途徑，從而導(dǎo)致磷酸化的Tau 過量沉積，進(jìn)而加重AD 病理的進(jìn)展。

4.2 CMA與乙?；疶au蛋白的關(guān)系

乙?；彩浅Ｒ姷腡au 蛋白的翻譯后修飾。Caballero等［6］證實，在AD中，底物Tau蛋白被乙?；揎椇螅瑫瓒鬖AMP2A多聚體將CMA底物復(fù)合物從溶酶體膜轉(zhuǎn)運至溶酶體腔內(nèi)的過程，從而使CMA 途徑失活。而后，乙酰化Tau蛋白會在細(xì)胞內(nèi)發(fā)生聚集，并大量地向細(xì)胞外釋放、擴散。這一過程增加了乙?；疶au蛋白對神經(jīng)元細(xì)胞的毒性作用。此外，Bourdenx 等［5］的實驗?zāi)Ｐ妥C實，大腦中神經(jīng)元的CMA 活性被抑制是發(fā)生在AD 中的早期事件，而在發(fā)生CMA 衰竭更早、更明顯的神經(jīng)元中存在有過量的Tau 蛋白。據(jù)此推測，CMA 途徑在AD 早期異常Tau 的降解中起到關(guān)鍵作用，其或?qū)檠泳廇D 進(jìn)展的臨床治療提供新的靶點。

乙?；疶au 可導(dǎo)致CMA 途徑失活，因此，了解其中的影響因素尤為重要。研究［37］顯示，Tau 的乙?；cS-亞硝酰化的甘油醛-3-磷酸脫氫酶（S-Nitrosylated glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase，SNO-GAPDH）相關(guān)；SNO-GAPDH 可協(xié)同增強Tau 蛋白乙?；傅幕钚浴⒁种芓au 蛋白去乙?；福廴鏢irius n1（Sirti 1）］的活性，從而增加乙?；疶au蛋白的總量。目前，已發(fā)現(xiàn)小分子物質(zhì)亦可調(diào)節(jié)Tau 蛋白乙?；?。奧米加匹（CGP3466B）是一種GAPDH 亞硝基化的特異性抑制劑，可阻斷GAPDH 和Sirt1的S-亞硝基化，下調(diào)Tau蛋白的乙酰化水平。Tau蛋白去乙?；窼irt1的活性主要受輔酶煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（nicotinamide adenine dinucleotide，NAD+）濃度的調(diào)節(jié)，輔酶NAD+的抑制劑Sarm1 蛋白可保持大腦中的NAD+水平，并阻止乙?；疶au蛋白的累積；而使用Sirt1 抑制劑EX527 抑制Sirt1 的活性或用煙酰胺磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶抑制劑FK866抑制NAD+的合成，則可導(dǎo)致Tau 蛋白乙酰化。此外，組蛋白去乙?；?（histone deacetylase 6，HDAC6）可使Tau 蛋白去乙?；?；非甾體抗炎藥二氟尼柳（Diflunisal）或雙水楊酸酯（Salsalate）可抑制Tau 蛋白乙?；傅幕钚?，下調(diào)Tau 蛋白的乙酰化［37］。綜上，在Tau 蛋白的乙?；^程中存在多種調(diào)節(jié)因素，該因素可調(diào)控乙?；疶au 蛋白對CMA 途徑的抑制作用，這可能為臨床治療AD提供新的方向。

4.3 CMA與泛素化Tau蛋白的關(guān)系

泛素化也是常見的Tau蛋白的翻譯后修飾。通常，泛素中有2個序列與CMA中涉及的KFERQ基序相匹配，提示細(xì)胞內(nèi)泛素化的Tau 蛋白可直接經(jīng)CMA 途徑進(jìn)行降解［10］。同時，在Hela 細(xì)胞和小鼠模型中進(jìn)行的研究證實，CMA 還可以調(diào)節(jié)其他途徑來降解泛素化的Tau蛋白。因此，泛素化Tau 蛋白可直接或者間接地由CMA 途徑進(jìn)行降解。

5 CMA中LAMP2A的調(diào)節(jié)

LAMP2A 是CMA 途徑中的關(guān)鍵分子，其活性的調(diào)節(jié)可直接影響CMA 途徑的活性。已有研究顯示，LAMP2A的活性可由多種蛋白途徑來調(diào)節(jié)，具體如下。

5.1 上調(diào)LAMP2A活性的途徑

（1） GFAP 信號途徑：膠質(zhì)纖維酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein，GFAP）有非磷酸化和磷酸化2 種狀態(tài)。非磷酸化的GFAP 能與LAMP2A 多聚體結(jié)合并使其保持穩(wěn)定，繼而上調(diào)CMA 途徑的活性。而磷酸化的GFAP 可與非磷酸化的GFAP 形成二聚體，競爭性抑制LAMP2A 多聚體的穩(wěn)定性，從而下調(diào)了CMA 的活性。PH 結(jié)構(gòu)域富含亮氨酸重復(fù)序列的蛋白磷酸酶1（PH domain and leucine rich repeat protein phosphatase 1，PHLPP1）可使GFAP 去磷酸化，穩(wěn)定LAMP2A 多聚復(fù)合物，從而上調(diào)CMA活性［8，38］。

（2）從頭合成途徑：蛋白質(zhì)的從頭合成途徑是指由簡單的小分子氨基酸合成復(fù)雜大分子的過程。在輕度氧化應(yīng)激、遺傳毒性損傷或缺氧的誘導(dǎo)下，LAMP2A 蛋白可通過從頭合成途徑增加LAMP2A 的表達(dá)水平，進(jìn)而上調(diào)CMA的活性。

（3）LAMP2A 蛋白降解減少：LAMP2A 蛋白發(fā)生降解時，會先被轉(zhuǎn)移到溶酶體膜的脂質(zhì)微區(qū)［39］，由組織蛋白酶A 和金屬蛋白酶進(jìn)行雙重切割，隨后釋放到溶酶體腔中進(jìn)行快速降解。在生理條件下，LAMP2A 的半衰期約為36 h；但當(dāng)饑餓持續(xù)超過48 h 后，其半衰期可延長至超過72 h，因降解減少導(dǎo)致溶酶體膜上的LAMP2A 相對增加。而在長期饑餓的狀態(tài)下，駐留在溶酶體腔中的LAMP2A 會部分被轉(zhuǎn)移至溶酶體膜上，進(jìn)一步導(dǎo)致膜上的LAMP2A增加，繼而上調(diào)CMA的活性［8］。

5.2 下調(diào)LAMP2A活性的途徑

（1） EF1α 途徑：延伸因子1α （elongation factor 1 alpha，EF1α） 可對LAMP2A 多聚復(fù)合物進(jìn)行調(diào)節(jié)。EF1α 與磷酸化的GFAP 結(jié)合時，非磷酸化的GFAP 可與LAMP2A 多聚復(fù)合物結(jié)合并保持其穩(wěn)定，從而上調(diào)CMA的活性。而三磷酸鳥苷（guanosine triphosphate，GTP）可介導(dǎo)EF1α 與磷酸化GFAP 發(fā)生解離，促進(jìn)非磷酸化GFAP 從GFAP-LAMP2A 復(fù)合物中解離，同時可加速非磷酸化GFAP 轉(zhuǎn)化為磷酸化GFAP，從而破壞LAMP2A 多聚復(fù)合物的穩(wěn)定性，下調(diào)CMA的活性［8］。

（2）RARα 信號途徑：視黃酸受體α（retinoic acid receptor α，RARα）不僅能直接抑制LAMP2A 介導(dǎo)的底物蛋白與溶酶體的靶向結(jié)合，還可抑制LAMP2A 參與底物蛋白向溶酶體腔內(nèi)的轉(zhuǎn)運。因此，RARα 可調(diào)節(jié)CMA途徑的多個環(huán)節(jié)，從而下調(diào)CMA的活性［8］。

（3）CaN-NFAT1通路：研究［40］顯示，CaN可通過去磷酸化來活化T 細(xì)胞核因子1（nuclear factor of activated T cell 1，NFAT1），而活化后的NFAT1 可直接結(jié)合LAMPA2 近端啟動子區(qū)域，上調(diào)LAMP2A 的表達(dá)；CaN的抑制劑（如環(huán)孢菌素A）可降低細(xì)胞中CaN 的活性，影響CaN 介導(dǎo)的NFAT1 活化，繼而下調(diào)LAMP2A 的表達(dá)，降低CMA的活性。

（4）VPS35突變：在生理條件下，高爾基復(fù)合體通過向溶酶體轉(zhuǎn)運LAMP2A來調(diào)節(jié)CMA的活性。在攜帶有液泡蛋白分選相關(guān)蛋白35 （vacuolar protein sortingassociated protein 35，VPS35）突變的細(xì)胞中，多種溶酶體蛋白的運輸發(fā)生了改變，造成溶酶體功能發(fā)生障礙，從而加速了溶酶體介導(dǎo)的LAMP2A降解過程，使CMA途徑的活性下降［8，39］。

6 總結(jié)與展望

近年來，隨著對自噬研究的不斷深入， 我們逐漸認(rèn)識到自噬異常可能是導(dǎo)致神經(jīng)性退行性疾病發(fā)生發(fā)展的重要因素，CMA 在調(diào)控蛋白質(zhì)質(zhì)量平衡和AD 疾病進(jìn)展中的作用也越來越明確。如前所述，CMA 可參與Aβ 和Tau 蛋白的清除及RCAN1 的降解。而乙?；腡au 蛋白可使CMA 途徑失活，且該蛋白能夠在細(xì)胞內(nèi)聚集并向細(xì)胞外擴散。實驗證實，CMA 途徑在AD 早期的病理事件中起到關(guān)鍵作用，且CMA 的失活可促進(jìn)早期AD 的進(jìn)展。因此，確定CMA 途徑與AD 早期病理事件關(guān)鍵分子的交互作用及其相關(guān)機制將成為下一步研究的重點。目前，Tau 蛋白和Aβ 的靶向藥物均有了重大突破，美國食品藥品監(jiān)督管理局在2021 年6 月10 日批準(zhǔn)靶向Aβ 的抗體Aducanumab 有條件上市，Tau蛋白的疫苗AADvac1 也有了突破性進(jìn)展［41-43］。這將標(biāo)志著針對AD 病理的藥物研究已經(jīng)成為當(dāng)下的熱點。因此，鑒于CMA 在AD 發(fā)生進(jìn)展中的重要作用，研發(fā)高選擇性的CMA 調(diào)節(jié)劑將是該領(lǐng)域面臨的又一巨大挑戰(zhàn)?？傊?，進(jìn)一步明確CMA 在AD 進(jìn)展中的作用，探索以調(diào)節(jié)自噬為靶點的相關(guān)研究，或?qū)锳D 的治療提供更為廣闊的前景。