外源褪黑素對低溫脅迫下不同葡萄品種抗氧化酶活性和AsA-GSH循環(huán)的影響

苗衛(wèi)東 王萌 高換超 井朋偉 李少東 樊秀彩

摘要：利用葉面噴施方法，探討100 μmol/L外施褪黑素（MEL）溶液對低溫脅迫下不同葡萄品種抗氧化酶系統(tǒng)和抗壞血酸-谷胱甘肽循環(huán)（AsA-GSH循環(huán)）的影響，以此推論MEL在葡萄受到低溫脅迫時(shí)起到的作用。結(jié)果表明，外源MEL可以促進(jìn)低溫脅迫下葡萄抗壞血酸（AsA）和谷胱甘肽（GSH）含量的積累，降低GSSG含量。長時(shí)間（7 h）低溫脅迫下，外源MEL可以降低脫氫抗壞血酸還原酶（DHAR）含量，能夠維持較高的AsA-GSH循環(huán)系統(tǒng)中抗壞血酸過氧化物酶（APX）、DHAR、單脫氫抗壞血酸還原酶（MDHAR）、谷胱甘肽還原酶（GR）活性。噴施外源MEL促進(jìn)了低溫脅迫下葡萄AsA-GSH循環(huán)快速而有效的運(yùn)轉(zhuǎn)，降低了低溫脅迫對葡萄植株的氧化傷害，從而緩解了低溫脅迫對葡萄幼苗的傷害作用。

關(guān)鍵詞：葡萄;低溫脅迫;外源褪黑素;酶活性;抗壞血酸-谷胱甘肽循環(huán);抗氧化酶

中圖分類號： S663.101? 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A

文章編號：1002-1302（2021）23-0133-06

收稿日期：2021-08-06

作者簡介：苗衛(wèi)東（1968—），男，河南遂平人，副教授，主要從事園藝植物栽培生理研究。E-mail：wangmeng991226@163.com。

通信作者：樊秀彩，碩士，研究員，主要從事葡萄遺傳資源研究。E-mail：fanxiucai@caas.cn。

葡萄（Vitis vinifera L.）是我國及世界上的重要水果之一，但在葡萄栽培生產(chǎn)過程中常常遭遇低溫脅迫。低溫常常引起植物生理代謝紊亂，生長發(fā)育受到抑制，降低產(chǎn)量和品質(zhì)。目前對低溫脅迫的研究主要集中在膜傷害、光合、滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)、抗氧化酶活性等方面[1]。褪黑素（melatonin，簡稱MEL）是一種生物調(diào)節(jié)劑，它不僅在植物的正常生長和發(fā)育過程中扮演著必不可少的角色，而且它還可以通過提高抗氧化酶活性，降低活性氧（ROS）含量，提高植株抗性，以此緩解多種環(huán)境脅迫，如抗寒、干旱、鹽漬、營養(yǎng)元素缺乏等[2-3]。

近年來，MEL介導(dǎo)植物對生物和非生物脅迫下的抗性研究越來越受到人們關(guān)注，已有研究表明，適宜濃度的MEL處理可以提高植物對低溫的忍耐性，但效果卻因MEL處理的濃度、逆境類型及植物種類而異?？箟难?谷胱甘肽（AsA-GSH）循環(huán)系統(tǒng)是植物體內(nèi)清除活性氧自由基的重要途徑，但關(guān)于MEL是否參與調(diào)節(jié)低溫脅迫下葡萄體內(nèi) ASA-GSH 循環(huán)，緩解低溫脅迫對葡萄植株的氧化傷害研究報(bào)道較少[4-5]。本試驗(yàn)選取砧木品種SO4葡萄（SO4 grape）、紅提葡萄（Red Globe grape）和無核白葡萄（Thompson Seedless grape）3個(gè)葡萄品種的一年生盆栽自根苗為試驗(yàn)材料，研究外源MEL對低溫脅迫下葡萄AsA-GSH循環(huán)的影響，為進(jìn)一步研究外源MEL對葡萄植株抗低溫脅迫能力的影響、MEL緩解低溫傷害等方面提供一定的理論依據(jù)，為葡萄防寒管理提供一定的理論依據(jù)和技術(shù)指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗(yàn)材料采集于河南科技學(xué)院葡萄種質(zhì)資源圃（試驗(yàn)地點(diǎn)：35°16′ 56″N，113°55′ 49″E;試驗(yàn)時(shí)間：2021年3—9月）。以SO4葡萄、紅提葡萄、無核白葡萄3個(gè)葡萄品種的一年生自根苗為試驗(yàn)材料，采用盆栽方式，盆口直徑為30 cm、高為25 cm。每盆裝沙壤土4.0 kg。

1.2 方法

1.2.1 材料處理

盆栽苗長勢良好后進(jìn)行試驗(yàn)處理，每個(gè)品種隨機(jī)選取10盆，每盆種植1株一年生自根苗，首先進(jìn)行低溫脅迫處理試驗(yàn)（-15 ℃），常溫溫度為25 ℃，24 h后取材測定各項(xiàng)指標(biāo)，每個(gè)處理重復(fù)3次;然后09：00—10：00時(shí)采用100 μmol/L外施褪黑素（MEL）溶液進(jìn)行葉面噴施，MEL溶液里添加0.5% Tween-20增加表面附著。葉面噴施 3 d 后，測定各項(xiàng)指標(biāo)。試驗(yàn)設(shè)計(jì)4個(gè)處理：（1）對照，噴施清水后進(jìn)行常溫處理;（2）低溫，噴施清水后進(jìn)行低溫處理，處理1、4、7、11、24 h;（3）MEL，常溫的噴施MEL;（4）低溫+MEL，低溫處理的噴施MEL。從每個(gè)處理的植株中上部選取葉片3張，所采樣品生長勢及管理水平一致。

1.2.2 抗氧化酶系統(tǒng)中抗氧化酶活性的測定

超氧化物歧化酶（SOD）活性采用SOD抑制氮藍(lán)四唑（NBT）光化還原法進(jìn)行測定，過氧化物酶（POD）活性采用愈創(chuàng)木酚法進(jìn)行測定，過氧化氫酶（CAT）活性采用高錳酸鉀滴定法進(jìn)行測定[6]。以上生理指標(biāo)均采用北京索萊寶科技發(fā)展公司試劑盒進(jìn)行測定，型號分別為BC0700、PR1400、BC1340，每個(gè)指標(biāo)類型重復(fù)測定3次。

1.2.3 AsA-GSH循環(huán)代謝物指標(biāo)的測定

還原型抗壞血酸（AsA）、氧化型抗壞血酸（dehydroascorbic acid，簡稱DHA）含量的測定采用二聯(lián)吡啶法[7]。氧化型谷胱甘肽（GSSG）、還原型谷胱甘肽（GSH）含量的測定采用Nagalakshmi等的DTNB檢測法[8]?？箟难徇^氧化物酶（APX）、脫氫抗壞血酸還原酶（DHAR）以及谷胱甘肽還原酶（GR）活性的測定參考Nakano等的方法[9]，單脫氫抗壞血酸還原酶（MDHAR）活性的測定參考Krivosheeva等的方法[10]。以上生理指標(biāo)均采用北京索萊寶科技有限公司試劑盒進(jìn)行測定，型號分別為BC1170、BC1160、BC0195、BC0650、BC1230、BC1180，每個(gè)指標(biāo)類型重復(fù)測定3次。

1.3 數(shù)據(jù)處理

采用SPSS 22.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。

2 結(jié)果與分析

2.1 褪黑素對低溫脅迫下不同葡萄品種抗氧化酶活性的影響

2.1.1 低溫脅迫下不同葡萄品種抗氧化酶活性的變化

由表1可知，低溫脅迫處理后，3個(gè)葡萄品種的SOD和CAT依然保持較高的酶活性，這可能是SOD和CAT保護(hù)酶活性的耐寒機(jī)制已形成，當(dāng)處理7 h時(shí)，酶活性達(dá)到最高，與常溫相比差異極顯著（P<0.01），這是低溫的一種適應(yīng)性反應(yīng)，使其比在常溫下能更有效地清除體內(nèi)的有毒物質(zhì)，保護(hù)葡萄植株免受傷害或減少傷害。當(dāng)?shù)蜏孛{迫7 h時(shí)，砧木SO4葡萄的SOD和CAT活性最高，分別達(dá)到（5.83±0.002 65） U/g鮮質(zhì)量（FW）和（65.20±0.072 1） U/g 鮮質(zhì)量。但到7 h后，3個(gè)葡萄品種的SOD和CAT活性均開始隨著處理時(shí)間的增加呈下降趨勢，說明隨著低溫處理時(shí)間的延長，葡萄植株有受凍害的可能，因此在葡萄栽植管理過程中，遇到低溫脅迫時(shí)，葡萄品種、溫度和時(shí)間都是必須要考慮的因素。隨著低溫脅迫時(shí)間的增加，3個(gè)葡萄品種的POD活性均呈逐漸下降的趨勢，低溫處理24 h，SO4葡萄的POD活性降低到（70.00±1.100 0） U/g FW，紅提葡萄的POD活性為（46.67±0.115 3） U/g FW，無核白葡萄的POD活性僅為（41.67±0.085 4） U/g FW。說明隨著低溫脅迫時(shí)間的延長，抗氧化酶的活性受到破壞，葡萄植株受到低溫傷害。

2.1.2 褪黑素對低溫脅迫下不同葡萄品種抗氧化酶活性的影響

由表2可知，在1～24 h低溫脅迫時(shí)間內(nèi)，噴施外源MEL，3個(gè)葡萄品種SOD和CAT活性均呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢，在7 h時(shí)酶活性達(dá)到最高，與常溫相比差異極顯著（P<0.05）;POD活性呈現(xiàn)逐漸下降的趨勢。在低溫脅迫的整個(gè)過程中，噴施外源MEL顯著提高了SOD和CAT活性。噴施外源MEL降低了低溫脅迫下的POD活性，說明噴施外源MEL在低溫脅迫下可以提高葡萄SOD和CAT活性，抑制POD活性，說明噴施外源MEL可以增加葡萄植株體內(nèi)抗氧化物酶活性，間接增加了抗氧化物質(zhì)的含量，能有效地清除體內(nèi)的自由基，提高葡萄植株抵抗低溫脅迫的能力。

2.2 褪黑素對低溫脅迫下不同葡萄品種AsA-GSH循環(huán)途徑的影響

2.2.1 低溫脅迫下不同葡萄品種AsA-GSH循環(huán)中酶活性和代謝物的變化

在抗壞血酸代謝中，APX以AsA作為電子供體，催化AsA與H2O2反應(yīng)，達(dá)到分解H2O2的目的;MDHAR以還原型輔酶II（NADPH）作為電子供體，將單脫氫抗壞血酸（MDHA）還原為AsA;脫氫抗壞血酸還原酶（DHAR）在堿性條件下催化GSH使脫氫抗壞血酸還原酶（DHA）還原為AsA;谷胱甘肽還原酶（GR）是一種黃素蛋白氧化還原酶，能催化GSSG還原為GSH，從而使細(xì)胞內(nèi)的谷胱甘肽庫保持在還原狀態(tài)。

由表3可知，低溫脅迫過程中，隨著處理時(shí)間的延長，3個(gè)葡萄品種APX、GR、DHAR和MDHAR活性呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢，而且低溫7 h時(shí)極顯著高于常溫水平。低溫處理7 h時(shí)，SO4葡萄中GR、DHAR和MDHAR活性分別達(dá)到（6.27±0.010 0） μmol/g、（10.86±0.020 0） μmol/g 和（6.27±0.026 3） μmol/g，而APX活性在紅提葡萄中達(dá)到（18.48±0.050 0） U/g FW，是3個(gè)葡萄品種中APX活性最高的。值得注意的是，SO4葡萄中MDHAR活性在低溫處理 4 h 時(shí)達(dá)到峰值，這比紅提葡萄和無核白葡萄中MDHAR活性峰值提早3 h。結(jié)果表明，3個(gè)葡萄品種在抵抗低溫脅迫過程中AsA-GSH循環(huán)中各種酶活性明顯增加，且SO4葡萄的增加幅度更大。但超過7 h低溫脅迫后，3個(gè)不同葡萄品種APX、GR、DHAR和MDHAR活性開始出現(xiàn)下降，說明低溫脅迫一定時(shí)間內(nèi)，葡萄自身會啟動體內(nèi)AsA-GSH循環(huán)系統(tǒng)中的酶活性，提高防御能力，但是隨著低溫脅迫時(shí)間的延長，這種能力會下降，AsA-GSH循環(huán)系統(tǒng)中APX、GR、DHAR和MDHAR活性下降。

低溫脅迫期間3個(gè)葡萄品種的AsA和GSH含量及GSH/GSSG比值的變化與酶活性變化一致，均表現(xiàn)為先上升后下降的趨勢，而氧化型谷胱甘肽含量則為逐漸下降趨勢，低溫處理24 h后，SO4葡萄、紅提葡萄和無核白葡萄分別降低到（4.03±0.034 6） mmol/g FW、（2.21±0.030 0） mmol/g FW和（2.05±0.020 0） mmol/g FW。3個(gè)葡萄品種的AsA和GSH含量在低溫脅迫7 h時(shí)達(dá)到最大值，與對照相比差異極顯著。3個(gè)葡萄品種中SO4葡萄的AsA含量、GSH含量以及GSH/GSSG值最高，分別達(dá)到（3.13±0.034 6） mmol/g FW、（4.27±0.052 9） mmol/g FW和57.74%;其次為紅提葡萄，該品種的AsA含量、GSH含量以及GSH/GSSG值分別為（2.89±0.0557） mmol/g FW、（1.21±0.036 1） mmol/g FW和45.66%;無核白葡萄的AsA含量、GSH含量以及GSH/GSSG值最低，依此為（1.55±0.0346）mmol/g FW、（1.01±0.036 1） mmol/g FW和39.15%。說明低溫脅迫期7 h之前，3個(gè)葡萄品種中的AsA含量和GSH含量增加，GSSG含量降低，促使AsA最大程度地保持在還原狀態(tài)，有利于增強(qiáng)葡萄幼苗抵抗低溫脅迫的能力，而隨著低溫脅迫時(shí)間的延長，AsA-GSH循環(huán)系統(tǒng)中APX、GR、DHAR和MDHAR活性降低，GSH含量和GSSG含量降低，促使AsA含量下降，葡萄會受到低溫傷害。

2.2.2 褪黑素對低溫脅迫下不同葡萄品種AsA-GSH循環(huán)途徑的影響

GR、DHAR、MDHAR對維持AsA-GSH循環(huán)的有效運(yùn)行具有重要的作用。由表4可知，低溫脅迫下噴施外源MEL，APX、GR、DHAR和MDHAR活性在7 h前逐漸增加，隨后快速下降。低溫脅迫1～11 h時(shí)噴施外源MEL，APX、GR、DHAR、MDHAR活性顯著高于常溫。噴施外源MEL在低溫脅迫7 h時(shí)，SO4葡萄中DHAR和MDHAR活性均高于紅提葡萄和無核白葡萄，分別達(dá)到（12.11±0.040 0） 、（8.50±0.043 6） μmol/g;而APX和GR活性在紅提葡萄中最高，分別達(dá)到（29.33±0.045 8） U/g FW和（8.93±0.026 5） μmol/g。說明施用外源MEL能保持相對較高的APX、MDHAR、DHAR和GR活性，增強(qiáng)植株對H2O2等活性氧的清除能力。

GSH不僅是一種抗氧化物質(zhì)，而且是脫氫抗壞血酸還原酶（DHA）的電子供體，能清除生物體內(nèi)的自由基從而解除毒害，它通過AsA-GSH循環(huán)可加快AsA再生[1]。在低溫脅迫時(shí)噴施外源MEL處理期間，3個(gè)葡萄品種中AsA含量、GSH含量、GSSG含量和GSH/GSSG值的變化均表現(xiàn)為先上升后下降的趨勢。低溫脅迫中噴施外源MEL增加了AsA、GSH、GSSG含量，其中低溫脅迫7 h時(shí)施加外源MEL，AsA、GSH、GSSG含量和GSH/GSSG值達(dá)到最大，與對照相比，效果差異極顯著（P<0.01）。3個(gè)葡萄品種中SO4葡萄的AsA、GSH、GSSG含量及GSH/GSSG值最高，分別達(dá)到（4.67±0.062 4）、（5.67±0.026 5）、（9.16±0.045 8） mmol/g FW和61.90%;其次為紅提葡萄，該品種AsA、GSH、GSSG含量以及GSH/GSSG值分別為（3.99±0.020 0）、（2.33±0.036 1）、（4.67±0.045 8） mmol/g FW和49.89%;而無核白葡萄的AsA、GSH、GSSG含量以及GSH/GSSG值是3個(gè)品種中最低的，僅為（3.00±0.026 5）、（1.79±0.026 5）、（4.33±0.010 0） mmol/g FW和41.34%?？梢?，低溫脅迫下噴施適量MEL可顯著提高GSH含量，降低GSSH含量，導(dǎo)致GSH/GSSG的比值明顯提高。說明噴施外源褪黑素可通過提高AsA-GSH循環(huán)系統(tǒng)的代謝活動，減輕活性氧對葡萄幼苗的傷害，從而提高葡萄抵抗低溫脅迫的能力。

3 討論與結(jié)論

低溫脅迫會影響植物的光合作用和能量的產(chǎn)生，導(dǎo)致物質(zhì)合成受阻，細(xì)胞內(nèi)活性氧積累，代謝失衡從而引發(fā)膜脂過氧化、電解質(zhì)失衡、細(xì)胞代謝紊亂等[2，11]，嚴(yán)重時(shí)會導(dǎo)致植物死亡。面對脅迫植物可以調(diào)動自身的抗氧化防御機(jī)制，產(chǎn)生SOD、CAT、POD、APX、GR、DHAR、MDHAR等抗氧化酶以及AsA、GSH等抗氧化劑[7-10]，通過直接或間接途徑還原積累的活性氧[9]，從而減少低溫對植物造成的傷害。

本試驗(yàn)主要探究低溫脅迫下外源施用MEL對不同葡萄品種常規(guī)抗氧化酶及AsA-GSH循環(huán)代謝系統(tǒng)的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)低溫處理的3種葡萄，SOD、CAT、POD活性隨處理時(shí)間的延長均呈現(xiàn)先升后降的趨勢，這與鄭春芳等的研究結(jié)果[5]一致。這可能是由于在脅迫初期，低溫作為信號，啟動了植物的應(yīng)激反應(yīng)，而在脅迫后期低溫降低了抗氧化酶活性，大量積累的活性氧誘導(dǎo)丙二醛（MDA）等有毒代謝物質(zhì)大量產(chǎn)生，進(jìn)而抑制了保護(hù)酶的活性。噴施外源MEL的葡萄，遭受低溫脅迫后SOD、CAT、POD活性與未噴施MEL的處理相比也呈現(xiàn)相同的趨勢，但是酶活性均高于低溫處理植株，這也在其他研究[12-15]中被證明，說明施用外源MEL可以提高SOD、POD、CAT這些常規(guī)抗氧化酶的活性，通過減少細(xì)胞膜脂過氧化，保持細(xì)胞膜完整性進(jìn)而有效降低低溫對葡萄植株造成的傷害。

AsA和GSH可以維持蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性，生物膜系統(tǒng)結(jié)構(gòu)的完整性及防御膜脂過氧化，與APX、DHAR、MDHAR、GR共同構(gòu)成了能有效清除自由基的循環(huán)系統(tǒng)，即AsA-GSH循環(huán)，在抗氧化機(jī)制中發(fā)揮重要作用，在AsA-GSH循環(huán)中AsA借助APX的催化作用與H2O2反應(yīng)，接受來自GSH的NADPH，把H2O2還原成H2O，同時(shí)自身被氧化形成MDHA，一部分的MDHA則在MDHAR的作用下被還原為AsA，重新參與AsA-GSH循環(huán)，而另一部分的MDHA通過再次氧化形成DHA，DHA又以GSH為底物在DHAR催化作用下重新生成AsA，而此反應(yīng)所產(chǎn)生的GSSG在NADPH參與下又被GR催化還原成GSH[16-21]。在本試驗(yàn)中，低溫脅迫初期，AsA-GSH系統(tǒng)中的抗氧化酶活性及非酶抗氧化劑含量呈上升趨勢，脅迫后期整體又呈下降的趨勢，呈現(xiàn)這種趨勢的原因推測與SOD、CAT、POD活性變化規(guī)律相同。而施用100 μmol/L外源MEL，APX、DHAR、MDHAR、GR活性和AsA、GSH含量提高，GSH/GSSG比值提升，說明施用外源MEL提高了AsA和GSH含量，為AsA-GSH循環(huán)系統(tǒng)提供了充足底物，加速了活性氧清除效率，減輕了活性氧對膜脂的傷害，保持了細(xì)胞完整性，從而緩解了低溫對葡萄的傷害，為葡萄防寒管理提供一定的理論依據(jù)和技術(shù)指導(dǎo)。

參考文獻(xiàn)：

[1]曲凌慧，車永梅，侯麗霞，等. 低溫脅迫對葡萄品種梅鹿輒和貝達(dá)活性氧代謝的影響[J]. 青島農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2010，27（2）：117-121，125.

[2]卞鳳娥，唐翠花，邢 浩，等. 外源褪黑素對干旱脅迫下葡萄內(nèi)源褪黑素及葉綠素?zé)晒馓匦缘挠绊慬J]. 植物生理學(xué)報(bào)，2018，54（10）：1615-1623.

[3]Zetterstrom R C，Eijkman C，Sir Hopkins F G. The dawn of vitamins and other essential nutritional growth factors[J]. Acta Padiatrica，2006，95（11）：1331-1333.

[4]尹永強(qiáng)，胡建斌，鄧明軍. 植物葉片抗氧化系統(tǒng)及其對逆境脅迫的響應(yīng)研究進(jìn)展[J]. 中國農(nóng)學(xué)通報(bào)，2007，23（1）：105-110.

[5]鄭春芳，劉偉成，魏 龍，等. 外施褪黑素對低溫脅迫下紅樹植物秋茄光合作用和抗壞血酸-谷胱甘肽循環(huán)的調(diào)控[J]. 植物生理學(xué)報(bào)，2019，55（8）：1211-1221.

[6]李小方，張志良. 植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)[M]. 5版.北京：高等教育出版社，2016：292.

[7]Jiang M Y，Zhang J H.Effect of abscisic acid on active oxygen species，antioxidative defence system and oxidative damage in leaves of maize seedlings[J]. Plant? and Cell Physiology，2001，42（11）：1265-1273.

[8]Nagalakshmi N，Prasad M N V.Responses of glutathione cycle enzymes and glutathione metabolism to copper stress in Scenedesmus bijugatus[J]. Plant Science，2001，160（2）：291-299.

[9]Nakano Y，Asada K.Hydrogen peroxide is scavenged by ascorbate-specific peroxidase in spinach chloroplasts[J]. Plant and Cell Physiology，1981，22（5）：867-880.

[10]Krivosheeva A，Tao D L，Ottander C，et al. Cold acclimation and photoinhibition of photosynthesis in Scots pine[J]. Planta，1996，200（3）：296-305.

[11]黃 娟，劉紀(jì)疆，高明華，等. 近30年伊寧縣氣候變化規(guī)律及其對冰葡萄種植可行性的影響[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2021，49（15）：136-142.

[12]王 芳，王 淇，趙曦陽. 低溫脅迫下植物的表型及生理響應(yīng)機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 分子植物育種，2019，17（15）：5144-5153.

[13]郁萬文，曹福亮，汪貴斌.低溫脅迫下銀杏活性氧代謝與膜傷害的關(guān)系[J]. 東北林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2010，38（7）：46-48.

[14]丁紅映，王 明，謝 潔，等. 植物低溫脅迫響應(yīng)及研究方法進(jìn)展[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2019，47（14）：31-36.

[15]雷雪峰，馬愛生，李海翠，等. 8種禾本科牧草低溫脅迫的生理響應(yīng)及抗寒性比較[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2019，47（9）：218-222.

[16]Tan D X，Manchester L C，Reiter R J，et al. Significance of melatonin in antioxidative defense system：reactions and products[J]. Neurosignals，2000，9（3/4）：137-159.

[17]Potters G，Horemans N，Bellone S，et al. Dehydroascorbate influences the plant cell cycle through a glutathione-independent reduction mechanism[J]. Plant Physiology，2004，134（4）：1479-1487.

[18]吳錦程，梁 杰，陳建琴，等. GSH對低溫脅迫下枇杷幼果葉綠體AsA-GSH循環(huán)代謝的影響[J]. 林業(yè)科學(xué)，2009，45（11）：15-19.

[19]Wu X X，He J E，Ding H D，et al. Modulation of zinc-induced oxidative damage in Solanum melongena by 6-benzylaminopurine involves ascorbate-glutathione cycle metabolism[J]. Environmental and Experimental Botany，2015，116：1-11.

[20]韓 敏，曹逼力，劉樹森，等. 低溫脅迫下番茄幼苗根穗互作對其抗壞血酸-谷胱甘肽循環(huán)的影響[J]. 園藝學(xué)報(bào)，2019，46（1）：65-73.

[21]Nahar K，Hasanuzzaman M，Alam M M，et al. Exogenous spermidine alleviates low temperature injury in mung bean （Vigna radiata L.） seedlings by modulating ascorbate-glutathione and glyoxalase pathway[J]. International Journal of Molecular Sciences，2015，16（12）：30117-30132.