血清MBP GFAP水平與新生兒缺氧缺血性腦病腦損傷程度的關(guān)系研究

張軍建 張礦召 武振江

平頂山市第一人民醫(yī)院，河南 平頂山 467000

新生兒缺氧缺血性腦病(hypoxic-ischemic encephalopathy，HIE)是指圍生期窒息導致的新生兒腦缺氧缺血性損害，可導致新生兒顱內(nèi)出血、多器官功能損傷、智力障礙、運動障礙、繼發(fā)性癲癇等，嚴重者導致患兒死亡[1-2]。HIE臨床癥狀以意識狀態(tài)改變、肌張力變化和驚厥為主要表現(xiàn)，是判斷腦病嚴重程度和后遺癥的主要指標[3]。HIE嚴重影響新生兒神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育，早期診斷與科學檢測腦細胞損傷的嚴重程度在臨床上具有重要意義[4-5]。髓鞘堿性蛋白(myelin base protein，MBP)位于中樞神經(jīng)系統(tǒng)髓鞘漿膜面，主要作用是維持髓鞘結(jié)構(gòu)與功能的穩(wěn)定，MBP含量可以反映髓鞘損傷情況[6]。血清膠質(zhì)纖維酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein，GFAP)是星形膠質(zhì)細胞分化和反應(yīng)性標記物，其作用主要是維持星形膠質(zhì)細胞的形態(tài)和功能，有研究表明GFAP水平的增高一定程度上反映了腦損傷的程度，是一種較敏感的腦損傷指標[7-8]。因此，本研究探討血清MBP、GFAP水平與HIE患兒腦損傷的關(guān)系，旨在為HIE臨床診斷提供指導。

1 資料和方法

1．1臨床資料回顧分析2018-02—2019-10平頂山市第一人民醫(yī)院121例HIE患兒的臨床資料，其中男67例，女54例；年齡1～4(2.10±0.32)周。納入標準：(1)符合HIE新生兒診斷標準；(2)無嚴重心、肝、腎等器官器質(zhì)性疾?。?3)患兒均在本院出生。排除標準：(1)伴感染性疾??；(2)先天性心臟病患兒；(3)中樞系統(tǒng)畸形患兒；(4)伴呼吸系統(tǒng)疾病患兒。本研究獲院倫理委員會批準。

1．2方法

1．2．1 血清MBP、GFAP水平檢測方法：新生兒出生24 h后取靜脈血2 mL，血液標本置于抗凝管中，室溫下3 000 r/min離心15 min(離心半徑10 cm)，取血清置于—80 ℃保存待測，采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫法測定血清MBP水平，酶聯(lián)免疫吸附法檢測GFAP水平，測量3次求平均值。MBP試劑盒購自上?？祈樕锟萍加邢薰?，GFAP試劑盒購自上海博谷生物科技有限公司。

1．2．2 分組方法：根據(jù)新生兒缺氧缺血性腦病診斷依據(jù)和臨床分度[9]：①存在產(chǎn)前高危因素，胎動減少，胎心率減慢，羊水Ⅲ度胎糞污染等病史；②Apgar評分1 min≤3分，5 min≤6分；③存在意識、肌張力改變、反射改變、驚厥等中樞神經(jīng)系統(tǒng)癥狀體征；④顱腦CT或B超的影像學改變。將本組HIE患兒分為輕中度組89例和重度組32例。

1．2．3 收集相關(guān)資料：統(tǒng)計可能影響HIE病情的危險因素，包括患兒性別、出生時胎齡、是否多胎、出生體質(zhì)量、妊娠期高血壓、母體貧血、產(chǎn)程異常、胎盤異常、胎膜早破、臍帶異常、羊水污染、母體高齡(>35歲)、產(chǎn)前發(fā)熱、自然分娩、產(chǎn)前使用催產(chǎn)素、定期產(chǎn)檢等。

1．2．4 Logistic回歸分析法賦值：將發(fā)生HIE作為因變量Y(發(fā)生=1，未發(fā)生=0)，患兒性別(男=1，女=0)、是否多胎(是=1，否=0)、妊娠期高血壓(是=1，否=0)、母體貧血(是=1，否=0)、產(chǎn)程異常(是=1，否=0)、胎盤異常(是=1，否=0)、胎膜早破(是=1，否=0)、臍帶異常(是=1，否=0)、羊水污染(是=1，否=0)、母體高齡(是=1，否=0)、產(chǎn)前發(fā)熱(是=1，否=0)、自然分娩(是=1，否=0)、產(chǎn)前使用催產(chǎn)素(是=1，否=0)、定期產(chǎn)檢(是=1，否=0)為二分類變量，出生時胎齡、出生體質(zhì)量、MBP、GFAP為連續(xù)變量，以上各因素均為自變量，實施Logistic回歸分析。

1．3統(tǒng)計學分析應(yīng)用SPSS 24.0軟件處理數(shù)據(jù)，計量資料用均數(shù)±標準差(x±s)表示，樣本間比較用t檢驗；計數(shù)資料用n(%)表示，組間比較采用χ2檢驗；采用Logistic回歸模型進行多因素分析，篩選危險系數(shù)。采用Spearman相關(guān)系數(shù)分析HIE患兒血清MBP、GFAP水平與HIE臨床分度的相關(guān)性。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2．12組患兒血清MBP、GFAP水平比較重度組血清MBP、GFAP水平高于輕中度組(P<0.05)。見表1。

表1 2組血清MBP、GFAP水平比較Table 1 Comparison of serum MBP and GFAP levels betweenHIE mild-moderate group and severe

2．2HIE病情的可能影響因素2組患兒性別、出生時胎齡、多胎、出生體質(zhì)量、妊娠期高血壓、母體貧血、胎盤異常、胎膜早破、臍帶異常、母親高齡、產(chǎn)前發(fā)熱、自然分娩、產(chǎn)前使用催產(chǎn)素、定期產(chǎn)檢比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；重度組產(chǎn)程異常和羊水污染占比高于輕中度組(P<0.05)。見表2。

2．3影響HIE重度腦損傷的危險因素Logistic回歸分析經(jīng)Logistic回歸分析，產(chǎn)程異常、羊水污染、MBP、GFAP均是HIE重度腦損傷的危險因素(P<0.05)。見表3。

2．4血清MBP、GFAP水平與病情程度的相關(guān)性經(jīng)Spearman相關(guān)性分析，HIE患者血清MBP、GFAP水平與HIE臨床分度呈正相關(guān)(r=0.816、0.835，P<0.001)。

表2 2組HIE病情的可能影響因素比較Table 2 Comparison of the possible influencing factors of HIE in the two groups

表3 影響HIE腦損傷的危險因素Logistic回歸分析Table 3 Logistic regression analysis of risk factors affecting severe brain injury in HIE

3 討論

隨著現(xiàn)代醫(yī)學的發(fā)展，新生兒HIE的發(fā)病率不斷降低，但是新生兒腦損傷的早期診斷至今沒有突破性進展，所以新生兒窒息引發(fā)的腦水腫、腦性癱瘓、智能低下等后遺癥的發(fā)生率不斷上升[10]。新生兒腦部耗氧量占自身總耗氧量的一半以上，腦部代謝水平最高，因此任何缺血缺氧情況都會導致新生兒窒息、代謝異常以及腦組織損傷[11-13]。HIE的發(fā)生可對患兒造成終身影響，并對其家庭造成嚴重負擔。因此，分析血清MBP、GFAP水平與HIE新生兒腦損傷嚴重程度的關(guān)系，以采取最佳治療手段改善患兒預后至關(guān)重要。

MBP主要分布于中樞神經(jīng)系統(tǒng)髓鞘，在髓鞘結(jié)構(gòu)和功能穩(wěn)定方面有重要作用。正常情況下血清MBP含量較低，中樞神經(jīng)系統(tǒng)遭到損害時MBP含量迅速上升。GFAP是中樞神經(jīng)系統(tǒng)表達蛋白，腦部缺血缺氧導致GFAP含量升高，誘導細胞開始分裂，產(chǎn)生新的星形膠質(zhì)細胞，星形膠質(zhì)細胞不斷分裂引起中樞系統(tǒng)神經(jīng)細胞損傷，阻止HIE新生兒神經(jīng)系統(tǒng)的功能恢復[14-15]。本研究HIE重度組血清MBP、GFAP水平高于輕中度組，表明血清MBP、GFAP水平與HIE進展密切相關(guān)。有研究表明腦外傷患者中MBP含量越高，其腦損傷程度越嚴重[16-19]。另有研究發(fā)現(xiàn)，重度窒息患兒血清MBP水平明顯上升，輕度窒息患兒血清MBP水平上升低于重度窒息患兒，所以血清MBP水平升高可能是判斷HIE新生兒腦損傷的指標[20-22]。研究發(fā)現(xiàn)人腦受到損傷時GFAP合成速度加快，血清GFAP含量升高，且GFAP參與HIE早期病理機制及后期腦組織修復過程[23-26]。研究發(fā)現(xiàn)新生兒HIE病情越嚴重，血清GFAP水平越高，因此GFAP水平可以反映腦損傷嚴重程度[27-30]。以上研究結(jié)果與本研究中HIE重度組患者血清MBP、GFAP水平升高結(jié)果一致，說明MBP、GFAP水平與腦損傷程度有關(guān)。本研究Logistic回歸分析顯示產(chǎn)程異常、羊水污染、MBP、GFAP均是HIE重度腦損傷的危險因素，提示除產(chǎn)程異常、羊水污染外，MBP、GFAP亦可導致HIE腦損傷的發(fā)生。第二產(chǎn)程出現(xiàn)延遲，很大程度上會引起胎兒宮內(nèi)窘迫，從而導致部分新生兒出現(xiàn)HIE。羊水污染會降低羊水的含氧量，導致胎兒在母體內(nèi)出現(xiàn)缺氧，引起HIE。研究表明腦損傷患者腦脊液MBP含量升高，與腦損傷程度有關(guān)，MBP可作為判斷中樞神經(jīng)系統(tǒng)破壞程度的指標[31-35]。研究表明，與健康新生兒相比，HIE新生兒GFAP水平顯著升高，而且GFAP與新生兒神經(jīng)行為評分呈負相關(guān)，因此檢測血清GFAP水平能夠判斷HIE患兒的病情程度及預測預后[36-42]。此外，本研究經(jīng)Spearman相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)HIE患者血清MBP、GFAP水平與HIE臨床分度呈正相關(guān)，進一步提示MBP、GFAP與HIE病情嚴重程度具有相關(guān)性，可作為早期預測新生兒腦損傷程度的理想指標。

血清MBP、GFAP水平是影響HIE腦損傷嚴重程度的獨立因素，與HIE臨床分度呈正相關(guān)，可通過檢測血清MBP、GFAP水平對腦損傷程度進行預判，而更深層次的病理機制有待于進一步研究。