裸花紫珠藥材及相關(guān)制劑質(zhì)量控制方法研究

付輝政 ，任琦，周志強，陳偉康，魏峰，馬雙成，羅躍華*

1.江西省藥品檢驗檢測研究院，國家藥品監(jiān)督管理局中成藥質(zhì)量評價重點實驗室，江西省藥品與醫(yī)療器械質(zhì)量工程技術(shù)研究中心，南昌 330029；2.中國食品藥品檢定研究院，北京 100050

裸花紫珠（Callicarpa nudifloraHook.ex Arn.）為馬鞭草科（Verbenaceae）紫珠屬植物，主產(chǎn)于廣東、廣西、海南等地［1］，為海南大宗地道藥材，目前在江西贛州、吉安、撫州等地進行了廣泛的栽培，具有散瘀消腫、抗菌止血、消炎解毒、驅(qū)風祛濕之功效。臨床上用于治療化膿性炎癥、急性傳染性肝炎、呼吸道及消化道出血、創(chuàng)傷出血等癥，外用治燒、燙傷及外傷出血等［2］，被譽為天然消炎止血圣藥。研究表明裸花紫珠主要含有黃酮類、萜類、苯丙素類和揮發(fā)油等成分，具有止血、抗血栓、抗炎、抑菌、細胞毒活性、增強免疫等多種藥理活性［3-8］，但對于裸花紫珠基礎(chǔ)研究還很薄弱，尤其是其藥效物質(zhì)及作用機理還尚不明確。

裸花紫珠最早收載于《中國藥典》1977 年版［9］，標準項下僅有性狀、理化鑒別和檢查項，標準較低。最早由裸花紫珠單味藥材制成的裸花紫珠片，收載于衛(wèi)生部藥品標準《中藥成方制劑》第六冊，標準項下僅有性狀、理化鑒別、檢查質(zhì)控項目，難以有效控制產(chǎn)品的質(zhì)量。裸花紫珠膠囊和顆粒系由裸花紫珠片通過工藝革新創(chuàng)制而成，其原標準中質(zhì)控項目簡單且缺乏專屬性。為了更好地控制裸花紫珠藥材、干浸膏、裸花紫珠片/膠囊/顆粒質(zhì)量，筆者針對裸花紫珠藥效物質(zhì)基礎(chǔ)和作用機制尚不明確問題，對裸花紫珠化學成分及藥理活性進行了系統(tǒng)研究，從裸花紫珠醇提物中分離鑒定了76個化學成分，其中新化合物21 個，通過體內(nèi)、外藥理研究，系統(tǒng)闡明了裸花紫珠藥效物質(zhì)基礎(chǔ)及作用機理，并明確了可用于裸花紫珠藥材、干浸膏、裸花紫珠片/膠囊/顆粒質(zhì)控定量活性指標成分木犀草苷和毛蕊花糖苷。在此基礎(chǔ)上，對裸花紫珠藥材、干浸膏、裸花紫珠片/膠囊/顆粒的鑒別、指紋圖譜、含量測定質(zhì)量控制方法以及主要活性成分藥代動力學進行了研究，建立了裸花紫珠藥材、干浸膏、裸花紫珠片/膠囊/顆粒5 項國家藥品標準，形成了從裸花紫珠-中間體-系列制劑的完整質(zhì)量控制體系，保障了產(chǎn)品質(zhì)量，同時也為指導臨床合理用藥提供了科學依據(jù)。

1 材料

島津2010 系列高效液相色譜儀、Aglient Technologies 1260 高效液相色譜儀、島津2010 型制備高效液相，檢測器均為DAD 檢測器；Perkin-Elmer Lambda 25 MV-Vis 分光度計；Perkin-Elmer 341 旋光儀；MDS SCIEX APCI 2000 LC-MS-MS 測定ESI-MS 由；Waters ACQMITY MPLC/Xevo G2 Q TOF測定HRESIMS，Bruker AVANCE III 600 超導核磁共振儀測定1H-NMR （600MHz）和13C-NMR （150MHz）譜及二維譜（HSQC，HMBC，1H-1H COSY，NOESY）譜。柱層析硅膠、薄層層析硅膠（青島海洋化工廠）；乙腈、甲醇為色譜純；水為 Milli-Q 制備的超純水、其他所用試劑均為分析純。SD 大鼠，體重（200±20） g，購自湖南斯萊克景達實驗動物有限公司（許可證號SCXK［湘］2009-0004），動物房溫度（22±2）℃，濕度55%±10%，每日光照時間12 h；動物飼料購自北京科澳協(xié)力飼料有限公司。對照品咖啡酸（批號110885-200102）、木犀草素（批號111520-200201）、毛蕊花糖苷（批號1530-200202）、木犀草苷（批號11720-201106）、連翹酯苷B（批號111811-201102）均購于中國食品藥品檢定研究院。其余對照品均由江西省藥品檢驗檢測研究院從裸花紫珠中分離制備得到，由MS、1H-NMR和13C-NMR 鑒定結(jié)構(gòu)，通過面積歸一化法計算純度均在98.0 %以上。裸花紫珠采自海南省五指山區(qū)，經(jīng)江西省藥品檢驗檢測研究院羅躍華主任中藥師鑒定為馬鞭草科紫珠屬裸花紫珠C.nudifloraHook.的葉。裸花紫珠藥材、干浸膏、裸花紫珠片/膠囊/顆粒藥品的來源信息見表1。

2 方法與結(jié)果

2.1 裸花紫珠物質(zhì)基礎(chǔ)研究

利用硅膠、Sephadex LH-20、MPLC、分析和制備HPLC 等分離分析技術(shù)和方法對裸花紫珠化學成分進行了分離純化［10-14］，根據(jù)化合物的理化性質(zhì)、質(zhì)譜、1D NMR 和2D NMR 等波譜分析技術(shù)鑒定了76 個化合物，發(fā)現(xiàn)新化合物21 個（見圖1），46個化合物為首次從裸花紫珠中分離得到，系統(tǒng)地闡明了裸花紫珠的化學成分，為裸花紫珠質(zhì)量控制研究奠定了基礎(chǔ)。

圖1 裸花紫珠中21個新化合物結(jié)構(gòu)

2.2 裸花紫珠藥效物質(zhì)作用機理研究

建立了反映裸花紫珠止血、活血、抗炎等5種動物模型和68 種指標的現(xiàn)代藥理學方法，對裸花紫珠提取物及分離得到的單體化合物進行系統(tǒng)藥理藥效評價，結(jié)果表明：1,6-di-O-caffeoyl-β-D-glucopyranoside 和木犀草素-3'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷可降低花生四烯酸誘導的血小板聚集率和血小板中P-選擇素、TXA2的含量，顯示較強抗花生四烯酸誘導血小板聚集活性，IC50值分別為0.129 mmol/L 和0.041 3 mmol/L（陽性藥奧扎格雷終濃度為0.2 mmol/L 時，抑制率為43.80%）。其體外機理是通過抑制血小板PI3K/Akt 信號通路，1,6-di-O-caffeoyl-β-D-glucopyranos-ide 同時具有抑制PLC/PKC 信號通路的作用，從而抑制蛋白RhoA、PKA 的表達，降低血小板聚集率、TXA2的生成和P-選擇素的釋放，貫穿血小板形變、聚集、釋放等多個反應(yīng)；2α,3α-二羥基-12-烯-28-烏蘇酸和（3S,5R,6R,7E,9S）-megastigmane-7-ene-3,5,6,9-tetrol 對MDA-MB-231 和MDAMB-468 細胞的體外侵襲和遷移能力具有明顯地抑制作用，并對高轉(zhuǎn)移乳腺癌細胞的體外遷移、侵襲和粘附能力均有顯著抑制作用，其作用機理是通過抑制細胞骨架蛋白F-actin 的聚合而下調(diào)腫瘤細胞的體外運動能力，并可降低PI3K/Akt 通路上PI3K110β 等6 個蛋白的表達，提示上述兩個化合物可能是通過下調(diào) PI3K/Akt 通路信號轉(zhuǎn)導，干擾細胞骨架蛋白F-actin 的形成，從而發(fā)揮抑制腫瘤細胞的體外運動能力；木犀草素、木犀草苷、毛蕊花糖苷顯示較強的抗氧化活性；木犀草苷、木犀草素-3'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、木犀草素-4'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、木犀草素、5,4'-二羥基-3,7,3'-三甲氧基黃酮、5-羥基-3,7,3',4'-四甲氧基黃酮、毛蕊花糖苷均顯示出不同程度的抑制LPS 誘導RAW264.7 細胞NO 生成作用。上述研究系統(tǒng)地驗證了裸花紫珠的功效，并深入闡明了裸花紫珠藥效物質(zhì)及作用機理，也為裸花紫珠、干浸膏、制劑質(zhì)控指標選擇提供了依據(jù)。

2.3 裸花紫珠藥材、干浸膏、裸花紫珠片膠囊顆粒共有成分方法研究

采用UPLC-ESI-Q-TOF-MSE分析方法（見圖2），根據(jù)質(zhì)譜數(shù)據(jù)以及對照物質(zhì)比對，鑒定了裸花紫珠藥材、干浸膏、裸花紫珠片/膠囊/顆粒中共有的13個指標成分結(jié)構(gòu)，依次分別為：柯伊利素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、nudifloside、木犀草苷、連翹酯苷B、毛蕊花糖苷、異毛蕊花糖苷、木犀草素-4'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、木犀草素-3'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、7-O-E-p-coumaroyl-gardoside、木犀草素、5,4'-二羥基 -3,7,3'-三甲氧基黃酮、2α,3β,19α-三羥基-12-烯-28-烏蘇酸、異鼠李素。具體的方法條件如下，色譜柱：Waters ACQUITY UPLC?BEH-C18（2.1 mm×100 mm，1.7 μm）；流動相：甲醇（A）-甲酸銨甲酸水溶液（每1 000 mL 水中含1 mL 甲酸和2 mmol 甲酸銨）（B）；梯度洗脫：0～17 min，5%→70% A；17～27 min，70%→80% A；流速：0.4 mL/min；柱溫：60 ℃；進樣量：2 μL。采用電噴霧電離離子源（ESI），Leucine-enkephalin 作校準液，負離子模式檢測，m/z 100～1 000，采樣間隔為0.5 s，毛細管電壓為2.5 kV，錐孔電壓為40 V，離子源溫度為100 ℃，脫溶劑溫度為450 ℃，脫溶劑氣體流速800 L/h，錐孔氣流量 40 L/h，碰撞氣體為氬氣；碰撞低能量為6 V，碰撞高能量20 V～40 V。初步闡明了裸花紫珠藥材、干浸膏、裸花紫珠片/膠囊/顆粒的藥效物質(zhì)組成，為裸花紫珠制劑的質(zhì)量控制提供了依據(jù)，同時確定了主要量大活性成分木犀草苷和毛蕊花糖苷為裸花紫珠藥材、干浸膏、裸花紫珠片/膠囊/顆粒定量質(zhì)控指標。

圖2 負離子模式下各樣品UPLC-ESI-Q-TOF-MSE BPI圖

2.4 裸花紫珠藥材、干浸膏、裸花紫珠片膠囊顆粒定性方法研究

2.4.1 顯微鑒別采用顯微法建立了裸花紫珠葉橫切面和表面觀顯微鑒別，具體如下：葉橫切面：上下表皮均為1 列細胞，外均被腺毛、非腺毛和腺鱗，以下表皮較多；上表皮下方有一列較大的下皮細胞。柵欄組織為1～2 列細胞；海綿組織細胞小，排列較緊密。主脈維管束外韌型，呈馬蹄狀環(huán)，韌皮部有纖維群。主脈上下表去皮內(nèi)側(cè)均有數(shù)列厚角細胞。薄壁細胞草酸鈣簇晶或方晶。見圖3。

圖3 裸花紫珠橫切面永久制片圖

葉表面觀：非腺毛有兩種：一種為迭生星狀毛，大多碎斷，中軸直徑18～30μm，壁厚，非木化，完整者1～10 余輪；每輪側(cè)生1～7 個側(cè)生細胞。另一種1～4 個細胞，末端有分叉，壁薄。腺鱗頭部6～8 個細胞，扁球形，直徑50～60 μm。腺毛頭部4個細胞，直徑22～27 μm，柄1～2個細胞。上皮細胞多角形，壁略呈連珠狀增厚。氣孔不定式，保衛(wèi)細胞長約25 μm。見圖4。

圖4 裸花紫珠葉表面觀顯微圖

2.4.2 薄層色譜鑒別采用薄層色譜法分別建立了裸花紫珠藥材、干浸膏、裸花紫珠片/膠囊/顆粒薄層色譜鑒別，具體如下：供試品溶液制備：取裸花紫珠1.0 g；或取裸花紫珠干浸膏0.7 g；或取裸花紫珠片，除去包衣，研細，取0.8 g；或取裸花紫珠膠囊內(nèi)容物1.0 g；或取裸花紫珠顆粒2.5 g，研細。加水150 mL，煎煮，保持微沸1 h，放冷，濾過，濾液加氯化鈉5 g，振搖使溶解，溶液加乙酸乙酯40 mL 振搖提取，分取乙酸乙酯液，蒸干，殘渣加甲醇1 mL 使溶解，作為供試品溶液；對照藥材溶液制備：取裸花紫珠對照藥材1 g，按供試品溶液的制備方法制成對照藥材溶液；色譜條件及系統(tǒng)適用性試驗：采用0.5 %氫氧化鈉溶液制備的硅膠G 薄層板；點樣量：10 μL；展開劑：乙酸乙酯-甲醇-濃氨水（17∶2∶1）；顯色劑：噴以3%三氯化鋁乙醇溶液，在105 ℃加熱5 min，置紫外光燈（365 nm）下檢視。結(jié)果：供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。通過多次試驗，重復性好，陰性樣品無干擾。見圖5。

圖5 各樣品薄層色譜圖

2.5 裸花紫珠藥材、干浸膏、裸花紫珠片膠囊顆粒HPLC定量方法研究

采用HPLC 多波長切換技術(shù)建立了同時測定裸花紫珠藥材、干浸膏、裸花紫珠片/膠囊/顆粒中木犀草苷和毛蕊花糖苷的含量測定方法，具體如下：供試品溶液制備：取裸花紫珠粉末（過四號篩）約1.0 g；或取裸花紫珠干浸膏，研細，取約0.7 g；或取裝量差異項下裸花紫珠片，除去薄膜衣，精密稱定，研細，取約0.8 g；或取裝量差異項下裸花紫珠膠囊內(nèi)容物，研細，取約1.0 g；或取裝量差異項下裸花紫珠顆粒，研細，取約2.5 g。精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入70 %甲醇50 mL，稱定重量，超聲處理（功率500 W，頻率40 kHz）40 min，放冷，再稱定重量，用70%甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，作為木犀草苷測定用供試品溶液。另精密量取續(xù)濾液5 mL，置50 mL 量瓶中，加70%甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為毛蕊花糖苷測定用供試品溶液；對照品溶液制備：取木犀草苷對照品、毛蕊花糖苷對照品適量，精密稱定，分別加70%甲醇制成每1 mL 含木犀草苷20 μg、毛蕊花糖苷40 μg 的溶液，即得；色譜條件及系統(tǒng)適用性試驗：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動相：乙腈（A）-0.1%甲酸（B），梯度洗脫：0～50 min，14% A；50～51 min，14% →80% A；51～61 min，80% A；流速：1.0 mL/min；進樣量：10 μL；柱溫為35℃；木犀草苷檢測波長為350 nm，毛蕊花糖苷檢測波長為330 nm。結(jié)果：木犀草苷的含量在2.63～131.30μg/mL 呈良好的線性關(guān)系，Y木犀草苷=26.87X-7.204（r=1.000 0）；毛蕊花糖苷的含量在3.88～194.2 μg/mL呈良好的線性關(guān)系，Y毛蕊花糖苷=16.09X-4.979（r=0.999 7）。木犀草苷加樣回收率為100.1%，RSD 為1.4%（n=6）；毛蕊花糖苷加樣回收率為100.4%，RSD 為1.4%（n=6），樣品結(jié)果見表1 和圖6。本方法簡單、準確，靈敏度高，重復性好，可用于裸花紫珠、干浸膏、裸花紫珠片/膠囊/顆粒的質(zhì)量評價。

圖6 木犀草苷對照品、供試品及陰性樣品（A）和毛蕊花糖苷對照品、供試品及陰性樣品（B）HPLC色譜圖

表1 樣品含量測定結(jié)果

2.6 裸花紫珠藥材、干浸膏、裸花紫珠片膠囊顆粒HPLC指紋圖譜方法研究［15］

建立了裸花紫珠藥材、干浸膏、片劑、膠囊、顆粒的HPLC 指紋圖譜方法。具體如下：供試品溶液制備：取樣品粉末（過4 號篩）約1.0 g，精密稱定，置100 mL 具塞錐形瓶中，精密加入70%甲醇50 mL，稱定重量，超聲處理（功率500 W，頻率 40 kHz）40 min，放冷，再次稱定重量，并用70%甲醇補重，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；對照品溶液制備：精密稱取咖啡酸、連翹酯苷B、nudifloside、木犀草苷、毛蕊花糖苷、異毛蕊花糖苷、juncein、7-O-E-p-coumaroyl-8-epi-lo-ganic acid、木犀草素、5,4'-二羥基-3,7,3'-三甲氧基黃酮對照品適量，置10 mL 量瓶中，加70%甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得；色譜條件及系統(tǒng)適用性試驗：采用Waters Sunfire C18 色譜柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流動相：乙腈（A）-0.1%甲酸（B）；梯度洗脫：0～50 min，10%→20% A；50～70 min，20%→40% A；70～90 min，40%→80% A；流速：1.0 mL/min；檢測波長：330 nm；柱溫：30 ℃；進樣量：10 μL。因毛蕊花糖苷色譜峰峰面積大且峰形較好，故以其為參照峰，計算各批次樣品共有峰的相對保留時間，顯示其RSD 均符合指紋圖譜的要求。取10 批海南五指山代表性藥材色譜圖導入中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)（2012 版），建立對照指紋圖譜，指認了13 個共有峰（見圖7）。將其他批次樣品的色譜峰與參照圖譜進行自動匹配，結(jié)果：各批次裸花紫珠藥材、干浸膏、裸花紫珠片/膠囊/顆粒的指紋圖譜相似度較高，相似度均在0.9 以上。見圖8。

圖7 裸花紫珠13個共有峰

圖8 裸花紫珠（A）、裸花紫珠干浸膏（B）、裸花紫珠片（C）、裸花紫珠膠囊（D）、裸花紫珠顆粒（E）質(zhì)量一致性對比圖

2.7 UHPLC-MS/M法同時測定大鼠血漿中裸花紫珠7個活性成分及其藥動學研究［16］

建立UHPLC-MS/MS 法同時測定大鼠血漿中裸花紫珠提取物7 個活性成分木犀草苷、dracocephaloside、Juncein、毛蕊花糖苷、異毛蕊花糖苷、連翹酯苷B、nudifloside 的血藥濃度，并研究提取物單次給藥后大鼠體內(nèi)的藥代動力學過程。方法：大鼠灌胃給予裸花紫珠提取物，分別于給藥后5、10、20、30、45、60、90、120、180、300、420 min 經(jīng)眼內(nèi)眥靜脈叢取血0.4 mL 置于肝素化離心試管中，依次加入10 μL 內(nèi)標，50 μL 鹽酸（0.25 mol/L），10 μL 甲醇，渦旋混勻，加入乙腈300 μL，渦旋滅活蛋白。離心，取上清液于40 ℃水浴下氮氣吹干，殘渣加50%乙腈100 μL 復溶，渦旋混勻后離心，取上清液，采用內(nèi)標法（SMZ），色譜柱：Phenomenex? Kinetex-C18（50 mm×2.1 mm，1.7 μm）；流動相：乙腈（A）-0.5%甲酸（B）梯度洗脫：0～7.0 min，10%→43% A；7.0～7.1 min，43%→95% A；7.1～9.0 min，95% A；柱溫：40 ℃；流速：0.45 mL/min。質(zhì)譜條件：電噴霧離子源（ESI）；負離子方式檢測；MRM（多重反應(yīng)監(jiān)測）模式；氣簾氣（N2）：25 psi；離子源GS 1（N2）：60 psi，GS 2（N2）：55 psi；源內(nèi)溫度500 ℃；噴霧電壓：-4 500 V；入口電壓（EP）：-10 V；出口電壓（CXP）：-13 V；7 種活性成分的母離子、子離子m/z 分別為（447.1/285.0）、（447.1/285.0）、（447.1/285.0）、（447.1/285.0）、（623.3/161.0）、（623.3/161.0）、（755.2/160.7）、（523.4/160.9）、（417.2/254.7）。結(jié)果：空白生物樣品的內(nèi)源性物質(zhì)對7 種活性成分和內(nèi)標物測定無干擾（見圖9）。

圖9 空白血漿（A）、空白血漿+對照品（B）和給藥20 min后的血漿樣品（C）MRM色譜圖

血漿中7 種活性成分的線性范圍分別為2.06～1 030 ng/mL、2.32～1 160 ng/mL、1.65～825 ng/mL、7.77～3 880 ng/mL、5.04～2 520 ng/mL、1.78～890 ng/mL、1.75～875 ng/mL，定量下限分別為1.03 ng/mL、1.16 ng/mL、0.82 ng/mL、3.88 ng/mL、2.52 ng/mL、0.89 ng/mL、0.88 ng/mL，線性關(guān)系好（r均大于0.995）。日內(nèi)、日間精密度（RSD）均小于8.8%，準確度（RE）在-9.6%～9.8%之間。方法的絕對提取回收率均大于75%；基質(zhì)效應(yīng)低；穩(wěn)定性研究結(jié)果表明樣品穩(wěn)定；7 種活性成分藥學動力學參數(shù)如下：T1/2分別為25.39±1.05、26.04±2.02、26.49±0.74、235.41±117.90、151.56±49.23、161.68±63.92、42.58±39.55 min；AUC0-t分別為3 134.65±413.45、2 944.69±571.63、2 801.90±304.44、93 881.65±18 326.65、29 204.97±8 499.88、15 027.05±3 763.82、987.50±232.30 ng/mL·min；AUC0-∞分別為3 134.68±413.46、2 944.72±571.64、2 801.94±304.44、100 776.25±25 227.72、30 006.63±8 709.22、16 237.88±3 872.06、1 002.13±266.55 ng/mL·min；Cmax分別為67.55±8.67、59.55±7.24、52.10±4.07、2 179.00±355.60、737.57±210.31、227.30±48.38、17.16±3.36 ng/mL，7 種活性成分均在30 min 左右達到最大血藥濃度，后又被快速地消除（見圖10）。

圖10 大鼠ig裸花紫珠提取物后7種活性成分的藥時曲線

3 討論

本課題組對裸花紫珠物質(zhì)基礎(chǔ)及作用機理進行系統(tǒng)研究。從裸花紫珠中共分離鑒定了76個化合物，其中新化合物21 個，46 個化合物為首次從裸花紫珠中分離得到。建立了反映裸花紫珠止血、活血、抗炎等5 種動物模型和68 種指標的現(xiàn)代藥理學方法，并明確了可用于裸花紫珠藥材、干浸膏、裸花紫珠片/膠囊/顆粒質(zhì)控定量活性指標成分木犀草苷和毛蕊花糖苷。

建立了UHPLC-MS/MS 同時測定大鼠血漿中裸花紫珠提取物7 種活性成分的血藥濃度的方法，從藥-時曲線圖中可看出7 種活性成分均在30 min 左右達到最大血藥濃度，后又被快速地消除，這可能與其相對較大的極性有關(guān)。木犀草苷、dracocephaloside、juncein 表現(xiàn)出一致的藥動學行為；毛蕊花糖苷、異毛蕊花糖苷也表現(xiàn)出類似的藥動學行為；木犀草苷與毛蕊花糖苷的藥-時曲線與文獻報道基本一致［17］；而裸花紫珠提取物中連翹酯苷B 的藥動學規(guī)律與在其他提取物中略有不同［18］，其原因可能是裸花紫珠中眾多化合物的相互作用的結(jié)果所造成的。雖然nudifloside 的給藥劑量高于黃酮苷類化合物，但其AUC0-t低于黃酮苷類，這表明nudifloside 的生物利用度低于黃酮苷類。

建立了裸花紫珠藥材顯微鑒別及裸花紫珠藥材、干浸膏、裸花紫珠片/膠囊/顆粒的專屬性強的TLC 鑒別方法；建立了裸花紫珠藥材、干浸膏、的HPLC 指紋圖譜方法；采用HPLC 多波長切換技術(shù)建立了同時測定裸花紫珠藥材、干浸膏、裸花紫珠片/膠囊/顆粒中木犀草苷和毛蕊花糖苷的含量測定方法。最終起草了裸花紫珠藥材、干浸膏、裸花紫珠片/膠囊/顆粒5 項國家藥品標準，形成了從裸花紫珠-中間體-系列制劑的完整質(zhì)量控制體系，為臨床合理用藥提供可參考的科學依據(jù)。