Sam68基因?qū)ψ訉m內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖的影響*

梁常艷， 楊越波， 李小毛

中山大學(xué)附屬第三醫(yī)院婦科(廣東廣州 510630)

近20年來子宮內(nèi)膜癌發(fā)生率在世界范圍內(nèi)呈上升趨勢，為最常見的婦科腫瘤之一。隨著人均期望壽命的延長，人口老齡化程度將加劇，子宮內(nèi)膜癌高發(fā)人群的數(shù)量將逐年增長[1]。因此，子宮內(nèi)膜癌的防治將成為我國腫瘤研究的重點(diǎn)領(lǐng)域之一。研究子宮內(nèi)膜癌發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制并尋找新的治療靶點(diǎn)， 是當(dāng)前子宮內(nèi)膜癌研究的熱點(diǎn)。Sam68 (Src-associated in mitosis 68 kD) 作為信號轉(zhuǎn)導(dǎo)與RNA激活(signal transduction and activation of RNA，STAR)家族成員之一，具有聯(lián)系信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路和RNA剪接的重要生物學(xué)功能。Sam68可能通過其SH2、SH3和(或)WW 結(jié)構(gòu)域，與一系列信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子，包括Src、ERK、PI3K、FBP21和FBP30等相互作用，從而發(fā)揮類似接頭蛋白的作用，參與細(xì)胞增殖、生長和分化過程[2-3]。近年來研究發(fā)現(xiàn)， Sam68在宮頸癌、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、鼻咽癌等實(shí)體腫瘤組織中較正常組織表達(dá)異常升高，與腫瘤生長、凋亡、侵襲轉(zhuǎn)移等密切相關(guān)[4]。但是Sam68在子宮內(nèi)膜癌中的具體作用目前尚未明確。2017年1月至2019年1月，本課題選擇不同分化水平的子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞株(高分化Ishikawa,中分化HEC-1A，低分化AN3CA)作為研究對象，通過建立穩(wěn)定干擾和過表達(dá)Sam68基因的子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞株，檢測子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖活力的改變，為進(jìn)一步闡明Sam68在子宮內(nèi)膜癌發(fā)生發(fā)展中的作用及其機(jī)制奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 細(xì)胞培養(yǎng) 人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞株HEC-1A、 Ishikawa、RL952、JEC、AN3CA 購自美國American Type Culture Collection(ATCC)。將細(xì)胞接種在含有 10% 胎牛血清(HyClone, Logan, UT, USA)的DMEM 培養(yǎng)液(Invitrogen, Carlsbad, CA, USA)，置于 37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。待細(xì)胞生長到約80%，加入胰蛋白酶消化、傳代，取對數(shù)生長期細(xì)胞進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

1.2 實(shí)時(shí)定量 PCR和蛋白質(zhì)印跡法分析 收集對數(shù)生長期的內(nèi)膜癌細(xì)胞，使用Trizol試劑(Invitrogen)提取總RNA，逆轉(zhuǎn)錄成 cDNA(實(shí)驗(yàn)步驟參閱RNA反轉(zhuǎn)錄試劑盒Promega A3500 說明書)，進(jìn)行實(shí)時(shí)定量PCR 反應(yīng)，同時(shí)以 β-actin 作為內(nèi)參，檢測Sam68 mRNA 水平的表達(dá)。Sam68 上游引物 5′-ATGAAGCTTATGGCCAGGAC-3′，下游引物 5′-CAGAAGCCAGAATGCAGAGT-3′;內(nèi)參β-actin上游引物 5′-GAAGGTGAAGGTCGGAGC-3′，下游引物 5′-GAAGATGGTGATGGGATTTC-3′。實(shí)時(shí)定量PCR循環(huán)參數(shù):95℃ 30 s，95℃ 5 s，60℃ 34 s，共 40 個循環(huán)。采用 2-ΔΔCt半定量法算出Sam68 mRNA與陰性對照組的相對表達(dá)水平。同時(shí)提取細(xì)胞總蛋白, BCA 法測定蛋白濃度，調(diào)整樣本為濃度1 μg/μL，100℃ 水浴5 min 使蛋白變性，取 20 μg 蛋白進(jìn)行 10% SDS-PAGE 凝膠電泳，轉(zhuǎn)移至PVDF膜(Milipore，美國)，用含 5% 脫脂牛奶封閉 1 h ；加入兔抗人 Sam68 單克隆抗體(體積稀釋比為 1∶2 000)及兔抗人 β-actin 單克隆抗體(體積稀釋比為1∶3 000)，4℃反應(yīng)過夜，TBS漂洗后分別孵育二抗。加入ECL 試劑，膠片曝光、顯影和定影。圖像分析系統(tǒng)掃描其吸光度值，進(jìn)行定量分析。

1.3 子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞轉(zhuǎn)染siRNA及過表達(dá)Sam68 根據(jù)Genbank中人Sam68基因序列，兩個人類siRNA序列被克隆到pSuper-retro-puro質(zhì)粒中產(chǎn)生分別pSuper-retro-Sam68-RNAi，序列為RNAi# 1: ggaccacaagaatACAATC和RNAi#2: GCATCCAGAGGATACCTTTGC(Invitrogen公司合成)。慢病毒轉(zhuǎn)染方法參照Turbo FectTMsiRNA Transfection Reagent (Thermo,美國)試劑說明書。轉(zhuǎn)染HEC-1A和RL952細(xì)胞株，Q-PCR和Western blot檢測轉(zhuǎn)染及沉默效果，具體按照1.2方法進(jìn)行。從Ishikawa細(xì)胞中提取RNA并逆轉(zhuǎn)錄制備cDNA模板，擴(kuò)增Sam68基因并將擴(kuò)增片段克隆至真核表達(dá)載體pcDNA-3送測序進(jìn)一步驗(yàn)證。利用Lipofecamine3000(Invitrogen，美國)轉(zhuǎn)染pcDNA-3- Sam68至Ishikawa細(xì)胞，同時(shí)將pcDNA-3轉(zhuǎn)染作為空白對照。Q-PCR和Western blot檢測轉(zhuǎn)染及過表達(dá)效果，具體按照1.2方法進(jìn)行。

1.4 MTT法 將轉(zhuǎn)染后的子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞按照104/孔的密度接種于96孔板，繼續(xù)培養(yǎng)24、48、72、96、120 h后進(jìn)行細(xì)胞活力檢測。去除培養(yǎng)液，加入預(yù)先配置的MTT試劑，于恒溫培養(yǎng)箱中靜置30 min，取出細(xì)胞培養(yǎng)板置于酶標(biāo)儀中讀取490處吸光度OD值，計(jì)算細(xì)胞的增殖能力。同時(shí)設(shè)置調(diào)零孔、對照孔，每組設(shè)定3復(fù)孔。

1.5 平板克隆實(shí)驗(yàn) 消化收集各組對數(shù)生長期細(xì)胞，調(diào)整細(xì)胞懸液濃度至250個/mL，接種6孔板，每孔2 mL，即500細(xì)胞/孔。置于37℃、飽和濕度的5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)10～14 d，觀察克隆出現(xiàn)日期及生長情況，發(fā)現(xiàn)克隆集落即停止培養(yǎng)。1×PBS洗3次，加入4%多聚甲醛1 mL/孔固定10 min，加1 mL/孔蘇木素染色10 min，用自來水輕輕沖洗干凈。計(jì)數(shù)每個孔的克隆數(shù)并拍照?？寺⌒纬陕?%)=(克隆形成數(shù)/接種細(xì)胞數(shù))×100%。

1.6 軟瓊脂(soft agar)克隆形成實(shí)驗(yàn) 軟瓊脂培養(yǎng)法原理是利用癌細(xì)胞接觸抑制效應(yīng)的喪失，能在懸浮狀態(tài)下很好地成簇生長，檢測腫瘤細(xì)胞永生化增殖能力。具體步驟參考相關(guān)文獻(xiàn)[5]：在微波爐中溶解已消毒的1.2%瓊脂，并將其與取1 mL 2×DMEM按照1∶1比例混合， 6孔板中每孔迅速加入1.5 mL混合液，每孔3 mL，待其自然冷卻，此作為下層膠鋪板；0.25%胰酶消化對數(shù)生長期的細(xì)胞，離心，將細(xì)胞懸浮于2× DMEM培養(yǎng)液中，計(jì)數(shù)后，使細(xì)胞濃度調(diào)整至為4×104·mL-1。 按照1∶1比例混合0.7%瓊脂和2×DMEM培養(yǎng)液，充分混勻，加2 mL 混合后的含0.33%的1×DMEM到6孔板中的每個孔中，每孔含細(xì)胞數(shù)5×104。每個實(shí)驗(yàn)組重復(fù)3個樣本，待上層瓊脂凝固后， 置于5%CO2、37℃培養(yǎng)14 d。間隔2 d補(bǔ)加200 μL 1×DMEM到上層膠上，以防水分蒸發(fā)干燥。將平皿放置在倒置顯微鏡下，在鏡下隨機(jī)選擇10個視野，計(jì)算視野中大于50個克隆數(shù)和所有克隆數(shù)，克隆形成率=大于50個克隆數(shù)/所有克隆數(shù)×100%。每孔加入1 mL的0.005%結(jié)晶紫染色1 h以上，鏡下拍照。

1.7 BrdU細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn) 將狀態(tài)良好的對數(shù)生長期細(xì)胞按照1×105/孔密度接種于24孔板中，待細(xì)胞貼壁后換無血清培養(yǎng)基饑餓細(xì)胞24 h，細(xì)胞密度達(dá)60%左右時(shí)每孔加入10 μL的BrdU工作液孵育60 min，每個實(shí)驗(yàn)組重復(fù)3孔。棄去培養(yǎng)基后PBS洗3次，4%多聚甲醛固定60 s，棄去固定液后PBS再次緩洗3次，加入0.1%曲拉通溶液破膜作用20 min，PBS洗后加入一抗anti-BrdU，室溫孵育1 h，棄去一抗PBS清洗3次，加入二抗羅丹明試劑(注意避光)室溫作用1 h，PBS洗清洗3次后加入DAPI對總體細(xì)胞進(jìn)行核染30 min，PBS清洗、晾干、封片，熒光顯微鏡下觀察細(xì)胞增殖情況。

2 結(jié)果

2.1 人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞中Sam68 mRNA及蛋白較正常子宮內(nèi)膜組織表達(dá)升高 選取了5株不同分化的人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系(HEC-1A, Ishikawa, RL952, JEC和AN3CA)及人正常子宮內(nèi)膜組織進(jìn)行檢測。實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 法檢測結(jié)果如圖1-A顯示，與人正常子宮內(nèi)膜組織相比，人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系中Sam68 mRNA的表達(dá)均出現(xiàn)明顯上調(diào)(圖1-A)。蛋白質(zhì)印跡法檢測5株不同分化的人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系Sam68蛋白含量，結(jié)果提示，人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞中Sam68蛋白的表達(dá)水平明顯高于對照組(P值均<0.05)(圖1-B)。后續(xù)實(shí)驗(yàn)中我們選用 Sam68 基因高表達(dá)的RL952(低分化)、HEC-1A(中分化)細(xì)胞進(jìn)行RNAi沉默，用Sam68基因表達(dá)最低Ishikawa(高分化)構(gòu)建過表達(dá)模型。

注：A:mRNA;B:蛋白子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系中Sam68 mRNA和蛋白水平均高于正常子宮內(nèi)膜組織，β-actin 作為內(nèi)參(n=3)。*P<0.05，**P<0.001圖1 實(shí)時(shí)熒光定量 PCR和蛋白質(zhì)印跡法檢測Sam68 mRNA和蛋白水平

2.2 成功構(gòu)建Sam68 mRNA干擾及過表達(dá)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞株模型 為了得到Sam68穩(wěn)定敲減的細(xì)胞克隆，本實(shí)驗(yàn)采用shRNA介導(dǎo)的RNAi干擾技術(shù)下調(diào)Sam68的表達(dá)，采用實(shí)時(shí)熒光定量檢測干擾效率。如圖2-A所示，Sam68 RNAi#1和Sam68RNAi#2組敲減效率均大于80%，與陰性對照組相比，RL952和HEC-1A細(xì)胞可見Sam68 mRNA 表達(dá)顯著降低(P<0.05)。進(jìn)一步采用Western blot 實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證在蛋白水平干擾載體對Sam68沉默的效率，與陰性對照組相比，已轉(zhuǎn)染干擾病毒的RL952和HEC-1A細(xì)胞中，Sam68條帶明顯減弱，表明穩(wěn)定轉(zhuǎn)染干擾載體后，Sam68蛋白表達(dá)水平明顯下調(diào)。以上結(jié)果表明，我們設(shè)計(jì)的兩個人類siRNA序列均能成功有效敲除Sam68基因，成功建立了干擾Sam68的穩(wěn)定細(xì)胞株。將pc DNA-3和 pc DNA-3-Sam68 質(zhì)粒分別轉(zhuǎn)染至Ishikawa 細(xì)胞 48 h 后，應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 和蛋白質(zhì)印跡法，檢測轉(zhuǎn)染的 Ishikawa細(xì)胞中 Sam68 mRNA 和蛋白的表達(dá)情況，如圖 2-B顯示，實(shí)驗(yàn)組pc DNA-3-Sam68 組細(xì)胞中 Sam68 mRNA 和蛋白的表達(dá)水平明顯高于 pc DNA-3 組(P<0.05)。這一結(jié)果表明，pc DNA-3-Sam68重組質(zhì)粒成功轉(zhuǎn)染Ishikawa細(xì)胞后能夠促進(jìn)細(xì)胞 Sam68 蛋白的過表達(dá)。

注：*P<0.05圖2 實(shí)時(shí)熒光定量 PCR和蛋白質(zhì)印跡法檢測子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞中Sam68的基因和蛋白水平的敲減(A)與過表達(dá)效率(B)

2.3 敲除Sam68基因可抑制子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖 HEC-1A和RL952細(xì)胞分別轉(zhuǎn)染pSuper-retro-Sam68- RNAi#1和Sam68RNAi#2 和pSuper-retro-puro質(zhì)粒(scramble組)，對每組觀測時(shí)間的吸光度值進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，分析顯示Sam68- RNAi#1和Sam68RNAi#2干擾組活細(xì)胞數(shù)量明顯減少，細(xì)胞生長速度變慢，且隨著時(shí)間延長這種抑制作用更明顯，與對照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見圖3，提示下調(diào)Sam68基因可明顯抑制子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞生長速度。平板克隆實(shí)驗(yàn)顯示，轉(zhuǎn)染RNAi組的細(xì)胞克隆形成率顯著低于scramble組(P<0.001)，見圖4-A。圖4-B軟瓊脂實(shí)驗(yàn)顯示轉(zhuǎn)染RNAi組的細(xì)胞形成直徑>0.1 mm的集落數(shù)目明顯低于scramble組(P<0.001)。BrdU細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)是通過測定腫瘤細(xì)胞周期中S期細(xì)胞比例來準(zhǔn)確反映腫瘤細(xì)胞的增殖情況。本實(shí)驗(yàn)通過熒光顯微鏡下拍照并統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示，人子宮內(nèi)膜癌HEC-1A和RL952轉(zhuǎn)染Sam68RNAi質(zhì)粒后，細(xì)胞處于S期(DNA分子中摻入BrdU細(xì)胞，顯示紅色)的比例明顯低于scramble組(P<0.05)，見圖4-C。上述結(jié)果均說明Sam68 RNAi對人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞的增殖能力抑制作用顯著。

圖3 MTT法檢測敲除Sam68基因子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖情況

注：A：平板克隆；B：軟瓊脂克隆形成； C：BrdU細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)提示沉默Sam68 mRNA后子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞RL952和HEC-1A增殖受到明顯抑制，*P<0.05圖4 Sam68基因子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖情況

2.4 過表達(dá)Sam68基因可促進(jìn)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖 將pc DNA-3和 pc DNA-3-Sam68 質(zhì)粒分別轉(zhuǎn)染至Ishikawa 細(xì)胞 48 h 后，將細(xì)胞接種于96孔板，繼續(xù)培養(yǎng)5 d，應(yīng)用MTT檢測各組細(xì)胞增殖情況，顯示pc DNA-3-Sam68組Ishikawa 細(xì)胞在48、72和96 h這3個時(shí)間點(diǎn)的OD值均明顯高于pc DNA-3組(P<0.05)，見圖5-C，這提示過表達(dá)Sam68基因可明顯促進(jìn)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞生長。平板克隆實(shí)驗(yàn)顯示轉(zhuǎn)染pc DNA-3-Sam68組的細(xì)胞克隆形成率明顯高于scramble組(P<0.001)，見圖5-A。圖5-B軟瓊脂實(shí)驗(yàn)顯示轉(zhuǎn)染pc DNA-3-Sam68組的細(xì)胞形成直徑>0.1 mm的集落數(shù)目明顯高于scramble組(P<0.001)。BrdU細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)顯示，人子宮內(nèi)膜癌Ishikawa轉(zhuǎn)染pc DNA-3-Sam68質(zhì)粒后，細(xì)胞處于S期的比例明顯高于scramble組(P<0.05),見圖5-D。上述結(jié)果均說明過表達(dá)Sam68基因可促進(jìn)人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞的增殖。

注：A：平板克??；B：軟瓊脂克隆形成；C：MTT；D1、D2：BrdU細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)提示過表達(dá)Sam68可促進(jìn)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞Ishikawa增殖，*P<0.05圖5 過表達(dá)Sam68基因的子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖情況

3 討論

子宮內(nèi)膜癌是常見的女性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤之一。研究認(rèn)為，子宮內(nèi)膜細(xì)胞增殖機(jī)制失衡是引起內(nèi)膜癌的重要因素，通過探索新型分子診斷標(biāo)記和作用靶點(diǎn)，促進(jìn)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞的凋亡，被認(rèn)為是當(dāng)前子宮內(nèi)膜癌研究的熱點(diǎn)方向。子宮內(nèi)膜癌的預(yù)后與細(xì)胞的分型分化密切相關(guān)，分化程度越高，細(xì)胞增殖和侵襲能力越弱，預(yù)后越好[6]。

近年來Sam68在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用備受關(guān)注。早期的研究提示Sam68可能發(fā)揮類似抑癌基因的作用[7]。然而，近年更多的研究提示Sam68可能發(fā)揮癌基因的作用，與多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)[8-10]。大量的實(shí)驗(yàn)觀察表明，Sam68通過調(diào)節(jié)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑和基因表達(dá)調(diào)節(jié)直接參與腫瘤發(fā)生，特別是在內(nèi)分泌相關(guān)癌癥中[11]。Busa等[12]首先報(bào)道了Sam68在前列腺癌組織中相對于癌旁正常組織表達(dá)明顯上調(diào)，下調(diào)Sam68可顯著抑制前列腺癌細(xì)胞的增殖和抗凋亡能力；宮頸癌的研究[13]顯示Sam68在宮頸癌組織中的表達(dá)明顯高于正常宮頸組織，并能促進(jìn)宮頸癌細(xì)胞增殖；Song等[14]報(bào)道了Sam68可能通過激活A(yù)kt/GSK-3β通路和抑制FOXO/p21/p27通路，促進(jìn)細(xì)胞通過G1/S期檢查點(diǎn)，從而促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞的增殖和惡性轉(zhuǎn)化。 在卵巢中，Sam68表達(dá)在EOC組織和細(xì)胞系中上調(diào)，用小分子干擾RNA降低Sam68的水平可以將細(xì)胞周期阻滯在G1期從而損害細(xì)胞增殖[15]。

文獻(xiàn)報(bào)道，Sam68基因敲除的小鼠表現(xiàn)出明顯的子宮發(fā)育障礙[16]，這使我們對Sam68在子宮內(nèi)膜癌發(fā)生發(fā)展中可能起到的作用發(fā)生了興趣。本研究選取了不同分化程度的子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系 (HEC-1A, Ishikawa, RL952, JEC和AN3CA)及人正常子宮內(nèi)膜組織中 Sam68 mRNA和蛋白表達(dá)水平進(jìn)行檢測，觀察到Sam68在子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系中的表達(dá)均明顯上調(diào)，而在正常子宮內(nèi)膜組織及癌旁組織中幾乎檢測不到Sam68基因及蛋白，這提示Sam68與子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，進(jìn)一步支持了本課題Sam68可能是子宮內(nèi)膜癌癌基因的假設(shè)。本研究結(jié)果還發(fā)現(xiàn)，低分化AN3CA及中分化HEC-1A細(xì)胞中的Sam68 mRNA及蛋白水平明顯高于高分化的Ishikawa細(xì)胞，提示Sam68的表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞分化與惡性程度呈密切相關(guān)。這與Wang等[17]報(bào)道的子宮內(nèi)膜癌患者中Sam68的高表達(dá)與組織學(xué)分級、FIGO分期和肌層侵犯有關(guān)相一致。

在上述基礎(chǔ)上，我們對Sam68蛋白與腫瘤增殖相關(guān)的一些重要生物學(xué)特征進(jìn)行了研究。本研究通過將Sam68的靶向siRNA轉(zhuǎn)染至子宮內(nèi)膜癌HEC-1A、RL952細(xì)胞中，經(jīng)Western blot和qRT-PCR實(shí)驗(yàn)檢測， 發(fā)現(xiàn)與對照組相比，Sam68蛋白和mRNA表達(dá)水平均明顯受到抑制，該結(jié)果表明：Sam68RNAi能有效降低HEC-1A、RL952細(xì)胞中內(nèi)源性Sam68基因的表達(dá)，為后續(xù)實(shí)驗(yàn)提供了研究基礎(chǔ)。而將Sam68 cDNA轉(zhuǎn)染至低表達(dá)Sam68的Ishikawa細(xì)胞后，Sam68蛋白和mRNA表達(dá)水平明顯上升。在細(xì)胞增殖功能方面，在MTT法檢測中發(fā)現(xiàn)，隨著細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間的延長，Sam68-siRNA 和 Sam68- siRNA組細(xì)胞的增殖能力較各個對照組明顯降低，過表達(dá)Sam68則促進(jìn)增殖；平板克隆以及軟瓊脂克隆結(jié)果均證實(shí)，沉默Sam68 基因的表達(dá)可導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞生存能力、集落形成能力降低，過表達(dá)Sam68則效果相反。

本研究結(jié)果表明，在子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞中抑制 Sam68 蛋白的表達(dá)，可抑制細(xì)胞增殖，但是具體機(jī)制尚未明確。后續(xù)研究中須對Sam68在子宮內(nèi)膜癌發(fā)生發(fā)展中的機(jī)制作進(jìn)一步探究，以期為子宮內(nèi)膜癌的分子靶向治療提供新的思路。