成纖維細(xì)胞生長因子21和脂聯(lián)素水平對急性冠狀動脈綜合征患者近期預(yù)后的預(yù)測價值

王 娟，魏 瓊，朱 宇，孟路路，慧露露，馬學(xué)敏，翟巖峰

急性冠狀動脈綜合征(ACS)作為冠狀動脈粥樣硬化的最嚴(yán)重表現(xiàn)形式，通常表現(xiàn)為不穩(wěn)定型心絞痛(UA)、ST段抬高型心肌梗死(STEMI)及非ST段抬高型心肌梗死(NSTEMI)，均具有起病急、病情重、病死率高等特點(diǎn)[1]。經(jīng)皮冠狀動脈介入治療(PCI)對閉塞血管開通率可達(dá)90%，相對于傳統(tǒng)的藥物治療或溶栓治療存在極大優(yōu)勢，已成為早期控制ACS急診患者病情的標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)對方案[2-3]。盡管PCI能有效恢復(fù)冠狀動脈生理功能并挽救ACS患者生命安全，但其術(shù)后仍存在支架內(nèi)血栓形成、支架內(nèi)再狹窄或再灌注損傷等風(fēng)險[4-5]。不良心血管事件(MACE)發(fā)生率仍較高，將對近遠(yuǎn)期預(yù)后造成嚴(yán)重威脅，故臨床有必要識別PCI術(shù)后MACE高?；颊撸M早制定并執(zhí)行預(yù)防策略。由于脂代謝異常貫穿ACS病理機(jī)制始末，通過相關(guān)血清學(xué)指標(biāo)對其預(yù)后展開預(yù)測具有一定可行性，其中外周血脂聯(lián)素(APN)結(jié)合其他標(biāo)志物在評估ACS患者冠狀動脈病變程度方面的價值已取得臨床廣泛認(rèn)同[6]。而成纖維細(xì)胞生長因子21(FGF21)的研究則多局限于糖尿病、肥胖、非酒精性脂肪肝等代謝性疾病病情分析[7-9]，二者雖已明確證實與冠心病的相關(guān)性，但仍較少應(yīng)用于心血管疾病患者預(yù)后預(yù)測[10]?；诖?，本研究旨在分析血清FGF21和APN水平對ACS患者近期預(yù)后的預(yù)測價值，現(xiàn)將取得成果作如下報告。

1 資料與方法

1.1一般資料 對2017年7月—2018年8月我院收治的124例ACS患者的臨床資料進(jìn)行回顧性分析。①納入標(biāo)準(zhǔn)：臨床表現(xiàn)、影像學(xué)檢查及PCI術(shù)中所見均符合ACS相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)[11]；年齡50～80歲；臨床檢測資料完整。②排除標(biāo)準(zhǔn)：合并主動脈夾層、肺動脈栓塞、心臟瓣膜病、心肌病、先天性心臟病及胸部腫瘤等其他引起急性胸痛的疾??；伴有嚴(yán)重外傷、貧血、消化道出血及肝腎功能障礙者；起病6個月內(nèi)隨訪失聯(lián)。其中男72例，女52例；年齡53～74(61.84±4.73)歲；PCI術(shù)中植入單枚支架65例，植入多枚支架59例；合并高血壓49例，合并糖尿病34例。隨訪6個月內(nèi)發(fā)生MACE者21例納入不良組，包括惡性心律失常10例、再發(fā)心肌梗死7例、充血性心力衰竭4例，未發(fā)生MACE者103例納入良好組。

1.2檢測方法 患者入院后常規(guī)采集肘前靜脈血10 ml，4℃冰箱內(nèi)進(jìn)行凝血反應(yīng)0.5 h，以3000 r/min離心15 min，提取上層血清凍存于-80℃冰箱待測；以2個月為檢測周期，統(tǒng)一將凍存樣品取出，預(yù)先置入4℃冰箱緩慢融化12 h，測試前0.5 h再將其與試劑盒一同放入室溫環(huán)境進(jìn)行溫度平衡。甘油三酯(TG)水平測試應(yīng)用酶法試劑盒，低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)水平測試應(yīng)用直接法試劑盒，每個樣品測試取3根EP管分別標(biāo)記為試驗管、標(biāo)準(zhǔn)管與空白管，分別加入血清樣品、標(biāo)準(zhǔn)液與生理鹽水，并以工作液稀釋，混勻后在37℃水浴中處理10 min，采用全自動生化分析儀，在546 nm波長處，分別進(jìn)行空白管調(diào)零、標(biāo)準(zhǔn)管標(biāo)定，隨后測試試驗管液體吸光度并計算血清樣品中TG或LDL-C濃度；FGF21、APN水平測試均應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)試劑盒，每8個樣品取1個96孔板仔細(xì)標(biāo)記樣品孔、空白孔與多個標(biāo)準(zhǔn)孔，分別加入血清樣品、稀釋液與標(biāo)準(zhǔn)液，并根據(jù)檢出范圍對標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行逐級稀釋，保持每孔液體體積一致，加蓋并在37℃培養(yǎng)箱中溫育2 h；甩干孔中液體，加滿洗滌液，靜置30 s后傾去，重復(fù)洗滌3次后在濾紙片上充分拍干，隨后加入底物溶液，水平搖勻后加蓋避光于37℃培養(yǎng)箱中進(jìn)行顯色反應(yīng)；約0.5 h后肉眼可見半數(shù)標(biāo)準(zhǔn)孔顯色，可加入終止液并送入酶標(biāo)儀進(jìn)行吸光度測定，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)孔濃度梯度與吸光度水平繪制散點(diǎn)圖，理想溶液模型下擬合出標(biāo)準(zhǔn)曲線，計算血清樣品吸光度對應(yīng)FGF21或APN濃度水平。

2 結(jié)果

2.1血清TG、LDL-C、FGF21、APN水平比較 不良組血清TG、LDL-C、FGF21水平均明顯高于良好組，而血清APN水平則明顯低于良好組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05，P<0.01)。見表1。

表1 2組ACS患者血清TG、LDL-C、FGF21、APN水平比較

2.2預(yù)測效能分析 TG、LDL-C預(yù)測ACS患者近期預(yù)后ROC曲線的AUC均明顯小于FGF21、APN及FGF21聯(lián)合APN預(yù)測方案，F(xiàn)GF21、APN明顯小于FGF21聯(lián)合APN預(yù)測方案(P<0.05)。另外，TG、LDL-C、FGF21、APN對應(yīng)cut-off值分別為1.94 mmol/L、3.10 mmol/L、2.39 ng/L、6.96 mg/L。見圖1、表2。

表2 血清TG、LDL-C、FGF21、APN預(yù)測ACS患者近期預(yù)后的ROC曲線參數(shù)

圖1 血清TG、LDL-C、FGF21、APN預(yù)測ACS患者近期預(yù)后的ROC曲線

3 討論

TG、LDL-C是傳統(tǒng)血液檢測的常見指標(biāo)，均可直接反應(yīng)受試者脂代謝情況；其中TG主要由肝臟細(xì)胞、脂肪細(xì)胞及小腸黏膜細(xì)胞合成，進(jìn)入血液后可與載脂蛋白結(jié)合，直接參與膽固醇、膽固醇酯的合成，以及乳糜微粒、低密度脂蛋白的轉(zhuǎn)運(yùn)，能促進(jìn)微粒在動脈血管壁發(fā)生沉積，逐漸演變?yōu)橹鄻佑不邏K，且其局部降解產(chǎn)物可對內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生毒性作用，高TG血癥患者冠狀動脈斑塊更易破裂[12]。而LDL-C作為將膽固醇轉(zhuǎn)運(yùn)至肝外組織的主要形式，不僅自身是組成冠狀動脈壁斑塊的成分之一，也極易被氧化修飾，滲透進(jìn)入血管內(nèi)皮細(xì)胞比例增大，對其損傷作用進(jìn)一步增加[13]，因此二者均可顯著推動ACS發(fā)生與進(jìn)展[14]。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，不良組血清TG、LDL-C水平顯著較高，且二者預(yù)測ACS患者近期預(yù)后ROC曲線的AUC分別為0.660與0.656，這表明不同預(yù)后情況的ACS患者雖可在早期血清TG、LDL-C水平上表現(xiàn)出明顯差異，但由于直接受到年齡、飲食及生活習(xí)慣等個體化因素的影響，與疾病預(yù)后機(jī)制關(guān)聯(lián)性不足，靈敏度或特異度欠佳，故并不適宜于臨床早期預(yù)測。

APN屬于白色脂肪細(xì)胞分泌的脂肪細(xì)胞因子，常以多聚體的形式存在于外周血，通過與骨骼肌、平滑肌細(xì)胞中受體1或肝臟細(xì)胞受體2結(jié)合，可提高細(xì)胞對葡萄糖的攝取效率，抑制糖異生作用，達(dá)到調(diào)節(jié)糖脂代謝的目的，還能活化鈣黏蛋白阻抗局部炎癥反應(yīng)、氧化應(yīng)激反應(yīng)及纖維化反應(yīng)[15]。據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)報道，由于APN能通過弱化巨噬細(xì)胞吞噬活性，阻礙其向泡沫細(xì)胞的病理轉(zhuǎn)化過程，并借以減少血細(xì)胞表面黏附分子表達(dá)，進(jìn)而防止血栓形成[16]；還能抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖與分化機(jī)制，可避免損傷區(qū)域遷移或擴(kuò)張，增強(qiáng)內(nèi)源性一氧化氮合酶活性，舒張血管并進(jìn)一步阻止血小板聚集，因此是目前發(fā)現(xiàn)的唯一對心肌缺血有保護(hù)作用的脂肪細(xì)胞因子[17-19]。本研究結(jié)果顯示，不良組血清APN水平較良好組更低，且預(yù)測ACS患者近期預(yù)后ROC曲線的AUC為0.749，明顯高于TG、LDL-C，其水平≤6.96 mg/L可高風(fēng)險預(yù)測為不良預(yù)后，提示早期血清APN水平能靈敏反映ACS患者內(nèi)皮細(xì)胞保護(hù)與抗動脈粥樣硬化、抗血栓形成的能力，從而有效預(yù)測疾病進(jìn)展[20]。

FGF21是FGFs超家族成員之一，由于三級結(jié)構(gòu)中缺乏肝素結(jié)合域，在體循環(huán)中多表現(xiàn)出類似激素的血糖、血脂平衡調(diào)節(jié)作用，可改善胰島素敏感性并協(xié)調(diào)全身能量代謝[21]；由于FGF21能活化脂肪細(xì)胞中非胰島素依賴的葡萄糖吸收作用，增加脂肪儲存，并提高肝臟對游離脂肪酸的氧化作用，抑制脂肪合成并提高能量耗散，因而可通過調(diào)脂功能對冠狀動脈粥樣硬化過程起到阻礙作用[22-23]。然而，在現(xiàn)有資料中多發(fā)現(xiàn)冠心病患者血清FGF21水平明顯高于健康對照樣本，認(rèn)為該物質(zhì)可作為機(jī)體對脂代謝異常的生理防御性反應(yīng)，從而患病后代償性提高分泌水平以減弱或抵消高脂血癥所產(chǎn)生的負(fù)面影響[24]。本研究還發(fā)現(xiàn)，不良組血清FGF21水平明顯高于良好組，且預(yù)測ACS患者預(yù)后ROC曲線的AUC為0.871，其水平≥2.39 ng/L可高風(fēng)險預(yù)測為不良預(yù)后，如聯(lián)合APN展開預(yù)測，則可將AUC提升至0.933，在所有方案中預(yù)測效能最佳，這說明FGF21聯(lián)合APN能分別從固有性保護(hù)血管內(nèi)皮細(xì)胞能力與代償性抗粥樣硬化強(qiáng)度方面準(zhǔn)確反映患者機(jī)體在ACS起病后的狀態(tài)，相較于脂代謝指標(biāo)能更順應(yīng)病情進(jìn)展趨勢，因此確證有較高預(yù)測價值。Gómez-Sámano等[25]在動物模型實驗中獲悉，高脂肪飲食導(dǎo)致的氧化應(yīng)激作用，可促使肝臟與脂肪組織上調(diào)FGF21表達(dá)活性，增強(qiáng)細(xì)胞核轉(zhuǎn)錄因子E-2抗氧化活性，以提高體內(nèi)超氧化物歧化酶含量減少內(nèi)皮細(xì)胞受損，認(rèn)為可作為臨床防治方案設(shè)計與療效評估的靶點(diǎn)。

綜上所述，早期聯(lián)合檢測血清FGF21和APN水平可對ACS患者的近期預(yù)后進(jìn)行有效預(yù)測，相比于TG、LDL-C水平能更準(zhǔn)確推演疾病轉(zhuǎn)歸趨勢，有利于盡早識別并實施預(yù)防策略改善預(yù)后，臨床檢測價值較高。