外周血中散發(fā)性染色體畸變的細(xì)胞遺傳學(xué)分析

黃霈 陳美佳 呂福通

[摘要] 目的 對(duì)外周血中散發(fā)性染色體畸變的類型及其臨床表現(xiàn)進(jìn)行遺傳學(xué)分析，為臨床遺傳咨詢和生育指導(dǎo)提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。 方法 回顧性分析2015年1月～2019年11月廣西壯族自治區(qū)生殖醫(yī)院的外周血染色體檢查標(biāo)本，并收集散發(fā)性染色體畸變患者的相關(guān)病歷資料，并對(duì)畸變類型進(jìn)行遺傳學(xué)分析。 結(jié)果 8367例受檢者標(biāo)本中共檢出散發(fā)性染色體畸變129例（1.5%），畸變類型以易位為主。其中t（7;14）最為常見（15.5%），共62例（48%）與流產(chǎn)有關(guān)。 結(jié)論 散發(fā)性染色體畸變的臨床意義不可忽視，在遺傳咨詢中應(yīng)建議該類患者再次生育時(shí)做產(chǎn)前診斷。

[關(guān)鍵詞] 散發(fā)性;染色體畸變;染色體易位;細(xì)胞遺傳學(xué);臨床表現(xiàn)

[中圖分類號(hào)] R74，R3 ? ? ? ? ?[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A ? ? ? ? ?[文章編號(hào)] 1673-7210（2020）06（a）-0160-03

[Abstract] Objective To provide laboratory basis for genetic counseling and reproductive guidance through investigating the types and clinical manifestations of sporadic chromosomal aberrations in peripheral blood. Methods Peripheral blood chromosome examination specimens detected in the Reproductive Hospital of Guangxi Zhuang Autonomous Region from January 2015 to November 2019 were retrospectively analyzed. Relevant medical records and types of aberrations of patients with sporadic chromosomal aberrations were collected for genetic analysis. Results A total of 129 cases （1.5%） of sporadic chromosomal aberrations were detected in the specimens of 8367 subjects， and the type of aberration was mainly translocation. Among them， t（7; 14） was the most common （15.5%）， and 62 cases （48%） were correlated with abortion. Conclusion The clinical significance of sporadic chromosomal aberrations cannot be ignored. Prenatal diagnosis should be recommended for people with such chromosomal aberration in their reproductive actions.

[Key words] Sporadic; Chromosomal aberration; Translocation; Cytogenetics; Clinical manifestation

外周血中單個(gè)細(xì)胞染色體畸變又稱為為散發(fā)性染色體異常，是一種罕見的臨床細(xì)胞遺傳學(xué)現(xiàn)象。早在30年前就被研究者們發(fā)現(xiàn)[1]，之后國內(nèi)外多個(gè)實(shí)驗(yàn)室也均發(fā)現(xiàn)這種現(xiàn)象的存在[2-4]。經(jīng)典遺傳學(xué)把它歸為體細(xì)胞突變的范疇，認(rèn)為這種畸變一般不會(huì)影響個(gè)體發(fā)育及生理功能[5]。然而近年來的研究表明單個(gè)細(xì)胞染色體畸變涉及到各號(hào)染色體，并可能與多種疾病和臨床癥狀有相關(guān)性[6]。本研究回顧性分析了廣西壯族自治區(qū)生殖醫(yī)院過去5年內(nèi)發(fā)現(xiàn)的散發(fā)性染色體異常病例，就其畸變類型及主要臨床表現(xiàn)進(jìn)行遺傳學(xué)分析。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

回顧性分析2015年1月～2019年11月廣西壯族自治區(qū)生殖醫(yī)院的外周血染色體檢查標(biāo)本，納入標(biāo)準(zhǔn)：①不明原因引起不孕不育的夫婦;②有反復(fù)流產(chǎn)史的女性;③少弱精癥和無精癥的男性。所有研究對(duì)象均知情同意并簽署知情同意書。

1.2 染色體核型分析

抽取外周血4 mL經(jīng)培養(yǎng)68～72 h后常規(guī)制備染色體標(biāo)本，經(jīng)G顯帶后，計(jì)數(shù)20個(gè)中期分裂相，分析5個(gè)以上清晰核型，發(fā)現(xiàn)單個(gè)細(xì)胞染色體畸變擴(kuò)大范圍分析100個(gè)分裂相。異常核型根據(jù)ISCN 2016人類細(xì)胞遺傳學(xué)國際命名體制命名。

2 結(jié)果

受檢患者共計(jì)8367例，發(fā)現(xiàn)單個(gè)細(xì)胞染色體畸變的正常核型患者129例，畸變類型包括數(shù)目異常及易位、倒位、缺失等結(jié)構(gòu)異常，涉及到幾乎各號(hào)染色體，發(fā)生率為1.5%。其中7號(hào)和14號(hào)染色體畸變率最高（35.7%），又以t（7;14）最為常見（15.5%）。臨床特征主要表現(xiàn)為原發(fā)性不孕癥（31%，40/129）、自然流產(chǎn)（48%，62/129）及異位妊娠（12%，15/129）。見表1。

3 討論

從20世紀(jì)70年代初單個(gè)細(xì)胞染色體畸變被發(fā)現(xiàn)以來[7]，這類罕見的臨床細(xì)胞遺傳學(xué)現(xiàn)象已經(jīng)引起越來越多研究者們的關(guān)注[1，8]。雖然多數(shù)畸變互不相同且隨機(jī)發(fā)生，一般被認(rèn)為是偶發(fā)事件，但t（7;14）發(fā)生率最高，且斷裂位點(diǎn)幾乎都集中在某些固定區(qū)域。這些區(qū)域被稱為斷裂熱點(diǎn)，按發(fā)生頻率由高到低為14q11-12、7p13-14、7q32-36及14q32，因此認(rèn)為其發(fā)生可能并非偶然[9]。本研究中涉及7和14號(hào)染色體易位及部分缺失的發(fā)生率最高（35.7%），且主要為t（7;14），斷裂位點(diǎn)也與之前的研究結(jié)果一致。

關(guān)于散發(fā)性的t（7;14）發(fā)生機(jī)制，目前的研究認(rèn)為可能與以下幾個(gè)方面有關(guān)：①7號(hào)和14號(hào)染色體上的不穩(wěn)定性位點(diǎn)：研究者用SCE技術(shù)觀察發(fā)現(xiàn)14q11處交換頻率較高，提示該位點(diǎn)存在高度的遺傳不穩(wěn)定性，并可能是t（7;14）高發(fā)生率的誘因[8]。②同源性：7q和14q上可能存在同源片段使兩者在染色體復(fù)制時(shí)相互靠近并發(fā)生交換[1，3]。③植物血凝素（PHA）誘發(fā)：研究證明t（7;14）只出現(xiàn)在有PHA刺激的外周血淋巴細(xì)胞中，而在無PHA刺激的外周血淋巴細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、羊水細(xì)胞中均未發(fā)現(xiàn)這種畸變，提示PHA可能是誘發(fā)t（7;14）的因素之一[10]。④T淋巴細(xì)胞分化成熟：T淋巴細(xì)胞抗原受體基因位點(diǎn)與7號(hào)和14號(hào)染色體斷裂熱點(diǎn)相重疊。已證實(shí)抗原受體α鏈基因定位于14q11-12，β鏈基因定位于7p13-21和7q22-ter，γ鏈基因定位于7p13-15，而免疫球蛋白重鏈基因則定位于14q32[11-13]。當(dāng)機(jī)體受到免疫刺激時(shí)，這些基因轉(zhuǎn)錄活性增強(qiáng)可能促進(jìn)7號(hào)和14號(hào)染色體的斷裂重排[9]。

本研究顯示在所有散發(fā)性畸變患者中近半數(shù)都有自然流產(chǎn)史，與文獻(xiàn)報(bào)道一致[2-4]，說明兩者之間可能存在一定聯(lián)系。患者可能是某種低比例異常細(xì)胞系的嵌合體[5]，如果這種畸變累及生殖腺，且生殖腺中異常細(xì)胞的比例有可能高于外周血，導(dǎo)致不平衡配子產(chǎn)生，引發(fā)自然流產(chǎn)，即產(chǎn)生與平衡易位攜帶者相似的臨床效應(yīng)[9，14]。若是染色體斷裂重排引發(fā)癌基因的激活或抑癌基因的失活，還有可能導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。目前已有研究證實(shí)14q11、14q32斷裂與T淋巴細(xì)胞白血病、淋巴瘤有相關(guān)性，1p13、7q34斷裂在慢性淋巴細(xì)胞白血病患者中發(fā)生率較高[2，15-18]，在急性髓系白血病中發(fā)現(xiàn)t（7;14）（q21;q32）且預(yù)后不良[19]。此外還有研究報(bào)道t（7;14）多發(fā)現(xiàn)于滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤及運(yùn)動(dòng)失調(diào)性毛細(xì)血管擴(kuò)張患者[4，20-21]。值得一提的是，本研究檢出的129例散發(fā)性染色體畸變患者中還有15例（12%）有異位妊娠史，這在過去的文獻(xiàn)中鮮見報(bào)道，兩者之間是否也存在某種聯(lián)系尚不清楚，有待進(jìn)一步研究。

散發(fā)性染色體畸變作為一種罕見的遺傳學(xué)現(xiàn)象，由于未達(dá)到異常染色體報(bào)告標(biāo)準(zhǔn)，通常以正常核型報(bào)告，但并不能排除此類患者是低比例嵌合體的可能性?；谏鲜錾l(fā)性染色體畸變可能產(chǎn)生的臨床效應(yīng)，建議檢驗(yàn)人員應(yīng)重視該類異常，當(dāng)發(fā)現(xiàn)單個(gè)細(xì)胞染色體畸變時(shí)應(yīng)加大計(jì)數(shù)并積極地給予臨床提示，臨床醫(yī)師應(yīng)建議該類患者再次生育時(shí)做產(chǎn)前診斷以減少胎兒出生缺陷的發(fā)生。

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（收稿日期：2020-01-22 ?本文編輯：任 ? 念）