嚴(yán)重脂血對Sysmex XE-2100全自動血液分析儀血細(xì)胞檢測結(jié)果的影響

李壽敏，張 茜，趙 府，郭子微，惠 維，王 誠

（1.六盤水市人民醫(yī)院檢驗科，貴州六盤水 553001；2.遵義醫(yī)科大學(xué)，貴州遵義 563000）

Sysmex XE-2100全自動血液分析儀是國內(nèi)目前較為普及的全自動五分類血液分析儀，血細(xì)胞分析是病人門診和入院必做的常規(guī)檢查之一，保證結(jié)果的可靠性尤為重要。既往同行研究脂血對血細(xì)胞分析的影響主要是對Hb及相關(guān)參數(shù)影響，本研究實驗過程中還發(fā)現(xiàn)過高的脂血還會對WBC計數(shù)及分類造成影響，既往沒有相關(guān)報道。本研究模擬臨床上常見脂血和輸注脂肪乳后造成的不同程度脂血對Sysmex XE-2100分析儀血細(xì)胞分析主要指標(biāo)影響進(jìn)行研究，旨在找出受影響的指標(biāo)及相應(yīng)的對策，應(yīng)對檢驗工作中不可避免的脂血問題。

1 材料與方法

1.1 研究對象 2019年7月本院健康體檢標(biāo)本30例，其中男性15例，女性15例；年齡18～59歲，平均年齡36歲，樣本要求清晨空腹采血3ml（EDTA-K2抗凝），常溫保存，所有標(biāo)本均排除脂血、溶血、黃疸、高白細(xì)胞等影響。

1.2 儀器試劑 Sysmex XE-2100全自動血液分析儀及原裝配套試劑,德國Roche cobas-8000全自動生化分析儀及TG配套試劑(LOT:38236801)，湘儀牌CTK120離心機(jī)。血細(xì)胞檢測質(zhì)控品由山東卓越生產(chǎn)(LOT:E514502)，生化質(zhì)控品有易控(LOT:20212112)和RANDOX(LOT:983VE)，中長鏈脂肪乳由四川國瑞藥業(yè)有限公司生產(chǎn)(LOT:1901282)，以上試劑均在有效期內(nèi)使用。

1.3 方法

1.3.1 血細(xì)胞參數(shù)檢測：空腹采血30例先進(jìn)行血細(xì)胞檢測，記錄的項目主要是白細(xì)胞計數(shù)（white blood cell,WBC）,紅細(xì)胞計數(shù)（red blood cell,RBC）,血紅蛋白（hemoglobin,Hb）,血細(xì)胞比容（hematorit,HCT）,平均紅細(xì)胞體積（mean corpuscular volume，MCV），平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量（mean corpuscular hemoglobin,MCH）,平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度水平（mean corpuscular hemoglobin concentration,MCHC）,血小板計數(shù)（platelet,PLT）和白細(xì)胞五分類比例:中性粒細(xì)胞百分比（NEUT%）,淋巴細(xì)胞百分比（LYMPH%）,單核細(xì)胞百分比（MONO%）,嗜酸性粒細(xì)胞百分比（EOS%）,嗜堿性粒細(xì)胞百分比（BASO%）。DIFF通道X軸測的是側(cè)向散色光，Y軸測的是側(cè)向熒光（DIFF-Y,NEUT-Y,DIFF-WY,LYMPH-Y），BASO通道X軸測的是側(cè)向散色光（DIFFX,NEUT-X,DIFF-WX,LYMPH-X,BASO-X,BASOWX），Y軸測的是前向散色光（BASO-Y,BASO-WY），記錄結(jié)果做對照組。

1.3.2 制備不同程度脂血及檢測：將每一例標(biāo)本平均分成兩管，為A，B兩組，將A，B兩組上層血漿分別吸出70μl和120μl，加入等量脂肪乳，用生化儀檢測TG濃度。A組TG=91.5±13.3mmon/L，B組TG=137.8±12.6mmol/L。所有樣本同時上機(jī)檢測，將血細(xì)胞檢測結(jié)果按照分組與對照組進(jìn)行比較分析。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析 所有數(shù)據(jù)采用SPSS 23.0統(tǒng)計軟件分析，檢測結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，各組與對照組比較作配對t檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 A組與對照組各檢測指標(biāo)比較 見表1。Hb,RDW-SD,RDW-CV,MCH,MCHC,WBC,LYMPH%和MONO%兩組比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），RBC，PLT，MEUT%，EOS%，BASO兩組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。

2.2 B組與對照組各項檢測指標(biāo)比較 見表1。Hb,HCT,MCV,RDW-SD,RDW-CV,MCH,MCHC,WBC,NEUT%,LYMPH%和MONO%兩組比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），RBC，PLT，EOS%，BASO%與對照組相比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。

2.3 脂血對白細(xì)胞分類的影響 見表2。檢測過程中A組有1例是分類失敗，B組有10例分類失敗，當(dāng)脂血程度達(dá)到一定程度還會對白細(xì)胞分類有影響，將A，B組分類散點圖敏感度（scattergram sensitivity）與對照組進(jìn)行比較，DIFF通道分類參數(shù)Y軸方向的側(cè)向熒光值除NEUT-Y信號值無影響，其余信號值與對照組比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01），X方向的側(cè)向散色光信號值與對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）；BASO通道分類參數(shù)Y軸方向的前向散色光均受到影響，其中BASO-Y下降，與對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01），而BASO-WY增加，與對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01），X方向的側(cè)向散色光值均增加，與對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。而且信號值的改變程度隨脂血程度的增加而加大，由于信號值的改變超過儀器的分辨能力造成的白細(xì)胞不能分類，見表3。

3 討論

現(xiàn)代實驗室在儀器、人員、試劑等方面都能夠很好的控制，標(biāo)本本身的異常情況更容易引起結(jié)果的異常，輕度脂血對XE-2100血液分析儀的檢測指標(biāo)均無影響，徐玉兵等[2-3，5]已進(jìn)行過相關(guān)報道。特殊病人如高脂血癥、輸注脂肪乳的病人、急性胰腺炎病人等都是脂血標(biāo)本來源，往往這類病人的血脂可能達(dá)到TG＞100mmol/L，脂血會對血細(xì)胞檢測一些重要指標(biāo)產(chǎn)生影響，這對檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確性提出了很大的挑戰(zhàn)。

本實驗研究結(jié)果顯示，無論脂血程度如何都對RBC，PLT,EOS%和BASO%檢測結(jié)果沒有影響。重度脂血時會造成Hb,HCT,MCV,MCH和MCHC水平升高，這項研究也與相關(guān)文獻(xiàn)相符[5,10]，同時還會造成RDW-SD和RBW-CV水平升高。當(dāng)TG≥137.8±12.6mmol/L時NEUT%檢測結(jié)果上升明顯，同時還會造成白細(xì)胞的不分類情況，而且脂血程度越高分類失敗情況越多，對白細(xì)胞分類受到影響的組別的信號值進(jìn)行比較分析，DIFF和BASO通道檢測信號值均受到干擾。

表1 不同程度脂血對血常規(guī)檢測結(jié)果的影響（±s）

項目 對照組 A組（91.5±13.3mmol/L）B組（137.8±12.6mmol/L）檢測值 t p 檢測值 t p RBC（×1012/L）4.91±0.27 4.92±0.30 -0.219 0.828 4.93±0.31 0.333 -0.740 HB(g/L) 140.19±10.50 166.91±13.78 -8.723 0.000 189.19±14.36 -15.585 0.000 HCT(%) 40.35±2.89 41.09±3.02 -0.995 0.324 42.52±3.21 -2.836 0.006 MCV(fl) 82.26±4.1 83.64±629 -1.036 0.304 86.4±6.51 -3.038 0.003 MCH(pg) 28.56±1.57 34.0±3.08 -8.903 0.000 38.47±3.25 -15.508 0.000 MCHC(g/L) 347.28±7.07 406.65±14.58 -20.722 0.000 445.8±15.7 -6.684 0.000 RDW-SD(Fl) 39.57±2.57 42.3±3.19 -3.773 0.000 44.14±3.17 -6.344 0.000 RDW-CV(%) 13.28±0.58 14.13±1.02 -4.087 0.000 14.14±0.93 -4.435 0.000 PLT（×109/L）288.27±68.18 295.67±67.87 -1.229 0.224 266.63±68.18 -0.421 0.675 WBC（×109/L）5.98±1.15 6.75±1.21 -2.623 0.011 7.56±1.49 -4.725 0.000 N(%) 47.46±7.97 48.9±10.65 -0.561 0.577 65.13±11.88 -5.829 0.000 L(%) 41.8±9.61 29.58±8.29 5.455 0.000 13.7±4.09 15.005 0.000 M(%) 7.48±1.93 18.96±5.11 11.877 0.000 18.18±7.66 -7.653 0.000 E(%) 3.0±2.41 2.95±2.41 0.143 0.887 3.09±4.35 -0.054 0.957 B(%) 0.2±0.14 0.18±0.15 -0.528 0.599 0.13±0.11 2.386 0.020

表2 不同程度脂血對白細(xì)胞分類參數(shù)的影響（±s，%）

表2 不同程度脂血對白細(xì)胞分類參數(shù)的影響（±s，%）

項目 對照組 A組（91.5±13.3mmol/L）B組（137.8±12.6mmol/L）檢測值 t p 檢測值 t p DIFF-X 141.6±1.9 149.1±2.8 -11.705 0.000 148.7±4.7 -7.304 0.000 DIFF-Y 40.0±1.5 35.0±1.5 12.711 0.000 37.0±3.5 4.167 0.000 NEUT-X 1 416.0±18.9 1 491.3±28.0 -11.709 0.000 1496.6±63.2 -6.269 0.000 NEUT-Y 388.8±59.2 350.4±14.7 3.544 0.001 369.7±34.9 1.528 0.132 DIFF-WX 83.5±±31.2 150.3±39.4 -7.028 0.000 186.1±19.0 -15.426 0.000 DIFF-WY 166.0±37.0 244.1±27.3 -9.256 0.000 226.4±20.2 -7.917 0.000 LYMPH-X 944.7±6.6 1 039.5±15.5 -29.131 0.000 1061.6±20.9 -27.459 0.000 LYMPH-Y 550.4±12.4 500.3±31.6 7.614 0.000 495.4±17.1 13.719 0.000 BASO-X 65.2±3.1 63.0±3.2 2.541 0.014 61.9±3.6 3.677 0.001 BASO-Y 69.0±6.4 61.9±4.0 5.166 0.000 57.7±5.7 7.138 0.000 BASO-WX 93.1±8.8 316.8±62.4 -18.122 0.000 346.3±14.1 -79.956 0.000 BASO-WY 65.3±6.8 160.4±16.0 -28.258 0.000 154.0±13.7 -30.12 00.000

分析原因：①脂血對XE-2100血細(xì)胞分析儀的檢測指標(biāo)影響中對RBC的相關(guān)參數(shù)有影響，其中以HB最為突出，因為HB所采用的是SLS-HB比色法[4,11]，比色測定法原理遵循朗伯-比爾定律[6]，脂血標(biāo)本濁度的增加從而造成HB假性增高,MCH和MCHC都是計算項目,隨HB假性升高而升高。MCV=HCT/RBC(×/L)×1015[9]，HCT假性升高而MCV升高。②儀器是通過檢測細(xì)胞前向散色光、側(cè)向散色光、側(cè)向熒光的信號值來對白細(xì)胞進(jìn)行分類，在脂血程度達(dá)到很高時WBC計數(shù)和分類都會受到影響，各類細(xì)胞信號值之間相互干擾造成的細(xì)胞分類結(jié)果改變，信號值的改變超過了儀器的分辨力，造成分類不全甚至不能分類。

綜上所述，脂血會對血細(xì)胞檢測的Hb及相關(guān)參數(shù)、白細(xì)胞計數(shù)及分類有影響，極大影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性，當(dāng)我們?nèi)粘９ぷ髦杏龅紿b,MCH和MCHC等異常升高且與RBC結(jié)果不匹配的情況即RBC×30=HB,HB×0.3=HCT時要注意是否受到脂血的影響，或全血靜置后血漿部分呈現(xiàn)乳白色渾濁，均應(yīng)高度懷疑為“脂血”標(biāo)本[5]。HB校正，可以利用馬驥等[3，6，11]提供的公式進(jìn)行校正，也可離心后測血漿中HB然后進(jìn)行換算[13]，或者用稀釋液置換血漿的方法進(jìn)行校正[1-2，7-8]，同時對MCH和MCHC進(jìn)行校正[6，12]。估算結(jié)果只能是和真實結(jié)果相近，可以給臨床報告修正后HB的結(jié)果作為參考，而WBC的結(jié)果則需要手工方法對分類和計數(shù)進(jìn)行校正，注明“標(biāo)本脂血”以便臨床對患者情況做出準(zhǔn)確的判斷。