瑤藥花皮膠藤藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

王 凱，歐春麗，張文玉，莫單丹，周小雷，王 碩，龔小妹

（廣西壯族自治區(qū)藥用植物園·西南瀕危藥材資源開發(fā)國家工程實驗室，廣西 南寧 530023）

花皮膠藤為夾竹桃科花皮膠藤Ecdysanthera utilis Hay. et Kaw. 的莖皮，為104 種瑤藥經(jīng)典老班藥花九牛，又名花杜仲藤、刺耳南、刺耳藍(lán)、眼角藍(lán)，其味苦、澀，性微溫，具有舒筋活絡(luò)、活血消腫功效，主治風(fēng)濕跌打、外傷筋斷、小兒白皰瘡等[1－2]。目前，花皮膠藤與杜仲藤均以杜仲藤為正名 Urceola micrantha（Wallich ex G. Don） D. J. Middleton?！稄V西植物名錄》記載，杜仲藤又名刺耳南，分布于廣西上林、臨桂、蒼梧、藤縣、合浦、東興、欽州、平南、容縣、陸川、博白、北流、白色、靖西、寧明、龍州、上思、金秀等地[3－4]?！稄V西藥用植物名錄》記載，花皮膠藤用于小兒膿皰瘡[5]?！吨腥A本草》記載，花杜仲藤味苦、辛，性平，具有祛風(fēng)通絡(luò)、活血消腫、解毒功效，主治小兒麻痹后遺癥、風(fēng)濕骨痛、跌打損傷、瘡毒[6－7]。本研究中對其性狀、顯微鑒別、薄層鑒別及其灰分、水分、浸出物等進行了系統(tǒng)研究?，F(xiàn)報道如下。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

CP224S 型電子分析天平（德國Sartorius，精度為0.000 1 g）；DM2000 型生物顯微鏡（德國徠卡公司）；SX2 －4JOA 型箱式電阻爐（上海比爾得儀器實業(yè)有限公司）；101 －1 型電熱鼓風(fēng)干燥箱（上海滬南科學(xué)儀器聯(lián)營廠）；W201 型恒溫浴鍋（上海申生科技有限公司）；高速萬能粉碎機（天津泰斯特儀器有限公司）；KQ5200 型超聲波清洗器（昆山超聲波儀器有限公司，功率為250 W，頻率為25 kHz）；ZMQS50001 型超純水機（美國Millipore Milli －Q Academic）；薄層色譜硅膠GF254板（青島海洋化工有限公司，批號為20180609，規(guī)格分別為50 mm 和100 mm，厚度為0.20 ～0.25 mm）。

1.2 試藥

水為超純水，其余試劑均為分析純，均購自成都市科龍化工試劑廠）；花皮膠藤樣品信息見表1，經(jīng)廣西藥用植物園中藥材標(biāo)本館劉壽養(yǎng)教授鑒定為正品。樣品保存于廣西藥用植物研究所中藥標(biāo)本室。

表1 花皮膠藤樣品信息

2 方法與結(jié)果

2.1 性狀鑒別

本品樹皮厚1 ～3 mm，外表面紫褐色或棕褐色，粗糙，皮孔白色，密而明顯，刮去栓皮顯棕黃色。內(nèi)表面淡紅褐色，具細(xì)縱紋。折斷面有稀疏白色膠絲相連，彈性差，氣微，味微澀。詳見圖1 和圖2。

圖1 花皮膠藤原植物

圖2 花皮膠藤藥材

2.2 顯微鑒別（切片）[8]

莖橫切面：木栓層為4 ～8 余列扁平細(xì)胞；栓內(nèi)層細(xì)胞為2 ～5 余列長方形細(xì)胞，壁稍增厚，有時可見石細(xì)胞散在；皮層較寬廣，中柱鞘纖維和石細(xì)胞相伴，斷續(xù)排列成環(huán)狀；韌皮部外側(cè)散有石細(xì)胞，射線1 ～3 列細(xì)胞；導(dǎo)管大小不一，2 ～10 個相連徑向排列或單個散在，木纖維成群分布；髓部細(xì)胞類圓形，胞間隙小三角形。詳見圖3。

圖3 花皮膠藤莖橫切面圖

2.3 粉末顯微特征

粉末呈棕色或紅棕色。石細(xì)胞甚多，多形大壁厚，散在分布或成群分布，類方形、類長方形、長條形或不規(guī)則多角形，壁厚7 ～24 μm；草酸鈣方晶較多，散在分布或成群分布，類方形、類長方形或多邊形，直徑5 ～15 μm，晶鞘顯微多見；導(dǎo)管為螺紋導(dǎo)管、網(wǎng)紋導(dǎo)管、具緣紋孔導(dǎo)管；淀粉粒少見，單粒或復(fù)粒。詳見圖4。

圖4 花皮膠藤粉末圖

2.4 薄層鑒別

分別稱取1 ～12 號花皮膠藤藥材粉末（過65 目四號篩）各5 g，加95 %乙醇20 mL，超聲提取1 h，濾過，濾液回收乙醇，水轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，用乙酸乙酯20 mL振搖提取，乙酸乙酯層用水15 mL 洗滌，棄去水層，乙酸乙酯層置水浴上蒸干，殘渣加甲醇2 mL 使溶解，作為供試品溶液。另取花皮膠藤對照藥材5 g，同法制成對照藥材溶液。按2015 年版《中國藥典（一部）》附錄ⅤB 薄層色譜法試驗，吸取上述2 種溶液各1 μL，分別點于同一硅膠G 薄層板上，以氯仿－乙酸乙酯－乙酸（90 ∶10 ∶1，V／ V／ V）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10 %磷鉬酸乙醇液（g／mL）。供試品溶液色譜中，在與對照藥材溶液色譜相應(yīng)位置上顯相同顏色的斑點。色譜圖見圖5。經(jīng)耐受性試驗考察，花皮膠藤薄層色譜系統(tǒng)耐受性條件為：溫度10 ～40 ℃，相對濕度30% ～70%。

圖5 花皮膠藤薄層色譜圖

2.5 浸出物、總灰分、酸不溶性灰分和水分測定[9]

浸出物測定按2015 年版《中國藥典(一部)》通則2201 測定，以95%乙醇為溶劑，采用冷浸法；總灰分、酸不溶性灰分測定按2015 年版《中國藥典（一部）》通則2302 中灰分測定法測定；水分按2015 年版《中國藥典（一部）》通則0832 中水分測定法測定。結(jié)果見表2。鑒于本品來自于野生資源，產(chǎn)地和采收情況較復(fù)雜，暫定為總灰分不得超過9.0% ，酸不溶性灰分不得超過5.0%，水浸出物不得低于15.0%，醇浸出物不得低于12.0%，水分不得超過15.0%。詳見表2。

3 討論

瑤藥花皮膠藤藥材的薄層鑒別方法中，曾以氯仿－丙酮（10 ∶1，V／ V）、氯仿－乙酸乙酯－乙酸（9 ∶1 ∶0.1，V／ V／ V）、氯仿－乙酸乙酯－乙酸（10 ∶1 ∶0.1，V／ V／ V）、氯仿－乙酸乙酯－乙酸（12 ∶1 ∶0.1，V／ V／ V）、氯仿－丙酮（9 ∶1， V／ V）、石油醚－丙酮（5 ∶1， V／ V)為展開劑進行層析預(yù)試驗，結(jié)果以氯仿－乙酸乙酯－乙酸（90 ∶10 ∶1，V／ V／ V）為展開劑，以10 %磷鉬酸乙醇液（g／mL）為顯色劑展開，所得薄層斑點清晰，分離效果好，故以此展開條件為展開系統(tǒng)。

表2 各產(chǎn)地花皮膠藤水分、灰分及浸出物測定結(jié)果（%）

化學(xué)成分預(yù)試驗[10]結(jié)果表明，瑤藥花皮膠藤可能含有三萜、甾體、糖類、苷類、酚類、皂苷、蒽醌、內(nèi)酯、鞣質(zhì)、有機酸等化學(xué)成分，但目前尚無有關(guān)化學(xué)成分的研究報道。因此，瑤藥花皮膠藤的薄層鑒別無對照品進行質(zhì)量控制研究，只能以對照藥材作為對照進行薄層層析研究。藥材中有效成分檢測指標(biāo)的缺失嚴(yán)重影響其藥材質(zhì)量，建立瑤藥花皮膠藤成分的定性定量檢查方法，對于保證瑤藥花皮膠藤藥材的質(zhì)量具有重要意義。因此，本研究中在其薄層色譜檢識方法的基礎(chǔ)上，擬對其活性成分進行分離、純化作為藥材的質(zhì)控指標(biāo)，制訂其含量限度，以期科學(xué)、有效地控制藥材的質(zhì)量，保證其臨床療效。