多重感染及病毒載量對(duì)兒童呼吸道感染嚴(yán)重程度的影響

張慧 李鋒 代勤韻

[摘要] 目的 探討多重感染及病毒載量對(duì)兒童呼吸道感染嚴(yán)重程度的影響。 方法 回顧性分析2017年12月～2018年12月于重慶市江津區(qū)中心醫(yī)院就診的呼吸道感染患兒97例，根據(jù)疾病嚴(yán)重程度評(píng)分（IOS）將所有患兒分為輕度組（n = 72）、中度組（n = 15）、重度組（n = 10）。所有患兒均行呼吸道病原體篩檢，比較三組患兒一般情況、癥狀、感染情況、并發(fā)癥、就診情況、實(shí)驗(yàn)室相關(guān)指標(biāo)及病毒載量等資料的差異。分析影響患兒病情的危險(xiǎn)因素。 結(jié)果 重度組多重感染率、降鈣素原（PCT）及總病毒載量顯著高于其他兩組，而中度組多重感染率、PCT及總病毒載量顯著高于輕度組（P < 0.05）。PCT（OR = 4.951，95%CI：1.005～9.473，P = 0.003）及多重感染（OR = 1.731，95%CI：8.782～122.363，P < 0.001）是影響疾病嚴(yán)重程度的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。 結(jié)論 PCT及多重感染是影響呼吸道感染患兒疾病嚴(yán)重程度的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，在今后的臨床工作中應(yīng)加以重視。

[關(guān)鍵詞] 呼吸道感染;兒童;多重感染;病毒載量

[中圖分類號(hào)] R725.6? ? ? ? ? [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A? ? ? ? ? [文章編號(hào)] 1673-7210（2020）05（c）-0088-04

Effects of multiple infections and viral load on severity of respiratory infection in children

ZHANG Hui? ?LI Feng? ?DAI Qinyun▲

Department of Pediatrics， Jiangjin Central Hospital of Chongqing， Chongqing? ?402260， China

[Abstract] Objective To investigate the effects of multiple infections and viral load on the severity of respiratory infections in children. Methods A retrospective analysis of 97 children with respiratory infections who were treated at the Jiangjin Central Hospital of Chongqing from December 2017 to December 2018 was carried out. All children were divided into three groups： mild group （n = 72）， moderate group （n = 15） and severe group （n = 10） infections according to the severity of disease. All patients underwent respiratory pathogen screening， and the differences in general conditions， symptoms， infections， complications， visits， laboratory-related indicators， and viral load were compared among the three groups. The risk factors that affect the condition of the child were analyzed. Results The multiple infection rate， procalcitonin （PCT） and total viral load in the severe group were significantly higher than those in the other two groups. The multiple infection rate， PCT and total viral load in the moderate group were significantly higher than those in the mild group （P < 0.05）. PCT （OR = 4.951， 95%CI： 1.005-9.473， P = 0.003） and multiple infections （OR = 1.731， 95%CI： 8.782-122.363， P < 0.001） were independent risk factors affecting the severity of disease. Conclusion PCT and multiple infections are independent risk factors for the severity of disease in children with respiratory tract infection， and should be taken into account in future clinical work.

[Key words] Respiratory infection; Child; Multiple infection; Viral load

急性呼吸道感染是兒科疾病中最為常見的一類疾病，而病毒是誘發(fā)上呼吸道感染的重要原因之一[1]。過(guò)去由于檢測(cè)條件及認(rèn)識(shí)不足，病毒感染在呼吸道感染患兒中情況不被重視，而導(dǎo)致的嚴(yán)重后果也屢見不鮮[2-3]。伴隨著微生物學(xué)的發(fā)展，熒光定量PCR檢測(cè)患兒病毒感染情況成為可靠程度較高的一類方法[4]，故本研究回顧分析重慶市江津區(qū)中心醫(yī)院（以下簡(jiǎn)稱“我院”）開展治療的呼吸道感染患兒的情況，通過(guò)多元回歸分析多重感染及病毒載量與患兒病情嚴(yán)重程度的關(guān)系，旨在為兒童急性呼吸道感染的診治提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析2017年12月～2018年12月于我院就診的患兒病歷97份?；純耗挲g1～11歲，平均（6.34±3.14）歲;男孩54例，女孩43例。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合《諸福棠實(shí)用兒科學(xué)》[5]中急性呼吸道感染的診斷標(biāo)準(zhǔn);②年齡1～12歲;③行感染病原體種類及載量分析;④病歷資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并先天性疾病;②半月內(nèi)抗感染治療史;③嚴(yán)重的心肺功能不全;④既往哮喘、鼻炎等過(guò)敏性呼吸系統(tǒng)疾病史。

1.2 病原體篩檢方法

根據(jù)以往文獻(xiàn)對(duì)于兒童呼吸道感染常見的病原體[4]，結(jié)合本研究實(shí)際情況，主要檢測(cè)RNA病毒包括呼吸道合胞病毒（Respiratory syncytial virus，RSV）、副流感病毒（Parainfluenza virus，HPIV）1-3型、流感病毒A和B（Flu virus，F(xiàn)lu）、人鼻病毒（Human rhinovirus，HRV）。首先使用拭子取患兒咽部分泌物樣本后置于無(wú)菌管中-80℃保存，而后使用賽默飛世爾公司提供的MagMAX Pathogen RNA Kit試劑盒（批號(hào)：1412022）提取相關(guān)病毒的RNA，使用寶日醫(yī)生物技術(shù)（北京）有限公司提供的PrimeScript Ⅱ 1st Strand cDNA Synthesis Kit轉(zhuǎn)錄試劑盒（批號(hào)：1326210）進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄并合成cDNA，而后進(jìn)行熒光定量PCR，主要使用探針及Ex Taq酶（寶日醫(yī)生物技術(shù)有限公司提供，批號(hào)：1457001）引物及探針合成序列參照NCIB GeneBank中對(duì)于目標(biāo)病毒的描述，見表1。賽默飛世爾公司提供的One step Rt-PCR Kit試劑（批號(hào)：4415328）行熒光定量一步法檢測(cè)病毒，每個(gè)循環(huán)的第二步結(jié)束時(shí)采集熒光，由儀器自帶軟件計(jì)算出Ct值并給出定量結(jié)果，將病毒載量≥1×103 copies/mL視為陽(yáng)性。

1.3 分類標(biāo)準(zhǔn)及觀察指標(biāo)

1.3.1 疾病嚴(yán)重程度分類? 疾病嚴(yán)重程度評(píng)分（IOS）將所有患兒分為輕度（0～2分）、中度（3～5分）、重度（6～7分）感染[6]。

1.3.2 癥狀? 根據(jù)《諸福棠實(shí)用兒科學(xué)》[5]中對(duì)于小兒急性呼吸道感染的描述，將癥狀分為咳嗽、咳痰、發(fā)熱、氣短或呼吸異常及胸片顯示異常。

1.3.3 感染情況及治療情況? 感染情況主要分為單一感染及多重感染，多重感染的定義為檢測(cè)到兩種或兩種以上病原體陽(yáng)性[7];治療情況主要包括ICU人數(shù)、吸氧人數(shù)及呼吸支持人數(shù)。

1.3.4 并發(fā)癥及就診情況? 并發(fā)癥包括肺炎及呼吸衰竭，就診情況分為門診和住院患者。

1.3.5 實(shí)驗(yàn)室相關(guān)指標(biāo)? 炎性指標(biāo)：白細(xì)胞（WBC）、C反應(yīng)蛋白（CRP）、降鈣素原（PCT）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細(xì)胞介素-2（IL-2）及IL-6;免疫指標(biāo)：CD3+、CD4+、CD8+、IgM、IgG、IgA。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，兩組間比較采用t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料用率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn);采用logistic多元回歸分析影響患兒病情的危險(xiǎn)因素。以P < 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 患兒分組情況及影響疾病嚴(yán)重程度的一般資料的單因素分析

97例患兒中，輕度組72例，中度組15例，重度組10例，而后對(duì)三組患兒的一般情況、感染情況、就診情況、并發(fā)癥、癥狀進(jìn)行單因素分析，結(jié)果顯示，重度組多重感染率量顯著高于其他兩組，而中度組多重感染率顯著高于輕度組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）。見表2。

2.2 影響疾病嚴(yán)重程度的實(shí)驗(yàn)室資料的單因素分析

重度組PCT顯著高于其他兩組，而中度組PCT顯著高于輕度組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）。見表3。

2.3 影響疾病嚴(yán)重程度病毒載量的單因素分析

重度組病毒總載量顯著高于其他兩組，而中度組總載量顯著高于輕度組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）。見表4。

2.4 影響疾病嚴(yán)重程度的logistic回歸分析

根據(jù)單因素分析結(jié)果，以疾病嚴(yán)重程度為因變量（1=輕度、2=中度、3=重度），以感染情況（0=單一感染、1=多重感染），PCT（實(shí)測(cè)值）和總病毒載量（實(shí)測(cè)值）為自變量進(jìn)行有序logistic回歸分析，結(jié)果顯示PCT（OR = 4.951，95%CI：1.005～9.473，P = 0.003）及多重感染（OR = 1.731，95%CI：8.782～122.363，P < 0.001）是影響疾病嚴(yán)重程度的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。見表5。

3 討論

目前臨床調(diào)查研究結(jié)果顯示，呼吸道感染是所有疾病中最為常見的一種，而其治療過(guò)程中最常用的經(jīng)驗(yàn)性抗生素治療法也是導(dǎo)致抗生素濫用的重要原因之一[8-9]。有研究顯示，病毒感染是導(dǎo)致呼吸道感染的重要原因，其中以RSV、PIV 1-3型、FluA、FluB及HRV最為常見[5]。但是國(guó)內(nèi)對(duì)于病毒感染情況及載量與患兒呼吸道感染嚴(yán)重程度的研究較少，故本次開展針對(duì)性研究，進(jìn)一步完善對(duì)患兒病情評(píng)價(jià)的指標(biāo)。

PCT在感染性疾病的實(shí)驗(yàn)室檢查中具有較高的靈敏度及特異度，且由于血清中其含量相對(duì)較低，故發(fā)生感染性疾病后其變化也相對(duì)明顯，國(guó)內(nèi)外多項(xiàng)研究結(jié)果均顯示PCT與感染疾病的嚴(yán)重程度顯著相關(guān)[10-11]，而本研究結(jié)果也顯示，PCT是影響患兒疾病嚴(yán)重程度的獨(dú)立因素，這與之相似。在Wishaupt等[12]的研究中，患兒發(fā)生多重感染率為22.5%，而本研究為19.58%（19/97）與之相近。而本研究結(jié)果還顯示，多重感染是影響患兒疾病嚴(yán)重程度的危險(xiǎn)因素，主要原因是由于多種病原體相互作用，對(duì)于患兒呼吸道刺激更明顯，從而極易導(dǎo)致其發(fā)生更嚴(yán)重的炎性反應(yīng)。

根據(jù)以往在大規(guī)模樣本調(diào)查中，F(xiàn)lu、RSV及PIV分別是引起中國(guó)小兒呼吸道感染的重要因素，而且與季節(jié)顯著相關(guān)，本研究中上述3種病毒感染率也相對(duì)較高，再次證實(shí)了上述3種病毒是導(dǎo)致小兒呼吸道感染的重要因素[13-15]。但朱益飛等[16]的研究指出，在118株小兒呼吸道分泌物中，F(xiàn)lu檢出陽(yáng)性率達(dá)到36.44%，而RSV檢出陽(yáng)性率為26.27%，對(duì)比發(fā)現(xiàn)本研究Flu檢出率顯著較低，這可能與季節(jié)、檢測(cè)方法及地區(qū)等因素有關(guān)。

目前由于病原體PCR檢測(cè)成本高，過(guò)程復(fù)雜等限制，國(guó)內(nèi)對(duì)于病毒載量與小兒呼吸道病情的研究大樣本量分析較少，但根據(jù)國(guó)外的研究，細(xì)菌-病毒混合感染是引起小兒呼吸道感染且影響病情的重要因素[17]。但本研究中病毒載量卻不是影響呼吸道感染嚴(yán)重程度的獨(dú)立因素，主要有以下幾點(diǎn)原因：①某些病毒作為病原體感染后存在潛伏期，而檢測(cè)到的病毒可能也并非導(dǎo)致疾病的主要原因;②回顧性研究可能存在的回憶及抽樣偏倚，加之之前的檢查手段并不全面，故病毒的種類并不完全;③雖然病毒是影響疾病的重要因素，也與人群、季節(jié)及合并其他病原體感染有關(guān)，故其載量并非導(dǎo)致疾病的重要影響因素;④在呼吸道感染患兒中，其病毒種類之間影響也相對(duì)明顯，診斷RSV陽(yáng)性患兒HRV陽(yáng)性率顯著下降[18-19]，所以其病毒載量也受種類制約明顯。

本次為單中心回顧性小樣本量研究，結(jié)果可能存在一定偏倚，同時(shí)，對(duì)于病毒種類的檢測(cè)并不完全，現(xiàn)階段研究發(fā)現(xiàn)人博卡病毒、肺支原體及衣原體等病原體對(duì)患兒呼吸道感染情況影響也相對(duì)顯著[20]。這些都是筆者今后完善研究的重點(diǎn)。

綜上所述，PCT及多重感染是影響呼吸道感染患兒疾病嚴(yán)重程度的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，在今后的臨床工作中應(yīng)加以重視。

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（收稿日期：2019-11-13? 本文編輯：任? ?念）