中青年人群泌乳素檢測鑒別巨泌乳素的意義探討

孫國威 趙楠楠 張明芳 王清林 劉常軍

作者單位：150000 黑龍江哈爾濱，黑龍江迪安醫(yī)學檢驗所有限公司（孫國威、趙楠楠）

150000 黑龍江哈爾濱，羅氏診斷產(chǎn)品（上海）有限公司（張明芳、王清林、劉常軍）

對于月經(jīng)紊亂、不孕不育、內(nèi)分泌紊亂以及一些無癥狀就診者的檢查中，性激素檢測結(jié)果是重要的診斷指標與依據(jù)。臨床發(fā)現(xiàn)泌乳素（prolactin，PRL）升高者并不一定有相應的臨床癥狀。但是高泌乳素血癥（hyperprolactinemia，HPRL）者往往會接受更多的影像學及實驗室檢查。有研究顯示，HPRL 女性中巨泌乳素（macroprolactin，MPRL）者可達到55%［1］。自動化檢測不能有效區(qū)分血液中的MPRL，而且不同分析儀器對含有MPRL 的樣本檢測結(jié)果會有不一致的現(xiàn)象［2］，導致了不同儀器的結(jié)果不同，而且目前自動化儀器并不能提高MPRL的檢出率［3-4］，因此仍需要其他實驗來確定高泌乳素水平是否由MPRL 導致［5］。本研究基于全自動免疫分析儀檢測PRL 結(jié)果較高的樣本使用聚乙二醇（polyethylene glycol，PEG）進行處理后，分析不同年齡患者血液中PRL 的濃度與年齡的關(guān)系，旨在討論是否對于實驗室檢測的高泌乳素樣本都應進行處理，計算回收率。

1 材料與方法

1.1 樣本來源 收集2019 年7 月—12 月各合作醫(yī)院送至黑龍江迪安醫(yī)學檢驗所有限公司檢測的的PRL 有效樣本10 909 例，年齡2～90 歲，平均（34.99±10.38）歲；男性318 例，年齡3～90 歲，平均（36.15±17.69）歲；女性10 591 例，年齡2～79 歲，平均（34.95±10.08）歲。使用自動免疫分析儀檢測PRL，對結(jié)果＞47.0 μg/L 的樣本進行PEG 處理，分析高泌乳素樣本中出現(xiàn)MPRL 的情況。

1.2 儀器與試劑 儀器為羅氏cobas e 601 電化學發(fā)光分析儀，試劑為羅氏公司的Elecsys?PRL 檢測試劑盒以及定標品PRL CalSet，系統(tǒng)試劑及耗材均為原裝配套產(chǎn)品。同時采用伯樂生理水平及病理水平的免疫質(zhì)量控制（質(zhì)控）品進行室內(nèi)精密度監(jiān)測。PEG 6000 為廣東光華科技股份有限公司生產(chǎn)。

1.3 檢測方法

1.3.1 對送檢樣本按不同年齡段分組，所有樣本均經(jīng)過羅氏cobas e 601 電化學發(fā)光分析儀檢測，記錄PRL 結(jié)果。

1.3.2 在18～25 ℃下，將25 g PEG 6000 溶解在約60 mL 蒸餾水或去離子水中（攪拌混勻15 min），然后加水至100 mL 制成25%的PEG 水溶液。溶液儲存于20～25 ℃，可穩(wěn)定7 d。

1.3.3 抽選出PRL 結(jié)果＞47.0 μg/L 的樣本198 例，吸取血清200 μL 和PEG 溶液按1∶1 在混勻器上充分混合，混合時間為10 s。轉(zhuǎn)速3 500 r/min（離心半徑20 cm），離心10 min，上清液按常規(guī)標本檢測方法上機檢測，計算經(jīng)PEG 沉淀處理后PRL 的回收率?；厥章视嬎愎綖椋夯厥章剩絇EG 沉淀后的PRL 結(jié)果×2/原始PRL 結(jié)果×100%。

1.4 倫理學 本研究符合醫(yī)學倫理學標準，經(jīng)本單位倫理批準（審批號：20200422），所有對受檢者的檢測均獲得過受檢者或家屬的知情同意。

1.5 統(tǒng)計學方法 采用SPSS 17.0 軟件進行統(tǒng)計學處理，符合正態(tài)分布的計量資料以均數(shù)±標準差（）表示，采用t 檢驗，計數(shù)資料以例（百分比）表示，采用χ2檢驗。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 不同年齡組受檢者PRL 檢測結(jié)果比較 不同年齡組的PRL異常升高者比例比較差異有統(tǒng)計學意義（χ2＝157.754，P＝0.000）。受檢者中16～22 歲組和23～35 歲組PRL 結(jié)果高于參考范圍上限的比例最高，可達到25.27%和23.37%，其次為＞55 歲組，PRL 異常升高者比例為21.56%。見表1。

表1 不同年齡段受檢者PRL 檢測異常情況比較

2.2 不同性別受檢者PRL 檢測結(jié)果比較 男性受檢者PRL 高于參考范圍上限的比例明顯高于女性，差異有統(tǒng)計學意義（χ2＝54.359，P＝0.000）。見表2。

表2 不同性別受檢者PRL 檢測異常情況比較

2.3 高泌乳素樣本PEG處理后回收率分析 198例PRL 結(jié)果＞47.0 μg/L 的樣本在經(jīng)過PEG 處理后再次檢測，有11 例（占5.56%）PRL 回收率＜40%，其中結(jié)果為47.0～70.5 μg/L 的PRL 樣本占1.52%，＞47.0 μg/L的PRL 樣本占4.04%；回收率為40%～60%的樣本48 例，占24.24%；回收率＞60%的樣本139 例，占70.2%（χ2＝3.609，P＝0.165）。見表3。

表3 高泌乳素組樣本PEG 處理后PRL 回收率分析

3 討論

PRL 是體內(nèi)的一類蛋白類激素，主要由腺垂體的泌乳細胞分泌，另外也可在體內(nèi)多個器官（如肝臟、乳腺、腎上腺）生成。泌乳素的分泌呈脈沖式，并且具有晝夜節(jié)律性［6-7］。PRL 在體內(nèi)循環(huán)中主要以單體形式存在并具有生物學活性，從而發(fā)揮生理作用，單體PRL 的相對分子質(zhì)量約為23 000，當聚合成大分子時PRL 幾乎無生物學活性［8-9］，這部分PRL 包括相對分子質(zhì)量約為50 000 的二聚體（big-PRL），當PRL 抗體出現(xiàn)時可將PRL 聚合形成相對分子質(zhì)量為100 000～150 000 的四聚體（big-big PRL），后者即為MPRL 分子。研究顯示，不僅單體泌乳素在不同時間段有脈沖式波動性分泌，MPRL 也同樣隨時間波動［10］。因此血液采集時間在影響PRL 檢測結(jié)果的同時，也可能會導致MPRL含量的變化，對于此類患者需要注意鑒別PRL 升高的影響因素。

在普通人群中，MPRL 者約占3%～4%，而在HPRL 患者中巨泌乳素血癥患者比例可高達35%［9］，血液中的MPRL 不具備生物學活性，因而無法啟動負反饋機制，導致血液中PRL 水平升高。研究顯示血清經(jīng)PEG 沉淀后，大分子的免疫球蛋白被沉淀，由于MPRL 是自身抗體與PRL 的復合物，因此也會被沉淀，最終導致PRL 回收率降低，回收率＜40%的樣本中的PRL 主要為MPRL，回收率為40%～60%的樣本中同時存在單體PRL 和MPRL或PRL 低聚體，回收率＞60%則說明標本中主要含有PRL 單體［8］。

在PRL 的分泌過程中，許多生理和病理情況會導致PRL 升高，生理性情況如精神壓力、妊娠、劇烈運動、乳腺刺激等。病理性情況如惡性腫瘤、胸壁損傷、肝腎疾病、原發(fā)性甲狀腺功能減退癥、壓迫垂體或下丘腦的顱內(nèi)腫瘤、空蝶鞍綜合征、自身免疫性甲狀腺疾病和系統(tǒng)性紅斑狼瘡等，以及特發(fā)性巨泌乳素血癥，其可占到所有疾病的1/3。還有一些藥物可使人體產(chǎn)生過多的PRL［1］，研究顯示抗精神疾病類藥物使用過程中患者可出現(xiàn)HPRL［11］。隨著生活水平的提高，人們更加追求健康的身體和心理狀態(tài)，但由于緊張的生活節(jié)奏，許多人處于亞健康狀態(tài)，如抑郁癥和焦慮癥患者［12］以及臨床上無明顯癥狀的人群，會由于內(nèi)分泌紊亂而入院就診，或者因有生育需求而咨詢醫(yī)生，此類人群入院檢查時常需檢測激素水平，當PRL 水平異常增高時，必然會引起醫(yī)生和患者的關(guān)注。因此當檢測出PRL 升高時能夠鑒別是否由MPRL 引起，及時為臨床診斷和治療提供準確可靠的依據(jù)，不僅可以減輕患者經(jīng)濟負擔，也能避免不必要的其他檢查。

PRL 異常升高可引起月經(jīng)不調(diào)，表現(xiàn)為月經(jīng)稀少甚至閉經(jīng)，嚴重者可引起育齡期女性不孕或流產(chǎn)。尤其對于青春期及育齡女性，性激素檢測尤為重要，作為性激素之一的PRL 對女性內(nèi)分泌相關(guān)疾病的診斷和治療起到至關(guān)重要的作用［13］。臨床工作中發(fā)現(xiàn)往往有受檢者出現(xiàn)HPRL，但進行其他實驗室檢測或影像學檢查時未見異常，此時才會對PRL 結(jié)果產(chǎn)生質(zhì)疑，對于這種情況復測PRL 后結(jié)果又與初查時沒有明顯差異，于是再對樣本進行PEG 處理，通過計算發(fā)現(xiàn)回收率＜40%，說明就診者血液PRL中含有MPRL 的比例較高。在此過程中，患者不僅承受著精神壓力和經(jīng)濟壓力，同時身體也承受著各項檢查所帶來的痛苦。Shimatsu 等［9］建議所有高泌乳素者都應進行MPRL 檢測，以避免錯誤的診斷和治療。Malik 等［14］也認為對于HPRL 患者在治療前應對PRL 進行進一步的評估。

本研究結(jié)果顯示，兒童（2～10 歲年齡段）出現(xiàn)PRL 異常升高的比例較低，這與Kars 等［15］的研究一致。送檢者中以女性居多，且年齡分布主要為中青年，PRL 高于參考范圍上限比例較高的人群分布在16～22 歲的青春期和23～35 歲的育齡人群，分析可能是因為此類人群處于青春期或因?qū)ι幸蠖雨P(guān)注生殖健康，因此在就醫(yī)時需進行PRL檢測以便診斷和鑒別疾病，判斷健康狀態(tài)。另外，對PRL 超出參考范圍上限比例較高的＞55 歲年齡組受檢者進行分析，該組218 例中男性51 例，女性167 例，與其他年齡組比較，該組的男性比例較高，且男性組PRL 異常升高的比例高于女性，因此導致了＞55 歲年齡組受檢者中PRL 高于參考范圍上限的比例較高。分析男性PRL 高于參考范圍上限比例較高的原因可能是因為男性在診治過程中對此項目的檢查更具有針對性，因此在有相關(guān)疾病的情況下陽性率較高。對198 例PRL 結(jié)果高于47.0 μg/L的樣本進行PEG 處理后，統(tǒng)計結(jié)果顯示，47.0～70.5 μg/L 組和＞70.5 μg/L 組的回收率比較差異無統(tǒng)計學意義，可能是由于樣本量小，其中回收率＜40%者全部為女性。有研究顯示，HPRL 患者中MPRL 者能夠正常懷孕生產(chǎn)［16］，不會影響生活質(zhì)量。在實際工作中，PRL 均為自動化檢測，出現(xiàn)HPRL 的結(jié)果往往不能確定是否由于MPRL 所致，HPRL 會讓患者承受更大的精神壓力，同時也會進行更多實驗室檢查和影像學檢查，甚至錯誤地采取用藥或手術(shù)等治療方式［15，17］。

綜上所述，并非PRL 結(jié)果越高MPRL 的可能性越大，指南中推薦對于無癥狀的HPRL 患者評估MPRL［18］。因此，對于PRL 異常升高的樣本均應該進行鑒別診斷，分析MPRL 存在的可能性。PEG 法因成本低廉、操作簡便，很多實驗室都選擇該方式對PRL 異常升高樣本進一步處理，計算回收率。尤其在青春期女性和育齡期因月經(jīng)失調(diào)、內(nèi)分泌紊亂就診患者中更應引起注意，因為該人群的激素水平影響因素較多，情況復雜，容易判斷錯誤，因此計算PRL 回收率為無癥狀的PRL 異常升高者鑒別MPRL提供了重要依據(jù)，可以避免誤診甚至錯誤治療。