復方元芪利喘顆粒的制備工藝研究

王海龍，陳大忠*

（1.中國人民解放軍聯(lián)勤保障部隊第962醫(yī)院，黑龍江 哈爾濱 150080；2.黑龍江中醫(yī)藥大學，黑龍江 哈爾濱 150040）

復方元芪利喘顆粒為名老中醫(yī)臨床經(jīng)驗方，由淫羊藿，黃芪，五味子，知母，麻黃五味中藥組成。具有溫陽益氣，化痰平喘的功效。本研究根據(jù)相關文獻報道[1-2]，確定水提取的最佳提取工藝。在此基礎上進行顆粒劑的制備工藝考察[3]，旨在研究出質量穩(wěn)定可控、服用方便中藥復方顆粒劑。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

98-1-B型電子恒溫電熱套(天津市泰斯特儀器有限公司)；AL204型電子天平（梅特勒-托利多儀器）；DGG9240B電熱恒溫鼓風干燥箱（上海森信實驗儀器

有限公司）；水分測定儀（上海儀電分析儀器有限公司）；SB-5200DT超聲波清

洗機（寧波新藝超聲波設備有限公司）；儀表恒溫水浴鍋（上海樹立儀器儀表有限公司）；waters 2695型高效液相分析儀（美國waters公司）。

1.2 試藥

處方中淫羊藿，麻黃，五味子等各味藥材均購自哈藥集團世一堂中藥飲片有限責任公司。淫羊藿苷對照品（購自中國藥品生物制品檢定院，批號：110737-200415）。實驗中所用的其他試劑均為分析純。甲醇、乙腈為色譜純，其他試劑均為分析純。

2 實驗方法與結果

2.1 復方元芪利喘顆粒水提工藝條件的優(yōu)選

稱取處方中各味藥材，按照正交試驗設計分別考察溶劑用量、提取時間和提取次數(shù)，以總固形物的出膏率和淫羊藿苷總提取含量為指標優(yōu)化最佳提取工藝。

2.2 淫羊藿苷含量測定

2.2.1 對照品溶液的制備：精密取淫羊藿苷對照品1.13 mg，加甲醇稀釋溶解并定容于10 ml容量瓶中，搖勻，備用（0.113 mg/ml）。

2.2.2 供試品溶液的制備取本品2 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入稀乙醇20 ml，稱重，超聲處理1 h，再稱重，補足重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液即得。

2.2.3 色譜條件與系統(tǒng)適應性試驗：色譜柱用十八烷基鍵合硅膠為填充劑[4-5]；以乙腈-水（30：70）為流動相，檢測波長為270 nm；流速1.0 ml/min；柱溫30℃，理論板數(shù)按淫羊藿苷峰計算不低于1500。

2.2.4 標準曲線的繪制：分別精密吸取淫羊藿苷對照品溶液2、4、6、8、10、12 μl，按上述色譜條件測定，記錄峰面積，以淫羊藿苷進樣量為橫坐標，峰面積積分值為縱坐標，繪制標準曲線，得線性回歸方程為Y=203126X+1024610.6，r=0.9999，結果表明，淫羊藿苷進樣量在0.904-2.034 μg呈良好線性關系。

2.2.5 精密度試驗：精密吸取2.1.3項下供試品溶液10 μl，重復進樣6次，測定，結果峰面積的RSD為1.8%，表明儀器精密度良好。

2.2.6 穩(wěn)定性試驗：同一批供試品溶液，分別于0，2，4，6，8，10小時按上述色譜條件進樣測定6次。結果淫羊藿苷色譜峰面積RSD為2.3%。表明供試品溶液在10小時內穩(wěn)定性較好。

2.2.7 重復性試驗：取同一樣品6份，分別制備供試品溶液，進樣測定，結果提取物中淫羊藿苷的含量為2.24mg/g，RSD為2.8%。結果表明該方法重復性良好。

2.2.8 加樣回收試驗：精密稱取本品共6份，分別精密加入淫羊藿苷對照品，按上述方法制成供試品溶液，進樣測定峰面積積分值，計算回收率，結果平均回收率98.86%，RSD為2.4%。

2.3 正交實驗結果

采用三因素三水平正交設計試驗優(yōu)選最佳提取工藝條件。根據(jù)單因素試驗結果以提取時間（A）、提取次數(shù)（B）、水溶劑用量（C）為考察因素，利用淫羊藿苷提取率和出膏率權重綜合評分為指標，選用L9(34)正交表進行試驗，結果見表1。

表1 提取工藝優(yōu)選正交試驗表

表2 綜合評分法方差分析

方差分析發(fā)現(xiàn)，因素A、B、C對提取效果的影響具有顯著性差異，其中因素

A2＞A3＞A1；B2＞B1＞B3，但B2和B1相近，沒有顯著性差異，而C3＞C2＞C1但C3與C2相近，二者也沒有顯著性差異，結合實際生產(chǎn)中的成本和周期，確定為水提取的最佳工藝為A2B2C3，即加水10倍量，煎煮2次，每次2小時。

2.4 提取工藝的驗證試驗

按處方組成，稱取以上各味藥材平行3份，按優(yōu)選出的最佳提取工藝條件加入10倍量水，提取2次，每次2小時，合并水煎煮液，濃縮至干，測定淫羊藿苷含量和總固形物重量[6]。計算淫羊藿苷提取率和總固形物出膏率。結果表明，3份提取物中淫羊藿苷提取率為76.82%，RSD為1.71%；總固形物出膏率為28.462%，RSD為1.38%，驗證結果確定該工藝穩(wěn)定、合理、可行。

3 討 論

采用HPLC法測定提取物中淫羊藿苷的含量，色譜條件成熟，以淫羊藿苷作為代表性成分能夠反映出水提取工藝的提取效率；在此基礎上，引入提取物的出膏率并結合淫羊藿的含量作為綜合評價指標，對二者賦予不同的權重系數(shù)[7-8]，計算綜合評分分值，以綜合評分數(shù)值對正交設計結果進行統(tǒng)計學處理后，優(yōu)化篩選出復方元芪利喘顆粒水提工藝的最佳條件，通過驗證結果客觀、重現(xiàn)性好。