基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和分子對(duì)接技術(shù)探討自擬“清瘟湯”治療新型冠狀病毒肺炎的機(jī)制*

馬詩瑜，方 潔，卞曉嵐△，楊 銘，鄭 嵐，鄭 林

（1.上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬瑞金醫(yī)院，上海200023；2.上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬龍華醫(yī)院，上海200032；3.上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬光華醫(yī)院，上海200003）

臨床實(shí)踐顯示，中醫(yī)藥及中西醫(yī)結(jié)合治療新型冠狀病毒肺炎（簡(jiǎn)稱新冠肺炎，COVID-2019）成效明顯，在疫情防控中發(fā)揮了重要作用。武漢市首個(gè)以中醫(yī)治療為主的方艙醫(yī)院患者觀察數(shù)據(jù)顯示，與單純西醫(yī)治療相比，中西醫(yī)結(jié)合治療患者的臨床癥狀消失時(shí)間（5.15 d）少2 d，體溫恢復(fù)時(shí)間（2.64 d）少1.7 d，平均住院時(shí)間少2.2 d，CT影像好轉(zhuǎn)率高22%，臨床治愈率高33%，普通轉(zhuǎn)重癥比率低27.4%[1]。瑞金醫(yī)院中醫(yī)科自擬“清瘟湯”（QWT），主要由貫眾、大青葉、板藍(lán)根、金銀花、蒲公英、金蕎麥、藿香、黃芪、防風(fēng)、白術(shù)、甘草11味中藥組方，發(fā)揮益氣固表、祛濕排毒功效，疫情前已在瑞金醫(yī)院感染科重癥監(jiān)護(hù)室（ICU）使用，對(duì)病毒性肺炎患者療效良好。新冠肺炎中醫(yī)辨證為“濕毒疫”，主要病位在肺。根據(jù)《溫病條辨》《傷寒論》等醫(yī)學(xué)著作，結(jié)合實(shí)際辨證論治，目前QWT已在瑞金醫(yī)院援助的武漢同濟(jì)協(xié)和醫(yī)院（光谷院區(qū)）、孝感市中心醫(yī)院、隨州市中心醫(yī)院、武漢大學(xué)附屬中南醫(yī)院等使用，取得了較好的臨床效果。

網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的研究策略主要是從系統(tǒng)性和整體性的特點(diǎn)來研究中藥復(fù)方的多成分、多靶點(diǎn)、多途徑的協(xié)同作用，從而闡明藥物作用機(jī)制[2-9]。分子對(duì)接技術(shù)是一種較成熟的發(fā)現(xiàn)新藥的技術(shù)手段，采用計(jì)算機(jī)輔助進(jìn)行藥物設(shè)計(jì)，通過化學(xué)計(jì)量學(xué)模擬分子的作用力和結(jié)構(gòu)，尋找小分子（或配體）與已知結(jié)構(gòu)的大分子（或受體）活性位點(diǎn)的低能結(jié)合模式[9]。本研究中基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)技術(shù)和分子對(duì)接技術(shù)探討QWT對(duì)新型冠狀病毒（SARS-CoV-2）的作用機(jī)制，為進(jìn)一步合理控制疫情及使用中藥提供理論基礎(chǔ)?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 研究方法

1.1 疾病及相關(guān)基因信息數(shù)據(jù)庫建立

1.2QWT化學(xué)成分及作用靶點(diǎn)數(shù)據(jù)庫建立[4-8]

化學(xué)成分篩選：通過搜索5個(gè)開源的數(shù)據(jù)庫（TCMID，CHEMBL，TCMSP，HIT，STITCH），得到QWT的相關(guān)活性成分及作用靶標(biāo)數(shù)據(jù)，并使用NCBI數(shù)據(jù)庫的Gene基因搜索功能對(duì)靶點(diǎn)信息進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化。使用了類藥性描述符（QED）對(duì)化合物的吸收、分布、代謝、排泄（ADME）性質(zhì)進(jìn)行篩選[4-8]，QED整合了8個(gè)重要的分子描述符，設(shè)定的化合物類藥性指數(shù)閾值為0.2，大于0.2的類藥性成分納入網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析。

表1SARS-CoV-2的相關(guān)基因

作用靶標(biāo)篩選：按照公式（1）計(jì)算復(fù)方作用靶標(biāo)GS，其中分子與分母分別表示靶標(biāo)與k個(gè)以上活性成分具有相互作用概率的負(fù)對(duì)數(shù)及按升序排列的秩次，P值越小相對(duì)應(yīng)的GS值越大，而P≥0.05時(shí)相應(yīng)的GS值為0。按照二項(xiàng)分布理論以P（X≥k）表示靶點(diǎn)與k個(gè)以上活性成分具有相互作用的概率值[公式（2）]進(jìn)行篩選，公式（2）中n是活性化合物總數(shù)，g是平均每個(gè)靶標(biāo)相互作用的活性化合物數(shù)，k為當(dāng)前靶標(biāo)相互作用的活性化合物數(shù)。當(dāng)靶標(biāo)P≤0.05時(shí)，說明該靶標(biāo)與k個(gè)活性成分相互作用是小概率事件，則該靶標(biāo)可以認(rèn)為是復(fù)方的主要作用靶標(biāo)。最終得出GS得分不為0的基因，即主要作用靶標(biāo)。

活性成分篩選：在GS值基礎(chǔ)上，進(jìn)一步采用復(fù)方作用靶標(biāo)得分的GS值[公式（3）]進(jìn)行篩選，式中GS是活性化合物i的靶標(biāo)基因得分，Ni是活性化合物i的靶標(biāo)基因數(shù)，I是指示變量，活性化合物i的得分等于其相應(yīng)靶標(biāo)得分的均值。通過GS值，可最終發(fā)現(xiàn)與復(fù)方中有效成分作用最相關(guān)的靶點(diǎn)。

上述工作由中藥網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析系統(tǒng)完成，TCMNPAS（TCM networkpharmacologyanalysissystem）國家計(jì)算機(jī)軟著登記號(hào)：2019SR1127090。

1.3 生物靶標(biāo)網(wǎng)絡(luò)模型構(gòu)建和分析

采用String V11.0軟件構(gòu)建QWT靶標(biāo)的蛋白質(zhì)相互作用（protein-protein interactoin）網(wǎng)絡(luò)，物種設(shè)置為“Homo Sapiens”，最低閾值設(shè)置中等置信度“Medium confidence”為0.4。使用Cytoscape 3.7.0軟件計(jì)算相應(yīng)的拓?fù)鋮?shù)值進(jìn)行篩選，使用MCODE功能對(duì)PPI網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行模塊分析，設(shè)置K-core值需大于4。

1.4 生物功能分析

對(duì)靶標(biāo)基因生物功能分析主要有3個(gè)層次，即基因本體（GO分析）、信號(hào)通路（pathway）及醫(yī)學(xué)主題詞（Mesh），采用超幾何分布模型P值，評(píng)估靶標(biāo)基因是否與特定的基因本體、信號(hào)通路及主題詞顯著關(guān)聯(lián)，同時(shí)還有經(jīng)過False Discovery Rate（FDR）法調(diào)整的P值，反映靶點(diǎn)群與基因本體、信號(hào)通路的關(guān)聯(lián)強(qiáng)度，以調(diào)整的P＜0.01為關(guān)聯(lián)最顯著。

基于網(wǎng)絡(luò)的QWT作用于疾病靶標(biāo)相關(guān)性分析，使用最短路徑長(zhǎng)度評(píng)估QWT作用靶標(biāo)與疾病的相關(guān)性，以P值判斷；顯示復(fù)方靶標(biāo)與疾病靶標(biāo)的關(guān)聯(lián)程度，按P值顯著性排序關(guān)聯(lián)程度最高的GO術(shù)語、KEGG通路。

1.5 分子對(duì)接試驗(yàn)方法[9]

從QWT的有效成分中，選取等級(jí)值（degree，等級(jí)值越高，說明其在網(wǎng)絡(luò)拓?fù)潢P(guān)系中作用越重要）最高的活性成分（27種），與SARS-CoV-2的3C類似蛋白酶（3CLpro，PDB ID：6Lu7）和天然人類血管緊張素轉(zhuǎn)換酶相關(guān)的羧肽酶（ACE2，PDB ID：1R42.）進(jìn)行分子對(duì)接。從RCSB數(shù)據(jù)庫（https：//www.rcsb.org/）下載相關(guān)蛋白的結(jié)構(gòu)，從ChemicalBook數(shù)據(jù)庫（https：//www.chemicalbook.com/）下載化合物結(jié)構(gòu)，使用Pymol軟件去除溶劑分子與配體，使用AutoDock軟件進(jìn)行加氫、加電子、加ROOT等操作，完成后進(jìn)行分子對(duì)接，其中蛋白結(jié)構(gòu)的設(shè)置為剛性大分子。使用算法為L(zhǎng)ocal Search Parameters，得到結(jié)果（蛋白結(jié)構(gòu)）中每個(gè)蛋白結(jié)合能最低的兩組，使用Pymol軟件對(duì)得到的最佳結(jié)果（蛋白結(jié)構(gòu)）進(jìn)行繪圖。

確實(shí)，馱子對(duì)我們村里人是大方的。一般村里人去他那兒彈棉花，算錢的時(shí)候，只要有零頭他全會(huì)抹掉，哪怕是九塊頭的。比如，五十九塊，他就會(huì)說，五十塊好了。再比如，過年過節(jié)的，馱子也會(huì)給村里人送一些小枕頭啊，小坐墊啊。盡管這些東西不是太值錢，但我們嶺北人是懂得感恩的。我們嶺北人就用語言東傳傳西傳傳，把個(gè)馱子說得跟圣人下凡似的好。

2 結(jié)果

2.1QWT化學(xué)成分及作用靶點(diǎn)數(shù)據(jù)庫建立

共獲得QWT中活性成分172個(gè)及主要靶標(biāo)480個(gè)，詳見表1。根據(jù)組成QWT的歸經(jīng)信息，構(gòu)建復(fù)方的中藥-歸經(jīng)網(wǎng)絡(luò)及重要活性成分-靶標(biāo)網(wǎng)絡(luò)。詳見圖1和圖2。

表1 QWT中各藥材活性成分與對(duì)應(yīng)366個(gè)靶標(biāo)成分?jǐn)?shù)量（個(gè)）

圖1 QWT“中藥-歸經(jīng)”網(wǎng)絡(luò)圖

圖1和圖2中每個(gè)節(jié)點(diǎn)的大小代表了其等級(jí)值（表示該節(jié)點(diǎn)和網(wǎng)絡(luò)中其他節(jié)點(diǎn)相連的路線條目，等級(jí)值越大代表該節(jié)點(diǎn)是連接其他節(jié)點(diǎn)的重要橋梁），顏色由冷到暖代表了中心度值（betweenness centrality），連線的粗細(xì)和顏色代表了Edge betweenness，所有的顏色和粗細(xì)都是越大越粗，越大越暖色。由圖1可見，等級(jí)值較大的依次為胃經(jīng)、肺經(jīng)、脾經(jīng)，等級(jí)值分別為10，5，5，說明大多數(shù)中藥歸屬此三經(jīng)。

對(duì)QWT中172個(gè)活性成分及480個(gè)主要靶標(biāo)構(gòu)建QWT活性成分-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)圖，共609個(gè)節(jié)點(diǎn)、2 556條邊，篩選其中等級(jí)值≥20的活性成分有27種，詳見表3；等級(jí)值≥30的靶標(biāo)共有89個(gè)，詳見表4。繪制27種重要成分與靶點(diǎn)間的網(wǎng)絡(luò)圖（圖2）可知，與靶標(biāo)相關(guān)的主要活性成分主要分為兩類，一類是清熱解毒藥中抗炎、抗菌、抗病毒的有效成分，另一類主要是扶正固表藥中提高免疫的氨基酸成分。

2.2QWT靶標(biāo)干預(yù)的生物功能分析

將480個(gè)作用靶標(biāo)進(jìn)行通路及基因本體的富集分析。QWT與SARS-CoV-2在GO水平上顯示出共關(guān)聯(lián)性，在前400個(gè)主要關(guān)聯(lián)的GO分類中兩者共關(guān)聯(lián)占比達(dá)73.60%。在P＜0.01水平上，與兩者顯著共關(guān)聯(lián)的GO分類主要有4類作用：1）抗炎作用（積極調(diào)控發(fā)熱、干擾素γ產(chǎn)生的正向調(diào)節(jié)、IL-12產(chǎn)生的正向調(diào)節(jié)、IL-6產(chǎn)生的正向調(diào)節(jié)、細(xì)胞對(duì)腫瘤壞死因子的反應(yīng)、I-κB激酶/NF-κB信號(hào)傳導(dǎo)、NIK/NF-κB信號(hào)）；2）免疫作用（α-βT細(xì)胞活化、B細(xì)胞活化參與免疫反應(yīng)、免疫球蛋白的生成、白細(xì)胞參與免疫反應(yīng)、淋巴細(xì)胞活化參與免疫反應(yīng)、單核細(xì)胞趨化、巨噬細(xì)胞趨化性的正調(diào)控、T細(xì)胞活化的正調(diào)控）；3）血管生成作用（腎素-血管緊張素調(diào)節(jié)血容量、血管生成）；4）鈣離子通道作用（胞漿鈣離子濃度的正調(diào)控、鈣離子穩(wěn)態(tài)、鈣離子轉(zhuǎn)運(yùn)的正向調(diào)節(jié)、鈣離子進(jìn)入的正調(diào)控）。其中鈣離子通道作用與血管生成作用之間互相作用，免疫調(diào)節(jié)作用與抗炎作用之間也相互關(guān)聯(lián)。

KEGG富集分析（圖3）顯示，在P＜0.01水平上，QWT靶標(biāo)與132條信號(hào)通路顯著關(guān)聯(lián)，與SARSCoV-2關(guān)聯(lián)為36條，與兩者均有關(guān)聯(lián)為26條。在兩者均有關(guān)聯(lián)的26條通路中，KEGG通路富集結(jié)果中限定為人類疾病部分的通路，得到14條靶標(biāo)富集的疾病通路，其中有12條通路與感染性疾病、肺部疾病及免疫疾病相關(guān)，包括瘧疾、阿米巴病、軍團(tuán)菌病、單純皰疹病毒感染、乙型病毒性肝炎、丙型病毒性肝炎、百日咳、甲型流感、肺結(jié)核、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、同種異體移植排斥。其他通路主要與抗炎及免疫相關(guān)，包括主要作用于腫瘤壞死因子（TNF）信號(hào)通路、白細(xì)胞介素17（IL-17）信號(hào)通路、核轉(zhuǎn)錄因子（NF-κB）信號(hào)通路、TLR多蛋白復(fù)合體（Toll）樣受體信號(hào)通路、輔助T細(xì)胞17（Th17）細(xì)胞分化T細(xì)胞受體信號(hào)通路、趨化因子信號(hào)通路、細(xì)胞因子與細(xì)胞因子受體的相互作用、NF-κB信號(hào)通路、NLR蛋白（NOD）樣受體信號(hào)通路、T細(xì)胞受體信號(hào)通路、產(chǎn)生IgA的腸道免疫網(wǎng)絡(luò)。

表3 QWT中與靶標(biāo)最相關(guān)的重要活性成分

表4 QWT中等級(jí)值較高的靶標(biāo)

2.3QWT和SARS-CoV-2的生物PPI網(wǎng)絡(luò)分析

使用String在線平臺(tái)對(duì)QWT的作用靶標(biāo)進(jìn)行PPI網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建，PPI網(wǎng)絡(luò)包含419個(gè)蛋白質(zhì)節(jié)點(diǎn)、21 519條邊。根據(jù)PPI結(jié)果進(jìn)一步進(jìn)行網(wǎng)絡(luò)分析和計(jì)算，選取等級(jí)值≥100的節(jié)點(diǎn)，主要包括CXCL8，CXCR4，CXCL12，APP，CXCL1，AGT，CXCL10，KNG1，POMC，CCR5，CCR2，CXCL2等200個(gè)靶點(diǎn)，對(duì)高等級(jí)值的靶點(diǎn)進(jìn)一步進(jìn)行PPI分析。Stirng功能富集分析結(jié)果中，設(shè)定統(tǒng)計(jì)指標(biāo)為FDR＜1×10-6，在KEGG通路富集的結(jié)果中發(fā)現(xiàn)，高等級(jí)值蛋白主要影響的KEGG疾病通路與感染性疾病、肺部疾病、免疫疾病、心血管疾病相關(guān)，包括肺結(jié)核、人嗜T淋巴細(xì)胞病毒-I（HTLV-I）感染、乙型病毒性肝炎、百日咳、軍團(tuán)菌病、沙門菌感染、擴(kuò)張型心肌病、動(dòng)脈粥樣硬化、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、阿米巴病、甲型流感。主要影響的信號(hào)通路有NOD樣受體信號(hào)通路、Toll樣受體信號(hào)通路、IL-17信號(hào)通路、TNF信號(hào)通路、血管平滑肌收縮等。同時(shí)，對(duì)高等級(jí)值靶點(diǎn)的PPI網(wǎng)絡(luò)進(jìn)一步使用網(wǎng)絡(luò)模塊功能分析（MCODE）進(jìn)行模塊分析，共得到2個(gè)子網(wǎng)絡(luò)模塊。詳見圖4。其中模塊1的靶點(diǎn)主要與免疫系統(tǒng)（圖中所示紫色）、抗炎（TNF信號(hào)通路，圖中所示綠色；MAPK信號(hào)通路，圖中所示黃色；白細(xì)胞介素信號(hào)，圖中所示紅色）相關(guān)；模塊2的靶點(diǎn)主要與細(xì)胞轉(zhuǎn)錄（圖中所示紅色）和RNA聚合酶Ⅱ特異的DNA結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合（圖中所示紫色）相關(guān)。

2.4 分子對(duì)接結(jié)果

QWT中主要的27種活性成分與3CLpro和ACE2的對(duì)接結(jié)果見表5。其中，每個(gè)蛋白對(duì)接最好的前5位化合物的對(duì)接結(jié)果見圖5。5種化合物均能與2種蛋白形成氫鍵，其中異鼠李素均能與2種蛋白形成5個(gè)氫鍵；槲皮素能與3C類形成5個(gè)氫鍵，與ACE2結(jié)合形成2個(gè)氫鍵；芹菜素能與3C類形成4個(gè)氫鍵，與ACE2結(jié)合形成3個(gè)氫鍵；熊果酸均能與2種蛋白形成2個(gè)氫鍵；羽扇豆酚均能與2種蛋白形成1個(gè)氫鍵。

表5 QWT中活性成分的分子對(duì)接結(jié)果

3 討論

本研究中對(duì)QWT的活性成分、歸經(jīng)、靶標(biāo)及生物功能均進(jìn)行了分析，并通過分子對(duì)接技術(shù)對(duì)直接作用于SARS-CoV-2的2種蛋白進(jìn)行了對(duì)接，希望為進(jìn)一步抗SARS-CoV-2治療提供支持。

新冠肺炎屬中醫(yī)“疫”范疇，病因?yàn)楦惺芤甙O之氣，主要為“濕毒”疫氣，病位在肺，但前期的許多研究發(fā)現(xiàn)[12]，多數(shù)患者有消化道癥狀。QWT主要作用于胃經(jīng)、肺經(jīng)、脾經(jīng)，方中有10味中藥作用于胃經(jīng)，有5味中藥作用于肺經(jīng)和脾經(jīng)。說明QWT對(duì)于改善脾胃癥狀有較好作用，同時(shí)作用于肺經(jīng)，祛濕和胃，調(diào)節(jié)胃腸道功能，共同改善肺部癥狀。

網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，QWT中最相關(guān)的活性成分是琥珀酸、香豆素、γ-氨基丁酸、谷氨酰胺、槲皮素、山柰酚、脯氨酸、賴氨酸、木犀草素、色氨酸、L-纈氨酸、膽堿、芹菜素、β-谷固醇、苯丙氨酸、丙氨酸、水楊酸、DL-纈氨酸、羽扇豆酚、腺苷、谷氨酸、熊果酸、大黃素、異鼠李素、黃豆苷元、檸檬酸、阿魏酸。其中主要為4類成分：1）黃酮/黃酮苷元等清熱解毒中藥中常見的有效成分，槲皮素、山柰酚、異鼠李素、木犀草素、芹菜素、黃豆苷元；2）五環(huán)三萜類的抗炎有效成分，熊果酸、羽扇豆酚；3）有機(jī)酸類有效成分，阿魏酸、琥珀酸、水楊酸、檸檬酸；4）氨基酸類成分，如賴氨酸、脯氨酸、色氨酸、丙氨酸、纈氨酸、谷氨酰胺等。山柰酚、槲皮素、木犀草素、芹菜素是經(jīng)典的抗炎和抗菌有效成分，以上幾種成分目前在抗炎、抗病毒、抗腫瘤、心血管保護(hù)、免疫調(diào)節(jié)等研究中也被報(bào)道有一定作用。山柰酚和槲皮素均能降低人腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、細(xì)菌內(nèi)毒素和白細(xì)胞介素（IL）-1β的刺激等的表達(dá)[13-14]。槲皮素對(duì)皰疹病毒感染機(jī)體后的增殖具有抑制作用，也可拮抗病毒誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡[15]。木犀草素[16-19]和芹菜素對(duì)抗病毒均有一定作用，芹菜素更是已有發(fā)明專利涉及其用于預(yù)防和/或治療中東呼吸道綜合征冠狀病毒（MERS-CoV）感染的藥物組合物[19]。熊果酸作為經(jīng)典的保肝有效成分，除了能抑制乙型肝炎病毒轉(zhuǎn)錄用于病毒性肝炎[20]外，對(duì)皰疹病毒也有作用[21]。黃豆苷元能有效抑制老年冠心病患者血清炎性因子水平（hs-CRP，IL-6，TNF-α），對(duì)冠狀動(dòng)脈粥樣硬化具有抗炎作用[22]。大黃素作為常見蒽醌類成分，體內(nèi)及體外試驗(yàn)中均表現(xiàn)出了抗炎活性，與其阻滯低氧誘導(dǎo)因子-1α（HIF-1α）/NF-κB-COX-2信號(hào)通路相關(guān)[23]。氨基酸類的有效成分主要發(fā)揮調(diào)節(jié)免疫作用，提高患者的免疫功能。多種活性成分協(xié)同作用，對(duì)于患者的抗炎、抗病毒、保肝、增強(qiáng)免疫力等多方面提供治療支持。

圖2 QWT中重要活性成分-靶標(biāo)網(wǎng)絡(luò)圖[3]

圖3 KEGG富集分析

圖4 高節(jié)點(diǎn)數(shù)PPI的MCODE模塊分析

圖5 分子對(duì)接結(jié)果[5]

QWT與SARS-CoV-2，在生物功能、KEGG通路作用中，以及PPI互作網(wǎng)絡(luò)中，最為相關(guān)的信號(hào)通路主要為：IL-6免疫反應(yīng)、IL-17信號(hào)通路、NOD樣受體信號(hào)通路、Toll樣受體信號(hào)通路等，最相關(guān)的疾病聚集主要為百日咳、甲型流感、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、瘧疾等。由于新冠肺炎目前沒有特效藥物，發(fā)病早期患者的外周血白細(xì)胞總數(shù)正常或減低，淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)減少，提示免疫功能改變，因此應(yīng)用中藥調(diào)節(jié)免疫功能顯得尤為重要。在重癥肺炎中就有報(bào)道，對(duì)炎性因子的調(diào)控與預(yù)后具有相關(guān)性[24]，PCT，CRP，TNF-α，IL-6水平均能較好地預(yù)測(cè)病情進(jìn)展及急性呼吸窘迫綜合征（ARDS）的發(fā)生，提示QWT可能通過相關(guān)的炎癥通路來進(jìn)一步避免炎性介質(zhì)的進(jìn)一步釋放。Toll樣受體和NOD樣受體均為與自身免疫疾病相關(guān)的受體[25]，QWT通過調(diào)節(jié)兩者的信號(hào)通路，可以影響自噬和抗炎，自噬可影響感染炎性疾病的緩解和炎癥性疾病的病理過程。此外，新冠肺炎患者可能出現(xiàn)心功能損害，QWT的靶標(biāo)可能影響腎素-血管緊張素調(diào)節(jié)血容量、調(diào)節(jié)血液循環(huán)、對(duì)鈣離子通道中的胞漿鈣離子濃度起正調(diào)控等，說明QWT有潛在的心血管保護(hù)作用，可能在一定程度上減輕患者的心臟負(fù)擔(dān)，改善心功能。

在分子對(duì)接結(jié)果中發(fā)現(xiàn)了5種活性成分（異鼠李素、槲皮素、芹菜素、熊果酸、羽扇豆酚）均能與SARSCoV-2的S蛋白和人體內(nèi)血管緊張素轉(zhuǎn)換酶Ⅱ（ACE2）蛋白結(jié)合并形成氫鍵，說明其有潛在的成藥性，可能需要進(jìn)一步的藥效學(xué)驗(yàn)證。現(xiàn)階段的研究認(rèn)為[26]，使用ACEI或者ARB類藥物可能是一把“雙刃劍”，而和中藥的配合使用，可能有“減毒增效”之功用。本研究中還發(fā)現(xiàn)，QWT與SARS-CoV-2最相關(guān)的5個(gè)靶標(biāo)可作用于瘧疾和類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎，提示中藥制劑與氯喹的聯(lián)合使用可能進(jìn)一步改善新冠肺炎的治療。

綜上所述，本研究中采用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的技術(shù)手段和分子對(duì)接技術(shù)，對(duì)自擬QWT的活性成分、歸經(jīng)和靶標(biāo)進(jìn)行了系統(tǒng)性研究，闡釋了其對(duì)SARS-CoV-2的分子水平作用機(jī)制，突出了中藥制劑多成分、多靶標(biāo)對(duì)機(jī)體整體調(diào)控的特點(diǎn)，為該復(fù)方制劑治療新冠肺炎提供了理論支持。