陶 杰
(長江大學工程技術(shù)學院體育教學部,湖北 荊州 434020)
杏鮑菇是食藥兼用的食用菌,也是日常生活中常見的菌類,因有杏仁香味和如鮑魚的口感,故稱為“杏鮑菇”[1]。杏鮑菇是營養(yǎng)價值很高,富含多種人體必需氨基酸、蛋白質(zhì)、單糖等營養(yǎng)元素,能夠有效提高人體抗氧化能力和免疫力。其子實體中的多糖是重要的營養(yǎng)活性物質(zhì)來源,也是其藥理活性的主要成分[2]。針對杏鮑菇多糖營養(yǎng)成分進行測定分析,并對其氧化和還原穩(wěn)定性開展試驗,研究分析杏鮑菇多糖的有效營養(yǎng)成分和抗氧化活性。探討杏鮑菇多糖的營養(yǎng)價值和對人體健康的改善作用。
將杏鮑菇粉于80℃烘箱中烘干30 min,粉碎后過80目篩。
粗蛋白的測定采用凱氏定氮法(Kjeldahl Method) 中的微量法[3],它是測定總有機氮的最準確和操作較簡便的方法之一。粗蛋白質(zhì)含量(H,%) 計算公式為:
式中:F為氮換算為蛋白質(zhì)的系數(shù),c為鹽酸標準溶液的濃度(mol·L-1);V1為滴定樣品吸收液時消耗鹽酸標準溶液的體積(mL);V2為滴定空白吸收液時消耗鹽酸標準溶液的體積(mL);m為樣品的質(zhì)量或體積(g或mL);M為氮的摩爾質(zhì)量(14.01 g·mol-1)。
粗脂肪的測定采用索氏抽提法(soxhlet extractor method),它是我國糧食等農(nóng)作物種子果實脂肪測定首選的標準方法,所測定脂肪的含量主要為游離脂肪含量。粗脂肪含量(Ft,%) 計算公式為:
式中:X為稱量瓶加濾紙包重量(g);Y為稱量瓶加濾紙包和烘干樣重(g);Z為稱量瓶加濾紙包和抽提后烘干殘渣重(g)。
灰分的測定:將杏鮑菇多糖樣品于電爐上加熱直至炭化,再轉(zhuǎn)到馬弗爐中在(600±50)℃下灼燒10 min,冷卻1 h后精確稱重測定灰分。
粗纖維是人體必需的一種特殊營養(yǎng)物質(zhì),在預(yù)防心臟病、結(jié)腸癌上有重要作用,能夠從消化率的角度來評價杏鮑菇的營養(yǎng)價值。粗纖維含量的測定一般有酸性洗滌劑法、中性洗滌劑法和酸堿法,根據(jù)杏鮑菇纖維的特點,采用酸堿法進行測定。
精確稱取已脫去脂肪的干燥杏鮑菇多糖粉樣品2 g,加200 mL稀硫酸,在回收冷卻裝置上加熱煮沸30 min,收集冷凝液用布氏漏斗過濾,在100℃蒸餾水中洗滌至 pH中性;用100℃的0.3 mol·L-1的NaOH 200 mL沖洗濾紙,收集濾紙殘留物在回收冷卻裝置上加熱煮沸30 min,漏斗過濾,在100℃蒸餾水中洗滌至pH中性;用蒸餾水沖洗濾紙,收集濾紙殘留物放入有石棉的古氏坩堝,抽去其中的水分,并用10 mL~20 mL 95%乙醇洗滌數(shù)次,再用10 mL~20 mL乙醚洗滌數(shù)次,抽干水分,放入(110±2)℃的烘干箱中烘干3 h,干燥冷卻40 min后稱重(恒重),置于(600±50)℃灼燒30 min,使殘留物全部灰化,干燥冷卻40 min后稱重,所減少的重量就是杏鮑菇多糖粉樣品的粗纖維重量(Wc,%),計算公式為:
式中:W1為在(110±2)℃下經(jīng)干燥后稱得的恒重(g);W2為灼燒后稱得的重量(g);WC為杏鮑菇多糖粉樣品重量(g)。
本試驗采用簡單易行的考馬斯亮藍G-250法對杏鮑菇多糖中蛋白質(zhì)含量進行測定[4]。將杏鮑菇多糖粉末稀釋至標準曲線之內(nèi)的濃度,得到多糖粉末稀釋液。分別取標準蛋白質(zhì)溶液 0、0.2 mL、0.4 mL、0.6 mL、0.8 mL、1.0 mL,分別加入 1.0 mL、0.8 mL、0.6 mL、0.4 mL、0.2 mL、0 蒸餾水稀釋至 1 mL,再加入考馬斯亮藍G-250溶液5 mL,混合均勻后靜置5 min,在560 nm波長處測吸光度,代入回歸方程求出杏鮑菇多糖樣品的蛋白質(zhì)含量,以蛋白質(zhì)含量與吸光度繪制標準曲線,得線性回歸方程為 y=0.71x+0.0143,R2=0.9987,如圖 1 所示。
杏鮑菇的主要營養(yǎng)成分結(jié)果見表1。
表1 杏鮑菇的主要營養(yǎng)成分Tab.1 Main nutrients of Pleurotus eryngii
由表1可知,杏鮑菇中粗蛋白的含量平均為26.09%,粗纖維含量為8.66%,在食用菌中處于中上水平;粗脂肪含量僅為2.53%,脂肪含量較低;灰分(無機鹽) 含量為8.70%,與香菇、木耳等主要食用菌種相比,其多糖的總糖含量相對較高,為5.90 mg·mL-1,還原糖含量較少,僅為 0.43 mg·mL-1。測定和分析杏鮑菇的營養(yǎng)學特性,可以為杏鮑菇相關(guān)產(chǎn)品的開發(fā)深加工提供科學依據(jù),對杏鮑菇多糖的分離純化也具有指導(dǎo)意義。
按1∶1比例配制杏鮑菇多糖溶液100 mg,分成5份[5],加入H2O2配制混合溶液5份各20 mL,5份混合溶液的 H2O2含量分別為 0.1%、0.2%、0.3%、0.4%、0.5%,在室溫下靜置12 h,在510 nm處用紫外可見分光光度計測量吸光度,試驗結(jié)果如圖2所示。
如圖2所示,杏鮑菇多糖溶液顯色后,吸光度數(shù)值與氧化劑濃度成反比,濃度越高吸光度越低,這說明杏鮑菇多糖的抗氧化性良好。
對杏鮑菇多糖的溶解穩(wěn)定性試驗為:配制3份10%濃度的杏鮑菇多糖溶液100 mL,順序放置在10℃、30℃、50℃、70℃、90℃的恒溫箱中 30 min,肉眼觀察至多糖粉末完全溶解,記錄多糖的溶解時間,試驗結(jié)果如表2所示。
表2 不同溫度杏鮑菇多糖溶解時間的影響Tab.2 Effect of different temperature on the dissolution time of Pleurotus eryngii polysaccharide
由表2可知,杏鮑菇多糖在低溫下的溶解并不好,溫度升高能夠有效縮短溶解時間,提高其溶解速度,這也是為什么水提法要在80℃~90℃條件下得率較高的重要原因。
通過以上試驗證明,杏鮑菇多糖的耐還原性和抗氧化性較好,低溫存儲不易氧化,能夠保持多糖的活性。
對杏鮑菇多糖營養(yǎng)成分試驗結(jié)果表明,杏鮑菇中含有多種營養(yǎng)成分,其中粗蛋白、粗纖維含量較高,而粗脂肪含量較低,總糖含量較高,而還原糖含量較低。對杏鮑菇多糖穩(wěn)定性試驗表明,杏鮑菇多糖的耐還原性和抗氧化性良好,在低溫下活性成份性質(zhì)穩(wěn)定,可以有效增強人體抗氧化能力。
杏鮑菇多糖中含有的多種活性成分和營養(yǎng)物質(zhì),能夠促進人體新陳代謝,是中老人、亞健康人群的理想營養(yǎng)物質(zhì)來源。后續(xù)的研究將對杏鮑菇中的多種氨基酸和維生素進行測定和分析,全面挖掘杏鮑菇的營養(yǎng)學特性,讓杏鮑菇更好地為人類健康事業(yè)服務(wù)。