沈陽地區(qū)獻(xiàn)血者疑難血型鑒定原因分析及處理措施

侯 萍，李曉豐，李劍平

沈陽中心血站檢驗(yàn)科，遼寧沈陽 110044

對獻(xiàn)血者進(jìn)行正確的血型鑒定是保證臨床用血安全、有效輸血的前提條件。沈陽中心血站每年都有幾萬人次的無償獻(xiàn)血者，檢驗(yàn)科會對送檢的血樣進(jìn)行ABO血型初篩，初篩ABO血型正反定型不一致的標(biāo)本會送到沈陽中心血站血型參比室進(jìn)行進(jìn)一步的血型鑒定，確保血型正確無誤。本文對沈陽中心血站檢驗(yàn)科2018年1月至2019年1月送檢的疑難血型288例獻(xiàn)血者的相關(guān)資料進(jìn)行回顧性分析，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 收集沈陽中心血站檢驗(yàn)科2018年1月至2019年1月送檢的288例獻(xiàn)血者疑難血型血樣，其中男148例，女140例；年齡20～55歲。

1.2試劑與儀器 抗A、抗B、抗A1、抗AB、抗H、ABO標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞、篩選細(xì)胞和譜細(xì)胞購自上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司[1]；另一組抗A 、抗B和 ABO標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞購自北京金豪制藥股份有限公司。所有試劑均在有效期內(nèi)使用。人類ABO血型基因檢測試劑盒購自天津秀鵬公司。儀器為Olympus顯微鏡，Kubota細(xì)胞洗滌離心機(jī)。

1.3方法 本研究對沈陽中心血站檢驗(yàn)科送檢的ABO血型正反定型不符標(biāo)本用試管法進(jìn)行血型血清學(xué)鑒定。包括2個廠家的試劑結(jié)果比對，不規(guī)則抗體篩選和鑒定、紅細(xì)胞吸收-放散試驗(yàn)、型物質(zhì)等，具體方法參考文獻(xiàn)[2-3]。沈陽中心血站對部分ABO血型正反定型不符的標(biāo)本進(jìn)行PCR序列特異性引物(PCR-SSP)紅細(xì)胞基因分型[4-5]。所有試驗(yàn)方法均嚴(yán)格按照試劑說明書和本實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)程執(zhí)行。

2 結(jié) 果

2.1獻(xiàn)血者ABO血型不符原因分析 2018年1月至2019年1月共采集106 061例血樣，沈陽中心血站檢驗(yàn)科送檢ABO血型正反定型不符標(biāo)本288例，占0.27%，在正反定型不符的血標(biāo)本中，血清中抗體減弱196例，占68.06%；不規(guī)則抗體26例，占9.03%；ABO亞型22例，占7.64%；冷凝集素3例，占1.04%；抗原減弱3例，占1.04%；抗體減弱加不規(guī)則抗體1例，占0.35%；其他37例，占12.85%。

2.2部分標(biāo)本血清學(xué)結(jié)果和基因分型結(jié)果比較 本研究對其中11例正反定型不符的標(biāo)本進(jìn)行PCR-SSP紅細(xì)胞基因分型檢測，血清學(xué)檢測原因、結(jié)果與基因分型結(jié)果比較見表1。

表1 部分標(biāo)本血清學(xué)結(jié)果和基因分型結(jié)果比較

3 討 論

準(zhǔn)確鑒定獻(xiàn)血者血型對臨床血液正確發(fā)放和安全輸血至關(guān)重要。2018年1月至2019年1月沈陽中心血站共檢測106 061例無償獻(xiàn)血者血樣，其中288例為ABO血型正反定型不符，占0.27%。根據(jù)回顧性數(shù)據(jù)對ABO血型正反定型不符的獻(xiàn)血者采用以下方法確定血型：(1)抗體減弱,反定型多加幾滴血清，同時延長反應(yīng)時間，并在4 ℃冰箱放置一段時間后觀察結(jié)果。(2)ABO亞型,該種血型不符多為紅細(xì)胞上A或B抗原減弱，通過正定型加做抗A1、抗AB和抗H，反定型加做A2細(xì)胞，并通過加做吸收-放散試驗(yàn)和型物質(zhì)確認(rèn)[6-7]，同時對血清學(xué)方法不能完全定型的標(biāo)本進(jìn)行PCR-SSP紅細(xì)胞基因分型[8]。(3)冷凝集素,冷凝集素在冬天或者天氣較冷的季節(jié)獻(xiàn)血人群發(fā)生較多，獻(xiàn)血者血清在低溫和標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞和自身細(xì)胞發(fā)生凝集反應(yīng)，通過將含有冷凝集素的試管放到37 ℃孵育或者用37 ℃鹽水反復(fù)洗滌細(xì)胞至不凝集，然后重新定型[9]。(4)不規(guī)則抗體,對O細(xì)胞出現(xiàn)凝集，而自身細(xì)胞陰性的獻(xiàn)血者進(jìn)行抗體篩選和抗體鑒定，抗體鑒定檢出多為室溫抗體，有抗M和抗P1[10-11]，對檢出有特殊抗體或者未鑒定出具體抗體的獻(xiàn)血者血漿報廢，紅細(xì)胞洗滌后應(yīng)用于臨床。獻(xiàn)血者多為健康人群。(5)人為因素,沈陽中心血站對檢驗(yàn)科送檢的疑難血型重新定型，如發(fā)現(xiàn)定型完全錯誤或者為正常血型，多與初篩人員未按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程操作或者責(zé)任心不強(qiáng)有關(guān)，需加強(qiáng)相關(guān)人員的學(xué)習(xí)和培訓(xùn)[12-13]。

總之，造成獻(xiàn)血者ABO血型鑒定困難的原因很多[14]，但最常見的為獻(xiàn)血者自身抗體或抗原減弱、不規(guī)則抗體產(chǎn)生，冷凝集素，以及工作人員的責(zé)任心不強(qiáng)等人為因素。作為采供血機(jī)構(gòu)的血液中心，準(zhǔn)確鑒定ABO血型是臨床用血的前提。工作人員如遇到疑難ABO血型應(yīng)認(rèn)真分析其可能出現(xiàn)的原因，在排除環(huán)境、試劑及人為等因素后，應(yīng)重新認(rèn)真進(jìn)行試驗(yàn)或者加做其他試驗(yàn)，以確保每名獻(xiàn)血者血型的準(zhǔn)確性，最終保證臨床用血安全。