草珊瑚質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究概況*

★ 溫柔 于歡 嚴(yán)麗萍 李潮 龔千鋒*（江西中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院 南昌 330004）

草珊瑚，金粟蘭科植物草珊瑚Sarcandra glabra（Thunb.）Nakai 的干燥全草［1］，別名腫節(jié)風(fēng)。草珊瑚具清熱涼血、活血消斑、祛風(fēng)通絡(luò)等功效，現(xiàn)代藥理研究表明草珊瑚具有抗菌消炎［2］、保肝［3］、抗腫瘤等臨床作用［4］，為了更好地對(duì)草珊瑚進(jìn)行研究，現(xiàn)將腫節(jié)風(fēng)的品種來(lái)源、采收加工、薄層色譜鑒別、化學(xué)成分分析等概況作一綜述，以期對(duì)草珊瑚質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究提供一定的參考依據(jù)。

1 品種來(lái)源

草珊瑚屬共有3 個(gè)種，東亞至印度都有分布，我國(guó)有草珊瑚（S.glabra）和海南草珊瑚（S.hainanensis）2 個(gè)種。草珊瑚主產(chǎn)于中國(guó)，在朝鮮、日本、馬來(lái)西亞、菲律賓、越南、柬埔寨、印度和斯里蘭卡等國(guó)也均有分布［5］。野生草珊瑚長(zhǎng)在海拔200～1 500 m 高的常綠闊葉林下的陰濕地方，廣泛分布于長(zhǎng)江流域以南各地，本草古籍上以嶺南地區(qū)記載為多［6-7］，1988 年江西省萍鄉(xiāng)市農(nóng)民首次林下種植草珊瑚，此后我國(guó)開(kāi)始大力發(fā)展人工栽培技術(shù)，從采種、育苗、栽植、管理和采收五個(gè)方面著手，再依據(jù)生物學(xué)特性，并大力發(fā)展林下套種草珊瑚人工栽培技術(shù)［8］。據(jù)報(bào)道，近幾年林下種植草珊瑚越來(lái)越受歡迎，不僅節(jié)省土地資源、經(jīng)濟(jì)效益高，同時(shí)有效成分含有量也較高。朱丹等采用HPLC法測(cè)定野生與栽培草珊瑚中迷迭香酸的含量，葉中含量最高，栽培草珊瑚迷迭香酸含量較野生草珊瑚高［9］。劉洪旭等運(yùn)用火焰原子吸收光譜法測(cè)定野生與栽培草珊瑚中礦物元素的含量，結(jié)果野生與栽培品中K、Ca、Fe、Mg 的含量均較高，Zn、Cu 含量均較低［10］。

2 采收加工

2.1 采收季節(jié) 草珊瑚為常綠半灌木，一年四季均可采收，草珊瑚的采收時(shí)間對(duì)其成分有著一定影響。2015 年版《中國(guó)藥典》中要求草珊瑚為全草入藥，夏、秋兩季均可采收。根據(jù)《九節(jié)茶規(guī)范化生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程》（試行），草珊瑚的最佳采收季節(jié)為秋季，藥材種植兩年以上更好。晴天采收，割取地上成熟的大莖葉，及時(shí)曬干［11］。許多學(xué)者對(duì)不同季節(jié)采收的草珊瑚含量進(jìn)行了分析，徐翔英等采用HPLC 法、主成分分析法測(cè)定不同種源不同季節(jié)草珊瑚新綠原酸、綠原酸、隱綠原酸、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、異嗪皮啶、山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖醛酸苷和迷迭香酸的含量差異，隨著季節(jié)變化，異嗪皮啶在秋冬兩季含量較高；迷迭香酸在8 至10 月份含量較高，其他月份基本恒定。其他成分1 至8 月份含量基本恒定，9 至11 月份含量較高，綜合得最佳采收季節(jié)為9、10、11 月份［12］。李鵬等采用HPLC 法測(cè)得反丁烯二酸在5、11 月份含較高，而異嗪皮啶在9、10 月份含量較高［13］，可見(jiàn)不同季節(jié)采收草珊瑚，功效作用程度也不一樣，酚酸類(lèi)成分抗菌消炎作用好，所以春季采收對(duì)抗炎作用較好；異嗪皮啶具有抗腫瘤作用，則秋季采收對(duì)抗癌作用較好。

2.2 加工方法 草珊瑚藥典炮制方法為除去雜質(zhì)，洗凈，潤(rùn)透，切斷，干燥這4 個(gè)步驟，每個(gè)步驟對(duì)飲片的質(zhì)量都有影響，徐翔英等采用陰干、曬干、不同溫度烘干、不同時(shí)間烘干這10 種方法對(duì)鮮草珊瑚樣品進(jìn)行干燥處理，采用HPLC 法測(cè)定草珊瑚中5 個(gè)有效成分的含量，運(yùn)用TOPSIS 綜合分析法得到不同干燥方式對(duì)草珊瑚有效成分含量有顯著影響［14］。雷丹等用正交設(shè)計(jì)對(duì)軟化后的草珊瑚干燥工藝進(jìn)行了考察，結(jié)果發(fā)現(xiàn)干燥溫度對(duì)草珊瑚成分有極顯著影響［15］，溫度只是炮制過(guò)程的一個(gè)影響因素，其它因素的影響還有待考察。現(xiàn)飲片廠對(duì)草珊瑚的加工方法各不一，有趁鮮切制和干燥軟化后切制，但多是按照藥典法全株炮制草珊瑚，草珊瑚有根莖葉三個(gè)部位，不同部位有效成分也不一樣［16］，加工過(guò)程中對(duì)飲片有效成分、藥理藥效的質(zhì)量影響亦較大，文獻(xiàn)上僅有干燥過(guò)程的影響因素幾篇報(bào)道，近幾年有關(guān)草珊瑚炮制這方面的文獻(xiàn)寥寥無(wú)幾，所以有必要對(duì)草珊瑚炮制工藝參數(shù)進(jìn)行更多研究。

2.3 包裝貯藏 草類(lèi)藥材含揮發(fā)油較多，適用于速凍及避光保存［17］。密封包裝、需防潮。

3 薄層色譜鑒別

童家贇等優(yōu)化了藥典所載薄層鑒別的展開(kāi)劑，以環(huán)己烷-乙酸乙酯-甲酸（8∶5∶1）為展開(kāi)劑，硫酸-乙醇溶液顯色，紫外燈下顯示多個(gè)斑點(diǎn)，表明不同產(chǎn)地腫節(jié)風(fēng)所含成分差異較大［18］。楊方明等采用石油醚-乙醚-甲酸（1∶5∶0.1）展開(kāi)劑，實(shí)驗(yàn)結(jié)果薄層色譜條件分離效果好，比藥典條件更理想［19］。

4 化學(xué)成分分析

在草珊瑚的化學(xué)成分多樣，有黃酮類(lèi)、香豆素類(lèi)、有機(jī)酸類(lèi)、苯丙素類(lèi)、微量元素、揮發(fā)油和其它類(lèi)，歷年來(lái)對(duì)草珊瑚各類(lèi)化學(xué)成分在質(zhì)量控制和藥理藥效上都有較系統(tǒng)的研究。

4.1 黃酮類(lèi) 草珊瑚黃酮類(lèi)成分最多，主要用分光光度法測(cè)定總黃酮的含量，朱建鑫等分離并測(cè)定了異嗪皮啶-7-O-β-D-葡萄糖苷、山柰酚-3-Oβ-D-葡萄糖酸苷的含量［20］。勵(lì)娜等以蘆丁為對(duì)照品，采用分光光度法測(cè)定草珊瑚中總黃酮的含量，發(fā)現(xiàn)葉中的總黃酮含量高達(dá)3.17%［21］。周斌等對(duì)草珊瑚不同季節(jié)、不同部位中的總黃酮和異嗪皮啶的含量進(jìn)行分析，結(jié)果根中異嗪皮啶含量較高，總黃酮含量葉中最高［16］。

4.2 香豆素類(lèi) Feng S 等分離出了一種新香豆素類(lèi)物質(zhì)3，5-2OH-7-O-α-L-鼠李糖-2H-色烯-2-吡喃酮，并證明它是一種潛在的抗炎物質(zhì)［22］。胡曉茹等首次從草珊瑚中分離得到6 種香豆精類(lèi)化學(xué)成分，并表明具有抗菌活性［23］，異嗪皮啶是《中國(guó)藥典》中作為評(píng)價(jià)草珊瑚藥材及其制劑質(zhì)量控制指標(biāo)成分，已被報(bào)道具有一定的抗菌、抗炎、抗癌活性［24］。

4.3 有機(jī)酸類(lèi) 反丁烯二酸的含量測(cè)定方法多見(jiàn)報(bào)道，游勇基、章光文等［25-26］采用HPLC 法分別測(cè)定了草珊瑚藥材及其制劑中反丁烯二酸的含量，龔冬琴、閔芳等［27-28］采用HPLC 法研究了不同采收季節(jié)和不同種源對(duì)腫節(jié)風(fēng)中異嗪皮啶和反丁烯二酸含量的影響；丁二酸含量測(cè)定至今還未見(jiàn)報(bào)道。

4.4 苯丙素類(lèi) 迷迭香酸2010 年收入《中國(guó)藥典》中作為草珊瑚的指標(biāo)性成分。它的含量分析測(cè)定已經(jīng)有很多報(bào)道［29-31］，盧瑞枝等也首次建立了RP-HPLC 法測(cè)定草珊瑚中綠原酸的含量［32］。

4.5 微量元素 楊波等采用微波消解處理草珊瑚樣品，電感耦合等離子體-質(zhì)譜法）（ICP-MS）分析草珊瑚中鐵、鋅、鈣、鎂、銅、錳、硒、鉬、鈷、鋁、鎳和鉻等12 種微量元素的含量［33］。

4.6 揮發(fā)油 林培玲等采用水蒸氣蒸餾法分別提取草珊瑚根、莖、葉中的揮發(fā)油，經(jīng)GC-MS 分析比較其不同部位有效成分的含量［34］，吳素香等也建立了GC 法測(cè)定鮮草珊瑚中揮發(fā)油及油中β-欖香烯的含量［35］。

4.7 其它 田學(xué)萍等在草珊瑚含片中測(cè)定到16 種氨基酸［36］、胡曉茹等分離到3 個(gè)木脂素類(lèi)化合物、3 個(gè)單萜苷類(lèi)化合物［37］，Hu X R 等分離到5 個(gè)三萜類(lèi)化合物［38］。

4.8 草珊瑚多指標(biāo)性成分含量測(cè)定 在現(xiàn)行藥典中，草珊瑚的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)只列出了迷迭香酸和異嗪皮啶物質(zhì)，參考大量文獻(xiàn)后，許多學(xué)者已對(duì)草珊瑚的單一指標(biāo)性成分的含量測(cè)定有了許多研究［39-41］，但不能較全面地反映草珊瑚的整體質(zhì)量。近幾年建立了草珊瑚多指標(biāo)性成分含量測(cè)定方法全面控制飲片質(zhì)量，徐翔英等建立HPLC 法同時(shí)測(cè)定不同采收期草珊瑚中7 個(gè)有效成分的含量，并通過(guò)主成分分析法選出福建省草珊瑚主產(chǎn)區(qū)最佳采收時(shí)間為9、10、11 月份，后又在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中優(yōu)化了HPLC 檢測(cè)方法，建立了同時(shí)測(cè)定草珊瑚中7 個(gè)化學(xué)成分含量測(cè)定的方法，為福建道地藥材草珊瑚的質(zhì)量控制研究提供進(jìn)一步的參考［42］。潘磬等建立HPLC 法同時(shí)測(cè)定草珊瑚中9 個(gè)有效成分的含量，以乙腈-0.2%磷酸水為流動(dòng)相，各成分在相關(guān)范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好。為福建三元區(qū)成功選育優(yōu)良品種［43］。姚志紅首次采用了UPLC 技術(shù)，以“一測(cè)多評(píng)”法同時(shí)測(cè)定腫節(jié)風(fēng)中6 個(gè)有效成分含量測(cè)定方法，11min 就實(shí)現(xiàn)了6 個(gè)成分的高效分離［44］。吳鐵榮等選用異嗪皮啶為內(nèi)標(biāo)物，通過(guò)HPLC 一測(cè)多評(píng)的分析方法分別對(duì)草珊瑚藥材及其注射液中有效成分進(jìn)行含量測(cè)定，同時(shí)用外標(biāo)法驗(yàn)證了一測(cè)多評(píng)的準(zhǔn)確性和科學(xué)性，為草珊瑚及其制劑活性成分的多指標(biāo)質(zhì)量控制提供了新模式［45-46］。林培玲等建立了流動(dòng)相為甲醇-乙腈-甲酸水溶液測(cè)定草珊瑚藥材HPLC 指紋圖譜的方法，并用特定的數(shù)字化技術(shù)確定了草珊瑚藥材20 個(gè)特征指紋峰，計(jì)算了46 個(gè)產(chǎn)地藥材的相似度。采用主成分聚類(lèi)分析法鑒別不同產(chǎn)地草珊瑚藥材，為藥材的質(zhì)量評(píng)價(jià)方法的建立提供新的模式［47］。張勝娜首次采用GC 技術(shù)建立鮮腫節(jié)風(fēng)揮發(fā)油的共有指紋圖譜。鮮腫節(jié)風(fēng)揮發(fā)油的質(zhì)量關(guān)系到其制劑的質(zhì)量［48］。草珊瑚的成分多種多樣，多指標(biāo)性成分的含量測(cè)定能夠反映中藥材整體質(zhì)量，在草珊瑚定量分析中起重要作用，為草珊瑚的質(zhì)量控制提供有效手段。

5 總結(jié)與展望

本文對(duì)草珊瑚品種來(lái)源、采收加工、薄層色譜鑒別、有效成分含量測(cè)定進(jìn)行了歸納整理，目前，草珊瑚藥材采收與加工這方面的研究比較薄弱，源頭的重要性決定了藥材飲片的質(zhì)量品質(zhì)，因此更應(yīng)注重草珊瑚的產(chǎn)地加工和炮制工藝研究，草珊瑚加工炮制沒(méi)有統(tǒng)一的規(guī)范，軟化和切制工藝的考察沒(méi)有相關(guān)的實(shí)驗(yàn)報(bào)道。中藥飲片切制前需經(jīng)凈制軟化處理。草珊瑚飲片切制時(shí)，沒(méi)有統(tǒng)一規(guī)定的軟化程度，或忽略軟化的步驟，不經(jīng)過(guò)凈制處理直接使用切藥機(jī)切制，造成藥材莖葉多破碎，有效成分流失，藥效降低。另外，在自然干燥和軟化的過(guò)程中，也可能出現(xiàn)葉子掉落和莖的斷裂等，這將嚴(yán)重影響草珊瑚藥材和飲片的質(zhì)量，對(duì)中藥現(xiàn)代化產(chǎn)業(yè)發(fā)展很不利。規(guī)范草珊瑚飲片軟化和切制方法，正確軟化和切制處理是當(dāng)前草珊瑚飲片炮制中的重要問(wèn)題，從而實(shí)現(xiàn)草珊瑚產(chǎn)地加工與炮制一體化，進(jìn)而有效控制草珊瑚質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。