HLA-G對(duì)子癇前期發(fā)生發(fā)展的影響

劉翠蓮 崔 澂

(河北省人民醫(yī)院，石家莊 050051)

子癇前期 (preeclampsia,PE) 是起源于胎盤的產(chǎn)科常見(jiàn)而特有的并發(fā)癥之一,易引起胎兒宮內(nèi)生長(zhǎng)發(fā)育受限及孕產(chǎn)婦和圍生兒死亡，但其病因及發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明。因此,探討PE相關(guān)病因及發(fā)病機(jī)制對(duì)改善母嬰預(yù)后具有重要意義。有證據(jù)顯示，母胎界面局部免疫系統(tǒng)在PE發(fā)病中發(fā)揮重要作用[1，2]。人類白細(xì)胞抗原G(human leucocyte antigen-G，HLA-G)在母胎免疫調(diào)節(jié)中起重要作用[3]，對(duì)PE發(fā)生發(fā)展有不可忽視的影響。

1 HLA-G的分子結(jié)構(gòu)與分布

HLA-G為非經(jīng)典人類白細(xì)胞抗原Ⅰ類基因家族成員，位于染色體6p21.31。HLA-G基因經(jīng)轉(zhuǎn)錄剪切可產(chǎn)生7種蛋白異構(gòu)體，其中HLA-G1、HLA-G2、HLA-G3、HLA-G4為膜結(jié)合型蛋白(mHLA-G)，HLA-G5、HLA-G6、HLA-G7為分泌型蛋白(sHLA-G)，又稱為可溶型蛋白。HLA-G抗原在生理狀態(tài)下僅表達(dá)于絨毛外滋養(yǎng)層細(xì)胞、胸腺髓質(zhì)、角膜等免疫豁免組織。其中HLA-G5表達(dá)可遍布胎盤及母體血液，HLA-G6可表達(dá)在浸潤(rùn)于蛻膜的細(xì)胞滋養(yǎng)層、絨毛膜滋養(yǎng)層。

2 HLA-G基因特性及其與PE的相關(guān)性

與經(jīng)典HLA-Ⅰ類分子基因(HLA-A、B、C)相比，非經(jīng)典HLA-G基因具有兩個(gè)特性：①啟動(dòng)子序列結(jié)構(gòu)的獨(dú)特性。經(jīng)典的HIA-Ⅰ類基因的5′端調(diào)控元件，包括增強(qiáng)子A、增強(qiáng)子B、干擾素反應(yīng)元件和α位點(diǎn)，目前在HLA-G啟動(dòng)子中均未發(fā)現(xiàn)。②等位基因的限制多態(tài)性。目前研究顯示HLA-G的限制多態(tài)性主要發(fā)生在5′上游調(diào)節(jié)區(qū)/啟動(dòng)子區(qū)和3′非翻譯區(qū)。該2個(gè)區(qū)域?qū)LA-G的表達(dá)調(diào)控作用極其重要，出現(xiàn)異常可能導(dǎo)致PE的發(fā)生[4]。

3′端非翻譯區(qū)多態(tài)性與HLA-G mRNA的穩(wěn)定性及HLA-G蛋白表達(dá)相關(guān)，國(guó)內(nèi)外已有眾多研究報(bào)道HLA-G 3′非翻譯區(qū)14 bp插入/缺失多態(tài)性與PE的相關(guān)性，有研究認(rèn)為其外顯子8中14 bp插入與PE發(fā)病相關(guān)[5]，但近期的多數(shù)研究并未發(fā)現(xiàn)14 bp插入/缺失與PE有關(guān)[6-9]。因PE是妊娠特有疾病，國(guó)內(nèi)的一項(xiàng)研究通過(guò)對(duì)母、子HLA-G 14 bp插入/缺失基因型分析發(fā)現(xiàn)，母子均為14 bp缺失純合子(-14 bp/-14 bp)，或者母親為14 bp插入/缺失(+14 bp/-14 bp)，其子為14 bp插入純合子(+14 bp/+14 bp)時(shí)PE的發(fā)生率會(huì)增高[10]；但國(guó)外的一項(xiàng)研究認(rèn)為母胎間HLA-G 14 bp基因型配伍與PE發(fā)生無(wú)相關(guān)性[8]；又因胎兒攜帶一半的父系基因，研究者發(fā)現(xiàn)父兒均為缺失純合子可以降低母親發(fā)生早發(fā)型重度PE的風(fēng)險(xiǎn)[11]。雖然研究結(jié)果存在爭(zhēng)議，但這為PE病因研究提供了新的方向。

國(guó)外研究發(fā)現(xiàn)HLA-G 3′端非翻譯區(qū)單核苷酸多態(tài)性復(fù)合體在PE患者胎盤中普遍存在，提示兩者間可能具有一定的相關(guān)性[12]，但國(guó)內(nèi)一項(xiàng)研究報(bào)道，母體外周血中HLA-G 3′端非翻譯區(qū)外顯子2與3中存在的5個(gè)單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)分布與重度PE無(wú)相關(guān)性[13]。目前對(duì)于5′端上游調(diào)節(jié)區(qū)/啟動(dòng)子區(qū)基因與PE的相關(guān)性研究較少，最近研究顯示HLA-G 5′端上游調(diào)節(jié)區(qū)+274位點(diǎn)和+289位點(diǎn)多態(tài)性可能與PE的易感性有關(guān)[14]；另有研究發(fā)現(xiàn)PE胎盤活檢組織中HLA-G 5′端啟動(dòng)子區(qū)DNA甲基化轉(zhuǎn)移酶1(調(diào)節(jié)基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化最主要的甲基化酶)表達(dá)水平較正常妊娠高，而啟動(dòng)子區(qū)甲基化將導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄過(guò)程受阻，使HLA-G蛋白表達(dá)水平降低，從而導(dǎo)致PE發(fā)生；而甲基化酶抑制劑可阻斷啟動(dòng)子區(qū)甲基化并使HLA-G蛋白表達(dá)水平增高[15]。這為未來(lái)臨床應(yīng)用甲基化酶抑制劑靶向預(yù)防及治療PE患者提供了理論基礎(chǔ)。

現(xiàn)有研究的爭(zhēng)議點(diǎn)可能在于研究的試驗(yàn)設(shè)備、樣本量、研究起止時(shí)間上的差異，并且研究對(duì)象存在一定的地域及種族差異，再者PE可以涉及多種器官系統(tǒng)而出現(xiàn)不同的臨床癥狀，所入選的孕婦病情輕重程度也存在一定差異，可能存在多種因素參與其發(fā)病過(guò)程，HLA-G基因的多態(tài)性是否為其獨(dú)立危險(xiǎn)因素尚需進(jìn)一步研究。

3 HLA-G特異性miRNA與PE的相關(guān)性

微小RNA (microRNA,miRNA)是長(zhǎng)度為17～22個(gè)核苷酸的單鏈非編碼RNA，HLA-G特異性的miRNAs可調(diào)控胎兒滋養(yǎng)細(xì)胞HLA-G表達(dá)。研究發(fā)現(xiàn)在子癇前期孕婦血清中有特異性的miRNA(miR-152)表達(dá)增強(qiáng)，而miR-152在正常妊娠孕婦胎盤組織中低表達(dá)[16，17]，推測(cè)miR-152可能通過(guò)抑制HLA-G基因轉(zhuǎn)錄參與PE的發(fā)生發(fā)展。此外，應(yīng)用miRNA芯片技術(shù)發(fā)現(xiàn)在缺氧狀態(tài)下miR-365表達(dá)顯著升高,并可通過(guò)與HLA-G 3′端非翻譯區(qū)特異位點(diǎn)結(jié)合抑制HLA-G表達(dá)[18]，揭示了缺氧導(dǎo)致PE病情向重度發(fā)展的機(jī)制。這均提示HLA-G特異性的miRNAs未來(lái)可作為子癇前期發(fā)病的預(yù)測(cè)因子。

4 HLA-G分子影響PE發(fā)病的可能機(jī)制

目前認(rèn)為子宮螺旋動(dòng)脈滋養(yǎng)細(xì)胞重鑄障，導(dǎo)致胎盤缺血、缺氧，釋放多種胎盤因子進(jìn)入母體血液循環(huán)，進(jìn)而導(dǎo)致系統(tǒng)性炎癥反應(yīng)激活及血管內(nèi)皮損傷為PE主要發(fā)病機(jī)制，但具體機(jī)制尚不明確?，F(xiàn)有研究已證實(shí)HLA-G分子在促進(jìn)滋養(yǎng)細(xì)胞侵襲、胎盤形成及子宮螺旋動(dòng)脈重鑄方面起重要作用[19]。眾多研究表明PE孕婦血液sHLA-G水平及胎盤組織HLA-G表達(dá)較正常孕婦均顯著降低[15]，且孕早期母體外周血中sHLA-G低水平與孕中晚期重度PE發(fā)生密切相關(guān)[20]，而外周血sHLA-G及胎盤組織HLA-G主要來(lái)源于胎兒滋養(yǎng)細(xì)胞，因此可推測(cè)，胎兒滋養(yǎng)細(xì)胞HLA-G分子的低表達(dá)是介導(dǎo)PE發(fā)生發(fā)展的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。

正常妊娠母體對(duì)胚胎是以Th2細(xì)胞介導(dǎo)的體液免疫為主，而HLA-G具有免疫趨化作用，可與蛻膜及外周單核細(xì)胞表面特異受體結(jié)合調(diào)節(jié)TNF-α、INF-γ、IL-4等細(xì)胞因子的釋放，與抗原提成細(xì)胞細(xì)胞表面受體結(jié)合刺激TGF-β、IL-10等免疫抑制性細(xì)胞因子分泌，誘導(dǎo)Th1/Th2平衡向Th2偏移，保護(hù)胚胎不被母體排斥，保證妊娠成功；而PE孕婦體內(nèi)HLA-G水平低表達(dá)對(duì)胚胎則是以Th1細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞免疫為主，導(dǎo)致滋養(yǎng)細(xì)胞免疫損傷加重，浸潤(rùn)能力下降，引發(fā)PE[21，22]。

正常妊娠中胎兒滋養(yǎng)細(xì)胞通過(guò)表達(dá)HLA-G抗原與蛻膜組織細(xì)胞表面特異性受體結(jié)合可觸發(fā)抑制或激活信號(hào)，限制母體蛻膜組織中的NK細(xì)胞、CD4+和CD8+T細(xì)胞以及B細(xì)胞潛在的有害的抗父系免疫反應(yīng)，從而保障滋養(yǎng)細(xì)胞能夠充分浸潤(rùn)到蛻膜組織中[23]；且滋養(yǎng)細(xì)胞分泌的sHLA-G5與自身KIR2DL4及ILT2受體結(jié)合,可刺激滋養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)一步侵入蛻膜，增強(qiáng)基質(zhì)金屬蛋白酶的表達(dá)，促進(jìn)子宮內(nèi)膜細(xì)胞外間質(zhì)重鑄，為胚胎著床及子宮螺旋動(dòng)脈重鑄提供條件，若sHLA-G5表達(dá)減少，可導(dǎo)致滋養(yǎng)細(xì)胞浸潤(rùn)能力受損，造成胎盤淺著床和子宮螺旋動(dòng)脈重鑄不足，血管阻力增大及胎盤灌注減少，從而引發(fā)PE的一系列癥狀[24]。

此外，HLA-G可通過(guò)胞啃機(jī)制(即細(xì)胞間通過(guò)接觸快速獲取胞膜片段或相關(guān)分子的現(xiàn)象)產(chǎn)生HLA-Gpos免疫細(xì)胞間接參與妊娠期的免疫調(diào)節(jié)。有研究表明，NK細(xì)胞、單核細(xì)胞、CD4+及CD8+T淋巴細(xì)胞均能通過(guò)胞啃機(jī)制從HLA-G陽(yáng)性抗原提呈細(xì)胞中獲得HLA-G蛋白，從而誘導(dǎo)母體對(duì)胎兒的免疫耐受，如果這一過(guò)程受阻，可能導(dǎo)致此類細(xì)胞攻擊胎兒滋養(yǎng)細(xì)胞，阻礙胚胎著床，導(dǎo)致PE發(fā)生。有試驗(yàn)通過(guò)檢測(cè)未妊娠女性、PE女性及健康妊娠女性外周血及蛻膜中的CD4+HLA-G+T細(xì)胞發(fā)現(xiàn)，與未妊娠對(duì)照組相比，妊娠組外周血及蛻膜中CD4+HLA-G+T細(xì)胞數(shù)量增加；與健康妊娠組相比，PE組CD4+HLA-G+T細(xì)胞的數(shù)量顯著下降[25]。另有研究顯示，PE的女性相對(duì)于正常妊娠女性，蛻膜中CD14+DC-SIGN+APCHLA-G+表達(dá)的比例及強(qiáng)度都有明顯下降[26]，提示PE孕婦蛻膜類細(xì)胞胞啃機(jī)制受阻，使其不能充分獲得HLA-G，從而導(dǎo)致PE發(fā)生。

5 展望

PE是一種多因素、多機(jī)制及多通路致病的疾病，其免疫因素已成為近年研究的熱點(diǎn)，其中以HLA-G與PE的相關(guān)性研究最多，但研究結(jié)果尚不一致，因此開(kāi)展大樣本的多種族、多地域HLA-G 基因型調(diào)查及其轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物HLA-G特異性miRNA、HLA-G蛋白在妊娠免疫調(diào)節(jié)等方面的研究，進(jìn)一步闡明 HLA-G與PE發(fā)病之間的關(guān)系，并探索其具體發(fā)病機(jī)制，從而采取有效干預(yù)措施，將對(duì)改善母嬰預(yù)后具有重要的臨床意義。