余甘子化學(xué)成分、藥理活性及質(zhì)量控制提升的研究進(jìn)展*

蘭 楊，姜 紅，張仕瑾，彭賢東，郭廷東△，唐志立

（1.四川省南充市中心醫(yī)院·川北醫(yī)學(xué)院第二臨床醫(yī)學(xué)院藥學(xué)部·個體化藥物治療南充市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，四川 南充637000；2.四川省成都市第五人民醫(yī)院藥學(xué)部，四川 成都611930）

余甘子為大戟科植物余甘子Phyllanthus emblicaL.的干燥成熟果實(shí)，是我國藏醫(yī)藥和印度傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)中的常用藥材。余甘子又名摩勒，《新修本草》記載余甘子主風(fēng)虛熱氣，而《本草綱目拾遺》記載其主補(bǔ)益、強(qiáng)氣力?，F(xiàn)代中醫(yī)藥認(rèn)為，其性涼，具有清熱涼血、消食健胃、生津止渴作用，目前已被開發(fā)為余甘子喉片，用于燥熱傷津引起的咽喉干燥疼痛?，F(xiàn)代研究表明，余甘子具有抗氧化、抑菌、抗炎、抗癌、抗腫瘤等多種生物活性，但目前對余甘子的質(zhì)量控制多以單一成分含量為指標(biāo)，不具有代表性。在此對余甘子化學(xué)成分、藥理活性機(jī)制進(jìn)行了歸納和總結(jié)，為其質(zhì)量控制提供參考。

1 化學(xué)成分

余甘子化學(xué)成分主要包括多酚類、鞣質(zhì)類、黃酮類、多糖類和三萜等。張?zhí)m珍等[1]應(yīng)用各種分離純化、理化和現(xiàn)代波譜法分離鑒定出余甘子中的11個化合物。羅維等[2]通過1D-核磁共振（NMR）、質(zhì)譜（MS）及紅外（IR）等光譜手段鑒定了18個化學(xué)成分。BHARATHI等[3]采用超高效液相色譜-紫外-質(zhì)譜（UHPLC-UV-MS）聯(lián)用法鑒定了余甘子中的單寧和三萜皂苷。

近年來，部分研究者逐漸關(guān)注余甘子的其他藥用部位，包括樹皮、葉和殼。CHAPHALKAR等[4]采用過氧化氫清除法和ABTS脫色法測定了余甘子樹皮中總酚、黃酮和單寧的含量，其含量較高，這使得余甘子樹皮具有較強(qiáng)的抗氧化活性。ZHANG等[5]從余甘子的葉和枝中分離鑒定出2種新的?；S烷酮苷、1種新的酚苷及22種已知化合物。TAHIR等[6]通過高效液相色譜-全波長（HPLC-DAD）法分析出余甘子葉中含有沒食子酸、蘆丁、山柰酸和咖啡酸等成分。LUO等[7]通過質(zhì)譜法和NMR鑒定了果殼中5種酚類物質(zhì)，化學(xué)成分分析結(jié)果顯示，余甘子樹皮、葉、殼與果實(shí)具有相似的有效成分，故樹皮和葉可被充分開發(fā)，實(shí)現(xiàn)資源的綜合利用。

2 藥理活性

2.1 抗氧化作用

抗氧化作用是余甘子主要的藥理活性，這一活性與其他藥理作用密切相關(guān)。余甘子中多種成分具有抗氧化活性。朱智蕓等[8]測定了余甘子中沒食子酸、柯里拉京、訶子鞣質(zhì)和鞣花酸這4種酚酸類成分的抗氧化活性，結(jié)果均表現(xiàn)出較強(qiáng)的抗氧化活性。ZHANG等[9]從余甘子的甲醇提取物中分離得到7種酚類，通過DPPH法、FRAP法和ABTS法測定，這7種酚類均表現(xiàn)出較強(qiáng)的抗氧化活性。王銳[10]采用體外化學(xué)模型研究余甘子降血糖和抗氧化活性，DPPH試驗(yàn)表明，余甘子多糖清除率總體上弱于維生素C，但在較高濃度時的清除作用與維生素C基本一致。LI等[11]通過沉淀純化法從余甘子中分離出1種新型的水溶性多糖，并通過多種方法測定了該多糖的抗氧化活性，結(jié)果顯示，其具有顯著的抗氧化能力。ZENG等[12]從余甘子果實(shí)中分離得到水溶性多糖，通過DPPH法和羥基自由基清除能力證實(shí)了該多糖具有良好的還原能力。

2.2 抗菌作用

余甘子作為天然的抗菌藥物，對多種細(xì)菌具有抑制作用。LIU等[13]分離出余甘子中的揮發(fā)油，并測定其抑菌活性，發(fā)現(xiàn)揮發(fā)油對革蘭陰性菌、革蘭陽性菌和3種病原菌均有抑制作用，余甘子水溶性多糖也具有抑菌作用[14]?；谟喔首拥囊志饔茫琈ASUM等[15]將余甘子提取物合成銀納米顆粒用于控制水稻的細(xì)菌性疾病。JAIN等[16]對比了6種植物對致齲細(xì)菌-變形鏈球菌的抑制作用，發(fā)現(xiàn)余甘子水提物和生姜醇提物的抑菌活性最高，可作為預(yù)防齲齒的替代藥物，也可作為漱口水，既安全又經(jīng)濟(jì)。GAO等[17]將余甘子提取物做成口香糖，咀嚼口香糖可刺激唾液的分泌，還可顯著降低細(xì)菌總數(shù)和變形鏈球菌的唾液水平，用于改善口腔衛(wèi)生。

2.3 抗炎作用

余甘子中多酚和黃酮類成分均具有抗炎活性，對多種炎性因子的抑制作用有顯著的劑量依賴性和選擇性，如余甘子提取物可有效抑制環(huán)氧合酶（COX）-2、誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶（iNOS）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細(xì)胞介素（IL）-1b和IL-6的表達(dá)，但不能抑制COX-1的表達(dá)。體內(nèi)試驗(yàn)證明，余甘子提取物以劑量依賴性的方式抑制角叉菜膠誘導(dǎo)的大鼠足腫脹[18-19]。對于不同炎癥模型，余甘子的不同提取液的抗炎效果有一定差異。李偉等[20]研究了余甘子不同溶劑提取物對脂多糖（LPS）誘導(dǎo)的炎癥模型的抗炎活性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)余甘子乙醇提取物具有最佳的抗炎效果。岑志芳等[21]采用尿酸鈉誘導(dǎo)大鼠痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎模型，對比了余甘子多種提取部位的抗炎作用，結(jié)果表明正丁醇部位和乙酸乙酯部位均具有明顯的抗炎鎮(zhèn)痛作用。

2.4 抗腫瘤作用

近年來，余甘子被發(fā)現(xiàn)具有潛在的抗腫瘤作用，目前已發(fā)現(xiàn)其可抑制多種腫瘤細(xì)胞，如肝癌細(xì)胞、宮頸癌細(xì)胞、直腸癌細(xì)胞、乳腺癌細(xì)胞、肺癌細(xì)胞和卵巢癌細(xì)胞等[22]。目前關(guān)于余甘子中多酚物質(zhì)抗腫瘤活性的研究較多，ZHU等[23]從余甘子提取物中分離出多酚物質(zhì)，并測定其對宮頸癌細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期、凋亡的影響，結(jié)果表明，余甘子中的多酚可抑制宮頸癌細(xì)胞的增殖，促進(jìn)細(xì)胞凋亡；沒食子酸、鞣花酸和柯里拉京均對多種腫瘤細(xì)胞表現(xiàn)出抑制作用[24-28]。余甘子可通過抑制AP-1和致癌病毒基因的靶向轉(zhuǎn)錄顯示其對乳腺癌細(xì)胞的抗癌活性[29]。

2.5 保肝作用

余甘子對酒精性和非酒精性肝炎均有保護(hù)作用。對于非酒精性肝炎，余甘子可顯著降低肝臟脂質(zhì)過氧化和細(xì)胞色素P4502E1（CYP2E1）、TNF-α 和IL-1β 的mRNA表達(dá)，降低血清中天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）和丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）濃度[30]。對于酒精性肝炎，余甘子可通過乙醇代謝酶活性調(diào)節(jié)、脂代謝調(diào)控、抗氧化損傷、抗炎和抗細(xì)胞凋亡等多個途徑來保護(hù)肝損傷[31]。

2.6 其他作用

長期服用余甘子可降低體質(zhì)量及胰島素，調(diào)節(jié)血脂等，具有抗肥胖的潛力[32]。同時，余甘子可降低超重和一級肥胖成人患心血管疾病的風(fēng)險(xiǎn)[33]。此外，余甘子能上調(diào)PI3K/Akt/GSK3β/β連環(huán)蛋白的心臟保護(hù)通路，從而在缺血再灌注損傷過程中保護(hù)心肌細(xì)胞[34]。

3 質(zhì)量控制現(xiàn)狀

近年來，多成分含量測定、一測多評、指紋圖譜、代謝組學(xué)、質(zhì)量標(biāo)志物等方法逐漸應(yīng)用到中藥中，中藥質(zhì)量控制得到了一定提升[35-38]。2015年版《中國藥典（一部）》中，采用沒食子酸作為對照品對余甘子進(jìn)行含量測定，但單一成分難以代表余甘子的復(fù)雜體系。有研究發(fā)現(xiàn)，余甘子加熱回流過程中所含的水解鞣質(zhì)會受熱水解為沒食子酸，進(jìn)而影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性[39]，故單一測定沒食子酸的含量來表征余甘子的質(zhì)量具有很大缺陷。張文莉等[40]采用HPLC測定余甘子中沒食子酸和鞣花酸的含量。李琦等[41]建立了同時測定余甘子沒食子酸、沒食子兒茶素、柯里拉京、訶子聯(lián)苯酸和鞣花酸含量的HPLC法。趙生玉等[42]建立了同時測定余甘子中5種成分（沒食子酸、沒食子兒茶素、表兒茶素、柯里拉京和鞣花酸）含量的方法，為余甘子質(zhì)量控制提供了參考。唐仕榮等[43]以不同產(chǎn)地的余甘子為原料，建立HPLC指紋圖譜，提取33個共有峰，完善了余甘子質(zhì)量控制的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。目前，余甘子的質(zhì)量控制得到了提高，可為含余甘子的復(fù)方制劑的質(zhì)量控制提供技術(shù)支持。此外，還可將代謝組學(xué)、質(zhì)量標(biāo)志物等應(yīng)用到余甘子的研究中，進(jìn)一步完善余甘子的質(zhì)量控制。

4 展望

余甘子的傳統(tǒng)用藥部位為成熟果實(shí)，近年來，隨著對其他藥用部位的研究發(fā)現(xiàn)，其化學(xué)成分與果實(shí)相似，且樹皮有保肝作用，葉有抗氧化活性和改善肺纖維化的作用，表明其他藥用部分也具有較高的藥用研究價值。后續(xù)研究中可借鑒余甘子果實(shí)的研究模式，加深對其他藥用部分化學(xué)成分、藥理活性的研究，開發(fā)更多的中藥產(chǎn)品，實(shí)現(xiàn)余甘子資源的綜合利用。

余甘子常與訶子和毛訶子配伍使用，是藏藥方中常見的基礎(chǔ)方，習(xí)稱“大三果”，但這3味藥材的質(zhì)量控制中僅余甘子以沒食子酸為對照品進(jìn)行了含量測定，而訶子和毛訶子無含量測定項(xiàng)。2015年版《中國藥典（一部）》收載的成方制劑藏族驗(yàn)方二十五味松石丸、二十五味珍珠丸、十五味沉香丸和催湯丸均包含這3種藥材，其中僅二十五味珍珠丸有對西紅花苷-Ⅰ的含量測定項(xiàng)，而其他3種制劑均無含量測定項(xiàng)。隨著分析手段和分析方法的不斷提高，對余甘子的研究越加深入，含量測定由單一成分發(fā)展到多成分同時測定，再發(fā)展到指紋圖譜鑒別，一方面可完善余甘子的質(zhì)量控制，另一方面余甘子含量測定和藥理機(jī)制的研究可彌補(bǔ)訶子和毛訶子無含量測定項(xiàng)的不足，可為成方制劑含量測定提供參考。