珠芽景天黃酮類化學(xué)成分研究*

雷 艷，姚成芬，馬 雪，聶雨杉，楊 暢，李月婷，李勇軍△

（1. 貴州醫(yī)科大學(xué)民族藥與中藥開發(fā)應(yīng)用教育部工程研究中心·省部共建藥用植物功效與利用國家重點實驗室，貴州 貴陽 550004； 2. 貴州醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，貴州 貴陽 550004； 3. 貴州醫(yī)科大學(xué)貴州省藥物制劑重點實驗室，貴州 貴陽 550004）

珠芽景天為景天科景天屬植物珠芽景天Sedum bulbiferum Makino. 的干燥全草，具有消炎解毒、散寒理氣等功效，收載于《中藥大辭典》［1］和《貴州植物志》［2］。珠芽景天又名零余子景天、珠芽半支、小箭草等，廣泛分布于廣東、廣西、湖南、四川、貴州等地，主產(chǎn)于貴州道真、畢節(jié)、清鎮(zhèn)等地，是貴州省少數(shù)民族民間常用藥材?，F(xiàn)代研究表明，珠芽景天所含化學(xué)成分主要有黃酮類、生物堿等［3-4］。本研究中對其化學(xué)成分進行了系統(tǒng)分析，從珠芽景天70% 乙醇提取物中分離得到21 個黃酮類化合物，其中化合物槲皮素-7- O-α- L-鼠李糖苷（1）、槲皮素-3- O-α- L-鼠李糖-7- O-α-L-鼠李糖苷（2）、木犀草苷（3）、柯伊利素-7- O-葡萄糖苷（4）、異鼠李素-3- O-β- D-葡萄糖-7-O-α- L-鼠李糖苷（5）、當(dāng)藥黃素（6）為首次從該植物分離得到?，F(xiàn)報道如下。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

ACQUITY-TQD 型質(zhì)譜儀（美國Waters 公司）；JEOL-ECS-400 MHz 型核磁共振波譜儀（日本電子株式會社）；BUCHI R-200 型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（瑞士Buchi 公司）；D-101 型大孔樹脂、柱層析硅膠及硅膠GF254預(yù)制板（青島海洋化工有限公司）；Sephadex LH-20 色譜柱（瑞士Pharmacia Biotech 公司）；Toyopearl HW-40C色譜柱（日本東曹株式會社）。

1.2 試藥

珠芽景天藥材采自于貴州省清鎮(zhèn)市，經(jīng)貴陽中醫(yī)學(xué)院孫慶文教授鑒定為正品，標(biāo)本（標(biāo)本號為20160605）保存于貴州醫(yī)科大學(xué)貴州省藥物制劑重點實驗室。

2 方法

2.1 提取與分離

稱取珠芽景天干燥全草5 kg，用70% 乙醇回流提取2 次，合并濾液，減壓回收乙醇后經(jīng)D101 型大孔吸附樹脂吸附，依次用水、50% 乙醇、95% 乙醇梯度洗脫，合并醇洗脫段（約110 g），經(jīng)正相硅膠柱色譜分離，以氯仿-甲醇梯度洗脫，薄層色譜（TLC）檢測合并，得到10個組分（Fr.1～Fr.10）。其中，F(xiàn)r.7 經(jīng)硅膠柱色譜，氯仿甲醇（15 ∶1～6 ∶1）洗脫，TLC 法檢測合并，得到3 個組分（Fr.7.1，F(xiàn)r.7.2，F(xiàn)r.7.3）。Fr.7.1 及Fr.7.2 經(jīng)Toyopearl HW-40C，Toyopearl HW-40F，Sephadex LH-20等色譜柱及不同溶劑反復(fù)洗脫得化合物4（8 mg）、化合物6（100 mg）；Fr.8 經(jīng)硅膠色譜柱，乙酸乙酯-甲醇（25 ∶1，V/ V）洗脫得2 個組分Fr.8.1 和Fr.8.3。各組分經(jīng)反復(fù)硅膠、凝膠Sephadex LH-20、反相ODS 色譜柱（30%～50%甲醇）色譜柱，得化合物1（9 mg）、化合物3（80 mg）、化合物5（3 mg）；Fr.9 經(jīng)硅膠色譜柱，氯仿-甲醇（5 ∶1～2 ∶1，V/ V）洗脫，TLC 法檢測合并，得3 個組分（Fr.9.1，F(xiàn)r.9.2，F(xiàn)r.9.3），F(xiàn)r.9.2 經(jīng)反復(fù)硅膠、Sephadex LH-20、Toyopearl HW-40F 色譜柱分離純化得化合物2（108 mg）。

2.2 結(jié)構(gòu)鑒定

2.2.1 化合物1

C21H20O11。黃色粉末。電噴霧電離質(zhì)譜（ESI-MS）m/ z：449［M+H］+，447［M-H］-；1H-NMR （DMSOd6，400 MHz）δ：6.40 （1H，d，J=2.0 Hz，H-6），6.77（1H，d，J=1.6 Hz，H-8），7.71（1H，d，J=2.2 Hz，H-2′），6.88 （1H，d，J=8.4 Hz，H-5′），7.58 （1H，d，J=8.4 Hz，H-6′），5.53 （1H，s，H-1″），1.12 （3H，d，J=6.0 Hz，H-6″）；13C-NMR （DMSO-d6，100 MHz）δ：147.9 （C-2），136.2 （C-3），176.0 （C-4），160.4（C-5），98.9 （C-6），161.4 （C-7），94.2 （C-8），155.7 （C-9），104.7 （C-10），121.8 （C-1′），115.6（C-2′），145.1 （C-3′），147.5 （C-4′），115.2 （C-5′），120.2 （C-6′），98.4 （C-1″），70.1 （C-2″），70.3（C-3″），71.6（C-4″），69.9（C-5″），18.0（C-6″）。以上數(shù)據(jù)與文獻［5］報道基本一致，故鑒定化合物1 為槲皮素-7- O-α- L-吡喃鼠李糖苷。

2.2.2 化合物2

C27H30O15。黃色粉末。ESI-MS m/ z：595［M+H］+，593［M-H］-；1H-NMR （CD3OD，400 MHz）δ：6.43（1H，d，J=2.0 Hz，H-6），6.68（1H，s，H-8），7.34（1H，s，H-2′），6.90 （1H，d，J=8.0 Hz，H-5′），7.31（1H，d，J=8.4 Hz，H-6′），5.36（1H，s，H-1″），0.94（3H，d，J=5.6 Hz，H-6″），5.54（1H，s，H-1?），1.26（3H，d，J = 6.0 Hz，H- 6?）；13C- NMR （CD3OD，100 MHz）δ：158.0 （C-2），136.5 （C-3），179.7 （C-4），162.9 （C-5），99.8 （C-6），163.5 （C-7），95.5（C-8），159.7（C-9），107.5（C-10），123.0（C-1′），116.9 （C-2′），146.4 （C-3′），150.0 （C-4′），116.4（C-5′），122.7（C-6′），100.5（C-1″），72.1（C-2″），71.9 （C-3″），73.2 （C-4″），71.7 （C-5″），17.7 （C-6″），103.5 （C-1″′），72.1 （C-2″′），71.9 （C-3″′），73.6 （C-4″′），71.3 （C-5″′），18.1 （C-6″′）。以上數(shù)據(jù)與文獻［6］報道基本一致，故鑒定化合物2 為槲皮素-3- O-α- L-鼠李糖-7- O-α- L-鼠李糖苷。

2.2.3 化合物3

C21H20O11。黃色粉末。ESI-MS m/ z：449［M+H］+，447［M-H］-；1H-NMR（DMSO-d6，400 MHz）δ：6.74（1H，s，H-3），6.43 （1H，d，J=2.0 Hz，H-6），6.77（1H，d，J=2.4 Hz，H-8），7.41（1H，d，J=2.4 Hz，H-2′），6.89（1H，d，J=8.4 Hz，H-5′），7.43（1H，dd，J=8.0，2.4 Hz，H-6′），5.07 （1H，d，J=7.6 Hz，H-1″）；13C-NMR （DMSO-d6，100 MHz）δ：162.9 （C-2），103.2 （C-3），181.9 （C-4），156，.9（C-5），99.5（C-6），164.5 （C-7），94.7 （C-8），161.1 （C-9），105.3（C-10），119.2 （C-1′），113.6 （C-2′），149.9（C-3′），145.8（C-4′），116.0（C-5′），121.4（C-6′），99.8（C-1″），73.1（C-2″），76.4（C-3″），69.5（C-4″），77.2（C-5″），60.6（C-6″）。以上數(shù)據(jù)與文獻［7］報道基本一致，故鑒定化合物3 為木犀草苷。

2.2.4 化合物4

C22H22O11。淺黃色粉末。ESI-MS m/ z：463［M+H］+；1H-NMR（DMSO-d6，400 MHz）δ：6.99 （1H，s，H-3），6.44（1H，d，J=2.4 Hz，H-6），6.86 （1H，d，J=2.4 Hz，H-8），7.60 （1H，s，H-2′），6.93 （1H，d，J=8.8 Hz，H-5′），7.58 （1H，d，J=7.6 Hz，H-6′），5.41 （1H，d，J=2.4 Hz，H-1″），3.88 （3H，s，3′-OCH3）；13C-NMR（DMSO-d6，100 MHz）δ：163.0（C-2），105.3 （C-3），182.1 （C-4），161.1 （C-5），99.5 （C-6），164.2（C-7），95.0 （C-8），156.9 （C-9），103.4 （C-10），120.5 （C-1′），110.3 （C-2′），151.0 （C-3′），148.1（C-4′），115.8（C-5′），121.3（C-6′），100.0（C-1″），73.1 （C-2″），76.4 （C-3″），69.6 （C-4″），77.3 （C-5″），60.6 （C-6″），56.0 （3′-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻［8］報道基本一致，故鑒定化合物4 為柯伊利素-7-O-葡萄糖苷。

2.2.5 化合物5

C28H32O16。黃色粉末。ESI-MS m/ z：625［M+H］+，623［M-H］-；1H-NMR （DMSO-d6，400 MHz）δ：9.83（1H，brs，5-OH），6.45（1H，s，H-6），6.84（1H，s，H-8），7.94 （1H，s，H-2′），3.84 （3H，s，3′-OCH3），6.91（1H，d，J=8.8 Hz，H-5′），7.55 （1H，d，J=8.8 Hz，H-6′），5.55 （1H，s，H-1″），5.55 （1H，s，H-1?），1.10（3H，d，J=5.2 Hz，H-6?）；13C-NMR（DMSO-d6，100 MHz）δ：156.8（C-2），133.3（C-3），177.6（C-4），160.9（C-5），99.4（C-6），161.6（C-7），94.6（C-8），156.0 （C-9），105.7 （C-10），120.9 （C-1′），113.4（C-2′），149.6（C-3′），146.9（C-4′），115.2（C-5′），122.3 （C-6′），100.7 （C-1″），74.3 （C-2″），76.4（C-3″），70.0 （C-4″），77.5 （C-5″），60.6 （C-6″），98.3 （C-1?），69.8 （C-2?），70.2 （C-3?），71.6（C-4?），69.8 （C-5?），17.9 （C-6?），55.7 （3′-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻［9］報道基本一致，故鑒定化合物5 為異鼠李素-3- O-β- D-葡萄糖-7- Oα- L-鼠李糖苷。

2.2.6 化合物6

C22H22O10。黃 色 無 定 形 粉 末。ESI-MS m/ z：447［M + H］+，445 ［M- H］-；1H- NMR （DMSO- d6，400 MHz，旋阻異構(gòu)引起的信號分裂）δ：6.83/6.82（1H，s，H-3），6.87/6.85（1H，s，H-8），7.97（2H，d，J=8.8 Hz，H-2′，6′），6.93 （2H，d，J =8.8 Hz，H-3′，5′），3.88/3.85 （3H，s，7-OCH3）；13C-NMR（DMSOd6，100 MHz，旋阻異構(gòu)引起的信號分裂）δ：163.9/163.8（C-2），103.1 （C-3），182.4/182.0 （C-4），160.4/159.6 （C-5），109.7/109.6 （C-6），165.0 （C-7），91.1/90.3 （C-8），156.9/156.8 （C-9），104.7/104.2 （C-10），121.0 （C-1′），128.6 （C-2′，6′），116.1 （C-3′，5′），161.4 （C-4′），71.0 （C-1″），72.9/72.7 （C-2″），79.2/79.1 （C-3″），70.3/69.7（C-4″），82.0/1.8 （C-5″），61.8 （C-6″），56.6/56.3（7-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻［10］報道基本一致，故鑒定化合物6 為當(dāng)藥黃素。

3 討論

景天屬植物在全球有470 余種，我國境內(nèi)有150 余種。珠芽景天在我國分布較廣泛。黃酮類化合物在景天屬植物中廣泛存在。本研究中從珠芽景天中提取分離得到21 個黃酮類化合物，其中6 個為該植物中首次分離得到，其余15 個化合物分別為山柰酚［11］、山柰酚-3-O-α- L-鼠李糖苷［12］、山柰酚-3- O-β- D-葡萄糖苷［13］、山柰酚-3- O-α-L-鼠李糖苷-7- Oα- L-鼠李糖苷［14］、山柰酚-3- O-β- D-吡喃木糖-（1 →2）-α-L-吡喃鼠李糖苷［15］、山柰酚-3-O-β- D-吡喃葡萄糖-7- O-α-L-吡喃鼠李糖苷［16］、山柰酚-3- O-（6′′-乙?；?β- D-葡萄糖）-7- O-α- L-鼠李糖苷［17］、山柰酚-3- O-β- D-吡喃葡萄糖-（1 →2）-α- L-吡喃葡萄糖-7- Oα- L-吡喃鼠李糖苷［18］、山柰酚-3- O-β-D-吡喃木糖-（1 →2）-α- L-吡喃鼠李糖-7- O-α- L-吡喃鼠李糖苷［19］、山柰酚-3- O-（2-β- D-葡萄糖基）-α-L-鼠李糖基-7- O-α- L-鼠李糖苷［20］、槲皮素-3- O-β- D-葡萄糖-7- O-α- L-鼠李糖 苷［21］、Bulbiferumoside Ⅴ［3］、Bulbiferumoside Ⅱ［3］、Bulbiferumoside Ⅵ［3］、山柰酚-3- O-（6-香豆?；?β- D-葡萄糖-（1 →2）-β- D-葡萄糖-7- O-α-L-鼠李糖苷［22］。本研究結(jié)果可為珠芽景天的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)及質(zhì)量控制研究奠定基礎(chǔ)，并為景天屬其他植物的研究和開發(fā)利用提供參考。