腸道病毒71型感染手足口病發(fā)病機(jī)制的研究

王春榮

王春榮,濟(jì)南市疾病預(yù)防控制中心病毒性疾病檢驗(yàn)所 山東省濟(jì)南市250021

核心提要：本文從腸道病毒71型(enterovirus 71,EV71)基因重組和突變、宿主基因及受體位點(diǎn)等方面探討了EV71感染手足口病(hand-foot-mouth disease,HFMD)的影響因素,并通過(guò)EV71感染模型探究HFMD的發(fā)病機(jī)制,闡明EV71疫苗研究中存在的問(wèn)題,為疾病的防控、臨床治療和疫苗研究提供參考.

0 引言

腸道病毒71型(enterovirus 71,EV71)是引起手足口病(hand-foot-mouth disease,HFMD)的主要病原體之一.EV71感染以5歲以下的嬰幼兒為主,引起的HFMD多為自限性,但有些感染可引起嚴(yán)重的神經(jīng)系統(tǒng)疾病,如無(wú)菌性腦膜炎、腦干腦炎和脊髓灰質(zhì)炎樣的麻痹性疾病,甚至死亡[1-3],已引起高度關(guān)注.目前尚無(wú)有效的EV71治療方法.

EV71屬小RNA病毒科腸道病毒屬,基因組為單股正鏈RNA,長(zhǎng)度約為7.4 kb.基因組兩端為5’和3’非編碼區(qū)(untranslated region,UTR),中間為連續(xù)的開放閱讀框,編碼含有約2194個(gè)氨基酸的多聚蛋白(圖1)[4],依據(jù)VP1核苷酸序列的差異,可將EV71分為A、B、C 3個(gè)基因型[5].目前EV71感染HFMD的發(fā)病機(jī)制仍未明確,病毒基因結(jié)構(gòu)與保證其生存、循環(huán)和逃避免疫等因素之間的關(guān)系尚不清楚.本文就EV71病毒和宿主相互作用機(jī)制的影響因素進(jìn)行概述,通過(guò)EV71感染動(dòng)物模型的研究探討HFMD的發(fā)病機(jī)制,為HFMD的防控、開發(fā)治療EV71的新型藥物或有效疫苗提供參考.

1 EV71基因重組與突變

1962年,有學(xué)者在脊髓灰質(zhì)炎病毒研究中報(bào)告了第一例RNA重組,此后許多研究[6,7]表明重組在腸道病毒進(jìn)化中具有重要意義并經(jīng)常發(fā)生.通過(guò)種內(nèi)和種間50個(gè)非翻譯區(qū)域的重組,腸道病毒的進(jìn)化和演變也已被證實(shí)[8].以往研究顯示,當(dāng)從嚴(yán)重HFMD患者分離的EV71亞基因型C4毒株與從輕度患者分離的毒株進(jìn)行比較時(shí),大多數(shù)突變位于50-NTR和VP1區(qū)域,有的僅在VP1中觀察到10個(gè)突變[9-12].然而,當(dāng)將2株EV71亞基因型C4a與C4進(jìn)行比較時(shí),突變幾乎跨越了整個(gè)基因組,從50-NTR到30-NTR[13,14].通過(guò)量化每一個(gè)突變基因所賦予的毒力程度來(lái)研究這些毒株的毒力,可以更好地了解它們究竟如何發(fā)揮作用,這將是非常有說(shuō)服力的.

有趣的是,當(dāng)對(duì)2000年新加坡嚴(yán)重HFMD暴發(fā)中分離出的致命EV71株進(jìn)行分析時(shí),發(fā)現(xiàn)它與非致命株僅在核苷酸5262處有所不同：致命株在基因組的5262位攜帶一個(gè)蘇氨酸,而非致命株中該 位置為丙氨酸[15].為了鑒定這個(gè)位置的蘇氨酸是否導(dǎo)致了該毒株的致死性,Yee等[16]通過(guò)核苷酸的定點(diǎn)誘變對(duì)致命株(C41)和非致命株(C10)的毒力進(jìn)行了量化；與致命株相比,5262位(A5262G)的突變導(dǎo)致非致命株RNA拷貝數(shù)減少75%,斑塊形成能力降低90%.

為了進(jìn)一步評(píng)估EV71亞基因型B4株基因組的特異性突變對(duì)毒力的影響,Yee等[16]在其基因組多位點(diǎn)(158、475、486和487)誘導(dǎo)突變并缺失50-NTR區(qū)域475-486核苷酸部位的11個(gè)堿基對(duì),結(jié)果顯示突變體475(C475T)和缺失體PD(50-NTR中475到486)表現(xiàn)出明顯的低細(xì)胞病變效應(yīng)和極低的RNA拷貝數(shù)；然而,對(duì)RNA拷貝數(shù)的分析表明,突變體A486G在RD細(xì)胞中仍能產(chǎn)生高水平的RNA,而突變體G487A在RD細(xì)胞中的拷貝數(shù)降低.這些數(shù)據(jù)為EV71亞基因型B4株毒力的影響因素提供了佐證.

以往研究表明,國(guó)內(nèi)分離的致命和非致命毒株之間存在氨基酸差異[10,14,17,18].這是否意味著某些毒力較高的毒株能夠引起大規(guī)模的疫情爆發(fā)?然而,EV71病毒每次復(fù)制時(shí)出現(xiàn)錯(cuò)誤的可能性很大,這也提出了另一個(gè)問(wèn)題,即單個(gè)基因突變是否真是致死的根本原因,或者更確切地說(shuō),攜帶多個(gè)氨基酸替換的突變?nèi)后w是否增加了病毒種群的適應(yīng)性,從而賦予其更高的致病性？在正常情況下,病毒基因組復(fù)制并產(chǎn)生數(shù)百種子代病毒,這些子代病毒可能因一個(gè)位置的氨基酸替代而有所不同,在接下來(lái)的幾輪復(fù)制中,可能產(chǎn)生更復(fù)雜的突變體而與原始序列有顯著差異,這些突變體的集合還可能形成一個(gè)準(zhǔn)物種[18].關(guān)于重組和/或自發(fā)突變導(dǎo)致的EV71致命毒株是否是HFMD暴發(fā)的唯一理由,或是否可能存在具有不同毒力的不同準(zhǔn)種之間的合作,這些問(wèn)題都有待證實(shí).

在以小鼠為感染模型的研究中,發(fā)現(xiàn)EV71 VP1的145位氨基酸或VP2的149位氨基酸的點(diǎn)突變是新生小鼠能否成功感染EV71適應(yīng)株的決定性因素[20].除編碼序列外,非編碼區(qū)域序列如內(nèi)部核糖體進(jìn)入位點(diǎn)(internal ribosome entry site,IRES)的突變也影響EV71對(duì)小鼠的感染毒性[9].而感染組織傾向性也可能與病毒序列變異有關(guān),從呼吸道、胃腸道、中樞神經(jīng)系統(tǒng)和血液標(biāo)本中分離的EV71序列的比較顯示,不同來(lái)源的EV71核苷酸存在差異.進(jìn)一步的研究表明,EV71 VP1的97位氨基酸與病毒的嗜神經(jīng)組織特性有關(guān)[21].近期研究顯示,EV71 VP1突變體L97R被認(rèn)為更具毒性,可能是因?yàn)樗芨玫嘏c硫酸肝素結(jié)合[22],而硫酸肝素是許多病毒(包括EV71)的常見附著受體[23].與此相反的是,VP1突變體145G與硫酸肝素的結(jié)合比突變體145E更好,其神經(jīng)毒力卻被認(rèn)為比后者小[24],可能是因?yàn)榱蛩岣嗡貎?yōu)先吸附在大量非靶細(xì)胞上,導(dǎo)致突變體VP1-145G的捕獲衰減.但EV71 VP1的硫酸肝素結(jié)合特性與病毒毒力是否呈正相關(guān)或負(fù)相關(guān),目前并沒(méi)有確切結(jié)論.

圖1 腸道病毒71型基因組結(jié)構(gòu)[4].

2 宿主基因

同種同亞型的EV71病毒在不同的宿主會(huì)產(chǎn)生不同的臨床癥狀,地區(qū)分布不同臨床表現(xiàn)也不同[25],這除了與病毒的毒力差別有關(guān)外,還可能決定于不同的宿主對(duì)病毒的反應(yīng)不同.人類白細(xì)胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)基因是一種免疫相關(guān)基因,在亞洲人中多見,表型頻率分布可達(dá)17%-35%,而在白人中少見(表型頻率分布僅0%-1%).據(jù)此,中國(guó)臺(tái)灣學(xué)者通過(guò)病例對(duì)照研究,發(fā)現(xiàn)HLA-A33基因與病毒的易感性相關(guān),并發(fā)現(xiàn)HLA-A2基因與肺水腫的發(fā)生相關(guān)[26].根據(jù)該基因在不同人群分布的差異或許可以解釋在過(guò)去為什么EV71多在中國(guó)臺(tái)灣、馬來(lái)西亞以及中國(guó)內(nèi)地、日本等亞太地區(qū)爆發(fā).細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞抗原4(cytotoxic T lymphocyte antigen 4,CTLA-4)是T細(xì)胞毒性和耐受性的重要調(diào)節(jié)因子,其多態(tài)性與EV71感染兒童腦炎有關(guān)[27].其他遺傳多態(tài)性,如腫瘤壞死因子和干擾素受體1[28,29],在EV71患者中也被發(fā)現(xiàn)與疾病嚴(yán)重程度相關(guān).

EV71所致HFMD,不同個(gè)體的臨床表型復(fù)雜多樣,這除了與病毒因素有關(guān)外,更重要的是由病毒和宿主的相互作用決定的,尤其是不同個(gè)體對(duì)病毒發(fā)生的免疫反應(yīng)不同.EV71感染首先通過(guò)與宿主細(xì)胞表面的特異性受體結(jié)合而吸附于宿主細(xì)胞表面,然后進(jìn)入宿主細(xì)胞并將病毒核酸釋放入細(xì)胞進(jìn)行繁殖擴(kuò)增,屬于細(xì)胞內(nèi)感染.與體液免疫功能比較,細(xì)胞免疫與非體液免疫功能對(duì)EV71感染患兒的影響更大[30,31].在免疫應(yīng)答過(guò)程中,眾多細(xì)胞因子在機(jī)體內(nèi)通過(guò)旁分泌、自分泌或內(nèi)分泌等方式發(fā)揮作用,具有多效性、重疊性、拮抗性、協(xié)同性等多種生理特性,形成了十分復(fù)雜的細(xì)胞因子調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)[3],而宿主的遺傳因素通過(guò)控制某些細(xì)胞因子的產(chǎn)量或反應(yīng)性調(diào)控免疫狀態(tài).

3 宿主受體位點(diǎn)

宿主細(xì)胞表面的受體在病毒感染和侵入機(jī)體的過(guò)程中發(fā)揮關(guān)鍵性作用,決定了病毒的宿主和組織嗜性.目前報(bào)道的較為明確的EV71受體包括溶酶體整合膜蛋白2(lysosomal integral membrane protein 2,SCARB2)和P選擇素糖蛋白配體1(P-selectin glycoprotein ligand 1,PSGLl).SCARB2是一種雙鏈跨膜蛋白,主要分布于溶酶體及基質(zhì),參與細(xì)胞膜運(yùn)輸、內(nèi)含體和溶酶體的重組等過(guò)程.EV71可通過(guò)VPl區(qū)結(jié)合游離的SCARB2受體而進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),這個(gè)過(guò)程能被SCARB2的抗體所抑制[32].此外,SCARB2受體蛋白的表達(dá)能使那些對(duì)EV71不易感的細(xì)胞變得有利于病毒的繁殖[33].Chen等[34]研究證實(shí),EV71通過(guò)其五聚體周圍的“口袋”區(qū)與SCARB2結(jié)合使病毒顆粒構(gòu)象改變,導(dǎo)致病毒釋放基因組RNA完成感染過(guò)程.PSGLl主要存在于白細(xì)胞表面,在炎癥早期與EV71結(jié)合引起炎性因子的釋放[35].也有研究發(fā)現(xiàn),Toll樣受體作為重要的病原模式識(shí)別受體能夠識(shí)別EV71,與宿主抵抗病毒感染和炎性反應(yīng)等有直接關(guān)系,可能參與介導(dǎo)EV71感染所致混合性拮抗反應(yīng)綜合征[36],另有研究報(bào)告了幾種EV71的替代受體[23,37,38].

4 EV71感染模型

4.1 體外系統(tǒng) 最常見的EV71感染細(xì)胞系是橫紋肌肉瘤起源的人惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞(rhabdomyosarcoma,RD)細(xì)胞系[39].這種RD細(xì)胞株能產(chǎn)生大量的病毒顆粒,因此常被用于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)[40]和病毒結(jié)構(gòu)研究[41]中EV71的擴(kuò)增.除RD細(xì)胞外,用于脊髓灰質(zhì)炎病毒感染的各種細(xì)胞株,如HELA和HEK293,也易受EV71感染和轉(zhuǎn)染[42,43].這些細(xì)胞系常被用作病毒蛋白功能研究的平臺(tái).一些神經(jīng)細(xì)胞系,包括sk-n-sh、nsc-34和sf268,已被用于研究宿主對(duì)EV71的反應(yīng)[44]、系統(tǒng)發(fā)育分析[45]和抗病毒藥物鑒定[46].

除RD細(xì)胞外,許多細(xì)胞系被用于EV71分子病毒學(xué)、病毒-宿主相互作用或藥物篩選的研究,如THP-1和人PBMC被用于研究EV71感染的先天性免疫[43].到目前為止,RD細(xì)胞系似乎是文獻(xiàn)中最常用的金標(biāo)準(zhǔn),部分原因可能是它具有不同EV71基因型的高產(chǎn)率[47].隨著越來(lái)越多的實(shí)驗(yàn)室使用相同的RD細(xì)胞系,未來(lái)更容易交叉比較來(lái)自不同實(shí)驗(yàn)室的結(jié)果.由于這些細(xì)胞系模型在某種程度上與人類自然感染相似,因此還需要另一種方法來(lái)驗(yàn)證通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)獲得的發(fā)現(xiàn),在這方面,動(dòng)物模型可以為研究者對(duì)EV71體內(nèi)感染和發(fā)病機(jī)制的理解提供更加完整和有說(shuō)服力的證據(jù).

4.2 體內(nèi)系統(tǒng) 從細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)中獲得的實(shí)驗(yàn)結(jié)果需要在動(dòng)物模型和人類臨床試驗(yàn)中進(jìn)行驗(yàn)證.目前有四種小鼠感染模型[48],這些模型正被積極地用于抗病毒研究.在這些模型中,有一個(gè)共同點(diǎn)就是經(jīng)常使用肢體癱瘓和死亡率來(lái)評(píng)估疾病的嚴(yán)重程度.

4.2.1 依賴于EV71適應(yīng)性毒株的小鼠模型：成人通常對(duì)EV71感染擁有抵抗力,同樣成年小鼠也不容易感染EV71臨床分離株.為了解決這個(gè)問(wèn)題,研究人員在ICR小鼠模型中開發(fā)出適合小鼠感染的EV71毒株MP4[49-51].將親本EV71注射到一天齡ICR小鼠體內(nèi),從腦組織中分離的適應(yīng)性EV71毒株被再次用于連續(xù)的注射適應(yīng)循環(huán),第四輪循環(huán)得到的EV71被指定為MP4[50].與其親本EV71株相比,MP4的細(xì)胞毒性更強(qiáng),產(chǎn)生的斑塊更大.由于EV71是一種具有準(zhǔn)物種性質(zhì)的RNA病毒,小鼠適應(yīng)性毒株往往會(huì)積累一些突變,而這些適應(yīng)性突變?cè)谌祟愖匀桓腥具^(guò)程中不容易被發(fā)現(xiàn).除了MP4,免疫缺陷的nod/scid小鼠模型中也產(chǎn)生了適應(yīng)性EV71毒株[52].對(duì)臨床分離株與小鼠適應(yīng)株的氨基酸序列進(jìn)行比較,發(fā)現(xiàn)兩者在VP1、VP3和蛋白酶2A等結(jié)構(gòu)蛋白存在顯著差異[52].因此,目前還不能確定用EV71適應(yīng)株感染小鼠得到的研究結(jié)果是否可以擴(kuò)展到人類對(duì)自然毒株感染情況.

4.2.2 免疫缺陷小鼠模型：宿主的免疫系統(tǒng)對(duì)病毒感染起著至關(guān)重要的作用[53].免疫缺陷小鼠,即使沒(méi)有攜帶任何人類病毒感染受體,也可以支持EV71臨床分離株的感染,而不是依賴于小鼠適應(yīng)株.

有研究顯示宿主體內(nèi)的干擾素是防止EV71感染和發(fā)病的必要條件[54].AG129小鼠,由于缺乏干擾素或干擾素受體,當(dāng)通過(guò)靜脈注射或口服途徑感染非小鼠適應(yīng)性EV71時(shí),會(huì)出現(xiàn)肢體癱瘓和死亡,在腸道和口腔感染的中樞神經(jīng)系統(tǒng)中都能檢測(cè)到病毒蛋白[55].與小鼠AG129相似,小鼠A129(缺乏干擾素受體)也可感染小鼠非適應(yīng)株EV71[56].此外,stat-1是干擾素信號(hào)傳導(dǎo)過(guò)程中的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子,stat-1基因敲除小鼠G129(缺乏干擾素受體)通過(guò)糞-口途徑可成功感染B型和C型EV71臨床分離株,感染的小鼠后肢癱瘓,中樞神經(jīng)系統(tǒng)中含有豐富的病毒蛋白[40],支持干擾素信號(hào)在保護(hù)中樞神經(jīng)系統(tǒng)免受EV71感染機(jī)制中的重要作用.

除先天免疫外,體液免疫在EV71感染和發(fā)病中也起著重要作用.缺乏T和B淋巴細(xì)胞的nod/scid小鼠可以感染小鼠適應(yīng)性EV71[52].然而,既然小鼠適應(yīng)EV71也可以感染具有免疫活性的小鼠[50],nod/scid小鼠模型中缺失的T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞是否真正對(duì)免受小鼠適應(yīng)EV71感染的保護(hù)中起作用?進(jìn)一步研究顯示,nod/scid小鼠接種EV71臨床分離株發(fā)生了肢體麻痹,上述問(wèn)題得到解決.盡管肢體癱瘓已被用作小鼠模型中評(píng)估EV71發(fā)病機(jī)制的常見標(biāo)志,但在人類自然感染中,急性弛緩性麻痹的發(fā)生頻率不如HFMD.有趣的是,在nod/scid模型中,首次在感染了臨床分離株的小鼠模型中觀察到一種類似HFMD的皮疹表型.此外,炎癥性因子IL-23/IL-17軸似乎在感染的nod/scid小鼠模型中被激活.這些有趣的現(xiàn)象是否在nod/scid模型具有特異性,或者可以推廣到其他小鼠模型或人類患者,還有待觀察.

此外,干擾素-γ誘導(dǎo)蛋白-10(interferon-gammainducible protein-10,IP-10)是EV71患者高表達(dá)的趨化因子[57].與野生型對(duì)照小鼠相比,IP-10敲除小鼠感染小鼠適應(yīng)性EV71后的死亡率更高,表明IP-10在EV71感染和發(fā)病機(jī)制中的保護(hù)作用[58].

4.2.3 轉(zhuǎn)基因小鼠模型：近年來(lái),許多EV71感染過(guò)程中的細(xì)胞受體[33,35,37,59]被提出,這些受體促進(jìn)了非敏感細(xì)胞系如小鼠成纖維細(xì)胞L929對(duì)EV71的感染.然而,表達(dá)人PSGL-1的轉(zhuǎn)基因小鼠不能支持EV71臨床分離株的感染[60].在這些報(bào)道的細(xì)胞受體中,迄今為止只有人scarb2(hscarb2)被證明支持體內(nèi)EV71感染.

以往報(bào)道有兩種不同的hscarb2-tg小鼠模型.在ef-1a-hscarb2模型[61]中,ef-1a啟動(dòng)子被用來(lái)驅(qū)動(dòng)C57b/6小鼠背景中hscarb2的表達(dá)；在sc2-hscarb2模型[62]中,一個(gè)天然的hscarb2啟動(dòng)子在人scarb2-bac克隆中驅(qū)動(dòng)c57b/6小鼠背景中的轉(zhuǎn)基因表達(dá).這兩種模型都能感染EV71,發(fā)展成肢體癱瘓,并在肌肉和神經(jīng)組織中檢測(cè)到病毒蛋白.然而,上述hscarb2Tg小鼠模型還不能有效支持口腔感染[61,62],而這對(duì)于兒童是一個(gè)重要的傳播途徑.

4.2.4 雜交小鼠模型：如上所述,hscarb2受體和免疫缺陷都有助于EV71感染和發(fā)病.因此,將轉(zhuǎn)基因hscarb2和宿主免疫缺陷結(jié)合可能會(huì)進(jìn)一步提高感染效率.事實(shí)上,通過(guò)雜交培育hscarb2-tg和stat-1ko小鼠產(chǎn)生了一個(gè)新的雜交小鼠模型.與其親本小鼠相比,該雜交小鼠模型更易于應(yīng)用.例如,雜交小鼠在2 wk大的時(shí)候,仍然可以感染不同基因型的EV71,需要的滴度(pfu)比親本小鼠低1000倍[63].EV71感染的雜交小鼠在中樞神經(jīng)系統(tǒng)(如中腦和脊髓)中表現(xiàn)出高密度的病毒蛋白.與stat-1ko模型一樣,盡管EV71感染的雜交小鼠出現(xiàn)肢體癱瘓,但在肌肉組織中沒(méi)有檢測(cè)到病毒RNA和蛋白.這表明,癱瘓完全源于中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷,而不是肌肉破壞.這種新的混合(hscarb2-tg/stat-1-ko)模型可以作為一個(gè)評(píng)估藥物或疫苗療效的平臺(tái)[63].

盡管這種雜交小鼠模型對(duì)研究EV71相關(guān)的神經(jīng)病變和抗病毒治療是一個(gè)更為敏感的系統(tǒng),但由于缺乏干擾素信號(hào),不能成為研究免疫調(diào)節(jié)劑治療的良好模型.

5 EV71疫苗

EV71一般通過(guò)密切的人與人接觸傳播,因此,疫苗接種可能是控制EV71感染的最佳方法.目前研究的EV71疫苗有多種類型,包括滅活病毒疫苗[64-66]、病毒樣顆粒疫苗[67]、DNA疫苗[68]、亞單位疫苗[69]和減毒活疫苗[70].

滅活病毒EV71疫苗的開發(fā)進(jìn)展迅速,是目前EV71疫苗中最先進(jìn)的候選疫苗[65,66,71-73],健康兒童接種滅活EV71疫苗5年后的免疫持續(xù)性仍然較高[74].2015年12月,中國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)了兩種預(yù)防HFMD的滅活EV71疫苗[75].由于滅活的EV71疫苗不能復(fù)制,因此出于安全考慮,它們比減毒活疫苗更受歡迎.然而,滅活疫苗的生產(chǎn)成本和潛在的供應(yīng)問(wèn)題使其在實(shí)際應(yīng)用中受到了限制[76].

病毒樣顆粒(VLPS)疫苗與滅活EV71疫苗不同,VLPS疫苗的優(yōu)點(diǎn)是能夠同時(shí)以其天然構(gòu)象呈現(xiàn)EV71衣殼蛋白的所有表面表位[75,77].盡管VLPS疫苗的效力低于滅活疫苗,但實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型研究表明,VLP能產(chǎn)生保護(hù)性中和抗體,并對(duì)疫苗中不存在的多種亞型產(chǎn)生交叉反應(yīng)[77].與VLP相關(guān)的問(wèn)題是其穩(wěn)定性、凈化和生產(chǎn)成本.其他類型的EV71疫苗(DNA疫苗、亞單位疫苗和減毒活疫苗)尚處于早期發(fā)展階段,目前正在對(duì)小鼠和非人類靈長(zhǎng)類動(dòng)物進(jìn)行臨床前試驗(yàn)[75].

6 結(jié)論

EV71感染在亞太地區(qū)引起了大規(guī)模的HFMD暴發(fā),已引起社會(huì)各界的高度關(guān)注.但是,目前尚無(wú)有效的EV71治療藥物,EV71感染發(fā)病機(jī)制的研究也沒(méi)有確切結(jié)論,還有很多問(wèn)題需要解決.EV71疫苗是保護(hù)兒童免受感染的有效方法,然而,目前沒(méi)有一種EV71疫苗能提供有效的保護(hù)作用來(lái)防止其他腸道病毒的感染,開發(fā)能覆蓋多種腸道病毒的疫苗仍是一種前瞻性的選擇.

在今后的研究中,(1)應(yīng)建立一個(gè)全球性EV71感染監(jiān)測(cè)網(wǎng)絡(luò),持續(xù)的監(jiān)測(cè)有助于識(shí)別和發(fā)現(xiàn)新的EV71變種；(2)迫切需要有效的抗病毒藥物來(lái)對(duì)抗亞洲和世界各地頻繁發(fā)生的EV71感染；(3)應(yīng)深入研究EV71感染模型中病毒種群的行為及其與發(fā)病機(jī)制的關(guān)系,因?yàn)槟壳斑€不清楚致命感染是由單一毒株導(dǎo)致,還是由人群中攜帶不同突變的病原體的合作引起,對(duì)這個(gè)問(wèn)題的解答可以為設(shè)計(jì)一種有效的EV71疫苗鋪平道路；最后,應(yīng)進(jìn)一步尋找新的特異性EV71受體,特別是加強(qiáng)嗜神經(jīng)性受體的研究,可為特效的靶向藥物的研究提供科學(xué)依據(jù).