ＨＳ－ＳＰＭＥ－ＧＣ－ＭＳ聯(lián)用分析中成藥保濟(jì)丸揮發(fā)性成分

駱宇燊　楊紅兵　陳成　劉毅　盧金清　江漢美　李錦周

摘要：采用頂空固相微萃取（HS-SPME）及氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（GC-MS）分析保濟(jì)丸中的揮發(fā)性成分。結(jié)果表明，利用HS-SPME-GC-MS法從中成藥保濟(jì)丸中分析出29種揮發(fā)性成分，驗(yàn)證了其中15種成分，相對含量占保濟(jì)丸總揮發(fā)性成分的46.47%，其中含量最高的為十二碳烷（12.63%），其次為茅蒼術(shù)醇（6.79%）、百秋李醇（4.80%）、石竹烯（3.66%）等。

關(guān)鍵詞：保濟(jì)丸;揮發(fā)性成分;頂空固相微萃取;氣質(zhì)聯(lián)用

中圖分類號：O657? ? ? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

文章編號：0439-8114（2019）22-0182-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2019.22.042? ? ? ? ? ?開放科學(xué)（資源服務(wù)）標(biāo)識碼（OSID）：

Analysis of volatile components of the Chinese medicine

Baoji pills by HS-SPME-GC-MS

LUO Yu-shen1，YANG Hong-bing1，CHEN Cheng1，LIU Yi1，2，LU Jin-qing1，2，JIANG Han-mei1，2，LI Jin-zhou1

（1.Hubei University of Chinese Medicine，Wuhan 430065，China;

2.Research and Development Center of Medicinal Plant in Hubei Province，Wuhan 430065，China）

Abstract： Volatile components in Baoji pills were analyzed by using headspace solid-phase microextraction（HS-SPME） and gas chromatography-mass spectrometry（GC-MS）. Results showed that a total of 29 volatile components were analyzed by HS-SPME-GC-MS method from Chinese patent medicine Baoji pills， 15 of which were identified by experiments. The relative content accounts for 46.47% of the total volatile components of Baoji pills. The highest content was dodecane（12.63%）， followed by atractylodes ethanol （6.79%）， phenolic alcohol （4.80%） and caryophyllene （3.66%）.

Key words： Baoji pill; volatile components; HS-SPME; GC-MS

保濟(jì)丸由十六味中藥組成，包括厚樸、蒼術(shù)、廣藿香、薄荷等富含揮發(fā)油的藥味。其功能為解表、和中、減輕濕熱，可被用來治療胃腸不適和由食傷引起的腹瀉，亦用于暈車暈船[1]。研究發(fā)現(xiàn)，保濟(jì)丸可以用來抗菌[2]、解熱[3]、止瀉鎮(zhèn)痛及解痙[4]，還可用來治療梅核氣[5]、胃腸型感冒[6]。目前，保濟(jì)丸成分的研究方法包括水蒸氣蒸餾法[7]、超聲波提取技術(shù)[8]及有機(jī)溶劑提取[8]，而應(yīng)用固相微萃取法（SPME）分析保濟(jì)丸成分未見文獻(xiàn)報道。

中國藥典中的保濟(jì)丸鑒別方法為顯微鑒別或薄層色譜法，部分采用高效液相色譜法測定其揮發(fā)油含量。保濟(jì)丸組方中有很多含揮發(fā)性成分，所以對保濟(jì)丸揮發(fā)性成分進(jìn)行分析，引導(dǎo)人們對其產(chǎn)品質(zhì)量的認(rèn)可，對臨床合理用藥及充分利用保濟(jì)丸具有一定的指導(dǎo)意義。頂空固相微萃取法（HS-SPME）是一種新型的富集技術(shù)與樣品制備技術(shù)，具有萃取速度快、操作簡單等優(yōu)點(diǎn)，特別適用于低揮發(fā)性組分的研究[9]。本研究運(yùn)用頂空固相微萃取技術(shù)對保濟(jì)丸揮發(fā)性成分進(jìn)行了分析，并用氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀分析和鑒定其成分。

1? 材料與方法

1.1? 試驗(yàn)材料

1.1.1? 藥材? 保濟(jì)丸：廣州王老吉藥業(yè)股份有限公司（批號為1708031）。

1.1.2? 儀器? 氣質(zhì)聯(lián)用儀，美國Hewlett-Packard公司;手動固相微萃取裝置，德國IKA公司;65 μm聚二甲基硅氧烷-雙乙烯基苯（PDMS/DVB）萃取纖維頭，美國Supelco公司;15 mL頂空瓶;電子分析天平。

1.2? 試驗(yàn)方法

1.2.1? 試驗(yàn)準(zhǔn)備? 利用研缽搗藥罐將藥品搗碎后，裝入頂空瓶，每瓶藥品重量1 g。

1.2.2? 頂空固相微萃取法? 經(jīng)過對萃取頭、取樣量、萃取溫度、平衡時間等因素的考察，獲得最佳固相微萃取條件[10]。取保濟(jì)丸粗粉1.0 g，置于15 mL頂空瓶中，插入一個手動噴射器與6 μm PDMS/DVB萃取纖維頭。120 ℃下預(yù)平衡10 min，將頂部空氣抽提15 min延長后立即插入色譜儀進(jìn)樣口（溫度在230 ℃）中，解吸時間為3 min。

1.2.3? GC-MS分析條件? 采用氣相色譜-質(zhì)譜（GC-MS）分析方法對預(yù)處理過的樣品進(jìn)行分析。

1）色譜條件。色譜柱：HP-5MS（50 m×0.2 mm×0.33 μm）。載氣：氦氣（99.999%）。流速：1.0 mL/min。進(jìn)樣口溫度：230 ℃。采取程序升溫，初始溫度為110 ℃，以15 ℃/min升溫到160 ℃，以20 ℃/min升溫到200 ℃，再以15 ℃/min升溫到230 ℃。

2）質(zhì)譜條件。離子源：EI源。離子源溫度：230 ℃。四級桿溫度：150 ℃。電子能量：70 eV。倍增管電壓：1.2 kV。接口溫度：280 ℃。質(zhì)量范圍：35～550 m/z。

2? 結(jié)果與分析

經(jīng)化學(xué)工作站數(shù)據(jù)處理和面積歸一化方法從各總離子流圖中計算各組分中的相對比例，具體結(jié)果見圖1和表1所示。

HS-SPME-GC-MS分離得到29個峰，按各峰的質(zhì)譜圖經(jīng)計算機(jī)質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫檢索，與每個峰值的質(zhì)量分析圖和文獻(xiàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行對照，驗(yàn)證了其中15種成分，占揮發(fā)性成分總量的46.47%。保濟(jì)丸15種揮發(fā)性成分中，含量最高的為十二碳烷，占揮發(fā)性成分的12.63%，其次主要為茅蒼術(shù)醇（6.79%）、百秋李醇（4.80%）、1，7，7-三甲基-2環(huán)[2.2.1]-2-酰酯（3.66%）、雙戊烯（3.55%）、正癸烷（3.02%）、3，8-二甲基癸烷（2.41%），其他成分有石竹烯（1.59%）、正十四烷（1.46%）等。

3? 討論

采用頂空固相微萃取法提取保濟(jì)丸中的揮發(fā)性成分[11]。該方法是一種無溶劑的樣品處理技術(shù)，實(shí)現(xiàn)了樣品的吸附、濃縮、解析、進(jìn)樣一體，使樣品預(yù)處理過程大為簡化，提高了分析速度及靈敏度，同時，二次污染較少。該方法適用于快速分離和鑒定保濟(jì)丸的揮發(fā)性成分，也可應(yīng)用于其他中藥材及中成藥的揮發(fā)性成分的研究。

另外，保濟(jì)丸中揮發(fā)性成分主要為烯烴類、烷烴類、脂類、醇類等。主要的烯烴類有雙戊烯，主要的烷烴類有十二碳烷，主要的醇類有茅蒼術(shù)醇、百秋李醇，其中茅蒼術(shù)醇對腸道平滑肌有作用[12]，百秋李醇具有抗菌作用[13]。

參考文獻(xiàn)：

[1] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典一部[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015.1261.

[2] 郭衛(wèi)真，劉? 妮，盧東榮，等.保濟(jì)丸抗菌作用的實(shí)驗(yàn)研究[J].內(nèi)蒙古醫(yī)藥，2010，24（67）：48.

[3] 茹? 麗，郭起岳，許常輝.保濟(jì)丸粉輻照前后解熱及止吐作用的研究[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2012，18（5）：191-193.

[4] 巫燕莉，李燕舞，杜? 群，等.保濟(jì)丸的止瀉鎮(zhèn)痛及解痙作用[J].現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生，2010，26（3）：322-324.

[5] 譚慶佳.保濟(jì)丸治療梅核氣19例[J].湖北中醫(yī)雜志，1991，13（4）：11.

[6] 黃曉丹，薛素琴，黃? 彬，等.保濟(jì)濃縮丸治療胃腸型感冒的臨床研究[J].中國民族民間醫(yī)藥，2009（16）：44-45.

[7] 曾和平，曾? 志，楊定橋，等.中成藥保濟(jì)丸揮發(fā)性化學(xué)成分（1）[J].藥物生物技術(shù)，2002，9（6）：359-363.

[8] 楊定橋，曾和平，曾? 志，等.中成藥保濟(jì)丸揮發(fā)性化學(xué)成分研究[J].中草藥，2001，32（12）：1065-1067.

[9] 張? 偉，盧? 引，顧雪竹，等.地錦草揮發(fā)性成分的HS-SPME-GC-MS分析[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2012，18（21）：66.

[10] 黎? 強(qiáng)，盧金清，郭勝男，等.頂空固相微萃取-氣相-質(zhì)譜聯(lián)用分析決明子中揮發(fā)性成分[J].中國醫(yī)院藥學(xué)雜志，2014，34（8）：655-657.

[11] 張? 嵐，李連元，李淑敏，等.固相微萃取檢驗(yàn)技術(shù)應(yīng)用及影響因素分析[J].中國公共衛(wèi)生，2005，21（6）：746.

[12] 張明發(fā)，沈雅琴.蒼術(shù)及其有效成分消化系統(tǒng)藥理作用的研究進(jìn)展[J].藥物評價研究，2017，40（3）：411-419.

[13] 趙思蕾，熊? 亮，王振強(qiáng)，等.基于成分敲除/敲入研究廣藿香油抗菌主要藥效物質(zhì)[J].天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，2016，28（5）：707-712.