肺腺癌患者表皮生長因子受體基因突變以及不同性別、年齡、轉(zhuǎn)移患者突變分析

周方元 李 艷

非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)是最常見的惡性腫瘤之一，也是導(dǎo)致癌癥患者死亡的主要原因之一[1]，占肺癌總數(shù)的80%-85%。由于NSCLC早期診斷困難，臨床確診時(shí)大部分已為晚期，手術(shù)和放療難以達(dá)到根治性治療，因而靶向治療成為患者最為重要的治療策略。目前，靶向抑制表皮生長因子受體(EGFR)已成為治療肺癌的里程碑式手段[2]，臨床上將EGFR突變作為NSCLC靶向治療的重要靶點(diǎn)，因此，EGFR突變狀態(tài)檢測(cè)對(duì)于NSCLC患者治療尤為重要。肺腺癌為NSCLC中的一種，其具有發(fā)病年齡較小、女性患者比例較其它類型NSCLC高、更易發(fā)生于不吸煙者[3]、有時(shí)早期即發(fā)生血行轉(zhuǎn)移等特點(diǎn)，因此了解肺腺癌患者EGFR突變?nèi)巳悍植记闆r，探討其與患者年齡、性別及轉(zhuǎn)移的關(guān)系，對(duì)為臨床肺腺癌的患者靶向治療有一定的價(jià)值。本研究檢測(cè)了230例肺腺癌患者EGFR的突變狀態(tài)，分析不同性別、年齡及轉(zhuǎn)移患者突變類型的差異，為肺腺癌患者的靶向治療提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象及分組

收集武漢大學(xué)人民醫(yī)院2016-01—2017-03期間經(jīng)病理確診的肺腺癌患者230例，根據(jù)性別不同分為男性組(123例)和女性組(107例)；根據(jù)患者年齡將患者分為<60歲組(103例)和≥60歲組(127例)；根據(jù)其是否發(fā)生轉(zhuǎn)移將其分為未轉(zhuǎn)移組(130例)和轉(zhuǎn)移組(100例)。按照性別分組后，男性肺腺癌患者組與女性肺腺癌患者組的年齡(t=0.879，P>0.05)和轉(zhuǎn)移率(χ2=1.45，P>0.05)分布均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；按照年齡分組后，<60歲組的肺腺癌患者組與≥60歲組在性別(χ2=0.24，P>0.05)和轉(zhuǎn)移率(χ2=1.98，P>0.05)分布均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；按照轉(zhuǎn)移與否分組后，轉(zhuǎn)移組和未轉(zhuǎn)移組性別(χ2=1.45，P>0.05)和年齡(t=0.532，P>0.05)分布均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

1.2 納入和排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)術(shù)后病理確診為肺腺癌；(2)無其它部位的原發(fā)惡性腫瘤病史。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)無法獲得病理切片的患者；(2)診斷不明確的患者；(3)同時(shí)患有其它部位原發(fā)性惡性腫瘤的患者。

1.3 檢測(cè)方法

人類EGFR基因突變檢測(cè)試劑盒購自武漢海吉力生物科技有限公司(貨號(hào)：HGN-eg01)，其基本原理是采用ARMS-PNA技術(shù)[4]，結(jié)合熒光PCR平臺(tái)，針對(duì)中國人群EGFR突變率進(jìn)行突變位點(diǎn)的選擇，檢測(cè)包括G719X、19del、T790M、S768I、20ins、L858R、L861Q在內(nèi)的中國人群常見EGFR突變位點(diǎn)。檢測(cè)所用樣本類型為石蠟包埋組織的病理切片，樣本保存時(shí)間均未超過3年。主要檢測(cè)步驟依次為核酸提取、配置檢測(cè)數(shù)+2個(gè)反應(yīng)體系、分裝至PCR管，每管18μl、加樣2μl、上機(jī)檢測(cè)和結(jié)果分析。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié) 果

2.1 肺腺癌患者EGFR基因突變類型分布

230例肺腺癌患者中，EGFR野生型為107例(46.52%)，EGFR突變型為123例(53.58%)。在突變型肺腺癌患者中，最多見的突變類型為19del(占56.10%)，其次為L858R(占34.15%)，隨后是G719X(占6.50%)，其它類型較少見。見表1。

表1 肺腺癌患者突變情況

2.2 不同性別肺腺癌患者EGFR突變情況

男性肺腺癌患者EGFR突變率顯著低于女性肺腺癌患者的突變率(P<0.01)。不同性別肺腺癌患者EGFR突變類型差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

2.3 不同年齡肺腺癌患者EGFR突變情況

<60歲組的肺腺癌患者EGFR突變率與≥60歲組無顯著差異(P>0.05)?！?0歲組肺腺癌EGFR突變患者19del類型突變率顯著低于<60歲組(P<0.01)，而L858R類型的突變率顯著高于<60歲組(P<0.05)。見表3。

表2 不同性別肺腺癌患者EGFR突變情況

注：與女性組比較，1)P<0.05

表3 不同年齡肺腺癌患者EGFR突變情況

注：與<60歲組比較，1)P<0.05，2)P<0.01

2.4 是否發(fā)生轉(zhuǎn)移肺腺癌患者EGFR突變情況

EGFR的突變與肺腺癌是否發(fā)生轉(zhuǎn)移不存在顯著差異(P>0.05)。是否發(fā)生轉(zhuǎn)移肺腺癌患者EGFR突變類型差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表4。

表4 是否發(fā)生轉(zhuǎn)移肺腺癌患者EGFR突變情況

3 討 論

EGFR是一種跨膜受體酪氨酸激酶，該區(qū)域的激活對(duì)癌細(xì)胞增殖、生長的相關(guān)信號(hào)傳遞具有重要意義[5]。EGFR基因突變發(fā)生率在腺癌中較高[6]，在一線治療的NSCLC患者中檢測(cè)EGFR基因的突變狀態(tài)具有重要的臨床意義,是決定患者是否能夠應(yīng)用EGFR酪氨酸激酶抑制劑治療的先決條件。

研究表明，在接受EGFR酪氨酸激酶抑制劑治療的患者中，EGFR突變型患者疾病控制率明顯優(yōu)于野生型患者,其中19del類型突變的患者疾病控制率也明顯優(yōu)于L858R類型突變的患者[7]，因此，檢測(cè)肺腺癌患者EFGR突變類型，對(duì)其指導(dǎo)用藥具有重要意義。本研究顯示，230例肺腺癌患者中，EGFR突變型患者占比53.58%，而這些突變型患者中，主要的突變類型集中在19del和L858R，表明肺腺癌患者主要的突變類型為19del和L858R，一半以上的肺腺癌患者更能從EGFR酪氨酸激酶抑制劑治療中獲益，與Paez等[8]的研究結(jié)果一致。研究發(fā)現(xiàn)EGFR基因突變導(dǎo)致EGFR酪氨酸激酶ATP結(jié)合位點(diǎn)的某些關(guān)鍵基團(tuán)發(fā)生重構(gòu)，增強(qiáng)了與ATP或其競爭性抑制劑吉非替尼等的相互作用[9]，這可能是EGFR突變型患者對(duì)吉非替尼等EGFR酪氨酸激酶抑制劑表現(xiàn)出更好療效反應(yīng)的可能原因之一。

肺癌的發(fā)病率存在性別差異，男性肺癌的發(fā)病率高于女性，但近年來女性肺癌的發(fā)病數(shù)量增長較男性快，肺癌表現(xiàn)出的性別差異可能與吸煙、空氣污染及肺癌家族史有關(guān)[10]。本研究納入的肺腺癌患者中，男性肺腺癌患者的突變率(43.08%)顯著低于女性肺腺癌患者(65.42%)，與Shi等[11]的研究結(jié)果一致，但兩者突變類型無顯著差異，表明更多的女性肺腺癌患者可以從EGFR酪氨酸激酶抑制劑治療中獲益。有研究表明EGFR陽性表達(dá)率與肺癌相關(guān)危險(xiǎn)因素相關(guān)，使用煤爐10年及以上者、吸煙10年及以上者、吸煙量超過10支/天者，由于這些因素長期作用于機(jī)體，造成EGFR基因的改變，陽性率升高[12]。據(jù)此可推測(cè)，女性肺腺癌患者由于居家烹飪、吸二手煙等因素可能較男性單純吸煙者接觸更多的肺癌相關(guān)危險(xiǎn)因素，而這些因素可能會(huì)對(duì)EGFR的突變產(chǎn)生一定的促進(jìn)作用，導(dǎo)致女性患者EGFR突變率高于男性，其具體機(jī)制有待進(jìn)一步的研究。

Han等[13]、Liang等[14]等的報(bào)道中指出，EGFR突變率與年齡不存在相關(guān)性，這與本研究一致，但這些研究都未對(duì)EGFR的突變類型進(jìn)一步的分類研究。本研究單獨(dú)針對(duì)常見的EGFR突變類型與年齡的關(guān)系分析發(fā)現(xiàn)，<60歲組的EGFR突變型患者中，19del類型的突變比例(72.73%)顯著高于≥60歲組(42.65%)，而L858R類型的突變比例(23.64%)顯著低于≥60歲組(42.65%)，可見雖然突變率與年齡不存在相關(guān)性，但是突變類型與年齡存在一定的相關(guān)性。國內(nèi)研究顯示，漢族人群中EGFR 19del突變類型的NSCLC患者預(yù)后較L858R突變類型好[15]，結(jié)合本文結(jié)果，提示<60歲組的EGFR突變型肺腺癌患者的預(yù)后可能會(huì)較≥60歲組EGFR突變型肺腺癌患者好，因此臨床上對(duì)于60歲及以上的EGFR L858R突變型肺腺癌患者的預(yù)后應(yīng)該著重監(jiān)測(cè)并加強(qiáng)相應(yīng)的臨床溝通。此外，本研究中還發(fā)現(xiàn)EGFR的突變與否與肺腺癌的轉(zhuǎn)移不存在顯著相關(guān)性，但有研究發(fā)現(xiàn)EGFR基因突變患者更易發(fā)生腦轉(zhuǎn)移，接受酪氨酸激酶抑制劑(Tyrosine Kinase Inhibitors,TKI)及腦部放療等治療后，生存期更長[16]，因此，對(duì)于EGFR突變及其突變類型與轉(zhuǎn)移部位的關(guān)系，值得進(jìn)一步的深入研究。

綜上所述，女性肺腺癌患者EGFR突變率高于男性，低年齡肺腺癌EGFR 19del突變率較高年齡肺腺癌患者高，這與目前臨床上癌治療效果女性優(yōu)于男性，低年齡肺癌患者接受放化療治療預(yù)后較好的事實(shí)相符，然而男性肺癌的發(fā)病率較高，高年齡的肺癌患者也占半數(shù)以上，因此，針對(duì)男性和/或高年齡的肺癌患者的靶向治療研究極為重要。

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