李艷玲 王曼 王振磊 王鴻芡 夏伯姍 岳嬌梁秀芳 南峰 向瑾 王永生 秦永平 張梅
摘要:建立UPLC-MS/MS法同時(shí)測(cè)定人血漿中替米沙坦與氨氯地平的濃度,用于研究替米沙坦/氨氯地平片的藥代動(dòng)力學(xué)。采用Waters BEH C18(2.1mm×50mm,1.7μm)色譜柱,流動(dòng)相A:甲酸:氨水:水(1:0.2:1000,v/v/v),流動(dòng)相B:甲酸:氨水:乙腈:水(1:0.2:950:50,v/v/v/v),進(jìn)行梯度洗脫,流量0.3mL/min,以d3-替米沙坦、d4-氨氯地平作內(nèi)標(biāo)。血漿樣本液液萃取后,采用SHIMADZU SIL-30 AD型UPLC進(jìn)樣分離,美國(guó)AB Sciex QTRAP 5500質(zhì)譜儀在MRM模式下檢測(cè)。結(jié)果表明:替米沙坦在0.50~500ng/mL范圍內(nèi),氨氯地平在0.05~8.00ng/mL范圍內(nèi)線性良好;替米沙坦及內(nèi)標(biāo)的保留時(shí)間均為1.43~,氨氯地平及內(nèi)標(biāo)的保留時(shí)間均為1.31min;替米沙坦萃取回收率103.0%~104.2%、氨氯地平萃取回收率54.6%~66.5%;方法的特異性、靈敏性、線性、精密度、準(zhǔn)確度、基質(zhì)效應(yīng)以及穩(wěn)定性驗(yàn)證數(shù)據(jù)均符合相關(guān)要求。該法快速、靈敏、專屬性強(qiáng)、重現(xiàn)性好,適用于替米沙坦/氨氯地平的血藥濃度測(cè)定。
關(guān)鍵詞:UPLC-MS/MS;替米沙坦;氨氯地平;血藥濃度
中圖分類號(hào):R917 文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A 文章編號(hào):1674-5124(2019)07-0066-08
收稿日期:2019-01-21;收到修改稿日期:2019-03-06
作者簡(jiǎn)介:李艷玲(1994-),女,山西運(yùn)城市人,碩士研究生,專業(yè)方向?yàn)樗幬锓治觥?/p>
通信作者:張梅(1963-),女,四川成都市人,教授,主要從事中藥及復(fù)方物質(zhì)基礎(chǔ)與質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)化研究。
0 引言
高血壓與心腦血管疾病密切相關(guān),其高發(fā)病率和高致死率極大地影響公眾健康[1-3]。替米沙坦(telmlsartan)是一種廣泛用于治療高血壓和心力衰竭的血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑(angiotensin 11 receptorblockers,ARBs)[4-6],氨氯地平(amlodipine)是一種長(zhǎng)效、可有效控制血壓的二氫吡啶類鈣通道拮抗劑[7]。研究表明,替米沙坦和氨氯地平在單藥治療高血壓方面已顯示出良好的療效[8],而替米沙坦/氨氯地平片(40/5mg)是替米沙坦和氨氯地平的復(fù)方制劑,其在降低血壓方面被認(rèn)為比單藥治療更有效、更耐受,且優(yōu)于其他傳統(tǒng)聯(lián)合用藥方案[9-10]。在研究替米沙坦/氨氯地平片的藥代動(dòng)力學(xué)及生物利用度時(shí),需要測(cè)定兩種藥物的血藥濃度。目前,國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)報(bào)道的LC-MS/MS分析方法多集中于單獨(dú)測(cè)定生物樣本中替米沙坦[11-13]或氨氯地平[14-16]的含量,同時(shí)測(cè)定人血漿中替米沙坦和氨氯地平的方法國(guó)內(nèi)外較少報(bào)道。張鶴等[17]在測(cè)定Beagle犬血漿中替米沙坦和氨氯地平的濃度時(shí)分別采用乙腈沉淀蛋白測(cè)定替米沙坦和液液萃取測(cè)定氨氯地平兩個(gè)方法,需要處理兩份樣本、進(jìn)樣兩次,工作量大、耗時(shí)長(zhǎng),靈敏度低,且采用非同位素內(nèi)標(biāo)奈普生和鹽酸克倫特羅;Ravi VB等[18]采用固相萃?。⊿PE)同時(shí)測(cè)定人血漿中替米沙坦和氨氯地平的濃度,以非同位素標(biāo)記藥物卡馬西平作內(nèi)標(biāo),存在血漿用量大(250μL)、成本高、耗時(shí)長(zhǎng),精密度較差等問(wèn)題。本研究使用同位素標(biāo)記藥物作內(nèi)標(biāo),用100μL血漿,在堿性條件下通過(guò)液液萃取,一次進(jìn)樣可同時(shí)測(cè)定血漿中高響應(yīng)、高濃度的替米沙坦和低濃度的氨氯地平濃度,具有線性范圍廣、靈敏度高、血漿用量少、準(zhǔn)確度和精密度好、操作簡(jiǎn)便,耗時(shí)短、成本低等特點(diǎn),適用于高通量的分析檢測(cè)工作,已成功應(yīng)用于健康志愿者口服替米沙坦/氨氯地平片(40/5mg)后的臨床藥代動(dòng)力學(xué)及生物利用度研究的大量樣本(5400余個(gè))檢測(cè),結(jié)果良好。
1 儀器與試藥
1.1 儀器
日本SHIMADZU SIL-30 AD型高效液相色譜儀;美國(guó)AB Sciex QTRAP 5500三重四級(jí)桿串聯(lián)質(zhì)譜儀;數(shù)據(jù)采集用Analyst工作軟件(Version 1.6.3);5810R低溫離心機(jī)(德國(guó)Eppendorf公司);XP205DR十萬(wàn)分之一電子分析天平(法國(guó)Mettler Toledo公司);Targin BT-Ⅲ水浴式氮吹儀(北京踏錦科技有限公司)。
1.2 試藥
苯磺酸氨氯地平對(duì)照品,中國(guó)食品藥品檢定研究院,批號(hào)100374-201204,純度99.9%:替米沙坦對(duì)照品,中國(guó)食品藥品檢定研究院,批號(hào)100629-201202,純度99.6%;同位素標(biāo)記的替米沙坦(d3-替米沙坦)對(duì)照品,加拿大TRC公司,批號(hào)1-TEK-100-2,化學(xué)純度97.0%,同位素純度99.1;同位素標(biāo)記的氨氯地平(d4-氨氯地平)對(duì)照品,加拿大TRC公司,批號(hào)11-PSB41-1,化學(xué)純度98.0%,同位素純度99.7%。試驗(yàn)制劑(替米沙坦氨氯地平片,四川自豪時(shí)代藥業(yè)有限公司,批號(hào):160405,規(guī)格:40/5mg/片);參比制劑(替米沙坦氨氯地平片,勃林格殷格翰國(guó)際藥業(yè)有限公司,批號(hào):505254,規(guī)格:40/5mg/片)。乙腈、甲酸,美國(guó)Thermo Fisher公司,色譜純;氨水,二氯甲烷、異丙醇,成都科隆公司,分析純;超純水,美國(guó)Millipore公司Millipore型超純水器自制。
2 方法
2.1 色譜條件
色榭主:Waters BEH C18(2.1mm×50mm,1.7μm)色譜柱,美國(guó)Waters公司;柱溫:40℃;流動(dòng)相A:甲酸:氨水:水(1:0.2:1000,v/v/v),流動(dòng)相B:甲酸:氨水:酬青:水(1:0.2:950:50,v/v/v/v),流量0.3mL/min。梯度洗脫:0.01~1.10min,B相38%~100%;1.10~1.80min,B相維持100%;1.80~1.81min,B相100%~38%:1.81~2.50min,B才匪時(shí)寺38%。流量:0.3mL/min,進(jìn)樣量:5μL,進(jìn)樣時(shí)長(zhǎng):2.50min。
2.2 質(zhì)譜條件
采用多反應(yīng)離子監(jiān)測(cè)(MRM,multiple reactionmonitoring),ESI(電噴霧離子源,electron sprayionization)正離子化方式檢測(cè),氣簾氣35 psi(1psi=6894.757Pa),霧化氣60psi,加熱輔助氣60psi,噴霧電壓5500V,離子源溫度500℃,去簇電壓70V,射人電壓10V,射出電壓13V。替米沙坦、d3-替米沙坦的檢測(cè)離子對(duì)分別為(m/z)515.2→276.2、518.2→279.2,碰撞能量38V;氨氯地平、d4-氨氯地平的檢測(cè)離子對(duì)分別為(m/z)409.2→238.2、413.2→238.2,碰撞能量15V。
2.3 溶液的配制
2.3.1 替米沙坦/氨氯地平標(biāo)準(zhǔn)曲線儲(chǔ)備液及工作液配制
用十萬(wàn)分之一天平分別精密稱取替米沙坦對(duì)照品10mg(相當(dāng)于替米沙坦9.96mg),苯磺酸氨氯地平對(duì)照品10mg(相當(dāng)于氨氯地平7.20mg),用甲醇分別定容于50mL容量瓶,混勻即得質(zhì)量濃度為200μg/mL的替米沙坦儲(chǔ)備液和150μg/mL的氨氯地平儲(chǔ)備液。替米沙坦/氨氯地平儲(chǔ)備液用35%乙腈水溶液進(jìn)一步稀釋成相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)曲線工作液,替米沙坦?jié)舛葹?0000,9000,5000,1600,400,100,20,10ng/mL,氨氯地平濃度為160,144,80,40,16,4,2,1ng/mL,置-35℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>
2.3.2 替米沙坦/氨氯地平質(zhì)控儲(chǔ)備液及工作液配制
采用2.3_1方法分別制得質(zhì)量濃度為200μg/mL的替米沙坦儲(chǔ)備液和150μg/mL的氨氯地平儲(chǔ)備液。替米沙坦/氨氯地平儲(chǔ)備液用35%乙腈水溶液進(jìn)一步稀釋成相應(yīng)的質(zhì)控工作液,替米沙坦?jié)舛葹?000,800,30,10ng/mL,氨氯地平濃度為128,20,3,1ng/mL,置-35℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>
2.3.3 內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備液及工作液配制
用10mL甲醇溶解d3-替米沙坦對(duì)照品1mg(規(guī)格:1.0mg/#k)于10mL容量瓶中,即得濃度為100μg/mL的d3替米沙坦儲(chǔ)備液;用十萬(wàn)分之一天平精密稱取d4-氨氯地平對(duì)照品1mg(規(guī)格:5.0mg/瓶),置于10mL容量瓶中,用甲醇溶解并定至刻度,即得濃度為100μg/mL的d4-氨氯地平儲(chǔ)備液。d3-替米沙坦/d4-氨氯地平儲(chǔ)備液用35%乙腈水溶液進(jìn)一步稀釋成內(nèi)標(biāo)工作液,制得濃度為20ng/mL的d3-替米沙坦和0.5ng/mL d4-氨氯地平(d3-TM-20ng/mL+d4-AL-0.5ng/mL),置-35℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>
2.4 樣品預(yù)處理與測(cè)定方法
取血漿樣本100μL,加入50μL內(nèi)標(biāo)工作液,加入50μL0.5%氨水,混勻后加入2.0mL,萃取劑(二氯甲烷:異丙醇=97:3),渦旋混合5min,低溫離心5min(3000r/min,8℃),射水真空泵負(fù)壓抽棄水層,轉(zhuǎn)移下層有機(jī)層至尖底試管中,于40℃水浴中通空氣流揮干。殘?jiān)?0μL35%乙腈(含0.2%甲酸)復(fù)溶,取上清液進(jìn)樣5μL。
2.5 方法學(xué)相關(guān)考察
2.5.1 專屬性
在本實(shí)驗(yàn)條件下,使用6個(gè)不同來(lái)源的空白基質(zhì),按照“2.4樣品預(yù)處理與測(cè)定方法”下操作,分析評(píng)價(jià)藥物及內(nèi)標(biāo)出峰處是否產(chǎn)生干擾,考察替米沙坦和氨氯地平的專屬性。
2.5.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線
將替米沙坦/氨氯地平標(biāo)準(zhǔn)曲線系列工作液按照1:19(v/v)的比例平行加入到空白血漿中,得替米沙坦質(zhì)量濃度為500,450,250,80,20,5,1,0.5ng/mL和氨氯地平質(zhì)量濃度為8,7.2,4,2,0.8,0.2,0.1,0.05ng/mL的替米沙坦/氨氯地平混合標(biāo)準(zhǔn)曲線血漿樣品。按照“2.4樣品預(yù)處理與測(cè)定方法”下操作,以樣品和內(nèi)標(biāo)的峰面積比(area ratio)為縱坐標(biāo),樣品濃度(ng/mL)為橫坐標(biāo),以1/c2為權(quán)重系數(shù)進(jìn)行回歸,得血漿中替米沙坦和氨氯地平的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
2.5.3 準(zhǔn)確度與精密度
將替米沙坦/氨氯地平質(zhì)控系列工作液按照1:19(v/v)的比例平行加入到空白血漿中,得替米沙坦質(zhì)量濃度為400,40,1.5,0.5ng/mL(定量下限)和氨氯地平質(zhì)量濃度為6.4,1,0.15,0.05ng/mL(定量下限)的替米沙坦/氨氯地平混合質(zhì)控血漿樣本,每個(gè)濃度平行6份,按照“2.4樣品預(yù)處理與測(cè)定方法”下操作檢測(cè)3批,分析計(jì)算批內(nèi)、批間精密度和準(zhǔn)確度。定量下限是標(biāo)準(zhǔn)曲線上的最低濃度點(diǎn)。分析方法的準(zhǔn)確度表示為標(biāo)示濃度的回收率(RE%)。精密度表示為測(cè)量值的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)。
2.5.4 稀釋系數(shù)考察
制備高濃度血漿樣本,理論濃度分別為替米沙坦800ng/mL,氨氯斷平12.8ng/mL,將空白血漿與檢測(cè)血漿按照=1:1(v/v)稀釋6份,按照“2.4樣品預(yù)處理與測(cè)定方法”下操作后進(jìn)樣。計(jì)算其精密度和準(zhǔn)確度。
2.5.5 萃取回收率
制備高、中、低3個(gè)濃度質(zhì)控血漿樣本,每個(gè)濃度3份,按照“2.4樣品預(yù)處理與測(cè)定方法”下操作,以提取后的高、中、低3個(gè)濃度質(zhì)控血漿樣本進(jìn)樣得到的峰面積與空白血漿直接加入相應(yīng)基質(zhì)效應(yīng)工作液后進(jìn)樣得到的未提取峰面積的比值,計(jì)算血漿中替米沙坦、氨氯地平與內(nèi)標(biāo)d3-替米沙坦、d4-氨氯地平的萃取回收率。
2.5.6 基質(zhì)效應(yīng)
取6個(gè)不同來(lái)源的空白血漿,每一空白血漿6份,共計(jì)36份,按照“2.4樣品預(yù)處理與測(cè)定方法”下操作,向揮干后的空白血漿樣本中加入底、高濃度相應(yīng)進(jìn)樣濃度工作液含內(nèi)標(biāo)工作液,分別得到基質(zhì)樣品中替米沙坦、氨氯地平與內(nèi)標(biāo)d3-替米沙坦、d4-氨氯地平的峰面積,同時(shí)以相應(yīng)進(jìn)樣濃度工作液直接進(jìn)樣得到對(duì)照樣品中藥物及內(nèi)標(biāo)的峰面積?;|(zhì)效應(yīng)為基質(zhì)樣品的平均峰面積與對(duì)照樣品的平均峰面積的比值。
2.5.7 穩(wěn)定性
以35%乙腈(含0.5%甲酸)為溶劑,將相應(yīng)儲(chǔ)備液配制成與標(biāo)準(zhǔn)曲線最高管進(jìn)樣濃度一致的穩(wěn)定性考察工作液,每個(gè)分別制備6份,以峰面積比值計(jì)算平均穩(wěn)定性偏差考察儲(chǔ)備液短期保存穩(wěn)定性和長(zhǎng)期保存穩(wěn)定性,工作液短期保存穩(wěn)定性和長(zhǎng)期保存穩(wěn)定性。
按照實(shí)際測(cè)定過(guò)程可能影響藥物穩(wěn)定性的因素,以涵蓋血漿樣品的預(yù)期保存條件,分別制備高、低2個(gè)濃度質(zhì)控血漿樣本,按照“2.4樣品預(yù)處理與測(cè)定方法”下操作,記錄色譜峰面積,由當(dāng)日標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算其濃度,與配制濃度比較考察各因素的穩(wěn)定性。
3 結(jié)果
3.1 專屬性
空白血漿色譜圖見圖1(a)和圖1(b),替米沙坦(TM)、氨氯地平(AL)及其內(nèi)標(biāo)(d3-TM、d4-AL)出峰處均無(wú)響應(yīng)。最低定量限濃度血漿樣本進(jìn)樣后,替米沙坦與內(nèi)標(biāo)d3-替米沙坦的保留時(shí)間為1.43min、氨氯地平與d4-氨氯地平的保留時(shí)間為1.31min。其色譜圖見圖Z(o)和圖1(d),由圖可知血漿內(nèi)源性雜質(zhì)均不干擾替米沙坦、內(nèi)標(biāo)d3-替米沙坦及氨氯地平、d4-氨氯地平的測(cè)定。
3.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線
以待測(cè)物濃度x為橫坐標(biāo),待測(cè)物與內(nèi)標(biāo)的峰面積比值y為縱坐標(biāo),進(jìn)行線性回歸得替米沙坦、氨氯地平的標(biāo)準(zhǔn)曲線。替米沙坦:y=0.0716x+0.0103(r2=0.9988);氨氯地平:y-0.916x-0.001 94(r2=0.9990),權(quán)重系數(shù)為1/c2。結(jié)果表明,替米沙坦在0.5~500ng/mL、氨氯地平在0.05~8ng/mL范圍線性良好。定量下限是指標(biāo)準(zhǔn)曲線上的最低濃度點(diǎn),替米沙坦信噪比(S/N)為33,氨氯地平信噪比(S/N)為19.8,
3.3 準(zhǔn)確度與精密度
如表1所示,替米沙坦每一濃度水平樣品的批內(nèi)精密度(RSD%)在0.8%~5.2%之間,批間精密度在3.1%~7.3%之間;批內(nèi)準(zhǔn)確度(RE%)在89.4%~109.2%,批間準(zhǔn)確度在96.1%~105.1%。氨氯地平每一濃度水平樣品的批內(nèi)精密度在 0.9%~6.7%之間,批間精密度在3.5%~5.9%之間;批內(nèi)準(zhǔn)確度在94.0%~109.4%,批間準(zhǔn)確度在98.3%~105.4%。其中最低管濃度(定量下限)替米沙坦準(zhǔn)確度范圍為89.4%~99.8%,精密度小于6.2%,氨氯地平準(zhǔn)確度范圍為94.0%~101.7%,精密度小于6.7%。
3.4 稀釋系數(shù)考察
分別考察了2倍的稀釋驗(yàn)證,結(jié)果可知,替米沙坦精密度為2.8%,氨氯地平精密度為1.1%,替米沙坦準(zhǔn)確度偏差為-1.9%,氨氯地平準(zhǔn)確度偏差為6.1%。
3.5 基質(zhì)效應(yīng)
以內(nèi)標(biāo)校準(zhǔn)后測(cè)定6次的平均基質(zhì)效應(yīng)低、高濃度血漿樣本中替米沙坦分別為100.4%,100.8%,氨氯地平分別為107.0%,106.5%;替米沙坦RSD分別為3.6%和3.4%,氨氯地平分別為1.2%和1.2%,結(jié)果見表2。
3.6 萃取回收率
替米沙坦、氨氯地平在低、中、高3個(gè)質(zhì)控水平的回收率分別為103.0%~104.2%和54.6%~66.5%,表明萃取效率令人滿意,且無(wú)濃度依賴性。結(jié)果見表2。
3.7 穩(wěn)定性
儲(chǔ)備液穩(wěn)定性數(shù)據(jù)及血漿樣本各項(xiàng)相關(guān)穩(wěn)定性數(shù)據(jù)如表3、表4所示,平均穩(wěn)定性偏差均小于10%,符合穩(wěn)定性相關(guān)要求。
4 應(yīng)用
本法已用于中國(guó)健康受試者,在3個(gè)周期內(nèi)分別單次口服給予替米沙坦/氨氯地平片的血藥濃度測(cè)定,其單次給藥的平均血藥濃度一時(shí)間曲線如圖2所示。由圖可知,試驗(yàn)制劑與參比制劑單次給藥替米沙坦、氨氯地平的藥時(shí)曲線變化趨勢(shì)一致。
5 討論
5.1 樣本預(yù)處理
本研究中替米沙坦、氨氯地平及其內(nèi)標(biāo)為中等極性化合物,由于沉淀蛋白法不能濃集樣本,氨氯地平濃度低,檢測(cè)靈敏度無(wú)法滿足定量要求,因此只能考慮具有濃集功能的固相萃取或液液萃取法,固相萃取成本高,條件優(yōu)化較為復(fù)雜,操作費(fèi)時(shí),故確定采用液液萃取。在進(jìn)行萃取劑的選擇時(shí),分別考察了甲基叔丁基醚、二氯甲烷和乙酸乙酯。甲基叔丁基醚萃取回收率過(guò)低;乙酸乙酯萃取回收率與基質(zhì)效應(yīng)雖合格,但易造成色譜柱堵塞;二氯甲烷-異丙醇(97:3,v/v)作萃取劑時(shí),氨氯地平萃取回收率仍達(dá)不到要求,為了提高氨氯地平的萃取回收率,考慮其結(jié)構(gòu)中的含氮雜環(huán),發(fā)現(xiàn)萃取時(shí)加入0.5%氨水的堿性環(huán)境,藥物及內(nèi)標(biāo)的萃取回收率和基質(zhì)效應(yīng)均合格(萃取回收率大于50%,基質(zhì)效應(yīng)小于15%),方法學(xué)評(píng)價(jià)結(jié)果證明了這一點(diǎn)。
5.2 內(nèi)標(biāo)選擇
本研究選用的是同位素內(nèi)標(biāo),其藥物與內(nèi)標(biāo)的色譜行為相似、萃取回收率平行、離子化效應(yīng)相近,測(cè)定結(jié)果更準(zhǔn)確,較文獻(xiàn)使用的內(nèi)標(biāo):鹽酸克倫特羅、奈普生[17]、卡馬西平[18]等更為理想。d3-替米沙坦做內(nèi)標(biāo)由于有同位素影響,在藥物檢測(cè)離子對(duì)處有峰,為了使內(nèi)標(biāo)在藥物出峰處的響應(yīng)值低于最低檢測(cè)限的20%,我們降低了內(nèi)標(biāo)的使用量。
5.3 色譜質(zhì)譜條件
替米沙坦為高濃度,高響應(yīng),氨氯地平為低濃度,低響應(yīng),高濃度替米沙坦由于響應(yīng)太高而超出質(zhì)譜響應(yīng)線性范圍,不能準(zhǔn)確定量,我們通過(guò)調(diào)整質(zhì)譜參數(shù),使替米沙坦CE由42V降低到38V,響應(yīng)調(diào)整至合理水平,實(shí)現(xiàn)一針進(jìn)樣可同時(shí)分析兩個(gè)濃度差別大的樣本;試驗(yàn)采用梯度洗脫將兩個(gè)藥物成分保留時(shí)間調(diào)整到比較合適,替米沙坦保留時(shí)間為1.43min,氨氯地平為1.31min,保證兩個(gè)成分既能同時(shí)定量又互不干擾;且待每個(gè)樣本出峰后用95%乙腈沖洗色譜柱平衡后再進(jìn)樣,降低了基質(zhì)效應(yīng),使樣本響應(yīng)度始終保持一致。
6 結(jié)束語(yǔ)
本研究為同時(shí)定量測(cè)定健康受試者血漿中替米沙坦/氨氯地平的血藥濃度,其中替米沙坦最低定量下限為0.50ng/mL,氨氯地平為0.05ng/mL,相較于單獨(dú)或分開測(cè)定血漿中替米沙坦、氨氯地平的濃度(氨氯地平定量下限僅0.1ng/mL),我們實(shí)驗(yàn)建立了一種快速、靈敏的UPLC-MS/MS聯(lián)用技術(shù),方法簡(jiǎn)便,靈敏度高,精密度好,耗時(shí)短,成本低、血漿用量少(僅100μL),重現(xiàn)性好,適合高通量分析,已經(jīng)成功應(yīng)用于替米沙坦/氨氯地平片在中國(guó)健康受試者的藥代動(dòng)力學(xué)研究。
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(編輯:徐柳)