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    UPLC-MS/MS同時(shí)測(cè)定人血漿中替米沙坦與氨氯地平濃度

    2019-11-16 11:04:40李艷玲王曼王振磊王鴻芡夏伯姍岳嬌梁秀芳南峰向瑾王永生秦永平張梅
    中國(guó)測(cè)試 2019年7期
    關(guān)鍵詞:替米沙坦血藥濃度氨氯地平

    李艷玲 王曼 王振磊 王鴻芡 夏伯姍 岳嬌梁秀芳 南峰 向瑾 王永生 秦永平 張梅

    摘要:建立UPLC-MS/MS法同時(shí)測(cè)定人血漿中替米沙坦與氨氯地平的濃度,用于研究替米沙坦/氨氯地平片的藥代動(dòng)力學(xué)。采用Waters BEH C18(2.1mm×50mm,1.7μm)色譜柱,流動(dòng)相A:甲酸:氨水:水(1:0.2:1000,v/v/v),流動(dòng)相B:甲酸:氨水:乙腈:水(1:0.2:950:50,v/v/v/v),進(jìn)行梯度洗脫,流量0.3mL/min,以d3-替米沙坦、d4-氨氯地平作內(nèi)標(biāo)。血漿樣本液液萃取后,采用SHIMADZU SIL-30 AD型UPLC進(jìn)樣分離,美國(guó)AB Sciex QTRAP 5500質(zhì)譜儀在MRM模式下檢測(cè)。結(jié)果表明:替米沙坦在0.50~500ng/mL范圍內(nèi),氨氯地平在0.05~8.00ng/mL范圍內(nèi)線性良好;替米沙坦及內(nèi)標(biāo)的保留時(shí)間均為1.43~,氨氯地平及內(nèi)標(biāo)的保留時(shí)間均為1.31min;替米沙坦萃取回收率103.0%~104.2%、氨氯地平萃取回收率54.6%~66.5%;方法的特異性、靈敏性、線性、精密度、準(zhǔn)確度、基質(zhì)效應(yīng)以及穩(wěn)定性驗(yàn)證數(shù)據(jù)均符合相關(guān)要求。該法快速、靈敏、專屬性強(qiáng)、重現(xiàn)性好,適用于替米沙坦/氨氯地平的血藥濃度測(cè)定。

    關(guān)鍵詞:UPLC-MS/MS;替米沙坦;氨氯地平;血藥濃度

    中圖分類號(hào):R917 文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A 文章編號(hào):1674-5124(2019)07-0066-08

    收稿日期:2019-01-21;收到修改稿日期:2019-03-06

    作者簡(jiǎn)介:李艷玲(1994-),女,山西運(yùn)城市人,碩士研究生,專業(yè)方向?yàn)樗幬锓治觥?/p>

    通信作者:張梅(1963-),女,四川成都市人,教授,主要從事中藥及復(fù)方物質(zhì)基礎(chǔ)與質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)化研究。

    0 引言

    高血壓與心腦血管疾病密切相關(guān),其高發(fā)病率和高致死率極大地影響公眾健康[1-3]。替米沙坦(telmlsartan)是一種廣泛用于治療高血壓和心力衰竭的血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑(angiotensin 11 receptorblockers,ARBs)[4-6],氨氯地平(amlodipine)是一種長(zhǎng)效、可有效控制血壓的二氫吡啶類鈣通道拮抗劑[7]。研究表明,替米沙坦和氨氯地平在單藥治療高血壓方面已顯示出良好的療效[8],而替米沙坦/氨氯地平片(40/5mg)是替米沙坦和氨氯地平的復(fù)方制劑,其在降低血壓方面被認(rèn)為比單藥治療更有效、更耐受,且優(yōu)于其他傳統(tǒng)聯(lián)合用藥方案[9-10]。在研究替米沙坦/氨氯地平片的藥代動(dòng)力學(xué)及生物利用度時(shí),需要測(cè)定兩種藥物的血藥濃度。目前,國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)報(bào)道的LC-MS/MS分析方法多集中于單獨(dú)測(cè)定生物樣本中替米沙坦[11-13]或氨氯地平[14-16]的含量,同時(shí)測(cè)定人血漿中替米沙坦和氨氯地平的方法國(guó)內(nèi)外較少報(bào)道。張鶴等[17]在測(cè)定Beagle犬血漿中替米沙坦和氨氯地平的濃度時(shí)分別采用乙腈沉淀蛋白測(cè)定替米沙坦和液液萃取測(cè)定氨氯地平兩個(gè)方法,需要處理兩份樣本、進(jìn)樣兩次,工作量大、耗時(shí)長(zhǎng),靈敏度低,且采用非同位素內(nèi)標(biāo)奈普生和鹽酸克倫特羅;Ravi VB等[18]采用固相萃?。⊿PE)同時(shí)測(cè)定人血漿中替米沙坦和氨氯地平的濃度,以非同位素標(biāo)記藥物卡馬西平作內(nèi)標(biāo),存在血漿用量大(250μL)、成本高、耗時(shí)長(zhǎng),精密度較差等問(wèn)題。本研究使用同位素標(biāo)記藥物作內(nèi)標(biāo),用100μL血漿,在堿性條件下通過(guò)液液萃取,一次進(jìn)樣可同時(shí)測(cè)定血漿中高響應(yīng)、高濃度的替米沙坦和低濃度的氨氯地平濃度,具有線性范圍廣、靈敏度高、血漿用量少、準(zhǔn)確度和精密度好、操作簡(jiǎn)便,耗時(shí)短、成本低等特點(diǎn),適用于高通量的分析檢測(cè)工作,已成功應(yīng)用于健康志愿者口服替米沙坦/氨氯地平片(40/5mg)后的臨床藥代動(dòng)力學(xué)及生物利用度研究的大量樣本(5400余個(gè))檢測(cè),結(jié)果良好。

    1 儀器與試藥

    1.1 儀器

    日本SHIMADZU SIL-30 AD型高效液相色譜儀;美國(guó)AB Sciex QTRAP 5500三重四級(jí)桿串聯(lián)質(zhì)譜儀;數(shù)據(jù)采集用Analyst工作軟件(Version 1.6.3);5810R低溫離心機(jī)(德國(guó)Eppendorf公司);XP205DR十萬(wàn)分之一電子分析天平(法國(guó)Mettler Toledo公司);Targin BT-Ⅲ水浴式氮吹儀(北京踏錦科技有限公司)。

    1.2 試藥

    苯磺酸氨氯地平對(duì)照品,中國(guó)食品藥品檢定研究院,批號(hào)100374-201204,純度99.9%:替米沙坦對(duì)照品,中國(guó)食品藥品檢定研究院,批號(hào)100629-201202,純度99.6%;同位素標(biāo)記的替米沙坦(d3-替米沙坦)對(duì)照品,加拿大TRC公司,批號(hào)1-TEK-100-2,化學(xué)純度97.0%,同位素純度99.1;同位素標(biāo)記的氨氯地平(d4-氨氯地平)對(duì)照品,加拿大TRC公司,批號(hào)11-PSB41-1,化學(xué)純度98.0%,同位素純度99.7%。試驗(yàn)制劑(替米沙坦氨氯地平片,四川自豪時(shí)代藥業(yè)有限公司,批號(hào):160405,規(guī)格:40/5mg/片);參比制劑(替米沙坦氨氯地平片,勃林格殷格翰國(guó)際藥業(yè)有限公司,批號(hào):505254,規(guī)格:40/5mg/片)。乙腈、甲酸,美國(guó)Thermo Fisher公司,色譜純;氨水,二氯甲烷、異丙醇,成都科隆公司,分析純;超純水,美國(guó)Millipore公司Millipore型超純水器自制。

    2 方法

    2.1 色譜條件

    色榭主:Waters BEH C18(2.1mm×50mm,1.7μm)色譜柱,美國(guó)Waters公司;柱溫:40℃;流動(dòng)相A:甲酸:氨水:水(1:0.2:1000,v/v/v),流動(dòng)相B:甲酸:氨水:酬青:水(1:0.2:950:50,v/v/v/v),流量0.3mL/min。梯度洗脫:0.01~1.10min,B相38%~100%;1.10~1.80min,B相維持100%;1.80~1.81min,B相100%~38%:1.81~2.50min,B才匪時(shí)寺38%。流量:0.3mL/min,進(jìn)樣量:5μL,進(jìn)樣時(shí)長(zhǎng):2.50min。

    2.2 質(zhì)譜條件

    采用多反應(yīng)離子監(jiān)測(cè)(MRM,multiple reactionmonitoring),ESI(電噴霧離子源,electron sprayionization)正離子化方式檢測(cè),氣簾氣35 psi(1psi=6894.757Pa),霧化氣60psi,加熱輔助氣60psi,噴霧電壓5500V,離子源溫度500℃,去簇電壓70V,射人電壓10V,射出電壓13V。替米沙坦、d3-替米沙坦的檢測(cè)離子對(duì)分別為(m/z)515.2→276.2、518.2→279.2,碰撞能量38V;氨氯地平、d4-氨氯地平的檢測(cè)離子對(duì)分別為(m/z)409.2→238.2、413.2→238.2,碰撞能量15V。

    2.3 溶液的配制

    2.3.1 替米沙坦/氨氯地平標(biāo)準(zhǔn)曲線儲(chǔ)備液及工作液配制

    用十萬(wàn)分之一天平分別精密稱取替米沙坦對(duì)照品10mg(相當(dāng)于替米沙坦9.96mg),苯磺酸氨氯地平對(duì)照品10mg(相當(dāng)于氨氯地平7.20mg),用甲醇分別定容于50mL容量瓶,混勻即得質(zhì)量濃度為200μg/mL的替米沙坦儲(chǔ)備液和150μg/mL的氨氯地平儲(chǔ)備液。替米沙坦/氨氯地平儲(chǔ)備液用35%乙腈水溶液進(jìn)一步稀釋成相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)曲線工作液,替米沙坦?jié)舛葹?0000,9000,5000,1600,400,100,20,10ng/mL,氨氯地平濃度為160,144,80,40,16,4,2,1ng/mL,置-35℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

    2.3.2 替米沙坦/氨氯地平質(zhì)控儲(chǔ)備液及工作液配制

    采用2.3_1方法分別制得質(zhì)量濃度為200μg/mL的替米沙坦儲(chǔ)備液和150μg/mL的氨氯地平儲(chǔ)備液。替米沙坦/氨氯地平儲(chǔ)備液用35%乙腈水溶液進(jìn)一步稀釋成相應(yīng)的質(zhì)控工作液,替米沙坦?jié)舛葹?000,800,30,10ng/mL,氨氯地平濃度為128,20,3,1ng/mL,置-35℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

    2.3.3 內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備液及工作液配制

    用10mL甲醇溶解d3-替米沙坦對(duì)照品1mg(規(guī)格:1.0mg/#k)于10mL容量瓶中,即得濃度為100μg/mL的d3替米沙坦儲(chǔ)備液;用十萬(wàn)分之一天平精密稱取d4-氨氯地平對(duì)照品1mg(規(guī)格:5.0mg/瓶),置于10mL容量瓶中,用甲醇溶解并定至刻度,即得濃度為100μg/mL的d4-氨氯地平儲(chǔ)備液。d3-替米沙坦/d4-氨氯地平儲(chǔ)備液用35%乙腈水溶液進(jìn)一步稀釋成內(nèi)標(biāo)工作液,制得濃度為20ng/mL的d3-替米沙坦和0.5ng/mL d4-氨氯地平(d3-TM-20ng/mL+d4-AL-0.5ng/mL),置-35℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

    2.4 樣品預(yù)處理與測(cè)定方法

    取血漿樣本100μL,加入50μL內(nèi)標(biāo)工作液,加入50μL0.5%氨水,混勻后加入2.0mL,萃取劑(二氯甲烷:異丙醇=97:3),渦旋混合5min,低溫離心5min(3000r/min,8℃),射水真空泵負(fù)壓抽棄水層,轉(zhuǎn)移下層有機(jī)層至尖底試管中,于40℃水浴中通空氣流揮干。殘?jiān)?0μL35%乙腈(含0.2%甲酸)復(fù)溶,取上清液進(jìn)樣5μL。

    2.5 方法學(xué)相關(guān)考察

    2.5.1 專屬性

    在本實(shí)驗(yàn)條件下,使用6個(gè)不同來(lái)源的空白基質(zhì),按照“2.4樣品預(yù)處理與測(cè)定方法”下操作,分析評(píng)價(jià)藥物及內(nèi)標(biāo)出峰處是否產(chǎn)生干擾,考察替米沙坦和氨氯地平的專屬性。

    2.5.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線

    將替米沙坦/氨氯地平標(biāo)準(zhǔn)曲線系列工作液按照1:19(v/v)的比例平行加入到空白血漿中,得替米沙坦質(zhì)量濃度為500,450,250,80,20,5,1,0.5ng/mL和氨氯地平質(zhì)量濃度為8,7.2,4,2,0.8,0.2,0.1,0.05ng/mL的替米沙坦/氨氯地平混合標(biāo)準(zhǔn)曲線血漿樣品。按照“2.4樣品預(yù)處理與測(cè)定方法”下操作,以樣品和內(nèi)標(biāo)的峰面積比(area ratio)為縱坐標(biāo),樣品濃度(ng/mL)為橫坐標(biāo),以1/c2為權(quán)重系數(shù)進(jìn)行回歸,得血漿中替米沙坦和氨氯地平的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

    2.5.3 準(zhǔn)確度與精密度

    將替米沙坦/氨氯地平質(zhì)控系列工作液按照1:19(v/v)的比例平行加入到空白血漿中,得替米沙坦質(zhì)量濃度為400,40,1.5,0.5ng/mL(定量下限)和氨氯地平質(zhì)量濃度為6.4,1,0.15,0.05ng/mL(定量下限)的替米沙坦/氨氯地平混合質(zhì)控血漿樣本,每個(gè)濃度平行6份,按照“2.4樣品預(yù)處理與測(cè)定方法”下操作檢測(cè)3批,分析計(jì)算批內(nèi)、批間精密度和準(zhǔn)確度。定量下限是標(biāo)準(zhǔn)曲線上的最低濃度點(diǎn)。分析方法的準(zhǔn)確度表示為標(biāo)示濃度的回收率(RE%)。精密度表示為測(cè)量值的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)。

    2.5.4 稀釋系數(shù)考察

    制備高濃度血漿樣本,理論濃度分別為替米沙坦800ng/mL,氨氯斷平12.8ng/mL,將空白血漿與檢測(cè)血漿按照=1:1(v/v)稀釋6份,按照“2.4樣品預(yù)處理與測(cè)定方法”下操作后進(jìn)樣。計(jì)算其精密度和準(zhǔn)確度。

    2.5.5 萃取回收率

    制備高、中、低3個(gè)濃度質(zhì)控血漿樣本,每個(gè)濃度3份,按照“2.4樣品預(yù)處理與測(cè)定方法”下操作,以提取后的高、中、低3個(gè)濃度質(zhì)控血漿樣本進(jìn)樣得到的峰面積與空白血漿直接加入相應(yīng)基質(zhì)效應(yīng)工作液后進(jìn)樣得到的未提取峰面積的比值,計(jì)算血漿中替米沙坦、氨氯地平與內(nèi)標(biāo)d3-替米沙坦、d4-氨氯地平的萃取回收率。

    2.5.6 基質(zhì)效應(yīng)

    取6個(gè)不同來(lái)源的空白血漿,每一空白血漿6份,共計(jì)36份,按照“2.4樣品預(yù)處理與測(cè)定方法”下操作,向揮干后的空白血漿樣本中加入底、高濃度相應(yīng)進(jìn)樣濃度工作液含內(nèi)標(biāo)工作液,分別得到基質(zhì)樣品中替米沙坦、氨氯地平與內(nèi)標(biāo)d3-替米沙坦、d4-氨氯地平的峰面積,同時(shí)以相應(yīng)進(jìn)樣濃度工作液直接進(jìn)樣得到對(duì)照樣品中藥物及內(nèi)標(biāo)的峰面積?;|(zhì)效應(yīng)為基質(zhì)樣品的平均峰面積與對(duì)照樣品的平均峰面積的比值。

    2.5.7 穩(wěn)定性

    以35%乙腈(含0.5%甲酸)為溶劑,將相應(yīng)儲(chǔ)備液配制成與標(biāo)準(zhǔn)曲線最高管進(jìn)樣濃度一致的穩(wěn)定性考察工作液,每個(gè)分別制備6份,以峰面積比值計(jì)算平均穩(wěn)定性偏差考察儲(chǔ)備液短期保存穩(wěn)定性和長(zhǎng)期保存穩(wěn)定性,工作液短期保存穩(wěn)定性和長(zhǎng)期保存穩(wěn)定性。

    按照實(shí)際測(cè)定過(guò)程可能影響藥物穩(wěn)定性的因素,以涵蓋血漿樣品的預(yù)期保存條件,分別制備高、低2個(gè)濃度質(zhì)控血漿樣本,按照“2.4樣品預(yù)處理與測(cè)定方法”下操作,記錄色譜峰面積,由當(dāng)日標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算其濃度,與配制濃度比較考察各因素的穩(wěn)定性。

    3 結(jié)果

    3.1 專屬性

    空白血漿色譜圖見圖1(a)和圖1(b),替米沙坦(TM)、氨氯地平(AL)及其內(nèi)標(biāo)(d3-TM、d4-AL)出峰處均無(wú)響應(yīng)。最低定量限濃度血漿樣本進(jìn)樣后,替米沙坦與內(nèi)標(biāo)d3-替米沙坦的保留時(shí)間為1.43min、氨氯地平與d4-氨氯地平的保留時(shí)間為1.31min。其色譜圖見圖Z(o)和圖1(d),由圖可知血漿內(nèi)源性雜質(zhì)均不干擾替米沙坦、內(nèi)標(biāo)d3-替米沙坦及氨氯地平、d4-氨氯地平的測(cè)定。

    3.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線

    以待測(cè)物濃度x為橫坐標(biāo),待測(cè)物與內(nèi)標(biāo)的峰面積比值y為縱坐標(biāo),進(jìn)行線性回歸得替米沙坦、氨氯地平的標(biāo)準(zhǔn)曲線。替米沙坦:y=0.0716x+0.0103(r2=0.9988);氨氯地平:y-0.916x-0.001 94(r2=0.9990),權(quán)重系數(shù)為1/c2。結(jié)果表明,替米沙坦在0.5~500ng/mL、氨氯地平在0.05~8ng/mL范圍線性良好。定量下限是指標(biāo)準(zhǔn)曲線上的最低濃度點(diǎn),替米沙坦信噪比(S/N)為33,氨氯地平信噪比(S/N)為19.8,

    3.3 準(zhǔn)確度與精密度

    如表1所示,替米沙坦每一濃度水平樣品的批內(nèi)精密度(RSD%)在0.8%~5.2%之間,批間精密度在3.1%~7.3%之間;批內(nèi)準(zhǔn)確度(RE%)在89.4%~109.2%,批間準(zhǔn)確度在96.1%~105.1%。氨氯地平每一濃度水平樣品的批內(nèi)精密度在 0.9%~6.7%之間,批間精密度在3.5%~5.9%之間;批內(nèi)準(zhǔn)確度在94.0%~109.4%,批間準(zhǔn)確度在98.3%~105.4%。其中最低管濃度(定量下限)替米沙坦準(zhǔn)確度范圍為89.4%~99.8%,精密度小于6.2%,氨氯地平準(zhǔn)確度范圍為94.0%~101.7%,精密度小于6.7%。

    3.4 稀釋系數(shù)考察

    分別考察了2倍的稀釋驗(yàn)證,結(jié)果可知,替米沙坦精密度為2.8%,氨氯地平精密度為1.1%,替米沙坦準(zhǔn)確度偏差為-1.9%,氨氯地平準(zhǔn)確度偏差為6.1%。

    3.5 基質(zhì)效應(yīng)

    以內(nèi)標(biāo)校準(zhǔn)后測(cè)定6次的平均基質(zhì)效應(yīng)低、高濃度血漿樣本中替米沙坦分別為100.4%,100.8%,氨氯地平分別為107.0%,106.5%;替米沙坦RSD分別為3.6%和3.4%,氨氯地平分別為1.2%和1.2%,結(jié)果見表2。

    3.6 萃取回收率

    替米沙坦、氨氯地平在低、中、高3個(gè)質(zhì)控水平的回收率分別為103.0%~104.2%和54.6%~66.5%,表明萃取效率令人滿意,且無(wú)濃度依賴性。結(jié)果見表2。

    3.7 穩(wěn)定性

    儲(chǔ)備液穩(wěn)定性數(shù)據(jù)及血漿樣本各項(xiàng)相關(guān)穩(wěn)定性數(shù)據(jù)如表3、表4所示,平均穩(wěn)定性偏差均小于10%,符合穩(wěn)定性相關(guān)要求。

    4 應(yīng)用

    本法已用于中國(guó)健康受試者,在3個(gè)周期內(nèi)分別單次口服給予替米沙坦/氨氯地平片的血藥濃度測(cè)定,其單次給藥的平均血藥濃度一時(shí)間曲線如圖2所示。由圖可知,試驗(yàn)制劑與參比制劑單次給藥替米沙坦、氨氯地平的藥時(shí)曲線變化趨勢(shì)一致。

    5 討論

    5.1 樣本預(yù)處理

    本研究中替米沙坦、氨氯地平及其內(nèi)標(biāo)為中等極性化合物,由于沉淀蛋白法不能濃集樣本,氨氯地平濃度低,檢測(cè)靈敏度無(wú)法滿足定量要求,因此只能考慮具有濃集功能的固相萃取或液液萃取法,固相萃取成本高,條件優(yōu)化較為復(fù)雜,操作費(fèi)時(shí),故確定采用液液萃取。在進(jìn)行萃取劑的選擇時(shí),分別考察了甲基叔丁基醚、二氯甲烷和乙酸乙酯。甲基叔丁基醚萃取回收率過(guò)低;乙酸乙酯萃取回收率與基質(zhì)效應(yīng)雖合格,但易造成色譜柱堵塞;二氯甲烷-異丙醇(97:3,v/v)作萃取劑時(shí),氨氯地平萃取回收率仍達(dá)不到要求,為了提高氨氯地平的萃取回收率,考慮其結(jié)構(gòu)中的含氮雜環(huán),發(fā)現(xiàn)萃取時(shí)加入0.5%氨水的堿性環(huán)境,藥物及內(nèi)標(biāo)的萃取回收率和基質(zhì)效應(yīng)均合格(萃取回收率大于50%,基質(zhì)效應(yīng)小于15%),方法學(xué)評(píng)價(jià)結(jié)果證明了這一點(diǎn)。

    5.2 內(nèi)標(biāo)選擇

    本研究選用的是同位素內(nèi)標(biāo),其藥物與內(nèi)標(biāo)的色譜行為相似、萃取回收率平行、離子化效應(yīng)相近,測(cè)定結(jié)果更準(zhǔn)確,較文獻(xiàn)使用的內(nèi)標(biāo):鹽酸克倫特羅、奈普生[17]、卡馬西平[18]等更為理想。d3-替米沙坦做內(nèi)標(biāo)由于有同位素影響,在藥物檢測(cè)離子對(duì)處有峰,為了使內(nèi)標(biāo)在藥物出峰處的響應(yīng)值低于最低檢測(cè)限的20%,我們降低了內(nèi)標(biāo)的使用量。

    5.3 色譜質(zhì)譜條件

    替米沙坦為高濃度,高響應(yīng),氨氯地平為低濃度,低響應(yīng),高濃度替米沙坦由于響應(yīng)太高而超出質(zhì)譜響應(yīng)線性范圍,不能準(zhǔn)確定量,我們通過(guò)調(diào)整質(zhì)譜參數(shù),使替米沙坦CE由42V降低到38V,響應(yīng)調(diào)整至合理水平,實(shí)現(xiàn)一針進(jìn)樣可同時(shí)分析兩個(gè)濃度差別大的樣本;試驗(yàn)采用梯度洗脫將兩個(gè)藥物成分保留時(shí)間調(diào)整到比較合適,替米沙坦保留時(shí)間為1.43min,氨氯地平為1.31min,保證兩個(gè)成分既能同時(shí)定量又互不干擾;且待每個(gè)樣本出峰后用95%乙腈沖洗色譜柱平衡后再進(jìn)樣,降低了基質(zhì)效應(yīng),使樣本響應(yīng)度始終保持一致。

    6 結(jié)束語(yǔ)

    本研究為同時(shí)定量測(cè)定健康受試者血漿中替米沙坦/氨氯地平的血藥濃度,其中替米沙坦最低定量下限為0.50ng/mL,氨氯地平為0.05ng/mL,相較于單獨(dú)或分開測(cè)定血漿中替米沙坦、氨氯地平的濃度(氨氯地平定量下限僅0.1ng/mL),我們實(shí)驗(yàn)建立了一種快速、靈敏的UPLC-MS/MS聯(lián)用技術(shù),方法簡(jiǎn)便,靈敏度高,精密度好,耗時(shí)短,成本低、血漿用量少(僅100μL),重現(xiàn)性好,適合高通量分析,已經(jīng)成功應(yīng)用于替米沙坦/氨氯地平片在中國(guó)健康受試者的藥代動(dòng)力學(xué)研究。

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    (編輯:徐柳)

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