藏藥抗腫瘤的研究概況

張光云　陳普

【摘 要】 隨著癌癥患病率和死亡率的不斷升高，尋找能有效抑制癌細胞生長、延長患者生存及提高生活質量的藥物已迫在眉睫。民族藥是探索和開發(fā)新藥的重要方向，是各民族在生產(chǎn)生活實踐中不斷積累總結的智慧結晶。文章以藏藥為基礎，通過收集整理、分析歸納、總結藏藥在抗腫瘤中的有效藥物、活性成分及作用機制，以期為藏藥在抗腫瘤方面的進一步研究及挖掘提供參考。

【關鍵詞】 藏藥;抗腫瘤;有效成分;作用機制

【中圖分類號】RT3 【文獻標志碼】 A【文章編號】1007-8517（2019）13-0072-04

癌癥又稱為惡性腫瘤，有研究顯示中國的癌癥成為2010年以來死亡的主要因素，且成為一個主要的公共衛(wèi)生問題[1]。隨著現(xiàn)代人生活環(huán)境和生活方式的改變，癌癥患病率和死亡率的逐漸升高，嚴重危害人類的健康。為此，尋找到一種有效且副作用小的抗腫瘤藥物已然成為學者們最為關心的迫切問題。近年來，藏藥在抗腫瘤方面的應用價值越來越得到學者們的肯定，藏藥屬于天然藥物，因其藥用資源豐富，應用價值高，已成為了挖掘新藥的重要研究方向。筆者以中國知網(wǎng)文獻檢索數(shù)據(jù)庫為主，以“藏藥/藏醫(yī)”、“抗腫瘤/癌癥”、“作用機制”為檢索關鍵詞，以近年來關于抗腫瘤的藏藥研究參考文獻和書目記載為基礎，對藏藥在抗腫瘤上的應用概況綜述如下。

1 藏藥中抗腫瘤活性的成份

藏藥中的天然抗腫瘤活性成分是尋找抗腫瘤藥物的重點方向，對尋找到一種療效好且副作用小的抗腫瘤藥物具有重要的意義。為此，諸多學者一直在不斷的探索抗腫瘤藥物中的主要活性成分。如王曉琴[2]通過提取藏藥矮兔耳草中的總皂苷，使用其對人胃癌MGC-803細胞的增殖和凋亡進行實驗，結果顯示：藏藥矮兔耳草提取物可以抑制人胃癌MGC-803細胞的增殖，且抑制作用具有時效和量效關系;此外，且可誘導人胃癌MGC-803細胞系的凋亡。朱小牧等[3]首次研究從巴夏嘎中分離得到的鴨嘴花堿對A549、A2780、HepG2、LLC細胞增殖的抑制作用，結果顯示鴨嘴花堿對實驗細胞株均有著不同程度的抑制作用，且細胞增殖抑制率與化合物濃度存在量效關系;其中，鴨嘴花堿對LLC的抑制作用最為顯著。令狐浪[4]應用從藏藥巴朱中分離得到了兩種化合物進行誘導腫瘤細胞凋亡實驗，結果顯示兩種化合物均能抑制腫瘤細胞增殖，誘導腫瘤細胞周期阻滯和細胞凋亡，且可增加促凋亡蛋白Bax的表達，降低抗凋亡蛋白Bcl-2的表達。雒艷萍[5]從藏藥裸莖金腰分離出DTFG和TTF兩種黃酮類化合物，實驗結果發(fā)現(xiàn)DTFG可以抑制豚鼠的淋巴細胞活性，TTF對胃癌細胞SGC-7901及白血病耐藥細胞K562/ADM的增殖具有抑制作用;且可誘導胃癌細胞SGC-7901發(fā)生凋亡，體外可促進豚鼠EOS活性。CHANDRAN U等[6]研究發(fā)現(xiàn)三果湯在抗腫瘤上有較好的作用，其作用機制是通過藏藥三果湯散中的槲皮素、鞣花酸等13個生物活性成分與24種癌癥中的17個靶蛋白相互作用;而ZHAO Y等[7]在2018年的體外細胞試驗也證實了三果湯散能對婦科腫瘤細胞發(fā)揮較好的促凋亡作用和抑制作用，能有效的抑制人子宮內膜癌HEC-1-B細胞、人卵巢癌人宮頸癌HeLa細胞和SK-OV-3細胞的增殖，且有劑量相關性。劉波[8]對藏藥濕生扁蕾中口山酮類化合物（Compound 1-4）進行抗癌活性篩選發(fā)現(xiàn)，Compound 1-4對HepG2和HL-60細胞均有較強的細胞毒性，且能夠引起兩種細胞不同程度的發(fā)生凋亡;其中Compound 2的抗癌活性最強，但高濃度時會造成對DNA的損傷。大量的研究證實藏藥余甘子抗腫瘤活性成分是沒食子酸、表兒茶素和鞣花酸[9-11]。李艷等[12]對藏藥寨卡有效部位的分離進行鑒定及研究其抗腫瘤活性，結果顯示藏藥寨卡抗腫瘤的有效部位主要為硫代葡萄糖苷，并對小鼠S180和CT-26實體瘤的生長存在明顯的抑制作用。張芳芳等[13]進行鐮形棘豆提取物抗腫瘤活性的體外實驗發(fā)現(xiàn)鐮形棘豆抗腫瘤活性的主要部位是鐮形棘豆的揮發(fā)油和總黃酮，它們均可不同程度地抑制人癌細胞株的增殖，并呈現(xiàn)出一定的量效關系。

2 藏藥抗腫瘤機制研究

2.1 抑制腫瘤細胞的生長和增殖 細胞增殖是生命體維持生長、發(fā)育、繁殖和遺傳的生命體征，而腫瘤細胞增殖則會對人體的生命健康產(chǎn)生危害作用;因此，從抑制腫瘤細胞增殖方向出發(fā)，去尋找能顯著抑制腫瘤細胞的藥物就顯得更有價值。普布多吉等[14]采用MTT法研究藏藥大花綠絨蒿內生真菌次級代謝對乳腺癌腫瘤細胞株MDA-MB-435的抑制活性，結果顯示抑制率大于80%內生菌菌株有17株，抑制率介于50%～80%之間的內生菌菌株13株，抑制率小于50%的內生菌菌株有10株;抑制率大于80%內生真菌菌株有9個種屬。結果表明，大多數(shù)大花綠絨蒿內生真菌具有良好的抗乳腺癌腫瘤活性。傅永紅[15]使用藏藥甘青烏頭生物堿抑制人源肝癌細胞HepG-2和鼠源肺癌細胞Lewis的增殖，結果表明甘青烏頭脂溶性生物堿和水溶性生物堿對肝癌細胞HepG-2和肺癌細胞Lewis均具有一定的抑制作用，且水溶性生物堿比脂溶性生物堿的抑制作用更加明顯，而抑制作用會隨著作用時間的延長和藥物濃度的增加而增強。顧青等[16]從藏藥鐮形棘豆中分離出7-甲氧基二氫黃酮（ 7-methoxy flavanone，1），7-羥基二氫黃酮 （ 7-hydroxy flavonone，2），2'，4'-二羥基査耳酮（2'，4'-dihydroxy chalcone，3），2'，4 '-二羥基4'-甲氧基查爾酮（ 2'，4 'dihydroxy4'-methoxy chalcone，4），N（2-苯乙基）肉桂酰胺（N2-phenylethyl cinnamamide，5）5中化合物，經(jīng)過MTT試驗發(fā)現(xiàn)化合物3（2'，4'-dihydroxy chalcone，3）對人肝癌細胞HepG2、小鼠黑色素瘤細胞B16F10、人肝癌細胞SMMC7721、人肝癌細胞HuH7以及人乳腺癌細胞MDA-MB231的增殖具有明顯的抑制作用。程燕等[17]研究藏藥柳茶水提物對胃癌耐藥細胞 BGC823/5-FU增殖及藥物敏感性的影響，發(fā)現(xiàn)其可以較好的抑制胃癌耐藥細胞株BGC823/5-FU的生長，并在一定程度上逆轉其化療耐藥，并且抑制抗凋亡蛋白的表達、激活促凋亡蛋白、誘導耐藥細胞發(fā)生凋亡可能是其作用的主要機制。吉立賓[18]運用藏藥雪靈芝水提取物研究其對胃腺癌細胞MGC-803增殖抑制的影響，得出雪靈芝水提取物對MGC-803細胞增殖具有抑制作用，對MGC-803細胞G1期具有阻滯作用及在細胞凋亡中也具有一定的作用;此外，其可通過下調細胞周期正性調節(jié)因子CyclinD1和上調負性調節(jié)因子P21和P16的表達，發(fā)揮G1期阻滯作用;并且雪靈芝水提取物影響MGC-803細胞凋亡可能是通過降低Bc1-2基因表達和升高Bax的基因表達來完成的。

2.2 誘導細胞凋亡與抑制細胞增殖 腫瘤的生成不僅與細胞不斷增殖有關，還與細胞凋亡或死亡受阻關系密切;當細胞凋亡通路受到阻斷，就有可能引發(fā)腫瘤。因此，人們在研究抗腫瘤的藥物中，除了研究怎樣抑制腫瘤細胞增殖外，還通過誘導腫瘤細胞的凋亡來治療腫瘤。楊榮等[19]選用5種不同的人體癌細胞（A549、HepG2、SGC7901、 MM-A375、SHEP1）作為研究對象，為了觀察藏藥綠蘿花抗腫瘤的作用機制，通過MTT分析法篩選出具有顯著抑制效果的SGC7901細胞，結果發(fā)現(xiàn)綠蘿花水煎干膏制劑在體外能通過抑制人胃癌SGC7901細胞增殖和誘導細胞調亡而具有抗腫瘤作用;此外，本實驗還發(fā)現(xiàn)綠蘿花具有增強小鼠機體免疫功能的作用;孫翠翠等[20]研究了綠蘿花水溶性多糖誘導腹水瘤S-180細胞、肝癌HepAl-6細胞和白血病L1210細胞凋亡的作用，結果顯示不同劑量綠蘿花水溶性多糖均具有誘導S-180細胞凋亡的作用，均可上調其早期和晚期凋亡率。有研究顯示[21]，余甘子水提物呈劑量依賴性延長荷EAC或DLA細胞腹水癌小鼠生存期及抑制體外培養(yǎng)的L929細胞的生長、抑制DLA細胞誘導的實體瘤的生長，并推測這種抑制作用與細胞周期阻滯有關;此外，余甘子提取物對人肺癌細胞A549和人肝癌細胞HepG2都有一定的抑制作用，而且其抑制作用和順鉑以及阿霉素存在協(xié)同效果[22];陳靜等[23]發(fā)現(xiàn)余甘子鞣質部位體外對人腫瘤細胞A549、BEL-7402均有明顯的生長抑制作用，且這種抑制作用與誘導腫瘤細胞凋亡及細胞G2/M期阻滯有關;此外，余甘子目前在抗腫瘤方面的研究較為成熟，不僅從余甘子藥物中的不同單體進行研究，在作用機制方面還具有抑制腫瘤血管生成[24-25]和調節(jié)機體免疫力的功效[26]。趙螢[27]研究鐮形棘豆和藏醫(yī)學法炮制馬錢子醇提物對腫瘤細胞增殖及凋亡的影響，結果表明鐮形棘豆和藏醫(yī)學法炮制馬錢子醇提物均能抑制細胞增殖和誘導細胞凋亡，且均呈劑量依懶性。從藥物作用機制對抗腫瘤的藥物進行分析，將有利于進一步明確藥物作用于人體的具體靶點，可為今后開展藥物作用機制研究提供思路及參考。楊光明等[28]研究藏藥鐮形棘豆總黃酮的不同劑量作用于SMMC-7721細胞，觀察藥物對細胞的凋亡情況及其與凋亡相關蛋白的表達情況，發(fā)現(xiàn)鐮形棘豆總黃酮作用SMMC-7721細胞后可凋亡細胞的比例明顯升高; Bcl-2蛋白表達下降，Bax蛋白表達與對照組比較有所降低，但Bcl-2/Bax比值明顯減小，說明鐮形棘豆總黃酮具有抑制SMMC-772細胞的增殖并誘導細胞凋亡的作用，其分子機制可能與下調Bcl-2基因表達和降低Bcl-2/Bax的比值有關。藏藥濕生扁蕾關于抗腫瘤的作用機制較多，有研究報道[29]其對人結腸癌SW480細胞凋亡與調控因子Bcl-2及Bax的mRNA的表達密切相關，藏藥濕生扁蕾作用結腸癌SW480細胞24h后，Bcl-2的mRNA表達量減少，Bax的mRNA表達增多，并呈劑量依賴性;王雅莉等[30]觀察藏藥濕生扁蕾對人結腸癌細胞SW480增殖調控因子CyclinD1、CDK4、PCNA和p21kip1·mRNA表達的影響，結果表明，藏藥濕生扁蕾作用結腸癌SW480細胞24h后，與對照組比較，CyclinD1、CDK4、PCNA mRNA的表達減少，p21kip1·mRNA 的表達增多，并有劑量依賴性，說明濕生扁蕾引起結腸癌SW480細胞凋亡可能與其抑制CyclinD1、CDK4、PCNA mRNA的表達和促進p21kip1·mRNA的表達有關;而盧年華[31]從NF-κB信號通路研究藏藥濕生扁蕾提取物誘導結腸癌細胞凋亡的作用機制，其發(fā)現(xiàn)一定的藏藥濕生扁蕾提取物濃度對NF-κB的表達具有下調作用，且能誘導結腸癌SW480細胞的凋亡。李紅芳等[32]研究發(fā)現(xiàn)藏藥中苯酚類衍生物通過上調核轉錄因子NF-KB 65可能激活凋亡通路從而誘導細胞的凋亡，抑制細胞的增值;此外，細胞內連環(huán)蛋白β-catenin 的表達也上調，進而導致細胞間的粘附性增強，從而抑制了腫瘤細胞的轉移。王飛[33]研究了余甘子抗癌化學物質組分及作用機制，結果發(fā)現(xiàn)余甘子70%乙醇提取物的血漿整體對癌細胞的抑制率較高，特別是對肝癌細胞及宮頸癌細胞的抑制率較好，通過用流式細胞儀對凋亡細胞進行細胞周期測定，發(fā)現(xiàn)余甘子能使癌細胞發(fā)生S期阻滯，影響細胞周期正常進程;對肝癌細胞SMMC-7721和宮頸癌細胞Hela使用余甘子純化后總酚酸和總黃酮，結果均表現(xiàn)出較高的抑制率。

2.3 藏藥抗腫瘤藥物的篩選與新發(fā)現(xiàn) 藏藥在抗腫瘤方面的研究較多，不僅篩選出多種藏藥具有抗腫瘤作用的藥物，且還從逆轉腫瘤多藥耐藥方面對藏藥進行了研究。如黨合群等[34]對21種藏藥進行動物實驗，以篩選出具有抗腫瘤作用的藥物，結果顯示在21種藏藥的各種制劑中，毛盔馬先篙、亞切瑪、沙生鳳毛菊的醇提物和唐古特烏頭生物鹼對小鼠肉瘤180，長毛馬先篙、五脈錄絨篙的醇提物對L615小鼠白血病，禾葉鳳毛菊、五脈錄絨篙的醇提物對大鼠Walker癌肉瘤256有不同程度的抑制作用。宗玉英等[35]對110 種藏藥抗腫瘤體外篩選實驗研究，結果顯示：五種藏藥桃兒七果實、藏木香、裸莖金腰、祁連圓柏、蒼耳草均具有較好的抗腫瘤作用。藏藥紅景天不僅在體外對某些腫瘤細胞有抑制作用，且對機體整體水平也具有抑瘤作用;但紅景天抗腫瘤的具有作用機制至今尚不完全清除，因此需要進一步進行深入研究[36]。黃旭峰等[37]通過文獻整理與訪談，整理出具有抗腫瘤功效的60種藥材和6種復方，發(fā)現(xiàn)這些品種中直接抑制腫瘤細胞生長與增殖的藥材有27種;誘導腫瘤細胞凋亡的藥材有12種;誘導腫瘤細胞分化的藥材有2種;增強機體免疫功能的藥材有3種;由此可看出，藏藥在抗腫瘤上的潛力巨大，將成為今后開展抗腫瘤研究的重要方向。此外，劉慶山等[38]研究藏藥“齋毒”中5個創(chuàng)新活性化合物在腫瘤多藥耐藥的逆轉作用，結果發(fā)現(xiàn)5個化合物分子具有創(chuàng)新的GsT抑制活性，特別對GST兀、GsTp1-1型活性很高，且活性遠遠高于陽性藥依他尼酸，說明這5個化合物具有逆轉腫瘤多藥耐藥的前景，可能成為未來新的抗癌藥和增敏劑來治療腫瘤，其具有較好的藥物開發(fā)前景，因此有必要進行進一步整體水平和細胞的研究。

3 小結

藏藥是我國傳統(tǒng)醫(yī)藥的重要組成部分，藥用資源豐富。其在抗腫瘤上的藥用價值較廣，但目前關于藏藥抗腫瘤的研究還不多，因此今后應該加強藏藥在抗腫瘤應用價值上的研究，以期為解決抗腫瘤治療這一世界難題提供更為有效的治療方案和途徑。筆者從收集整理的文獻可以看出，目前藏藥被研究出具有抗腫瘤效果的藥物仍然很少，且存在以下問題：①大部分藥物研究主要基于體外的細胞增殖和細胞凋亡這兩方面，關于體內的研究報道較少;②研究出來的藥物在臨床上是否有療效少有報道;且大部分的藥物作用機制不清楚，只是從細胞增殖的抑制和誘導細胞凋亡來進行探索;③藥物發(fā)揮抗腫瘤的具體成分研究較少，大部分主要集中在水提取物和醇提取物的研究上。因此，為了充分挖掘藏藥在抗腫瘤上的應用價值，筆者建議從以下方面進行：①增加動物體內的實驗研究，以期為臨床的應用奠定基礎;②充分利用現(xiàn)代技術對具有抗腫瘤的藏藥化學成分進行分離，明確其具體的有效部位或對抗腫瘤有用化合物，再進一步使用有效部分或化合物進行抗腫瘤作用機制的研究;③充分收集整理民間治療腫瘤疾病有效的單驗方，以擴大藏藥抗腫瘤的藥物庫，為尋找到更多有利于治療腫瘤疾病的藥物提供充足資源。

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（收稿日期：2019-04-09 編輯：陶希睿）