大鼠“次髎”穴的取穴方法研究

劉笑萌 許明 鄧石峰 余雨荷 艾坤 張泓

[摘要]目的總結(jié)和分析實(shí)驗(yàn)過程中取穴時(shí)出現(xiàn)的問題，在“次髎”穴解剖結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上，為實(shí)際操作中大鼠“次髎”穴的定位探尋一種準(zhǔn)確可行的取穴方法。方法40只SD大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)組，每組各20只。對(duì)照組以Cy1棘突為骨性標(biāo)志進(jìn)行穴位定位，實(shí)驗(yàn)組以L6棘突為骨性標(biāo)志進(jìn)行穴位定位。分別對(duì)兩組大鼠進(jìn)行“次髎”穴定位及針刺，并在X線下對(duì)大鼠腰骶部正、側(cè)位進(jìn)行觀察，檢驗(yàn)針尖是否準(zhǔn)確插入S2后孔中。結(jié)果對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組的準(zhǔn)確率分別為50.0%、85.0%。結(jié)論以L6棘突為骨性標(biāo)志進(jìn)行大鼠“次髎”穴位的定位準(zhǔn)確率更高，今后對(duì)動(dòng)物穴位的定位應(yīng)綜合解剖學(xué)、針下手感等方面進(jìn)行描述，并結(jié)合影像學(xué)檢查，更加直觀的進(jìn)行驗(yàn)證。

[關(guān)鍵詞]次髎;取穴方法;大鼠;Cy1棘突;L6棘突

[中圖分類號(hào)]R245[文獻(xiàn)標(biāo)志碼]A [文章編號(hào)]doi：10.3969/j.issn.1674-070X.2019.11.018

中醫(yī)學(xué)理論中“次髎”穴屬足太陽(yáng)膀胱經(jīng)，主“大小便不利”，是針刺治療生殖、泌尿等系統(tǒng)疾病的經(jīng)驗(yàn)用穴，也是目前動(dòng)物實(shí)驗(yàn)常用腧穴。大鼠腧穴定位發(fā)展較久，在針刺相關(guān)研究中應(yīng)用較多。通過查閱大量文獻(xiàn)，發(fā)現(xiàn)大鼠穴位相關(guān)圖譜及資料僅給出“次髎”穴的簡(jiǎn)單定位，對(duì)具體的取穴方法無(wú)詳細(xì)描述，大大增加了針灸科研人員實(shí)際操作中的不確定性，導(dǎo)致研究結(jié)果缺乏說服力，影響針灸相關(guān)研究的可靠性。因此，探尋一種準(zhǔn)確簡(jiǎn)便的大鼠“次髎”穴取穴方法具有重要意義。

本研究在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的過程中，通過反復(fù)操作體會(huì)，以SD大鼠為研究對(duì)象，基于解剖學(xué)定位及影像學(xué)觀察，總結(jié)取穴過程中出現(xiàn)的問題，以期為大鼠“次髎”穴定位提供一種精確簡(jiǎn)便的方法。

1取穴方法探析

大鼠有頸椎7塊、胸椎13塊、腰椎6塊、薦椎4塊、尾椎若干（椎式為C7T13L6S4Cy27-31）。通過觸摸及肉眼觀察發(fā)現(xiàn)：L6棘突與其他腰椎棘突相比較為直立：S4棘突形狀同Cy1棘突相似，均較低矮：L6/S1棘突間隙明顯大于S4/Cy1棘突間隙。以上觀察結(jié)果與《大鼠的解剖和組織》資料中的描述相符，可作為椎骨定位的依據(jù)。見圖1。

目前選取“次髎”穴進(jìn)行的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)較多，但取穴方法各有不同。有學(xué)者提出以Cy1棘突為骨性標(biāo)志進(jìn)行定位，方法如下：通過反復(fù)上下提放鼠尾，感受骶尾結(jié)合處（S4與Cy1間關(guān)節(jié)）的活動(dòng)，確定Cy1棘突的位置，沿Cy1棘突向上觸摸2個(gè)棘突，即為S263棘突間隙，在間隙正中偏上處旁開5-10mm直刺入15mm，為“次髎”穴。但在實(shí)際操作中，由于大鼠皮下脂肪較厚，Cy1棘突常難以辨別，大大增加了定位的難度。同時(shí)，在針刺過程中大鼠易掙扎蜷縮，降低了取穴的準(zhǔn)確性。根據(jù)大鼠解剖學(xué)，其兩側(cè)髂嵴最高點(diǎn)連線平對(duì)L6棘突，是腰骶部明顯的骨性標(biāo)志。

基于以上解剖特點(diǎn)，本研究提出一種以大鼠L6棘突為骨性標(biāo)志的穴位定位方法，具體操作如下：（1）以大鼠兩側(cè)髂嵴最高點(diǎn)連線定位16棘突，可明顯觸及L6棘突在皮下觸感圓鈍，與S1棘突間隙較大：（2）操作者左手（非利手）中指、無(wú)名指、小指輕輕固定大鼠胸腰椎部位，防止因大鼠掙扎蜷縮影響進(jìn)針，食指向下將大鼠腰骶部皮膚展平，使皮膚緊貼棘突（見圖2）;（3）右手食指指腹從L6棘突向下觸摸2個(gè)棘突后可觸及$2/$3棘突間隙，在間隙正中偏上處旁開5-10mm直刺15mm，即為“次髎”穴。此方法選取較為固定且更加明確的骨性標(biāo)志進(jìn)行定位，增加了“次髎”穴取穴的準(zhǔn)確性。

2取穴方法驗(yàn)證

2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組

健康SD大鼠40只，SPF級(jí)，雌雄各半，體質(zhì)量（240±20）g，由湖南中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供，動(dòng)物許可證號(hào)：SCXK（湘）2016-0002。適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，按隨機(jī)數(shù)字表法分為對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)組，每組20只。對(duì)照組以Cy1棘突為骨性標(biāo)志進(jìn)行穴位定位：實(shí)驗(yàn)組以L6棘突為骨性標(biāo)志進(jìn)行穴位定位。

2.2主要儀器設(shè)備

800mA數(shù)字化X射線攝影系統(tǒng)（荷蘭飛利浦公司），0.25mmx25mm華佗牌一次性無(wú)菌針灸針（蘇州醫(yī)療用品廠有限公司）。

2.3操作步驟

將大鼠俯臥位固定于設(shè)備平臺(tái)上，調(diào)節(jié)800mA直線數(shù)字?jǐn)z影球管高度1m，拍照條件為8.4ms，2.4mAs，57kV。采用上述“1”中方法分別對(duì)兩組大鼠進(jìn)行“次髎”穴定位，定位完畢后，將一次性滅菌毫針刺人穴位。由未參與施針的兩位實(shí)驗(yàn)人員利用BV閱片軟件閱片，并對(duì)X線下大鼠腰骶部進(jìn)行正、側(cè)位進(jìn)行觀察。

2.4準(zhǔn)確率判定

閱片、檢驗(yàn)并記錄針尖是否準(zhǔn)確刺人S2后孔中。若出現(xiàn)兩位實(shí)驗(yàn)人員檢驗(yàn)結(jié)果不同的情況，請(qǐng)第三人閱片，經(jīng)討論達(dá)成一致后確定最終結(jié)果。以針尖準(zhǔn)確刺人S2后孔的大鼠個(gè)數(shù)與該組大鼠總個(gè)數(shù)的百分比作為準(zhǔn)確率。

2.5 結(jié)果

對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組的準(zhǔn)確率分別為50.0%、85.0%，實(shí)驗(yàn)組準(zhǔn)確率較高，即以大鼠兩側(cè)髂嵴最高點(diǎn)連線準(zhǔn)確定位L6棘突的基礎(chǔ)上，再向下觸摸S2、S3棘突間隙進(jìn)行定位的取穴方法準(zhǔn)確率較高。見表1-2和圖3。

3思考

人體“次髎”穴的定位在《針灸甲乙經(jīng)》《針灸聚英》中均有記載：“次髎在第二空，夾脊陷者中”;《世界衛(wèi)生組織標(biāo)準(zhǔn)針灸經(jīng)穴定位滬記載：“次髎在骶部，正對(duì)第2骶后孔中”。對(duì)于“次髎”穴的定位，諸多文獻(xiàn)引用《實(shí)驗(yàn)針灸學(xué)》，其中僅提及兔“次膠”穴可參照人體“次髎”穴進(jìn)行定位，并未對(duì)大鼠“次髎”穴定位進(jìn)行說明。查閱大量文獻(xiàn)亦發(fā)現(xiàn)，幾乎所有動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究中大鼠“次髎”穴均參照人體“次髎”穴定位于第2骶后孔中。將大鼠“次髎”穴定位于第2骶后孔中能否類比人體“次髎”穴？研究表明穴位在組織結(jié)構(gòu)、生物物理特性、病理反應(yīng)、刺激效應(yīng)等方面均具有特異性。人體“次髎”穴被證實(shí)是富含血管、神經(jīng)的結(jié)締組織集中部位。大鼠有3對(duì)骶后孔，骨性結(jié)構(gòu)與人體雖存在一定差別，但在大鼠骶后孔內(nèi)有脊神經(jīng)前、后支通過，同非穴區(qū)相比有顯著差異。穴位與其所屬靶器官間相對(duì)緊密的聯(lián)系可能是穴位特異性的形態(tài)機(jī)能學(xué)基礎(chǔ)，大量臨床研究表明，針刺“次髎”穴對(duì)改善泌尿系統(tǒng)、生殖系統(tǒng)疾病療效確切。同時(shí)，大量基礎(chǔ)研究證實(shí)，將大鼠“次髎”穴定位于第2骶后孔中并施以針刺，對(duì)泌尿系統(tǒng)、生殖系統(tǒng)等疾病的模型大鼠相應(yīng)癥狀治療效果明顯。由此，筆者認(rèn)為大鼠“次髎”穴選取在同人體“次髎”穴的相同位置（即第2骶后孔中），無(wú)論從組織結(jié)構(gòu)、刺激效應(yīng)及治療效果等方面均較為合理。

隨著對(duì)動(dòng)物穴位定位的研究增多，取穴方法準(zhǔn)確性的判斷方式也逐漸增多。通過斷層解剖驗(yàn)證取穴的準(zhǔn)確性存在一定主觀性，且不夠直觀。于金娜等通過10倍顯微鏡觀察穴區(qū)解剖結(jié)構(gòu)。X線對(duì)于骨骼的分辨度較高，且針灸針與骨在X線下可較好的被區(qū)分。本研究旨在驗(yàn)證針尖是否準(zhǔn)確刺人大鼠第2骶后孔中，因此，我們選擇將針刺后的大鼠置于X線下進(jìn)行準(zhǔn)確性判斷，可更加直觀的進(jìn)行驗(yàn)證。目前X線在骨折大鼠成模的判斷、胃腸運(yùn)動(dòng)等方面的應(yīng)用較廣泛，應(yīng)用于穴位解剖學(xué)定位較少，但在今后穴位定位的探究中借助影像學(xué)方法可使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更加明確、直觀。

《黃帝內(nèi)經(jīng)》中記載“刺之要，氣至而有效”“得氣”也是保證針刺療效的必要條件?！暗脷狻敝饕ā搬樃小焙汀搬t(yī)者得氣”兩方面，其中后者指醫(yī)者（操作者）行針時(shí)的手感。大鼠不能主觀地告知我們是否產(chǎn)生“得氣”感，因此，需要通過操作者感受針下手感來判斷是否“得氣”。操作者在將針尖刺人大鼠S2后孔中時(shí)，明顯感受到孔內(nèi)組織對(duì)針的提、插均有一定阻力，這種針下手感與針尖觸碰骨面的“堅(jiān)硬感”及刺人軟組織的“落空感”均有不同，而與潘衛(wèi)星提出的“手下‘沉緊狀阻力感”、劉繼生提出的“沉緊感”等描述基本相符?！稑?biāo)幽賦》也將“得氣”時(shí)操作者的針下感覺形容為“氣之至也，如魚吞鉤餌之浮沉”“輕滑慢而未來，沉澀緊而已至”。穴位特異性、針刺手法等均是影響“得氣”的關(guān)鍵因素。有研究提出這種針下手感可能與穴周肌肉的輕度收縮及結(jié)締組織纏繞有關(guān)，出針阻力可作為評(píng)價(jià)“得氣”的量化指標(biāo)之一。在對(duì)動(dòng)物穴位進(jìn)行取穴時(shí)，注重操作者對(duì)針下手感的體會(huì)，可增加取穴的準(zhǔn)確性、保證針刺療效，且更加符合傳統(tǒng)針刺辨證取穴觀點(diǎn)和針灸學(xué)整體調(diào)節(jié)的根本原則。

本研究通過對(duì)兩種“次髎”穴取穴方法進(jìn)行操作對(duì)比，發(fā)現(xiàn)以L6棘突為標(biāo)志進(jìn)行定位的準(zhǔn)確率較以Cy1棘突為標(biāo)志定位有所提高。驗(yàn)證過程中實(shí)驗(yàn)組仍有3只大鼠未能準(zhǔn)確取穴，故不能排除由于大鼠骶骨結(jié)構(gòu)、體質(zhì)量等方面存在個(gè)體差異對(duì)取穴準(zhǔn)確率的影響。因此，接下來對(duì)動(dòng)物穴位的定位應(yīng)綜合解剖學(xué)、針下手感等方面進(jìn)行研究，并結(jié)合影像學(xué)檢查，更加直觀地進(jìn)行驗(yàn)證。