膠乳增強(qiáng)透射免疫比濁法與電化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測(cè)癌胚抗原結(jié)果比對(duì)

閆紅娟

（平?jīng)鍪腥嗣襻t(yī)院，甘肅 平?jīng)?44000）

癌胚抗原（carcinoembryonic antigen，CEA）是一種由641個(gè)氨基酸組成的酸性糖蛋白，分子量為150～300kD，碳水化合物的含量約在45%～60%［1］。CEA類似于AFP，屬于在胚胎時(shí)期產(chǎn)生的胎兒癌性抗原組［2］。癌胚抗原是一種比較廣譜的腫瘤標(biāo)志物［3］，臨床上多用該指標(biāo)作為大多數(shù)癌癥的診斷、鑒別診斷、預(yù)后判斷、放療、化療及手術(shù)療效觀察的指標(biāo)［4］。目前CEA的檢測(cè)方法有很多，主要檢測(cè)方法有：放免法、酶聯(lián)免疫法及化學(xué)發(fā)光分析法［5］。我們就國(guó)產(chǎn)膠乳增強(qiáng)透射免疫比濁法和市場(chǎng)上主流檢測(cè)方法電化學(xué)發(fā)光免疫分析法兩種方法進(jìn)行比較，現(xiàn)介紹如下。

材料和方法

1 樣本來源

收集醫(yī)院新鮮成年人、非孕血清204例，其中男性99例，女性105例，包括患者及健康體檢人群，年齡22～96歲。

2 試劑與儀器

ROCHE公司生產(chǎn)的Cobas e 411電化學(xué)發(fā)光儀和日本HITACHI公司生產(chǎn)的7180全自動(dòng)生化分析儀；試劑為與ROCHE電化學(xué)發(fā)光配套的CEA檢測(cè)試劑盒和北京九強(qiáng)生產(chǎn)的金斯?fàn)柲z乳增強(qiáng)透射免疫比濁法試劑盒。校準(zhǔn)均選擇試劑配套的校準(zhǔn)品，所有試劑均在有效期內(nèi)。

3 檢測(cè)方法

3.1 電化學(xué)發(fā)光免疫分析法 嚴(yán)格按照德國(guó)ROCHE公司生產(chǎn)的《癌胚抗原試劑盒》操作手冊(cè)進(jìn)行。儀器狀態(tài)良好，質(zhì)控在控。

3.2 膠乳免疫增強(qiáng)法 嚴(yán)格按照北京九強(qiáng)公司生產(chǎn)的《癌胚抗原試劑盒》操作手冊(cè)進(jìn)行。儀器狀態(tài)良好，質(zhì)控在控。

4 采用的參考范圍

Roche化學(xué)發(fā)光法CEA：＜4.70ng／mL；金斯?fàn)柲z乳免疫增強(qiáng)法CEA：＜5.00ng／mL。

5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS24.0軟件進(jìn)行分析，非正態(tài)分布的配對(duì)數(shù)據(jù)，兩兩比較采用Wlicoxon配對(duì)秩和檢驗(yàn)，測(cè)得CEA濃度用中位數(shù)（四分位數(shù)范圍）［M（P25～P75）］描述。相關(guān)分析用Spearman相關(guān)分析，并進(jìn)行相關(guān)分析和曲線評(píng)估，用顯著性水平a＝0.05作為判斷性水準(zhǔn)，判斷是否有差異。采用Microsoft Office 2007軟件進(jìn)行分析，進(jìn)行線性相關(guān)和準(zhǔn)確性分析。

結(jié) 果

1 CEA水平的差異

經(jīng)正態(tài)性檢驗(yàn)，所有指標(biāo)均不符合正態(tài)性分布（P＜0.001），兩檢測(cè)方法測(cè)定的血清CEA水平以中位數(shù)（四分位數(shù)范圍）描述其集中趨勢(shì)和離散趨勢(shì)；采用Wlicoxon配對(duì)秩和檢驗(yàn)，204例標(biāo)本在兩種檢測(cè)方法上差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＝0.632）。用Spearman進(jìn)行相關(guān)分析，相關(guān)系數(shù)為0.982，認(rèn)為兩種方法結(jié)果間具有極高度的相關(guān)性（P＜0.01）見表1。

表1 膠乳增強(qiáng)透射免疫比濁法與電化學(xué)放光法癌胚抗原水平統(tǒng)計(jì)描述與相關(guān)分析

2 金斯?fàn)柲z乳增強(qiáng)透射免疫比濁法與ROCHE化學(xué)發(fā)光的線性相關(guān)分析

圖1顯示金斯?fàn)朇EA和羅氏化學(xué)發(fā)光法CEA檢測(cè)結(jié)果，線性回歸方程為：Y＝0.9944X+0.026，R2＝0.9956。R2大于0.95，說明比對(duì)方法的樣本檢測(cè)范圍足夠?qū)?，能夠滿足樣本比對(duì)要求，CEA樣本濃度范圍內(nèi)檢測(cè)兩方法間之間的線性關(guān)系良好，回歸統(tǒng)計(jì)的截距和斜率均可靠。

圖1 電化學(xué)放光法與膠乳增強(qiáng)透射免疫比濁法癌胚抗原線性相關(guān)圖

3 金斯?fàn)柲z乳增強(qiáng)透射免疫比濁法與ROCHE化學(xué)發(fā)光的準(zhǔn)確性分析

通過數(shù)據(jù)處理（見表2），得出ROCHE化學(xué)發(fā)光與金斯?fàn)柲z乳增強(qiáng)透射免疫比濁法檢測(cè)CEA的真陽性率為100%、真陰性率為100%、假陽性率為0、假陰性率為0、診斷準(zhǔn)確度為100%、Youden指數(shù)為1［6］。證明兩種方法在陰陽性判斷上識(shí)別是一致的。陽性樣本共32例，男性21例（47～87歲），女性11例（54～80歲），其中確診癌癥的樣本為25例，直腸癌11例，直腸癌術(shù)后1例，肺癌6例，結(jié)腸癌2例，乳腺癌3例，食管癌1例，子宮惡性腫瘤1例，及其他病因7例。

表2 膠乳增強(qiáng)透射免疫比濁法與電化學(xué)放光法檢測(cè)癌胚抗原陰陽性樣本例數(shù)

討 論

膠乳免疫比濁法的原理是將抗體標(biāo)記在納米級(jí)別的膠乳微球表面，血清的癌胚抗原與試劑中的抗體在液相中相遇，結(jié)合成抗原-抗體復(fù)合物，產(chǎn)生一定的濁度，膠乳微球可以相應(yīng)的放大該濁度變化。通過與相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)曲線做對(duì)照，可以由濁度變化計(jì)算得出血清中的癌胚抗原的濃度［7］；癌胚抗原作為非特異性的腫瘤標(biāo)志物，在多種癌癥的輔助診斷方面有一定的臨床意義。CEA為大分子細(xì)胞表面糖蛋白，較為廣泛的存在于腫瘤的上皮細(xì)胞中，特別是腺癌組織中，在大腸癌中的表達(dá)率極高，但不具有特異性，在乳腺癌、肺癌、胃癌均可發(fā)現(xiàn)升高的CEA［8］。但CEA的陽性率也不同，胰腺癌為88%～91%，肺癌為76%，結(jié)腸癌為73%，肝癌為88%～96%，乳腺癌、卵巢癌為73%。不僅如此，CEA對(duì)治療效果的觀察上同樣有著不可忽略的作用。對(duì)于手術(shù)的患者，術(shù)后切除徹底的話，通常在6周內(nèi)降至正常水平。術(shù)后如有轉(zhuǎn)移或者復(fù)發(fā)，出現(xiàn)癥狀的10個(gè)星期前至13個(gè)月內(nèi)，CEA就已經(jīng)開始升高了。因此CEA的水平也可顯示術(shù)后是否預(yù)后不良［9］。從本文的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可以看出，用九強(qiáng)金斯?fàn)柕哪z乳增強(qiáng)透射免疫比濁法的試劑與ROCHE電化學(xué)發(fā)光試劑檢測(cè)癌胚抗原，共204例標(biāo)本，在兩種檢測(cè)方法上差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且相關(guān)性良好；在陰陽性區(qū)分上達(dá)到完全一致。九強(qiáng)金斯?fàn)栐噭┖胁捎酶呒兌鹊膯慰寺】贵w，測(cè)定結(jié)果與進(jìn)口電化學(xué)發(fā)光試劑盒有很好的相關(guān)性，且具有操作簡(jiǎn)單、反應(yīng)快速、成本低廉、無需其他昂貴儀器及無放射性污染等優(yōu)點(diǎn)，值得在臨床上推廣使用。但建議各地區(qū)基層醫(yī)院實(shí)驗(yàn)室建立本實(shí)驗(yàn)室參考范圍。