VEGF-C、EGFR在胃癌組織中的表達及臨床意義

何方龍　徐劍

【摘要】 目的：分析血管內(nèi)皮生長因子-C（VEGF-C）和表皮生長因子受體（EGFR）在胃癌組織中的表達水平及其與臨床病理因素的相關(guān)性。

方法：選擇2016年6月-2017年12月佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院收治的胃癌患者的手術(shù)標本87例作為試驗組，同期癌旁正常胃組織標本87例納入對照組，并收集對應(yīng)患者的臨床資料，采用免疫組化Envision兩步法檢測VEGF-C、EGFR在胃癌及癌旁正常組織中的表達情況，并結(jié)合多種病理因素分析其表達的特點及在胃癌組織中表達的相關(guān)性。結(jié)果：VEGF-C和EGFR在試驗組中的陽性表達率均顯著高于對照組（P<0.01）;VEGF-C和EGFR的表達在不同年齡、性別、腫瘤部位及腫瘤大小方面，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），而在不同腫瘤分化程度、腫瘤浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠處轉(zhuǎn)移方面，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）;VEGF-C和EGFR在胃癌組織中的表達呈正相關(guān)（r=0.356，P=0.001）。結(jié)論：VEGF-C和EGFR的表達與胃癌的發(fā)生發(fā)展有一定聯(lián)系，同時在胃癌的發(fā)生發(fā)展過程中起到協(xié)同作用。

【關(guān)鍵詞】 胃癌; 血管內(nèi)皮生長因子-C; 表皮生長因子; 免疫組織化學(xué)

doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2019.08.034 文獻標識碼 B 文章編號 1674-6805（2019）08-00-03

Expression of VEGF-C，EGFR in Gastric Cancer and Clinical Significance/HE Fanglong，XU Jian.//Chinese and Foreign Medical Research，2019，17（8）：-75

【Abstract】 Objective：To analyze the expression levels of vascular endothelial growth factor-C（VEGF-C） and epidermal growth factor receptor（EGFR） in gastric cancer and their correlation with clinicopathological factors.Method：Eighty-seven surgical specimens of gastric cancer patients admitted to the First Affiliated Hospital of Jiamusi University from June 2016 to December 2017 were selected as the experimental group.Eighty-seven normal gastric tissue specimens were included in the control group，and the corresponding patients were collected.The data were analyzed by immunohistochemical Envision two-step method to detect the expression of VEGF-C and EGFR in gastric cancer and adjacent normal tissues.The expression characteristics and expression in gastric cancer tissues were analyzed by combining various pathological factors.Result：The positive expression rates of VEGF-C and EGFR in the experimental group were significantly higher than those in the control group（P<0.01）.The expressions of VEGF-C and EGFR were not significant differences to age，sex，tumor location and tumor size（P>0.05），which were closely significant differences to tumor differentiation，tumor invasion depth，lymph node metastasis and distant metastasis（P<0.05）.There was a positive correlation between VEGF-C and EGFR expression in gastric cancer tissues（r=0.356，P=0.001）.Conclusion：The expression of VEGF-C and EGFR is related to the occurrence and development of gastric cancer，and plays a synergistic role in the occurrence and development of gastric cancer.

【Key words】 Gastric cancer; Vascular endothelial growth factor-C; Epidermal growth factor; Immunohistochemistry

First-authors address：The First Hospital Affiliated to Jiamusi University，Jiamusi 154002，China

近年來我國胃癌的發(fā)病率呈上升趨勢，已經(jīng)成為目前高發(fā)的消化道惡性腫瘤之一。其致病因素多樣且復(fù)雜，主要包括內(nèi)在因素、外在因素、胃部疾病及吸煙等不良生活習(xí)慣。近年來研究發(fā)現(xiàn)，其發(fā)病和多種原癌基因被激活及抑癌基因失去活性存在著密切的聯(lián)系[1]。盡管在胃癌的一些診療領(lǐng)域取得很大進展，但研究結(jié)果顯示，2014年我國胃癌新發(fā)病例約41萬，占全部癌癥發(fā)病的11%，約占全球所有胃癌新發(fā)病例的40%，總體來看仍呈升高趨勢[2]。本研究采用免疫組化方法檢測胃癌組織VEGF-C（vascular endothelial growth factor-C）和EGFR（epidermal growth factor receptor）的表達，探討VEGF-C和EGFR在胃癌表達上的相互間關(guān)系，同時研究這兩種因子與臨床病理特征間的關(guān)系，為判斷胃癌預(yù)后及篩選靶向治療優(yōu)勢病例提供臨床數(shù)據(jù)支持。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2016年6月-2017年12月于佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院經(jīng)手術(shù)治療且病理科確診為胃癌的留存組織標本87例作為試驗組，另選取同期癌旁正常組織標本87例作為對照組。試驗組男53例，女34例，年齡42～81歲，中位年齡62.6歲。試驗組患者腫瘤部位：胃竇、幽門癌49例，胃體、胃底癌38例;腫瘤大小：<5 cm者44例，≥5 cm者43例。腫瘤分化程度：49例高中分化癌，38例低分化癌。腫瘤浸潤深度：漿膜外者39例，達漿膜層內(nèi)者48例;未出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者45例，出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者42例。有遠處轉(zhuǎn)移者33例，無遠處轉(zhuǎn)移者54例。所選取的標本其手術(shù)前均未經(jīng)過放化療及免疫治療。

1.2 方法

對所有選取的標本進行甲醛固定，常規(guī)方法進行組織包埋后經(jīng)切片機連續(xù)切片，切片厚度為4 μm，所有標本組織VEGF-C、EGFR的表達均使用免疫組化Envision兩步法進行染色，分別進行，根據(jù)說明書進行操作，磷酸鹽緩沖液（PBS）代替一抗視為陰性對照，將VEGF-C、EGFR已知陽性切片視為陽性對照。

1.3 結(jié)果判定

VEGF-C染色部位主要位于細胞質(zhì)，在細胞核也可見但極少量，染色結(jié)果呈棕褐色;EGFR染色部位位于細胞膜或細胞質(zhì)，其染色結(jié)果也呈棕褐色。在高倍鏡（×200）下進行觀察，隨機選取5個視野共計數(shù)細胞500個，按照染色強度及陽性細胞所占比例進行評分，具體計分標準如下：棕褐色3分，棕黃色2分，淡黃色1分，無色0分;染色陽性細胞數(shù)計分：>75%為4分，51%～75%為3分，26%～50%為2分，6%～25%為1分，≤5%為0分。將染色強度及陽性細胞所占比例的得分乘積作為最后陽性的判斷結(jié)果，得分≥6視為陽性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理

應(yīng)用SPSS 25.0軟件包進行統(tǒng)計分析。計數(shù)資料采用樣本率描述，使用字2檢驗和費希爾精確概率法（Fisher），相關(guān)性分析采用斯皮爾曼（Spearman）相關(guān)性分析。以P<0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 胃癌組織與癌旁組織中VEGF-C、EGFR表達情況比較

試驗組即胃癌組織中VEGF-C及EGFR陽性表達率分別為67.82%及60.92%，對照組即癌旁組織中VEGF-C及EGFR陽性表達率分別為11.49%及19.54%。差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），見表1。

2.2 胃癌組織VEGF-C、EGFR表達與臨床病理特征的關(guān)系

腫瘤高中分化期、浸潤加深、有淋巴結(jié)及遠處轉(zhuǎn)移的胃癌患者的VEGF-C和EGFR陽性表達率明顯高于腫瘤低分化、浸潤淺、無淋巴結(jié)及遠處轉(zhuǎn)移的患者，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。而VEGF-C、EGFR的表達與患者的不同年齡、性別、腫瘤部位及腫瘤大小差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），見表2。

2.3 VEGF-C、EGFR在胃癌組織中表達的相關(guān)性分析

將各標本的VEGF-C、EGFR表達的等級資料進行Spearman相關(guān)分析，統(tǒng)計結(jié)果顯示，VEGF-C和EGFR這兩種因子在胃癌組織中的表達呈現(xiàn)正相關(guān)（r=0.356，P=0.001），見表3。

3 討論

胃癌的發(fā)病率呈逐年上升趨勢，大多數(shù)病例在晚期診斷，目前的治療無法提高診斷后的適度生存率。研究顯示，在我國女性和男性腫瘤相關(guān)死因中胃癌分別占到第2位和第3位[3-4]。絕大多數(shù)的患者在早期并無特殊癥狀，只是自覺腹部不適，和胃炎、胃潰瘍等疾病常無法鑒別，容易被忽略。當(dāng)出現(xiàn)上腹疼痛、食欲缺乏、消瘦等癥狀時已為進展期，對患者的日常生活和工作造成嚴重影響[5]。胃癌根治術(shù)是現(xiàn)在臨床上主要采取的治療胃癌的手段，但術(shù)后常伴隨的高復(fù)發(fā)率及高轉(zhuǎn)移率依然是臨床上無法避免的問題，并且臨床上存在不同胃癌患者在分化程度、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠處轉(zhuǎn)移及治療方法相同的情況下預(yù)后卻不盡相同的情況，究其原因主要是胃癌的發(fā)病過程復(fù)雜多變，往往呈現(xiàn)出多個基因改變、不同種因素作用及階段性發(fā)展[6-8]。

VEGF-C是一種多功能的血管生成因子，其在腫瘤疾病發(fā)生發(fā)展過程中主要通過對血管內(nèi)皮細胞特異性有絲分裂原的促進，使血管內(nèi)皮細胞進行分裂及增殖等一系列活動，進而使得血管的通透性增加，最終發(fā)揮促進腫瘤血管生成的作用[9]。并且有大量研究顯示，在不同的癌癥患者體內(nèi)，VEGF-C的表達水平同正常人群比較，其百分比較高，這就說明VEGF-C很可能與胃癌的轉(zhuǎn)移存在密切聯(lián)系[10]。EGFR是一種位于細胞膜的蛋白激酶受體，其是酪氨酸激酶Ⅰ型受體家族中的一員。通過與EGFR配體相結(jié)合后發(fā)生二聚化，激活酪氨酸激酶使酪氨酸殘基發(fā)生磷酸化，從而暴露酪氨酸激酶靶蛋白結(jié)合位點，激活多條信號通路改變，最終影響細胞增殖與分化[11]。實驗表明，EGFR過表達于多種惡性腫瘤細胞的表面，其作用機制是通過多種途徑促進癌細胞的侵襲，在靶藥治療胃癌中起重要作用，同時在療效分析與腫瘤預(yù)后判斷上也起一定作用[12]。

本試驗通過對上述兩種因子在胃癌組織和癌旁組織中的表達情況及二者相關(guān)性進行了分析探討，結(jié)果發(fā)現(xiàn)胃癌組織中VEGF-C和EGFR的表達水平與癌旁正常組織相比較有相當(dāng)大的升高，且腫瘤的分化程度低、侵襲深度深、存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及遠處轉(zhuǎn)移的患者，VEGF-C和EGFR陽性率更高，推測VEGF-C和EGFR的表達與胃癌的臨床病理特征及預(yù)后密切相關(guān)。而對VEGF-C和EGFR表達情況的相關(guān)性進行研究的結(jié)果顯示為正相關(guān)，這就表明VEGF-C和EGFR可能存在有協(xié)同促進胃癌發(fā)展的作用，但二者的具體作用機制仍需深入試驗研究。

綜上所述，VEGF-C和EGFR在胃癌組織中呈現(xiàn)高表達，且都參與了胃癌的生長、侵襲和轉(zhuǎn)移等病理生理過程，且相互影響。因此，這二種因子結(jié)合共同檢測可應(yīng)用于胃癌預(yù)后的預(yù)測，選取輔助化療的優(yōu)勢人群，同時在靶向藥物治療領(lǐng)域也有一定的臨床意義，一定程度上提高患者的生存率。

參考文獻

[1]史振貴.消化性潰瘍與胃癌的關(guān)系分析[J].吉林醫(yī)學(xué)，2011，32（3）：542.

[2] Lei Yang，Rongshou Zheng，Ning Wang，et al.Incidence and mortality of stomach cancer in China，2014[J].Chinese Journal of Cancer Research，2018，30（3）：291-298.

[3]陳萬青，鄭榮壽，張思維，等.2012年中國惡性腫瘤發(fā)病和死亡分析[J].中國腫瘤，2016，25（1）：1-8.

[4]梁迪，李道娟，師金，等.河北省1973-2013年惡性腫瘤死亡變化分析[J].中華流行病學(xué)雜志，2018，39（1）：35-39.

[5]蘭藍，趙飛，蔡玥，等.中國居民2015 年惡性腫瘤死亡率流行病學(xué)特征分析[J].中華流行病學(xué)雜志，2018，39（1）：32-34.

[6]李妍，王妍，歐明坤，等.Survivin和Ki-67胃癌中的表達及臨床意義[J].黑龍江醫(yī)藥科學(xué)，2018，41（1）：59-60.

[7]呂鑫，何其勇，王亞洲，等.Ki67與MMP-9在胃腺癌中表達的意義[J].黑龍江醫(yī)藥科學(xué)，2016，39（1）：102-103.

[8] Smyth E C，Tarazona N，Chau I.Ramucirumab：targeting angiogenesis in the treatment of gastric cancer[J].Immunotherapy，2014，6（11）：1177-1186.

[9]王來，朱孟沙，田君海，等.Six1和TGF-β及VEGF-C在人喉鱗狀細胞癌裸鼠移植瘤淋巴轉(zhuǎn)移中的作用[J].臨床耳鼻咽喉頭頸外科雜志，2016，20（24）：1960-1964.

[10]秦躍紅，王功朝，劉濱，等.星形細胞腫瘤組織中 VEGF-A、VEGF-C 的表達變化及其與腫瘤血管生成的關(guān)系[J].山東醫(yī)藥，2014，58（15）：1-3.

[11]胡崢嶸，魏兵華，李長科，等.依托咪酯乳劑復(fù)合舒芬太尼對老年婦科腹腔鏡術(shù)后患者早期認知功能的影響[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報，2014，11（33）：124-127.

[12] Ayyappan S，Prabhakar D，Sharma N.Epidermal growth factor receptor（EGFR）-targeted therapies in esophagogastric cancer[J].Anticancer Res，2013，33（10）：4139-4155.