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    β—catenin和VEGF在基底細(xì)胞癌中的表達(dá)及其相關(guān)性

    2016-12-26 10:03:48黃洪欣杜興莉姜長(zhǎng)青
    中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥 2016年29期
    關(guān)鍵詞:血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子

    黃洪欣 杜興莉 姜長(zhǎng)青

    【摘要】 目的 探討β-連環(huán)素(β-catenin)和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)在皮膚基底細(xì)胞癌(BCC)組織中的表達(dá)相關(guān)性及其意義。方法 應(yīng)用免疫組化Polymer方法檢測(cè)42例皮膚BCC和27例皮膚組織慢性炎的β-catenin和VEGF的表達(dá)情況。結(jié)果 β-catenin在BCC和皮膚組織慢性炎陽性表達(dá)率分別為95.2%和11.1%, 比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);VEGF在皮膚組織慢性炎和BCC中陽性表達(dá)率分別為22.2%和90.5%, 比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。β-catenin和VEGR均呈陽性表達(dá)38例, 2例是β-catenin陽性, 而VEGF陰性2例, 兩者均為陰性2例, 皮膚BCC中β-catenin與VEGF呈正相關(guān)(r=0.567, P<0.01)。結(jié)論 BCC中β-catenin異位表達(dá)可能是VEGF高表達(dá)的重要原因, 其在BCC發(fā)生中可能起重要作用。

    【關(guān)鍵詞】 基底細(xì)胞癌;β-連環(huán)素;血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子

    DOI:10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.29.022

    皮膚BCC癌可能起源于不分化的多能表皮干細(xì)胞, 發(fā)病機(jī)制中β-catenin在Wnt信號(hào)途徑中異?;罨鸬搅岁P(guān)鍵作用。VEGF是強(qiáng)效且特異的促腫瘤血管生長(zhǎng)因子, 近年來β-catenin的致腫瘤作用及促血管生成作用已成為研究熱點(diǎn)[1], 但兩者在BCC中的作用還需更進(jìn)一步的深入研究, 為此, 作者應(yīng)用免疫組化Polymer法檢測(cè)皮膚BCC中β-catenin和VEGF的表達(dá), 初步探討兩者在皮膚BCC發(fā)生中的關(guān)聯(lián)。

    1 材料與方法

    1. 1 材料來源 收集2012~2016年青島市立醫(yī)院手術(shù)切除的42例皮膚BCC和27例皮膚組織慢性炎標(biāo)本, 患者年齡45~86歲, 一抗β-catenin和VEGF及二抗試劑盒均購(gòu)自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司, 工作濃度1∶100。

    1. 2 方法

    1. 2. 1 免疫組化染色 切片依次脫蠟水化, 加3%的雙氧水15 min后蒸餾水洗片3次, 修復(fù)抗原后用磷酸緩沖鹽溶液(PBS)洗3次, 加一抗4℃冰箱過夜, PBS洗3次后加二抗孵育20 min, DAB顯色、蘇木素液復(fù)染、梯度脫水、二甲苯透明、中性樹膠封片、光鏡觀察。

    1. 2. 2 結(jié)果判定 β-catenin染色結(jié)果依據(jù)Maruyama等[2]的方法:細(xì)胞膜陽性表達(dá)率>70%為正常表達(dá), 不足判定為表達(dá)減弱或缺失, 胞漿或胞核陽性表達(dá)率>10%判定為異位表達(dá)。VEGF染色結(jié)果依據(jù)許良中等[3]的方法:染色強(qiáng)度無著色0分, 淡黃色1分, 棕黃色2分, 棕褐色3分, 著色細(xì)胞占計(jì)數(shù)細(xì)胞百分比率為0者記0分, <10%為1分, 10%~50%為2分, 51%~75%為3分, >75%為4分。染色強(qiáng)度與陽性細(xì)胞百分比相乘, <3分者為陰性, ≥3分者為陽性。

    1. 3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)數(shù)資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗(yàn);兩種蛋白相關(guān)性分析采用 Spearman 等級(jí)相關(guān)檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2. 1 β-catenin和VEGF的表達(dá) β-catenin在BCC和皮膚組織慢性炎陽性表達(dá)率分別為95.2%(40/42)和11.1%(3/27), 比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);VEGF在皮膚組織慢性炎和BCC中陽性表達(dá)率分別為22.2%(6/27)和90.5%(38/42), 比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。

    2. 2 皮膚BCC中β-catenin與VEGF關(guān)聯(lián)性分析 β-catenin和VEGR均呈陽性表達(dá)38例, 2例是β-catenin陽性, 而VEGF陰性2例, 兩者均為陰性2例, 皮膚BCC中β-catenin與VEGF呈正相關(guān)(r=0.567, P<0.01)。

    3 討論

    β-catenin信號(hào)通路已成為近年來腫瘤生物學(xué)研究的熱門課題, 當(dāng)Wnt通路的某一環(huán)節(jié)出現(xiàn)異常, 就會(huì)使得β-catenin異常積聚入細(xì)胞核, 激活核內(nèi)相關(guān)因子, 發(fā)揮其致癌與病理作用[4]。在皮膚腫瘤如黑素瘤、鮑恩病、BCC、鱗狀細(xì)胞癌中均存在膜表達(dá)減少, 胞漿及胞核表達(dá)增強(qiáng)[5]。本研究結(jié)果表明β-catenin在皮膚BCC中呈現(xiàn)陽性表達(dá)率高達(dá)95.2%, 與其在皮膚組織慢性炎11.1%的低陽性表達(dá)率比較, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01), 提示β-catenin的異位表達(dá)與皮膚BCC的發(fā)生關(guān)系密切。VEGF作為作用最強(qiáng)、特異性最高的促血管生長(zhǎng)因子之一, 有研究發(fā)現(xiàn)VEGF在肺癌、腎癌、胃癌、食管鱗狀細(xì)胞癌等多種腫瘤中呈高表達(dá)[6]。本研究結(jié)果顯示, 在皮膚BCC中VEGF蛋白的陽性表達(dá)率明顯高于皮膚組織慢性炎的表達(dá)率, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01), 這與Bowden等[7]研究結(jié)果相似, 說明VEGF的高表達(dá)與皮膚BCC的發(fā)生也有密切關(guān)系。

    近年研究表明, VEGF含有β-catenin道路的下游靶基因β-catenin /Tcf-4復(fù)合體的結(jié)合位點(diǎn)[6], 因此突變的β-catenin 與 Tcf-4 位點(diǎn)結(jié)合, 啟動(dòng)下游靶基因 VEGF的表達(dá)上調(diào)。本研究結(jié)果顯示, BCC中β-catenin和VEGR都呈高表達(dá)且有顯著關(guān)聯(lián)性, 也說明在皮膚BCC發(fā)生病變過程中, Wnt通路出現(xiàn)異常, 突變的β-catenin增多導(dǎo)致VEGF 表達(dá)增高。

    本實(shí)驗(yàn)初步探討β-catenin和VEGF在皮膚BCC中的表達(dá)及其關(guān)聯(lián)性, 然而需明確二者在皮膚BCC中的作用機(jī)制, 仍需應(yīng)用多方法深入且細(xì)致研究, 并應(yīng)與臨床皮膚BCC的治療緊密結(jié)合。

    參考文獻(xiàn)

    [1] Klaus A, Birchmeier W. Wnt signalling and its impact on development and cancer. Nat Rev Cancer, 2008(8):387-398.

    [2] Maruyama K, Ochiai A, Akimoto S, et al. Cytoplasmic beta-catenin accumulation as a predictor of hematogenous metastasis in human colorectal cancer. Oncology, 2000(59):302-309.

    [3] 許良中, 楊文濤. 免疫組織化學(xué)反應(yīng)結(jié)果的判斷標(biāo)準(zhǔn). 中國(guó)癌癥雜志, 1996(6):229-231.

    [4] Jamieson C, Sharma M, Henderson BR. Targeting the β-catenin nuclear transport pathway in cancer. Semin Cancer Biol, 2014(27):

    20-29.

    [5] Nelson WJ, NusseR. Convergence of Wnt, bete-catenin, and cadherinpathways. Science, 2004, 303(5663):1483-1487.

    [6] 劉宣, 王炎, 殷佩浩, 等. Wnt /β-catenin 信號(hào)通路對(duì)人腸癌細(xì)胞VEGF 表達(dá)的調(diào)控作用. 中國(guó)癌癥雜志, 2012, 22(12):881-885.

    [7] Bowden J, Brennan PA, Umar T, et al. Expression of vascular endothelial growth factor in basal cell carcinoma and cutaneous squamous cell carcinoma of the head and neck. J Cutan Pathol, 2002, 29 (10):585-589.

    [收稿日期:2016-09-26]

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