甲狀腺破骨細胞樣巨細胞性未分化癌臨床病理及分子病理特征探析

劉金松德州市陵城區(qū)人民醫(yī)院病理科，山東德州 253000

甲狀腺破骨細胞樣巨細胞性未分化癌在臨床十分少見，在我國全部甲狀腺惡性腫瘤中的5%，生存期較短，死亡率高。該疾病被認為起源于濾泡細胞，其十分罕見，但在生物學(xué)行為中具備高度惡性，且預(yù)后較差[1]。目前臨床對于該疾病通常以放療、化療、外科手術(shù)治療為主，但上述治療方式僅能使腫瘤局部進展得到改善，無法提高患者生存率和治愈率。而隨著我國分子生物學(xué)技術(shù)不斷發(fā)展，單克隆抗體和小分子抑制劑在甲狀腺破骨細胞樣巨細胞性未分化癌中具有顯著效果。臨床通過對甲狀腺破骨細胞樣巨細胞性未分化癌進行分析，其少見的組織學(xué)亞型分別為：少細胞亞型、血管瘤樣亞型、腺鱗癌亞型、柱狀細胞亞型、癌肉瘤亞型、淋巴上皮樣腫瘤亞型、鱗狀細胞亞型等[2]。該研究對所有100例甲狀腺破骨細胞樣巨細胞性未分化癌患者實施分析（選取時間為 2017年6月—2018年8月），并對其各項情況進行分析，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

研究對象為該院收治的100例甲狀腺破骨細胞樣巨細胞性未分化癌患者，對其實施手術(shù)切除、免疫組化染色和甲狀腺基因突變檢測，分析其基因突變位點。100例甲狀腺破骨細胞樣巨細胞性未分化癌患者，其中男性50例、女性50例；年齡范圍在20～40歲，中位年齡為（30.44±1.23）歲。

1.2 方法

手術(shù)切除：將手術(shù)切除標本選擇濃度為10%的中性福爾馬林進行固定，并進行常規(guī)脫水操作，石蠟包埋，3 um厚切片，經(jīng)HE染色，光鏡下觀察。

免疫組化染色：選擇全自動免疫組化染色儀作為儀器，型號為LEICA型，選擇兩步法，一抗以CgA、CD68、CK19、PCK、LCA、TTF-1、CK7、PAX-8、CD34（均為DAKO公司和基因科技公司提供）；二抗為DS9800。將已知陽性切片作為對照組，PBS代替一抗作陰性對照。

甲狀腺基因突變：①DNA樣本檢測：對DNA降解程度以及是否存在蛋白質(zhì)污染、RNA采用瓊脂糖凝膠電泳進行分析，并精準定量DNA的純度和濃度。②建庫捕獲：選擇飛朔生物自主專利技術(shù)，對樣本DNA進行文庫制備，對目標序列實施擴增捕獲，促使產(chǎn)物能夠形成粘性末端，進而形成環(huán)形產(chǎn)物，并對環(huán)形產(chǎn)物進行特異性的擴增和放大[3-4]。③庫檢：選擇Qubit2.0實施初步定量，后對文庫的有效濃度采用qPCR方式進行準確定量。④上機測序：根據(jù)庫檢合格文庫的數(shù)據(jù)產(chǎn)出需求和有效濃度進行PGM測序。⑤數(shù)據(jù)分析：待測序完成后，獲得原始測序序列，并評估測序所產(chǎn)生的數(shù)據(jù)，待評估完成后行變異檢測[5]。

1.3 觀察指標

分析100例甲狀腺破骨細胞樣巨細胞性未分化癌患者基因突變位點。

1.4 統(tǒng)計方法

應(yīng)用SPSS 26.0統(tǒng)計學(xué)軟件分析所有數(shù)據(jù)，其中計量資料用（±s）表示，進行t檢驗；計數(shù)資料用%表示，用χ2檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

100 例患者中，出現(xiàn) KRAS、NRAS、PIK3CA 基因突變。見表1。

表1 分析100例患者基因突變位點

3 討論

甲狀腺破骨細胞樣巨細胞性未分化癌的診斷標準中認為：①腫瘤類型以未分化成分為主[6-7]。②需具備明確的上皮分化組織學(xué)證據(jù)，若沒有，應(yīng)存在TTF-陽性、PCK陽性或TG陽性。有學(xué)者認為，其未分化細胞成分應(yīng)在10%以上。該研究中，主要以大量增生的破骨樣巨細胞最為常見，且存在上皮標記的部分表達[8]。多數(shù)甲狀腺破骨細胞樣巨細胞性未分化癌存在殘存的分化好的甲狀腺腫瘤病灶，以濾泡癌和乳頭狀癌最為常見。

在甲狀腺破骨細胞樣巨細胞性未分化癌中，通常可見核分裂，以非典型核分裂最為常見[9]。同時還可出現(xiàn)壞死和出血現(xiàn)象，以細胞排列成柵欄狀。雖然上述形態(tài)學(xué)存在臨床普遍的甲狀腺破骨細胞樣巨細胞性未分化癌的特點，但隨著我國研究不斷深入，臨床較多新型的亞型也被逐漸描述出來，其中破骨細胞亞型在臨床被定義為混雜的腫瘤細胞中存在反應(yīng)性的CD68陽性破骨細胞樣多核巨細胞。甲狀腺破骨細胞樣巨細胞性未分化癌以女性最為多見，平均年齡在70歲左右，以結(jié)節(jié)性甲狀腺腫作為臨床表現(xiàn)[10-11]。該研究中，在實施手術(shù)切除術(shù)均實施B超檢查，均提示伴有甲狀腺多發(fā)結(jié)節(jié)，與結(jié)節(jié)性甲狀腺腫改變十分相似，改變具有一定迷惑性。甲狀腺破骨細胞樣巨細胞性未分化癌雖然在形態(tài)學(xué)方面具有分化差別，但有45%～80%以PCK表達為主[12-13]。目前，甲狀腺破骨細胞樣巨細胞性未分化癌常見的基因改變中，以RAS和BRAF基本突變?yōu)橹?，在一半的病例中能夠進行觀察，其次為PIK3C以及少數(shù)存在的CDKN2C、CTNNBOI、HRAS、RET和HRAS的突變。在該研究結(jié)果中，突變基因類型主要以NRAS COSM584、NRAS COSM573、PIK3CACOSM27273、KRASCOSM12722為主， 突變位點以 P.Q61R、P.G13D、P.A1046T、P.v14I為主，突變率分別為20.00%、1.50%、1.60%、2.20%，該研究結(jié)果與黃思念等[14]學(xué)者研究的“甲狀腺破骨細胞樣巨細胞性未分化癌臨床病理及分子病理特點分析”一文中結(jié)果數(shù)據(jù)十分相似，上述學(xué)者研究結(jié)果顯示，其 突 變 基 因 為 NRAS COSM584、NRAS COSM573、PIK3CA COSM27273、KRAS COSM12722 與該文結(jié)果一致，其100例患者中出現(xiàn)PIK3CA基因突變，與該文結(jié)果十分相似，提示甲狀腺破骨細胞樣巨細胞性未分化癌易出現(xiàn)基因突變，屬于一種高度侵襲性腫瘤，預(yù)后較差，應(yīng)加以關(guān)注。

該文研究數(shù)據(jù)顯示，100例患者中，出現(xiàn)KRAS、NRAS、PIK3CA基因突變。

綜上所述，甲狀腺破骨細胞樣巨細胞性未分化癌為一類高度侵襲性腫瘤，預(yù)后較差，以肉瘤樣改變作為組織形態(tài)學(xué)，應(yīng)加以重視。