TB-IGRA檢測對診斷結(jié)核活動的價值探討

郄麗琴

[摘要] 目的 探究TB-IGRA（γ-干擾素釋放酶聯(lián)免疫法）檢測對診斷結(jié)核活動的價值。 方法 選取2016年3～12月我院收治的可疑結(jié)核感染患者108例和同期非結(jié)核感染患者130例作為研究對象，其中可疑結(jié)核感染患者中結(jié)核感染確診病例為44例，結(jié)核感染疑似病例為64例，對受檢者TB-IGRA檢測，同時行肺部CT、PPD、痰或胸水標本涂片檢查，并對相應(yīng)結(jié)果進行追蹤隨訪，最后分析結(jié)果。 結(jié)果 TB-IGRA檢測在確診結(jié)核組和疑似結(jié)核患者中的陽性率均高于PPD試驗的陽性率，在非結(jié)核桿菌感染患者陰性率高于PPD試驗，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。 結(jié)論 TB-IGRA檢測技術(shù)的應(yīng)用有助于早期發(fā)現(xiàn)早期診斷結(jié)核活動患者，對診斷結(jié)核活動具有靈敏度高、特異性好、取材方便、價格合理等優(yōu)點。

[關(guān)鍵詞] TB-IGRA檢測;可疑結(jié)核感染;PPD;診斷價值

[中圖分類號] R521? ? ? ? ? [文獻標識碼] B? ? ? ? ? [文章編號] 1673-9701（2019）05-0080-03

[Abstract] Objective To explore the value of TB-IGRA（gamma-interferon-releasing enzyme-linked immunosorbent assay） for the diagnosis of active tuberculosis. Methods 108 patients with suspected tuberculosis infection and 130 patients without tuberculosis infection treated in our hospital from March to December 2016 were selected. Among the 108 suspected patients， 44 were confirmed， and 64 were suspected. Patients were tested for TB-IGRA， and CT scans of the lungs， PPD tests， and smear examinations of sputum or pleural effusions were performed. The results were followed up and analyzed. Results The positive rates of TB-IGRA test in the confirmed tuberculosis group and suspected tuberculosis group were higher than those in the PPD tests. In patients without tuberculosis infection， the negative rate of TB-IGRA was higher than that of PPD test， and the differences were statistically significant（P<0.05）. Conclusion The application of TB-IGRA detection is helpful for early detection and early diagnosis of tuberculosis patients， and it has the advantages of high sensitivity， good specificity， convenient material selection and reasonable price.

[Key words] TB-IGRA test;Suspected tuberculosis infection;PPD;Diagnostic value

我國是全球結(jié)核病22個高負擔國家之一，尋找一種可靠的診斷技術(shù)來快速確診活動性結(jié)核病是結(jié)核病控制的重要手段之一[1]。結(jié)核菌素（purified protein derivative，PPD）試驗近一個世紀以來一直被用于結(jié)核感染和活動性結(jié)核診斷的細胞免疫功能的體內(nèi)試驗[2-3]。由于使用的抗原為結(jié)核分支桿菌復合抗原與接種的卡介苗（Bacillus Calmette-Guérin，BCG）及非結(jié)核分支桿菌之間存在交叉，使得假陽性率高、特異性下降。而作為體內(nèi)試驗又受到機體免疫因素的影響，導致敏感性下降，是PPD試驗的主要缺陷[4]。γ干擾素釋放試驗在診斷結(jié)核方面規(guī)避了PPD試驗因蛋白不純及受體內(nèi)免疫狀態(tài)的影響而出現(xiàn)假陽性假陰性情況[5]，本研究經(jīng)過對本院2016年3～12月份238例已行γ干擾素釋放試驗檢測的住院患者進行分析，探討此試驗在診斷結(jié)核是否活動期中的價值。

1資料與方法

1.1 一般資料

選取2016年3～12月我院收治的疑似結(jié)核感染患者108例和同期非結(jié)核感染患者130例作為研究對象，其中可疑結(jié)核感染患者中結(jié)核感染確診病例為44例，結(jié)核感染疑似病例為64例，其中44例疑似結(jié)核患者中，男30例，女14例，年齡26～65歲，平均（34.56±3.34）歲;病程6個月～5年，平均（1.27±0.45）年。其64例疑似結(jié)核患者中，男40例，女24例，年齡25～64歲，平均（34.58±3.37）歲;病程6個月～5年，平均（1.29±0.43）年。其130例非結(jié)核感染患者中，男70例，女60例，年齡24～64歲，平均（34.35±3.42）歲;病程5個月～5年，平均（1.33±0.28）年。三組患者的一般資料差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），具有可比性。

診斷分組標準：根據(jù)中華醫(yī)學會推薦的《肺結(jié)核診斷與治療指南》標準[6]，把受檢者分為可疑結(jié)核感染組和非結(jié)核桿菌感染組，其中可疑結(jié)核組又分為結(jié)核確診組和結(jié)核疑似組。有病史、臨床表現(xiàn)及影像學改變、PPD檢查等診斷為結(jié)核，涂片抗酸桿菌或病理組織學陽性者納入結(jié)核確診組。有病史、臨床表現(xiàn)及影像學改變、PPD檢查等診斷為結(jié)核，涂片或病理組織陰性者納入結(jié)核疑似病例組。根據(jù)病史、臨床表現(xiàn)及治療最終排除結(jié)核者納入非結(jié)核桿菌感染組。

1.2 方法

三組均采集靜脈血5 mL行γ干擾素釋放試驗，并同時行PPD試驗。有標本患者留取痰、胸水或支氣管內(nèi)膜刷檢物等標本找抗酸桿菌涂片檢查，并行相關(guān)影像學檢查。TB_IGRA的操作實驗大致分兩部分：第一步，利用結(jié)核菌特異性抗原體外刺激效應(yīng)T細胞分泌IFN-γ，需刺激24 h;第二步，利用化學發(fā)光法檢測IFN-γ的含量來判斷是否感染了結(jié)核桿菌。PPD操作常用皮內(nèi)注射法，PPD的用量：第一次試驗液為每0.1 mL中含有0.0001 mg。OT一般第一次使用1：10萬倍稀釋液，以防發(fā)生嚴重的皮膚及全身反應(yīng)。常規(guī)消毒后將試驗液注射于前臂屈側(cè)皮內(nèi)，48～72 h觀察結(jié)果，如48 h結(jié)果看不清，應(yīng)以72 h的結(jié)果為準，注意局部有無硬結(jié)，不可單獨以紅暈為標準。

1.3 結(jié)果判斷

采用北京萬泰公司的試劑盒檢測γ干擾素釋放試驗，檢驗結(jié)果包括本底對照管N、陽性對照管P、樣本測試管T。T-N≥14且≥N/4為陽性結(jié)果。PPD試驗為在受試者左前臂背側(cè)1/3處皮內(nèi)注射0.1 mL，72 h后判斷結(jié)果：無硬結(jié)或紅腫硬結(jié)直徑<5 cm為陰性，無硬結(jié)或紅腫硬結(jié)直徑5～9 cm 判斷為陽性，直徑5～9 cm為弱陽性，直徑10～20 cm為一般陽性，直徑>20 cm或表面有水泡為強陽性。

1.4 評價指標

觀察三組患者TB-IGRA檢測檢測和PPD試驗檢測結(jié)果的的陽性率，檢測結(jié)果與臨床的符合率。γ干擾素檢測≥14 pg/mL為陽性，<14 pg/mL為陰性。

1.5 統(tǒng)計學方法

所有研究數(shù)據(jù)均采用SPSS19.0統(tǒng)計學軟件進行分析總結(jié)，計量資料以（x±s）表示，采用t檢驗，計數(shù)資料以[n（%）]表示，采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2結(jié)果

2.1三組患者TB-IGRA檢測及PPD試驗的檢測結(jié)果

2.2 結(jié)果分析

結(jié)核確診組TB-IGRA檢測陽性率為97.72%（43/44），結(jié)核疑似組為92.19%（59/64），非結(jié)核桿菌感染組為10.77%（14/130）?？梢山Y(jié)核組γ干擾素檢測陽性率均在90%以上，診斷結(jié)核敏感性高，與非結(jié)核桿菌感染組比較，有統(tǒng)計學差異。在TB-IGRA檢測數(shù)值上，結(jié)核疑似組和結(jié)核確診組無統(tǒng)計學差異。具體追蹤每例患者，結(jié)核確診組有1例TB-IGRA檢測陰性患者，考慮系患者存在硬皮病、長期服用激素，免疫力低下有關(guān)。結(jié)核疑似患者中，有46例患者行診斷性抗結(jié)核治療，追蹤結(jié)果，均治療有效，其余18例患者結(jié)核臨床未明確診斷，本組有5例患者TB-IGRA檢測陰性，其中有2例系臨床診斷結(jié)核患者，均為年輕無基礎(chǔ)疾病患者，故考慮不排除血樣操作原因，有三例系未明確診斷結(jié)核患者。非結(jié)核桿菌感染組，有2例γ干擾素檢測>100 pg/mL，12例TB-IGRA檢測在14～100 pg/mL，需繼續(xù)追蹤隨訪，排除存在非結(jié)核分支桿菌感染可能。PPD試驗可疑結(jié)核組中結(jié)核確診組陽性率72.73%，結(jié)核疑似組陽性率54.69%，非結(jié)核桿菌感染組陽性率29.23%。

3 討論

眾所周知，結(jié)核病是臨床上比較常見的一種慢性傳染性疾病，其病原菌使結(jié)核分枝桿菌，其不僅對肺部有感染作用，對全身各個器官均可由感染作用，引起相應(yīng)的肺外結(jié)核[7-9]。我國是世界上結(jié)核的高發(fā)國家之一，發(fā)病率很高，患者最親愛活動期主要表現(xiàn)為低熱、盜汗等，但其臨床癥狀缺乏特異性[10-11]。對于活動性結(jié)核的診斷，傳統(tǒng)的診斷技術(shù)敏感性較低，所耗的時間較長，而且其診斷的準確性也較差，尤其是結(jié)核桿菌陰性的肺結(jié)核或者肺外結(jié)核的診斷較為困難，很容易引起對患者的誤診、漏診以及延遲診斷，因此對于尋找結(jié)核活動性的診斷新方法至關(guān)重要[12]。研究發(fā)現(xiàn)TB-IGRA檢測是比較準確判斷結(jié)核的一種方法。

γ干擾素釋放試驗在結(jié)核的診斷中應(yīng)用越來越廣泛，其診斷的主要機制就是結(jié)核分枝桿菌在入侵機體后會快速產(chǎn)生記憶性的T細胞，機體再次受到結(jié)核分枝桿菌的侵襲后激活記憶性的T細胞，引起機體釋放γ干擾素，從而判斷結(jié)核的感情狀況[13-14]。其檢測的主要優(yōu)點：對患者的創(chuàng)傷較小;所選用的結(jié)核特異性抗原ESAT-6he CFP-10在所有卡介苗菌株和絕大多數(shù)的肺結(jié)核分枝桿菌存在缺失現(xiàn)象，與肺結(jié)核分枝桿菌并無交叉反應(yīng);能夠快速獲取所需的結(jié)果;其操作簡單，重復性較好。而傳統(tǒng)的PPD試驗中，卡介苗與結(jié)核菌素之間的抗原同源性會引起較高的假陽性發(fā)生，對于檢測結(jié)果的意義很小[15]。而且如果機體的免疫功能受到損害時，PPD試驗會經(jīng)常發(fā)生假陰性或無反應(yīng)結(jié)果，因此雖然PPD試驗比較價廉，但其診斷意義并不高。γ干擾素存在于結(jié)核分枝桿菌中，可以確保其檢測結(jié)核分支桿菌感染的特異度和敏感度。

呼吸內(nèi)科對于結(jié)核病的診斷來說，由于一些疑難癥、各系統(tǒng)肺外結(jié)核以及結(jié)核病并發(fā)其他疾病等復雜因素的患者較多，在結(jié)核病的診斷上受到很多因素的影響帶來較大的困難。本次研究結(jié)果顯示采用TB-IGRA檢測診斷的患者其在結(jié)核疑似患者中的陽性率92.19%，在確診結(jié)核活動患者中的陽性率97.72%，而非結(jié)核桿菌感染患者陰性率89.23%，說明其在結(jié)核中的診斷價值極高。而且TB-IGRA檢測不需昂貴的儀器和設(shè)備，簡單而且快捷，可實現(xiàn)試驗操作的自動化，節(jié)約時間，提高診斷效率，適合在大多數(shù)的臨床實驗室實施。

綜上所述，TB-IGRA檢測具有很好的應(yīng)用價值和前景，對于診斷結(jié)核具有很高的特異性，其臨床應(yīng)用價值明顯高于PPD試驗。值得在臨床中借鑒使用。

[參考文獻]

[1] 朱春玲，侯遠沛，彭素真，等.γ-干擾素體外釋放試驗在結(jié)核診斷中的應(yīng)用評價[J].臨床肺科雜志，2014，19（10）：1833-1835.

[2] 陶學芳，王華鈞.結(jié)核特異性抗原γ-干擾素釋放試驗在結(jié)核桿菌感染診斷中的應(yīng)用[J].浙江預(yù)防醫(yī)學，2012，24（10）：12-14，19.

[3] 張怡，謝曉丹.全血γ-干擾素釋放試驗在結(jié)核診斷中的應(yīng)用價值[J].生物技術(shù)通訊，2016，27（2）：260-262.

[4] 趙磊，薛劍，趙濤，等.γ-干擾素釋放試驗在肺外結(jié)核中的應(yīng)用[J].臨床薈萃，2015，30（3）：319-321.

[5] 張俊，高峰.IGRA及TB-PCR在腸結(jié)核與克羅恩病鑒別診斷中的價值[J].世界華人消化雜志，2014，22（4）：527-532.

[6] 王曉艷，劉慧，朱俊，等.TB-IGRA檢測在結(jié)核病診斷中的價值[J].臨床肺科雜志，2014，19（5）：944-945.

[7] 李津，潘燕玉，張寶華，等.IGRA檢測在結(jié)核性胸膜炎中的診斷價值[J].臨床肺科雜志，2014，19（6）：1055-1057.

[8] 易斌，曾瑜，李佳萌.胸水ADA、IFN-γ及TB-DNA的聯(lián)合檢測對結(jié)核性胸膜炎的診斷價值[J].標記免疫分析與臨床，2016，20（11）：1341-1343.

[9] 曹英迪.結(jié)核感染T細胞檢測和胸水腺苷脫氨酶對結(jié)核性胸膜炎的診斷意義[J].基層醫(yī)學論壇，2016，20（8）：1087-1088.

[10] 韓冰，宋其生，于濱，等.胸腔積液ADA/血清ADA和TB-Ab聯(lián)合檢測對結(jié)核性胸腔積液的診斷價值[J].山東醫(yī)藥，2015，55（37）：49-50.

[11] 陳志飛.腺苷脫氨酶聯(lián)合TB-IGRA在結(jié)核性胸膜炎診斷中的應(yīng)用價值[J].中國醫(yī)師雜志，2017，19（1）：111-114.

[12] 張林，劉萍，林晶，等.γ-干擾素釋放分析試驗（TB-IGRA）在藏族結(jié)核病診斷中的價值[J].中國循證醫(yī)學雜志，2015，15（6）：625-627.

[13] 張曉梅，張興旺，葉華，等.結(jié)核特異性細胞免疫反應(yīng)試驗在結(jié)核病中的診斷價值[J].國際檢驗醫(yī)學雜志，2016， 37（11）：1568-1570.

[14] 阮麟，廖洪，王厚茜.結(jié)核感染T細胞（IGRA）檢測在結(jié)核病診斷中的應(yīng)用[J].預(yù)防醫(yī)學情報雜志，2016，32（7）：693-696.

[15] 任冬梅，李德保，何全利，等.TB-IGRA檢測在臨床結(jié)核病診斷中的應(yīng)用價值[J].河南預(yù)防醫(yī)學雜志，2017， 28（9）：703-705.

（收稿日期：2018-09-16）