GBS自動(dòng)培養(yǎng)檢測與普通細(xì)菌培養(yǎng)的對比分析

郭淑麗 黃國虹 李娟 木克代斯·米爾地洋 王婧 王昌敏

無乳鏈球菌又稱 B 群鏈球菌（Group B Streptococcus，GBS），為革蘭氏陽性球菌，存在于女性陰道和直腸，是條件致病菌。GBS主要通過產(chǎn)道上行擴(kuò)散感染子宮和胎膜，圍產(chǎn)期婦女感染GBS后，不但可引起絨毛膜羊膜炎、子宮內(nèi)膜炎，還可通過臍帶或在分娩過程中通過產(chǎn)道傳染給新生兒，引起新生兒腦膜炎、肺炎、敗血癥等，以及泌尿系統(tǒng)感染、產(chǎn)褥感染等，故其在圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)占有重要地位[1-3]。對于GBS的檢測方法，目前也有多種，包括普通細(xì)菌培養(yǎng)法，肉湯增菌法，選擇增菌培養(yǎng)自動(dòng)檢測系統(tǒng)及 PCR 法等。由于普通培養(yǎng)方法存在漏檢的弊端，本院采用珠海迪爾研制的GBS選擇性增菌顯色培養(yǎng)自動(dòng)檢測系統(tǒng)，現(xiàn)將二者檢測情況報(bào)告如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集新疆維吾爾自治區(qū)人民醫(yī)院2017年4—12月門診和住院妊娠35～37周孕婦 672例，患者年齡為19～45歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：新疆維吾爾自治區(qū)人民醫(yī)院住院及門診的常規(guī)產(chǎn)檢者，單胎宮內(nèi)妊娠經(jīng)B超證實(shí)胎兒存活，且自愿加入本研究的同時(shí)簽署知情同意書的孕婦，于孕35～37周進(jìn)行GBS帶菌狀況篩查。排除標(biāo)準(zhǔn)：多胎妊娠者；免疫缺陷者；精神病患者；不愿意合作者。

1.2 檢測方法

1.2.1 樣本采集 所有受試者由產(chǎn)科醫(yī)師以無菌拭子自陰道下段1/3及肛門括約肌取樣，不需借助診視器，收集于轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基（Amies）內(nèi)送檢。

1.2.2 普通細(xì)菌培養(yǎng)法 陰道直腸拭子接種于血平板（BAP），35～37℃培養(yǎng)18～24小時(shí)，據(jù)菌落形態(tài)及溶血特征挑取可疑菌落涂片行革蘭染色陽性鏈球菌，同時(shí)進(jìn)行觸酶試驗(yàn)陰性、B群血清凝集試驗(yàn)陽性，最終通過梅里埃MS確認(rèn)GBS。

1.2.3 選擇性增菌顯色培養(yǎng)自動(dòng)檢測系統(tǒng)嚴(yán)格按說明書進(jìn)行，將標(biāo)本接種于珠海迪爾生物工程有限公司生產(chǎn)的B群鏈球菌選擇性增菌顯色培養(yǎng)基，并采用B群鏈球菌培養(yǎng)分析系統(tǒng)進(jìn)行培養(yǎng)和陽性自動(dòng)判別。陽性者取肉湯轉(zhuǎn)種，據(jù)菌落形態(tài)及溶血特征挑取可疑菌落涂片行革蘭染色陽性鏈球菌，同時(shí)進(jìn)行觸酶試驗(yàn)陰性、B群血清凝集試驗(yàn)陽性，最終通過梅里埃MS確認(rèn)GBS。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 13.0 軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，計(jì)量資料用（±s）表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料用n（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 GBS檢出情況

672例樣本通過選擇性增菌顯色培養(yǎng)自動(dòng)檢測系統(tǒng)檢出GBS陽性89例，陽性率為13.24%，普通細(xì)菌培養(yǎng)法檢出GBS陽性65例，陽性率為9.67%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。必須經(jīng)由選擇性肉湯培養(yǎng)基增菌后方可分離出 GBS的有24例（3.57%），未發(fā)現(xiàn)普通細(xì)菌培養(yǎng)法陽性而增菌培養(yǎng)陰性的樣本，表明選擇性增菌顯色培養(yǎng)自動(dòng)檢測系統(tǒng)能夠靈敏且特異的檢出GBS，結(jié)果詳見表1。

2.2 GBS報(bào)陽時(shí)間

通過選擇性增菌顯色培養(yǎng)自動(dòng)檢測系統(tǒng)檢測GBS報(bào)陽時(shí)間為5～24 h，均值為（13.5±6.5）h，而普通細(xì)菌培養(yǎng)法需18～48 h，均值（35.6±8.5）h，選擇性增菌顯色培養(yǎng)自動(dòng)檢測系統(tǒng)能夠明顯縮短報(bào)陽時(shí)間（t= 53.539 5，P＜0.05）。

3 討論

GBS對于孕產(chǎn)婦及新生兒感染具有重要意義，國外研究早已制定孕產(chǎn)婦“圍產(chǎn)期B族鏈球菌相關(guān)疾病預(yù)防指南” ，歐美國家定期篩查并進(jìn)行相應(yīng)預(yù)防，新生兒感染GBS的情況得到了有效控制[4-5]。GBS在陰道分泌物中存在漏檢情況，目前我國孕產(chǎn)婦常規(guī)篩查GBS尚未完全普及，且方法不同對檢出率會(huì)有影響[6-7]，本研究為提高 GBS 檢出率，對比分析了GBS選擇性增菌顯色培養(yǎng)自動(dòng)檢測系統(tǒng)與普通細(xì)菌培養(yǎng)法的檢測結(jié)果，以快速尋找更敏感的方法，為臨床診斷提供據(jù)、進(jìn)一步保障母嬰健康。

表1 672例樣本孕婦陰道分泌物樣本不同方法檢測結(jié)果[例（%）]

本研究通過選擇性增菌顯色培養(yǎng)自動(dòng)檢測系統(tǒng)檢出GBS陽性率為13.24%，明顯高于普通細(xì)菌培養(yǎng)法檢出陽性率，其中3.57%GBS必須由選擇性肉湯培養(yǎng)基增菌后才能檢出，分析其可能的原因是由于本研究采用選擇性增菌顯色培養(yǎng)自動(dòng)檢測系統(tǒng)，在37℃恒溫環(huán)境下持續(xù)培養(yǎng)，培養(yǎng)基為GBS生長繁殖提供較高的營養(yǎng)成份及生長因子，同時(shí)抑制部分雜菌的生長，石蠟油覆蓋能夠提供兼性厭氧環(huán)境，GBS在培養(yǎng)過程中快速使培養(yǎng)基底部發(fā)生顏色變化，培養(yǎng)分析系統(tǒng)利用光學(xué)傳感器連續(xù)監(jiān)測培養(yǎng)基底部顏色的變化，從而可以快速判定待檢標(biāo)本的檢測結(jié)果，因此該系統(tǒng)檢出GBS的時(shí)間明顯短于普通細(xì)菌培養(yǎng)，能為患者的治療爭取時(shí)間，具有重要的臨床價(jià)值。

本研究通過普通細(xì)菌培養(yǎng)法672例樣本GBS檢出率為9.67%，高于李東等[8-10]報(bào)道的普通細(xì)菌培養(yǎng)法GBS的陽性率，可能是由于地域、人群、飲食、生活習(xí)慣等差異，導(dǎo)致孕產(chǎn)婦帶菌率不同所致；本研究中選擇增菌培養(yǎng)自動(dòng)檢測系統(tǒng)GBS檢出率13.24%也高于李東等及李相會(huì)等[11]報(bào)道的顯色培養(yǎng)8.7%和6.11%的結(jié)果，且高于烏魯木齊市婦幼保健院GBS增菌培養(yǎng)的檢出率11.3%[12]，提示選擇增菌培養(yǎng)自動(dòng)檢測系統(tǒng)可能優(yōu)于單純的顯色培養(yǎng)或增菌培養(yǎng)的方法，具有較好的臨床應(yīng)用前景。

GBS感染對孕產(chǎn)婦及新生兒可造成嚴(yán)重影響，目前其檢測方法多樣，采用方法不同，GBS的檢出率也會(huì)有差異，目前常用的方法為，普通細(xì)菌培養(yǎng)、顯色培養(yǎng)、增菌培養(yǎng)、PCR法等，本研究發(fā)現(xiàn)選擇增菌培養(yǎng)自動(dòng)檢測系統(tǒng)有較好的陽性率。選擇合適的方法對圍產(chǎn)期婦女進(jìn)行GBS產(chǎn)前篩查對提高出生人口素質(zhì)意義重大，也可以更好的為臨床診治提供依據(jù)，服務(wù)臨床。