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    高溫環(huán)境下枯草芽孢桿菌對(duì)AA雞生長(zhǎng)性能、免疫器官發(fā)育及免疫功能的影響

    2019-03-06 04:24:58AguzeyHARRY
    河南農(nóng)業(yè)科學(xué) 2019年2期
    關(guān)鍵詞:枯草胸腺飼糧

    ,,,Aguzey HARRY,,,

    (廣東海洋大學(xué) 農(nóng)學(xué)院,廣東 湛江 524088)

    當(dāng)前畜牧養(yǎng)殖向機(jī)械化、規(guī)?;l(fā)展,“全進(jìn)全出”逐漸成為養(yǎng)殖行業(yè)的生產(chǎn)模式,雖然有利于畜禽的集中管理,但環(huán)境應(yīng)激容易引起畜禽抵抗力下降,導(dǎo)致發(fā)病率增高。由于禽病治療多用抗生素[1],造成了細(xì)菌的耐藥性增加、畜禽產(chǎn)品抗生素的殘留等負(fù)面影響,進(jìn)而制約了畜禽養(yǎng)殖業(yè)的健康安全發(fā)展,因此,抗生素替代品的開發(fā)和高效利用十分必要。

    微生態(tài)制劑是由有益微生物或微生物的代謝產(chǎn)物加工而成。一些芽孢桿菌類微生物具有優(yōu)良的耐高溫性能,同時(shí)無毒副作用,能夠調(diào)節(jié)動(dòng)物腸道微生態(tài)平衡,促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育。研究表明,適宜劑量的枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)有利于動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育、增強(qiáng)機(jī)體免疫功能,同時(shí)可激活體內(nèi)多種酶,抑制菌群繁殖,從而達(dá)到改善腸道內(nèi)環(huán)境的作用,但枯草芽孢桿菌添加劑量不同、應(yīng)用環(huán)境條件不同等因素的差異也會(huì)造成改善效果的不同[2-4]。為此,在前期研究的基礎(chǔ)上,探討不同添加劑量的枯草芽孢桿菌對(duì)高溫環(huán)境下1~42日齡愛拔益加(AA)雞的生長(zhǎng)發(fā)育、免疫器官發(fā)育和免疫功能的影響,為枯草芽孢桿菌在肉雞養(yǎng)殖中的合理應(yīng)用提供參考。

    1 材料和方法

    1.1 供試菌劑

    枯草芽孢桿菌制劑購(gòu)于廣東雅琪生物科技有限公司(活菌總含量≥2×1010cfu/g)。

    1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)及日糧組成

    本試驗(yàn)采用單因子隨機(jī)分組試驗(yàn),選用1日齡健康、體質(zhì)量鄰近且同批孵化的AA雞300只,隨機(jī)分為5組,每組5個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)12只雞。飼養(yǎng)地點(diǎn)為廣東湛江,飼養(yǎng)期為6—7月,環(huán)境溫度為26~34 ℃。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼糧,試驗(yàn)組飼喂分別添加了0.010%、0.015%、0.020%和0.025%枯草芽孢桿菌制劑的基礎(chǔ)飼糧?;A(chǔ)飼糧為玉米-豆粕型,根據(jù)AA雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行配制,其組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表1。

    表1 基礎(chǔ)飼糧的組成及營(yíng)養(yǎng)水平Tab.1 Composition and nutrient levels of the basal diet

    續(xù)表1 基礎(chǔ)飼糧的組成及營(yíng)養(yǎng)水平Tab.1(Continued) Composition and nutrient levels of the basal diet

    注:每千克飼糧中預(yù)混料含維生素A 9 600.00 IU,維生素D33 600.00 IU,維生素E 15.00 IU,維生素K 0.40 mg,維生素B13.50 mg,維生素B29.00 mg,維生素B65.00 mg,維生素B120.03 mg,煙酸40.00 mg,D-泛酸8.00 mg,葉酸0.50 mg,生物素0.20 mg,鐵85.00 mg,銅10.00 mg,鋅105.00 mg,錳115.00 mg,碘0.50 mg,硒0.25 mg。

    Note:1 kg of premix contained VA 9 600.00 IU,VD33 600.00 IU,VE 15.00 IU,VK 0.40 mg,VB13.50 mg,VB29.00 mg,VB65.00 mg,VB120.03 mg,niacin 40.00 mg,D-pantothenic acid 8.00 mg,folic acid 0.50 mg,biotin 0.20 mg,Fe 85.00 mg,Cu 10.00 mg,Zn 105.00 mg,Mn 115.00 mg,I 0.50 mg,Se 0.25 mg.

    1.3 飼養(yǎng)管理

    飼養(yǎng)期間控制好溫度和濕度,雛雞階段進(jìn)行24 h光照。脫溫后AA雞在自然環(huán)境狀態(tài)下養(yǎng)殖,環(huán)境溫度為26~34 ℃。保證雞只自由采食、飲水,雞糞每天清理1次,每天換水并保持雞只飲水清潔,注意觀察雞群精神情況和采食狀況,如有死亡雞只,隨時(shí)記錄。此外,按照AA雞常規(guī)免疫程序進(jìn)行免疫。

    1.4 測(cè)定項(xiàng)目及方法

    1.4.1 AA雞生長(zhǎng)性能測(cè)定 以每個(gè)重復(fù)為單位記錄AA雞初始體質(zhì)量,在AA雞21日齡和42日齡時(shí)分別于8:00對(duì)空腹雞只進(jìn)行體質(zhì)量測(cè)量,在整個(gè)試驗(yàn)過程中詳細(xì)記錄各階段耗料量,計(jì)算AA雞各生長(zhǎng)階段的平均日增體質(zhì)量(Average daily gain,ADG)、平均日采食量(Average daily feed intake,ADFI)和料重比(Feed weight ratio,F/G)。計(jì)算公式分別為ADG=(末體質(zhì)量-初體質(zhì)量)/(天數(shù)×雞只數(shù));ADFI=耗料量/(天數(shù)×雞只數(shù));F/G=平均日采食量/平均日增體質(zhì)量。

    1.4.2 AA雞免疫器官指數(shù)測(cè)定 分別在AA雞21日齡和42日齡時(shí)進(jìn)行屠宰試驗(yàn),采用頸靜脈處死法,剝離AA雞的胸腺、脾臟和法氏囊,稱質(zhì)量計(jì)算器官指數(shù)。計(jì)算公式分別為胸腺指數(shù)=胸腺質(zhì)量/體質(zhì)量;脾臟指數(shù)=脾臟質(zhì)量/體質(zhì)量;法氏囊指數(shù)=法氏囊質(zhì)量/體質(zhì)量。

    1.4.3 AA雞免疫指標(biāo)測(cè)定 分別在AA雞21日齡和42日齡時(shí)進(jìn)行翅下采血,將采集血液放入采血管中3 000 r/min離心10 min,取1.5 mL血清于離心管中冷凍保存,以備進(jìn)行新城疫抗體效價(jià)(NDV-Ab)、溶菌酶活性(Lysozyme activity,LZM)、免疫球蛋白(IgG)含量檢測(cè)。其中NDV-Ab采用血球凝聚法測(cè)定,LZM采用比濁法測(cè)定,IgG采用ELASA試劑盒測(cè)定。試驗(yàn)所用試劑盒均購(gòu)于南京建成生物工程研究所。

    1.5 數(shù)據(jù)處理

    試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel 2010處理,用SPSS 22.0中ANOVA進(jìn)行分析,Duncan’s法進(jìn)行多重比較,結(jié)果以“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 枯草芽孢桿菌對(duì)AA雞生長(zhǎng)性能的影響

    由表2可以看出,飼糧中添加枯草芽孢桿菌可以一定程度上提高AA雞生長(zhǎng)各階段以及全期ADG。AA雞生長(zhǎng)各階段及全期ADG隨著枯草芽孢桿菌添加劑量的增加而增加,以0.020%枯草芽孢桿菌添加組ADG最高,兩者顯著高于對(duì)照組,但各添加組之間ADG差異不顯著。1—42日齡添加枯草芽孢桿菌制劑的試驗(yàn)組AA雞的ADG分別較對(duì)照組提高1.92%(P>0.05)、7.95%(P>0.05)、9.67%(P<0.05)、8.49%(P>0.05)。F/G在AA雞不同生長(zhǎng)階段及全期都有一定程度降低,1—42日齡AA雞各試驗(yàn)組F/G分別降低2.63%(P>0.05)、5.26%(P>0.05)、5.79%(P<0.05)和4.74%(P>0.05)。

    表2 枯草芽孢桿菌對(duì)AA雞生長(zhǎng)性能的影響

    注:表中同行數(shù)據(jù)肩上標(biāo)注的不同字母表示差異性顯著(P<0.05),下同。

    Note:Different letters marked on the shoulder of data in the same peer in the table indicate significant difference(P<0.05),the same below.

    2.2 枯草芽孢桿菌對(duì)AA雞免疫器官指數(shù)的影響

    由表3可以看出,0.020%枯草芽孢桿菌添加組21日齡AA雞的胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)分別比對(duì)照組高61.25%(P<0.05)、59.26%(P<0.05),0.025%枯草芽孢桿菌添加組21日齡AA雞的胸腺指數(shù)分別比對(duì)照組和0.010%枯草芽孢桿菌添加組高52.50%(P<0.05)和36.31%(P<0.05)。與對(duì)照組相比,各試驗(yàn)組42日齡AA雞的胸腺指數(shù)比對(duì)照組分別增加17.53%(P>0.05)、13.96%(P>0.05)、19.81%(P>0.05)、22.73%(P<0.05),各試驗(yàn)組之間差異不顯著;0.025%枯草芽孢桿菌添加組42日齡AA雞的脾臟指數(shù)分別高于對(duì)照組和其他試驗(yàn)組43.43%(P<0.05)、39.21%(P>0.05)、36.54%(P>0.05)、23.48(P>0.05)。整個(gè)試驗(yàn)期間AA雞的法氏囊指數(shù)有增加的趨勢(shì),但變化不顯著。

    表3 枯草芽孢桿菌對(duì)AA雞免疫器官指數(shù)的影響Tab.3 Effect of Bacillus subtilis on immune organ index of AA chickens

    2.3 枯草芽孢桿菌對(duì)AA雞免疫功能的影響

    由表4可以看出,各試驗(yàn)組無論是21日齡還是42日齡AA雞的NDV-Ab、IgG含量和LZM都有不同程度提高,并且呈現(xiàn)劑量效應(yīng)關(guān)系。其中,0.025%枯草芽孢桿菌添加組AA雞的NDV-Ab顯著高于對(duì)照組,0.015%、0.020%和0.025%枯草芽孢桿菌添加組AA雞IgG含量顯著高于對(duì)照組,但組間差異不顯著;AA雞的LZM在2個(gè)生長(zhǎng)階段表現(xiàn)出一定差異,0.020%、0.025%枯草芽孢桿菌添加組21日齡AA雞的LZM顯著高于對(duì)照組,0.020%枯草芽孢桿菌添加組42日齡AA雞的LZM顯著高于對(duì)照組。各試驗(yàn)組42日齡AA雞的NDV-Ab分別比對(duì)照組高5.22%(P>0.05)、15.13%(P>0.05)、13.57%(P>0.05)和21.74%(P<0.05);各試驗(yàn)組42日齡AA雞的IgG含量比對(duì)照組高19.41%(P>0.05)、33.53%(P<0.05)、22.94%(P<0.05)和32.94%(P<0.05),除此之外,0.020%、0.025%枯草芽孢桿菌添加組42日齡AA雞的IgG含量比0.010%枯草芽孢桿菌添加組分別升高2.95%(P<0.05)、11.33%(P<0.05);各試驗(yàn)組42日齡AA雞的LZM均大于對(duì)照組,其中0.020%枯草芽孢桿菌添加組提高最多,為10.36%(P<0.05)。

    表4 枯草芽孢桿菌對(duì)AA雞部分免疫指標(biāo)的影響Tab.4 Effect of Bacillus subtilis on partial immune indexe of AA chickens

    3 結(jié)論與討論

    飼糧添加枯草芽孢桿菌可在一定程度上提高動(dòng)物的生長(zhǎng)發(fā)育和免疫器官指數(shù),同時(shí)提高血清NDV-Ab、IgG含量和LZM。因此,以生長(zhǎng)性能、免疫器官和免疫指標(biāo)為綜合指標(biāo)進(jìn)行評(píng)價(jià)后,得出枯草芽孢桿菌的適宜添加劑量為0.020%。

    3.1 高溫環(huán)境下飼糧添加枯草芽孢桿菌對(duì)AA雞生長(zhǎng)性能的影響

    芽孢桿菌在動(dòng)物生產(chǎn)中常用來調(diào)節(jié)腸道菌群內(nèi)環(huán)境平衡、提高飼料利用效率、增強(qiáng)機(jī)體免疫功能、產(chǎn)生生物活性物質(zhì)促進(jìn)機(jī)體健康[5-7]。唐志剛等[8]研究表明,日糧添加0.01%的益生菌可促進(jìn)AA雞快速生長(zhǎng)和免疫器官發(fā)育,也可提高機(jī)體抗病力和蛋白質(zhì)利用率。研究發(fā)現(xiàn),日糧添加枯草芽孢桿菌制劑可提高肉雞日增體質(zhì)量和飼料利用率,刺激機(jī)體分泌腸道酶和其他酶,促進(jìn)飼料消化吸收[9-12]。但不同的研究結(jié)果間也有差異。余東游等[13]發(fā)現(xiàn),飼糧中添加1×105cfu/g的枯草芽孢桿菌對(duì)308羅斯肉雞前期生長(zhǎng)不明顯,但后期效果優(yōu)于前期,且全期料重比降低,飼料轉(zhuǎn)化率增大。本研究結(jié)果表明,0.020%和0.025%枯草芽孢桿菌添加組1—21日齡、22—42日齡以及飼養(yǎng)全期AA雞的ADG均高于對(duì)照組。這與陳彩文等[14]、譚榮炳等[15]和鄭春芳等[16]研究結(jié)果一致,但與齊博等[17]研究結(jié)果不一致,推測(cè)可能與雞品種、菌群種類及活菌數(shù)、添加劑量和飼養(yǎng)環(huán)境有關(guān)。在飼糧中添加0.020%和0.025%枯草芽孢桿菌有利于促進(jìn)AA雞的生長(zhǎng)發(fā)育,并提高飼料利用率。分析其相關(guān)作用機(jī)制,可能與枯草芽孢桿菌能夠增加腸道有益菌群數(shù)量和比例,補(bǔ)充內(nèi)源酶的不足并提高了營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率有關(guān)[18]。

    3.2 高溫環(huán)境下飼糧添加枯草芽孢桿菌對(duì)AA雞免疫指標(biāo)的影響

    飼料添加微生態(tài)制劑可提高血清中的IgG、補(bǔ)體(C3)和AKP[19],降低料重比,顯著提高雞只免疫器官指數(shù)和消化器官指數(shù)[20]。劉明超等[21]發(fā)現(xiàn),添加0.03%的枯草芽孢桿菌可明顯提高36日齡羅斯308肉雞的胸腺指數(shù);添加0.1%的枯草芽孢桿菌制劑(一類為Pa02制劑,另一類為PAS38,活菌數(shù)均為1×106cfu/g)可明顯改善4周齡和6周齡愛維因肉雞的胸腺、脾臟和法氏囊器官發(fā)育[22]。不同微生態(tài)制劑之間的效果也有差異,利明[23]在日糧中添加枯草芽孢桿菌(B.subtilis)、地衣芽孢桿菌(B.lichenlformis)和遲緩芽孢桿菌(B.lentus),探究其對(duì)雄性AA雞免疫器官發(fā)育和免疫細(xì)胞吞噬能力,以枯草芽孢桿菌的效果最好。本研究檢測(cè)得,0.020%枯草芽孢桿菌添加組21日齡AA雞的胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)分別高于對(duì)照組61.25%(P<0.05)和59.26%(P<0.05),0.025%枯草芽孢桿菌添加組21日齡AA雞的胸腺指數(shù)高于對(duì)照組52.50%(P<0.05)。0.025%枯草芽孢桿菌添加組42日齡AA雞的脾臟指數(shù)分別高于對(duì)照組和其他試驗(yàn)組43.43%(P<0.05)、39.21%(P>0.05)、36.54%(P>0.05)、23.48%(P>0.05)。利明[23]通過研究B.subtilis、B.lichenlformis和B.lentus對(duì)雄性AA雞生產(chǎn)性能和免疫功能的影響,結(jié)果表明,法氏囊指數(shù)較對(duì)照組均有不同程度增加,但差異不顯著,與本試驗(yàn)結(jié)果相似。

    枯草芽孢桿菌主要通過好氧呼吸的方式進(jìn)行發(fā)酵,可作為免疫因子刺激并激活生命體免疫細(xì)胞,使免疫系統(tǒng)成熟加快。倪耀娣等[24]報(bào)道,口服活菌微生態(tài)制劑可延緩病毒免疫后新城疫抗體滴度消長(zhǎng)速度;DUC等[25]發(fā)現(xiàn),飼喂枯草芽孢桿菌可提高小鼠免疫球蛋白G效價(jià)水平,并能誘導(dǎo)和促進(jìn)炎細(xì)胞因子白細(xì)胞介素-6生成;王雄等[26]研究發(fā)現(xiàn),飼喂銀鯽微生態(tài)制劑后,飼喂組在第7天、第14天、第21天和第28天的LZM均高于未飼喂組。本研究中,0.020%和0.025%枯草芽孢桿菌添加組21日齡AA雞的IgG含量和LZM均高于對(duì)照組,0.015%、0.020%和0.025%枯草芽孢桿菌添加組42日齡AA雞的IgG含量均高于對(duì)照組(P<0.05),0.020%、0.025%枯草芽孢桿菌添加組42日齡AA雞的IgG含量比0.010%枯草芽孢桿菌添加組分別升高2.95%(P<0.05)、11.33%(P<0.05)。各試驗(yàn)組42日齡AA雞的LZM均大于對(duì)照組,其中,0.020%枯草芽孢桿菌添加組提高10.36%(P<0.05)。因此,飼糧中添加不同劑量的枯草芽孢桿菌可明顯提高血清NDV-Ab、IgG含量和LZM,進(jìn)而提高AA雞的免疫功能。

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