豆甾醇的研究進(jìn)展概述*

汪 帥，孫 宇，李春梅，盧 群

（廣東藥科大學(xué)，廣東 廣州 510006）

豆甾醇是植物甾醇的典型代表，廣泛存在于各類植物及植物油精煉的脫臭餾出物中，具有多種生物學(xué)活性，無毒，具有乳化性、穩(wěn)定性、抗氧化等特點，廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)藥等領(lǐng)域。本研究中對豆甾醇的來源分布、提取、理化性質(zhì)、生理學(xué)活性、臨床運用等多方面進(jìn)行概述，為臨床應(yīng)用提供理論參考，也為豆甾醇的進(jìn)一步開發(fā)利用提供借鑒。

1 來源和分布

豆甾醇為植物的活性成分，廣泛分布于大自然中。不同植物體內(nèi)的豆甾醇含量不同，其中植物油及其加工品中含量最高，其次是大豆、谷物、堅果，瓜果和蔬菜的含量較低。

2 提取方法

目前，豆甾醇的提取方法主要有化學(xué)法和物理法。化學(xué)法即傳統(tǒng)的分離提純方法，先利用化學(xué)反應(yīng)制備各種甾醇衍生物，增加各種甾醇的物理性差異，再用物理方法分離出豆甾醇?；瘜W(xué)法包括絡(luò)合法和皂化法，前者將甾醇與有機(jī)素、鹵素絡(luò)合，增加其溶解度，便于提取；后者利用酯在堿的作用下水解生成羧酸鹽和醇的原理提取豆甾醇。物理法是根據(jù)物理性質(zhì)分離出豆甾醇，包括溶劑結(jié)晶法、吸附法、分子蒸餾法等，目前主要以溶劑結(jié)晶法為主，該法主要是利用物質(zhì)在不同有機(jī)溶劑中溶解度有差異的原理達(dá)到提取目的，先采用一種非極性溶劑通過結(jié)晶的方法使豆甾醇富集，再采用另一種溶劑體系進(jìn)一步純化，提取得到的豆甾醇在純度、效率等方面都優(yōu)于傳統(tǒng)的化學(xué)法［1］。

3 理化性質(zhì)

豆甾醇為白色粉末狀物質(zhì)，在不同溶劑中呈現(xiàn)的狀態(tài)有所不同。一般無臭無味，相對分子質(zhì)量為412.69，碳原子數(shù)為 27 ～31，沸點為 501.9 ℃（760 mmHg），熔點為161～170℃，相對密度略大于水。豆甾醇易溶于醋酸乙酯、苯、氯仿、吡啶，微溶于丙酮和乙醇，不溶于水。豆甾醇的化學(xué)性質(zhì)主要表現(xiàn)在活性的羥基（C3位）和雙鍵（C5位）上，C17位上相連的由8～10個碳原子構(gòu)成的側(cè)鏈也與其生理特性和用途有關(guān)。

4 生物活性及應(yīng)用

4.1 藥理學(xué)活性及其應(yīng)用

抗氧化：LI等［2］發(fā)現(xiàn)，豆甾醇可顯著抑制A7r5細(xì)胞中血管緊張素Ⅱ（AngⅡ）誘導(dǎo)的活性氧（ROS）的增加，增加AngⅡ處理的A7r5細(xì)胞中SOD和CAT酶的活性，結(jié)果表明豆甾醇在A7r5細(xì)胞中的抗氧化作用。黃建春等［3］采用體外試驗法觀察玉郎傘中提取得到的豆甾醇對O2-·和·OH的清除及抑制作用，發(fā)現(xiàn)高、中濃度豆甾醇對其均有明顯的清除作用，并呈濃度依賴性。左玉等［4］采用硫氰酸鐵法（FCT）和硫代巴比妥酸反應(yīng)物法（TBARS）檢測脂質(zhì)的氧化進(jìn)程，發(fā)現(xiàn)不同濃度豆甾醇均能使大豆磷脂脂質(zhì)氧化物（FTC）和丙二醛的生成量下降，表明豆甾醇具有抗氧化活性。

抗腫瘤：程杏安等［5］采用四唑鹽 （MTT）法觀察豆甾醇和β-谷甾醇對B16-F10黑色素瘤細(xì)胞活力的影響，發(fā)現(xiàn)豆甾醇能明顯抑制B16-F10黑色瘤細(xì)胞的生長。李慶勇等［6］發(fā)現(xiàn)，豆甾醇能阻滯人肝癌細(xì)胞SMMC-7721的細(xì)胞周期的S期和G2/M期，抑制癌細(xì)胞的增殖，并誘導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡。KANGSAMAKSIN 等［7］發(fā)現(xiàn)，豆甾醇在體外能顯著降低腫瘤壞死因子-α（TNF-α）的轉(zhuǎn)錄水平，在體內(nèi)能破壞腫瘤血管的生成，抑制膽管癌（CCA）異種移植瘤的生長，認(rèn)為豆甾醇是治療膽管癌的候選藥物。PANDEY等［8］發(fā)現(xiàn)，豆甾醇在人膽囊癌細(xì)胞中能上調(diào)p27表達(dá)、下調(diào)jab1基因，而調(diào)控線粒體凋亡信號通路，激活Caspase-3，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，表明豆甾醇具有抗膽囊癌的作用。LI等［9］發(fā)現(xiàn)，在人胃癌細(xì)胞SNU-1中，豆甾醇除了能上調(diào)促凋亡基因BAX蛋白的表達(dá)、下調(diào)抗凋亡基因bcl-2的表達(dá)、抑制癌細(xì)胞的增殖外，還能抑制胃癌細(xì)胞遷移，誘導(dǎo)細(xì)胞周期阻滯在G2/M 期，抑制 JAK/STAT 信號通路。ALI等［10］在二羥甲基丁酸（DMBA）誘導(dǎo)的小鼠皮膚癌模型中發(fā)現(xiàn)，豆甾醇能顯著減小腫瘤的體積，降低乳頭狀瘤的累積數(shù)目，延長平均潛伏期，表明豆甾醇具有抗皮膚癌的活性。

抗炎癥：PANDITH等［11］在體外試驗研究中發(fā)現(xiàn)，暹羅雜草提取物中的豆甾醇能明顯抑制LPS誘導(dǎo)的環(huán)氧合酶 -2（COX-2）、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶（iNOS）mRNA和蛋白水平的提高，抑制前列腺素E2（PGE2）和一氧化氮（NO）的釋放。CHEN 等［12］通過大體形態(tài)學(xué)、組織學(xué)等方法評估軟骨關(guān)節(jié)炎（OA）家兔的膝關(guān)節(jié)，發(fā)現(xiàn)豆甾醇能明顯抑制基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）的表達(dá)，抑制軟骨的降解，表明豆甾醇具有治療骨關(guān)節(jié)炎的潛力。馮思敏等［13］研究發(fā)現(xiàn)，豆甾醇能明顯抑制葡萄糖酸鈉（DSS）誘導(dǎo)的C57BL/6J雄性小鼠結(jié)腸縮短，減少糞便中的血紅蛋白含量，降低結(jié)腸炎病理學(xué)評分，并能顯著降低結(jié)腸組織炎性因子白細(xì)胞介素 1（IL-1）、白細(xì)胞介素 6（IL-6）、單核細(xì)胞趨化蛋白 1（MCP-1）和環(huán)氧合酶 2（COX-2）的 mRNA 表達(dá)。ANTWI等［14］研究發(fā)現(xiàn)，豆甾醇除了能減輕免疫球蛋白E（IgE）介導(dǎo)齲齒動物的皮膚過敏反應(yīng)、減少反應(yīng)面積外，還能減少混合物C48/80誘導(dǎo)的動物抓撓行為，顯著減少耳皮膚組織的表皮層增厚和炎性細(xì)胞浸潤，顯示出豆甾醇在治療皮膚過敏性疾病方面有巨大潛力。

降低膽固醇：張帆［15］觀察了豆甾醇等6種植物甾醇對人結(jié)腸癌上皮細(xì)胞Caco-2對膽固醇吸收的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，豆甾醇能劑量依賴性地顯著降低膽固醇的吸收作用。FENG等［16］發(fā)現(xiàn)，豆甾醇能顯著改善高脂西式飲食（HFWD）誘導(dǎo)的小鼠脂肪肝和代謝異常，降低腸道膽汁酸、肝總脂質(zhì)、膽固醇、高密度脂蛋白膽固醇和三酰甘油的水平。

保護(hù)精神狀況：YADAV等［17］研究發(fā)現(xiàn)，豆甾醇能明顯減少氯胺酮引起的小鼠的自發(fā)活動、刻板行為、強(qiáng)化降壓延遲等一些精神病癥狀，增加γ-氨基丁酸（GABA）、谷胱甘肽（GSH）水平，減少多巴胺、丙二醛、TNF-α水平，降低乙酰膽堿酯酶活性，表明豆甾醇對精神病癥狀有一定的改善作用。

鎮(zhèn)痛作用：有研究發(fā)現(xiàn)［18］，口服 0.3 ～3 mg/kg 豆甾醇，不但不會引起小鼠的胃潰瘍和改變胃腸道轉(zhuǎn)運，反而還對醋酸誘導(dǎo)的扭體試驗、手術(shù)切口引起的機(jī)械性疼痛、部分坐骨神經(jīng)結(jié)扎等多種急、慢性疼痛模型表現(xiàn)出非常有效的鎮(zhèn)痛作用。

抗糖尿病：WARD等［19］研究發(fā)現(xiàn)，豆甾醇能改善胰島素瘤細(xì)胞（INS-1）中葡萄糖脂質(zhì)毒性所引起的游離膽固醇增加，進(jìn)而導(dǎo)致胰島素分泌缺陷，增加總胰島素，促進(jìn)激動蛋白重組，顯示對治療2型糖尿病能發(fā)揮有益作用。WANG等［20］研究發(fā)現(xiàn)，在體外試驗中，用不同濃度的豆甾醇處理L6細(xì)胞，對促進(jìn)葡萄糖的攝取有顯著作用。在體內(nèi)試驗中，口服豆甾醇后，KK-AY小鼠的空腹血糖水平和血脂指標(biāo)（如三酰甘油和膽固醇）明顯降低，顯著減輕了KK-AY小鼠的胰島素抵抗和口服葡萄糖耐量。其機(jī)制可能與增加葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白4（GLUT4）的移位和表達(dá)有關(guān)，表明豆甾醇對治療2型糖尿病具有潛在益處。

4.2 其他領(lǐng)域的應(yīng)用

豆甾醇具有良好的乳化性能，在紙張加工、油墨顏料分散、紡織品柔軟等方面有廣泛用途。此外，豆甾醇還可作為原料合成除草劑和殺蟲劑；具有促進(jìn)生長、改善健康、增加產(chǎn)量、降低成本等特性，廣泛應(yīng)用在蠶、魚、蝦、鳥、家禽、家畜等的養(yǎng)殖方面，表現(xiàn)出良好的經(jīng)濟(jì)效益和社會生態(tài)效益。

5 結(jié)語

豆甾醇是從植物中提取出的具有高生物活性的一種天然物質(zhì)，具有許多重要的生理功能。隨著現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展和豆甾醇基礎(chǔ)研究開發(fā)的不斷深入和突破，豆甾醇的分離提純將會變得更容易，其藥理價值也將充分顯現(xiàn)出來，可為進(jìn)一步開發(fā)利用這種新型的健康食品、藥品或產(chǎn)品提供借鑒。