?飼料中不同水平蜂花粉對黃尾鲴親魚繁殖性能的影響?

摘 要：以魚粉、豆粕、棉粕、菜粕為蛋白源，以豆油為脂肪源配制基礎(chǔ)飼料，按1%、2%、3%的劑量添加蜂花粉至基礎(chǔ)飼料中制成3種試驗(yàn)組飼料，在室外池塘中對黃尾鲴開展為期8周的攝食生長試驗(yàn)。結(jié)果表明：2%和3%蜂花粉組親魚性成熟比例顯著高于對照組和1%蜂花粉組（Plt;0.05），其親魚性成熟比例為85%以上，而對照組為65%;從卵子質(zhì)量來看，對照組黃尾鲴親魚卵徑、受精率、孵化率以及出膜仔魚全長顯著低于添加蜂花粉組（Plt;0.05）;從精子質(zhì)量看，親魚日糧中添加高比例的蜂花粉能顯著提高雄性親魚的繁殖性能（Plt;0.05），與對照組相比，2%蜂花粉組可提高精子密度45.3%，提高精子活力12.7%，精子畸形率下降21.0%。綜合考慮，2%蜂花粉為黃尾鲴親魚最佳添加量。

關(guān)鍵詞：飼料;蜂花粉;黃尾鲴;繁殖性能

中圖分類號(hào)：S917.4 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1006-060X（2018）10-0084-03

Effects of Different Levels of Bee Pollen in Feed on Reproductive Performance of

Xenocypris davidi Bleeker

LI Cai-gang，ZHANG Hai-xin，HU Wen-juan，WAN Jin-tao，LUO Nan，HUANG An-qi，ZHANG Yan-ping

（Jiangxi Fisheries Research Institute， Nanchang 330039， PRC）

Abstract： Feeding growth test of Xenocypris davidi Bleeker was carried out in outdoor ponds for 8 weeks; three experimental group feeds were made by adding bee pollen to the basic feed at the dosage of 1%， 2% and 3%， with fish meal， soybean meal， cotton meal and vegetable meal as protein source， and soybean oil as fat source for basic feed. The results showed that： the sexual maturation rate of the parent fish in the bee pollen group with the addition of 2% and 3% was significantly higher than that in the control group and the bee pollen group with the addition of 1% （Plt;0.05）. From the perspective of egg quality， the egg diameter， fertilization rate， hatching rate and the length of membrane larvae in the control group were significantly lower than that in the bee pollen group （Plt;0.05）. From the perspective of sperm quality， the addition of high proportion of bee pollen in the diet of parental fish can significantly improve the reproductive performance of male parental fish （Plt;0.05）. Compared with the control group， the addition of 2% bee pollen increased sperm density by 45.3%， sperm motility by 12.7% and the rate of sperm malformation by 21.0%. All things considered， the best amount of yellowtail catfish was 2% bee pollen.

Key words： feed; bee pollen; Xenocypris davidi Bleeker; reproductive performance

黃尾鲴（Xenocypris davidi Bleeker）俗稱黃尾、黃片、黃姑子、黃瓜魚等，隸屬于鯉科（Cyprinidae）鲴亞科（Xenocypri-ninae）鲴屬（Xenocypris）[1]，是一種中小型淡水魚類。親魚的營養(yǎng)對提高產(chǎn)卵量、受精率、孵化率和仔魚質(zhì)量以及仔稚魚生長與存活等具有重要作用，對親魚的營養(yǎng)強(qiáng)化有助于提高其繁殖性能。為了獲得大量的優(yōu)質(zhì)苗種，親魚的培育顯得尤為重要。蜂花粉營養(yǎng)非常豐富，含有多種必需氨基酸、不飽和脂肪酸、黃酮類化合物、多糖、磷脂、維生素和微量元素等成分，國際上稱其為“完全營養(yǎng)素”。國內(nèi)外許多學(xué)者已將蜂花粉作為飼料添加劑廣泛運(yùn)用于動(dòng)物飼料中，如王建橋等[2]在蛋雞日糧中添加0.8%的蜂花粉，結(jié)果產(chǎn)蛋率、蛋雞的抗病力以及抗應(yīng)激性都有所提高;陳艷珍等[3]在蛋種雞日糧中添加1.0%蜂花粉，其產(chǎn)蛋率、種蛋受精率、受精蛋孵化率等得到顯著提高。蜂花粉作為飼料添加劑提高動(dòng)物繁殖性能效果顯著[4]，但蜂花粉作為飼料添加劑在水產(chǎn)動(dòng)物飼料中的應(yīng)用報(bào)道卻較少。通過研究飼料中不同水平蜂花粉對黃尾鲴親魚繁殖性能的影響，探索其最佳添加量，以期為黃尾鲴規(guī)?；斯び绾陀H魚飼料的配制提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)在萍鄉(xiāng)市水產(chǎn)科學(xué)研究所進(jìn)行，供試2齡黃尾鲴親魚由該研究所培育。正式試驗(yàn)前，用基礎(chǔ)日糧馴養(yǎng)黃尾鲴一周。在親魚繁殖季節(jié)前2～3個(gè)月，從親魚池中隨機(jī)挑選90尾性腺未發(fā)育成熟的雌性親魚（體重204.1±10.2 g）和90尾雄性親魚（體重159.8±7.6 g），隨機(jī)分為4組，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)20尾（雌∶雄=1∶1），分別置于12個(gè)自制養(yǎng)殖裝置（規(guī)格為2 m×2 m×1 m），飼養(yǎng)于水深約80 cm的池塘中，進(jìn)行正式試驗(yàn)。

試驗(yàn)用蜂花粉購自江西農(nóng)業(yè)大學(xué)蜜蜂研究所，超微粉碎后備用。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 飼料配制 親魚基礎(chǔ)飼料以魚粉、豆粕、棉粕、菜粕為蛋白源，以豆油為脂肪源，對照組飼喂根據(jù)營養(yǎng)需求配制的基礎(chǔ)日糧，營養(yǎng)成分：粗蛋白、粗脂肪、粗纖維、粗灰分分別為34.58%、7.62%、4.33%、9.76%。試驗(yàn)組在基礎(chǔ)日糧中分別添加1%、2%、3%劑量的蜂花粉，以及3%、2%、1%的沸石粉，人工混合后使用（基礎(chǔ)飼料配方如表1），對照不加蜂花粉，僅添加4%沸石粉。試驗(yàn)用原料均過60目篩，所有原料充分混合均勻后壓制成直徑為3 mm的顆粒飼料，烘干后儲(chǔ)存在冰箱和冷庫中備用。

1.2.2 親魚飼養(yǎng)管理 養(yǎng)殖試驗(yàn)在室外進(jìn)行，自然光照。試驗(yàn)期間，每天以體重的3%～4%投喂自制試驗(yàn)膨化顆粒飼料，每天投喂2次，分別于每天9：00、16：00各投喂1次，每次投喂后1 h觀察魚的吃食情況并將殘餌撈出，每日記錄耗料，估算采食量。養(yǎng)殖池每14 d換水1次，換水量約為1/3，試驗(yàn)期8周。試驗(yàn)期間水溫為17.8～26.5℃，水中溶解氧大于4.5 mg/L，pH值6.8～7.5。試驗(yàn)結(jié)束后，停止喂食使魚饑餓24 h，測定各試驗(yàn)組魚總重和尾數(shù)，按公式（1）、（2）計(jì)算成活率、性成熟系數(shù)。懷卵量采用重量取樣法，即從卵巢中剪一小段性腺（0.1～0.5 g）放在干凈載玻片上稱重，并在顯微鏡下計(jì)算含有卵黃顆粒的全部卵粒數(shù)。相關(guān)指標(biāo)計(jì)算公式如下：

成活率（%）=100×試驗(yàn)?zāi)~尾數(shù)/試驗(yàn)初魚尾數(shù)" " " " （1）

性腺成熟系數(shù)（%）=卵巢/體重×100" " " " " "（2）

1.2.3 黃尾鲴的人工繁殖 5月上旬，對投喂的各組黃尾鯝親魚進(jìn)行人工催產(chǎn)，獲得黃尾鯝受精卵并孵化出膜。受精后的魚卵放入孵化桶中孵化，水溫控制在25±0.5℃，溶解氧5 mg/L以上，pH值7.0～8.0。利用Olympus ix53倒置熒光顯微鏡測定卵徑、仔魚長度。

1.2.4 精液采集及活力測定 （1）精液采集：將試驗(yàn)魚置于浸過水的濕棉質(zhì)毛巾，并用濕毛巾將魚的頭部全部遮蓋;用干燥的棉質(zhì)毛巾擦干魚體生殖孔附近的水分，然后用手輕輕擠壓腹部生殖腺部位，即可將精液擠出，用干凈干燥的吸管吸取精液置于冰浴的1.5 mL離心管中，立即取樣進(jìn)行活力觀察;擠壓過程中防止尿液與體表水分混入精液。（2）精子活力測定：用移液槍吸取50 μL激活液于載玻片上，并移到視野內(nèi);以牙簽挑取少許精液放入Olympus ix53顯微鏡下載玻片的液滴中，記錄時(shí)間并進(jìn)行觀察;采用計(jì)數(shù)板測定法計(jì)算精子密度;采用載玻片計(jì)數(shù)法計(jì)算精子活力。精子的頭部、中部、尾部畸形都為畸形精子。

1.2.5 數(shù)據(jù)處理 試驗(yàn)數(shù)據(jù)使用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（Mean±SD.）表示，采用Excel和SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行方差分析，用Duncan's檢驗(yàn)進(jìn)行多重比較，顯著差異水平為P<0.05。

2 結(jié)果與分析

2.1 蜂花粉對黃尾鲴親魚繁殖性能的影響

由表2可知，各試驗(yàn)組親魚成活率均在95%以上，其中添加2%蜂花粉組的親魚成活率達(dá)到100%，而造成少量親魚死亡的原因是試驗(yàn)分組過程中對親魚的刺激引起了應(yīng)激反應(yīng);隨著蜂花粉添加量的增加，親魚的性成熟比例逐漸遞增，對照組顯著低于添加蜂花粉組（Plt;0.05），但2%蜂花粉組與3%蜂花粉組之間差異不顯著;2%和3%蜂花粉組的親魚雌、雄性成熟系數(shù)無顯著差異，但均顯著高于對照組和1%蜂花粉組（Plt;0.05），其親魚性成熟比例達(dá)到85%以上，而對照組（基礎(chǔ)日糧組）性成熟比例為65%;各試驗(yàn)組的絕對懷卵量和相對懷卵量之間無顯著差異。

2.2 蜂花粉對黃尾鲴卵子質(zhì)量的影響

由表3可知，隨著蜂花粉添加水平的遞增，其卵徑、受精率、孵化率及出膜仔魚全長逐漸遞增，對照組顯著低于添加蜂花粉組（Plt;0.05），但添加2%蜂花粉組與添加3%蜂花粉組之間無顯著差異。

2.3 蜂花粉對黃尾鲴精子質(zhì)量的影響

由表4可知，隨著蜂花粉添加水平的遞增，其雄性親魚的繁殖性能逐漸遞增，其中與對照組相比，添加2%和3%蜂花粉組提高效果最顯著（Plt;0.05），但兩者之間無顯著差異;其中，2%蜂花粉組可提高精子密度45.3%，提高精子活力12.7%，精子畸形率下降21.0%。

3" 結(jié)論與討論

蜂花粉對魚類是安全的。大量研究表明，蜂花粉可作為一種無毒、無副作用的天然綠色飼料添加劑廣泛應(yīng)用于動(dòng)物養(yǎng)殖中。在日糧中添加適量的蜂花粉可增強(qiáng)動(dòng)物免疫功能，促進(jìn)動(dòng)物生長發(fā)育、提高飼料利用率、改善動(dòng)物產(chǎn)品品質(zhì)等，從而降低生產(chǎn)成本，提高經(jīng)濟(jì)效益。試驗(yàn)中觀察發(fā)現(xiàn)，飼料中添加蜂花粉后，黃尾鲴親魚生長發(fā)育狀況良好、應(yīng)激反應(yīng)小、病害少，整個(gè)養(yǎng)殖過程中沒有出現(xiàn)不良反應(yīng)。

蜂花粉含有多種營養(yǎng)物質(zhì)，被譽(yù)為“最理想的天然營養(yǎng)品”[5]。近年來臨床上將蜂花粉用于治療男性器質(zhì)性陽痿、男性精液異常性不孕癥及女性更年期綜合癥，或用作飼料添加劑提升動(dòng)物繁殖性能等，均取得較好效果[4]。付越等[6]研究發(fā)現(xiàn)蜂花粉可提高蛋雞的產(chǎn)蛋性能、繁殖性能和蛋品質(zhì)，降低死亡率。筆者的試驗(yàn)結(jié)果表明，在黃尾鲴親魚飼料中，添加不同水平的蜂花粉可顯著提高黃尾鲴親魚性成熟系數(shù)、卵徑、孵化率、出膜仔魚長度（Plt;0.05），但不能增加其懷卵量。位孟聰[7]研究表明，在母鵝日常飼料中添加1.5%蜂花粉能顯著提高其產(chǎn)蛋量、血清中的生殖激素（雌二醇、促卵泡素以及孕酮）水平等，但不能提高母鵝單枚蛋重，筆者的試驗(yàn)結(jié)果與其相悖。這可能是因?yàn)槲锓N的差異，使其對蜂花粉的作用機(jī)制存在差異。

試驗(yàn)結(jié)果表明，蜂花粉能顯著提高雄性黃尾鲴的精子密度、精子活力，并能降低精子畸形率，從而對雄性黃尾鲴親魚的繁殖性能產(chǎn)生積極影響。位孟聰[7]通過添加不同比例的蜂花粉飼喂鵝，發(fā)現(xiàn)蜂花粉能顯著提高公鵝的精液量、精液密度以及精子活力等，筆者的研究結(jié)果與之相吻合。

綜上所述，在該試驗(yàn)條件下，黃尾鲴親魚飼料中添加1%、2%和3%的蜂花粉能顯著提高雌性及雄性黃尾鲴親魚的繁殖性能（Plt;0.05）。雖然2%和3%添加劑量之間無顯著差異，但從性成熟系數(shù)、卵徑、孵化率、出膜仔魚長度、精子活力等方面來看，添加2%的蜂花粉效果更好。綜合考慮，2%蜂花粉為黃尾鲴親魚最佳添加量。

參考文獻(xiàn)：

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[2] 王建橋，金湯東. 肉用種雞飼料中添加不同蜂產(chǎn)品對種雞產(chǎn)蛋率的影響[J]. 浙江畜牧獸醫(yī)，1999，（2）：7.

[3] 陳艷珍，張淑芬，莊淑芬. 蜂花粉對蛋種雞生產(chǎn)性能及蛋品質(zhì)影響的研究[J]. 中國禽業(yè)導(dǎo)刊，2000，（16）：30-31.

[4] 王開發(fā)，支崇遠(yuǎn). 花粉中雌二醇和睪酮含量研究[J]. 養(yǎng)蜂科技，2004，（5）：2-3.

[5] 劉建濤，趙 利，蘇 偉，等. 蜂花粉生物活性物質(zhì)的研究進(jìn)展[J]. 食品科學(xué)，2006，27（12）：909-912.

[6] 付 越，郝 璐，劉英博，等. 蜂花粉對蛋雞生產(chǎn)性能和免疫功能的影響[J]. 飼料研究，2015，（9）：50-55.

[7] 位孟聰. 板栗蜂花粉對五龍鵝繁殖性能影響的試驗(yàn)研究[J]. 中國畜牧雜志，2016，52（20）：63-67.