棘頭梅童魚胚胎發(fā)育和仔魚形態(tài)觀察

劉俊果,宋煒,蔣科技,梁述章,張鳳英,諶 微,馬凌波

(1. 中國水產(chǎn)科學(xué)研究院東海水產(chǎn)研究所，農(nóng)業(yè)部遠(yuǎn)洋與極地漁業(yè)創(chuàng)新重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，上海 200090； 2. 上海海洋大學(xué)水產(chǎn)與生命學(xué)院，上海 201306)

棘頭梅童魚(Collichthyslucidus)俗稱梅子魚、小金鱗、大頭寶等，屬鱸形目(Perciformes)，石首魚科(Sciaenidae)，梅童魚屬，為近海中下層小型魚類，廣泛分布于我國沿海及河口，是近海尤其是河口區(qū)重要的小型經(jīng)濟(jì)魚類[1-3]。棘頭梅童魚肉質(zhì)細(xì)嫩，味道鮮美，且終年可以捕獲，深受沿海居民的喜愛[4-5]。然而，棘頭梅童魚有限的種群規(guī)模和繁衍速率難以滿足市場需求，現(xiàn)已出現(xiàn)過度捕撈和種群衰退的危險(xiǎn)[6]。

魚類早期生活史的研究，是魚類自然資源繁殖保護(hù)和養(yǎng)殖業(yè)苗種培育的基礎(chǔ)[7]。魚類胚胎發(fā)育和胚后發(fā)育的形態(tài)觀察和描述，對其發(fā)育生物學(xué)、繁殖生物學(xué)、人工繁育及之后的育種研究都具有重要的指導(dǎo)作用[8-11]。國內(nèi)外有關(guān)棘頭梅童魚的研究報(bào)道主要集中在資源調(diào)查[12-15]、形態(tài)鑒定[16]、遺傳結(jié)構(gòu)分析[17-18]和功能基因克隆[19]等方面，而其早期發(fā)育研究尚未見報(bào)道。本文在項(xiàng)目組對棘頭梅童魚人工繁育技術(shù)攻關(guān)與研究基礎(chǔ)上，對棘頭梅童魚胚胎及仔魚形態(tài)特征進(jìn)行觀察和描述，旨在填補(bǔ)該方面資料的空白，探明棘頭梅童魚早期生活史階段的發(fā)育規(guī)律，為規(guī)?；斯し敝澈兔绶N培育提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 受精卵來源

2016年5～6月，在福建省寧德市富發(fā)水產(chǎn)有限公司試驗(yàn)場開展了棘頭梅童魚人工繁育試驗(yàn)。選擇形體完整、體質(zhì)健壯、鱗片完整、無外傷無畸形的親魚。并且雄性親魚輕壓腹部有乳白色濃稠的精液流出，在水中呈線狀，并能很快散開；雌性親魚上下腹部均較膨大，卵巢輪廓明顯，輕壓魚腹，則有游離的成熟卵從生殖孔中溢出。試驗(yàn)用成熟親魚65尾，平均體長14 cm，平均體質(zhì)量45 g。采用干法人工授精所獲的受精卵，放入5.0 m×2.0 m×1.6 m的水泥池中充氣培養(yǎng)。

1.2 方法

1.2.1 胚胎發(fā)育觀察

從人工授精時(shí)開始取樣，在顯微鏡下作連續(xù)觀察和拍照，每次觀察取樣30粒以上，胚胎發(fā)育時(shí)間以50%以上個(gè)體到各期的時(shí)間為準(zhǔn)。

1.2.2 仔魚形態(tài)特征觀察

從初孵仔魚開始定期取樣，在解剖鏡下對仔魚形態(tài)發(fā)育情況進(jìn)行觀察和拍攝，并測量相關(guān)形態(tài)學(xué)數(shù)據(jù)，用5%福爾馬林溶液固定標(biāo)本備查。

1.2.3 數(shù)據(jù)和圖像處理

使用Excel 2013對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，照片用photoshop CS2進(jìn)行編排。胚胎發(fā)育各時(shí)期的積溫為胚胎某發(fā)育階段的時(shí)間與水溫的乘積。

2 結(jié)果與分析

2.1 胚胎發(fā)育

在水溫25.0～26.0 ℃、鹽度27～28、pH 8.0、溶解氧6.5 mg·L-1的條件下培育，棘頭梅童魚胚胎從受精卵到孵化出膜歷時(shí)20 h 20 min，積溫518.5 h ℃。根據(jù)棘頭梅童魚胚胎發(fā)育特點(diǎn)，整個(gè)發(fā)育過程可分為合子、卵裂、囊胚、原腸胚、神經(jīng)胚、器官形成及出膜7個(gè)階段共24個(gè)時(shí)期，各時(shí)期發(fā)育主要特征和所需時(shí)間見表1。

表1 棘頭梅童魚胚胎發(fā)育特征Tab.1 Features of embryonic development of Collichthys lucidus

2.1.1 合子階段

棘頭梅童魚受精卵為圓球形，無色透明，中央有1個(gè)油球，卵徑(1.182±0.041) mm，油球徑(0.458±0.015) mm。受精卵遇水膨脹，并可見卵周隙，隨后原生質(zhì)逐漸向動物極集中，隆起形成扁平狀的胚盤。在靜水狀態(tài)下，原生質(zhì)集中的動物極朝下，植物極朝上。

2.1.2 卵裂階段

棘頭梅童魚受精卵胚盤不斷隆起，面積逐漸擴(kuò)大，受精后42 min開始第1次卵裂，屬經(jīng)裂，在胚盤中部形成一條分裂溝，將胚盤分裂成兩個(gè)大小基本相同的分裂球，此時(shí)胚胎進(jìn)入2細(xì)胞期(圖版Ⅰ-1)。受精后46 min開始第2次分裂，在兩個(gè)細(xì)胞中部出現(xiàn)分裂溝并不斷加深，與第1次分裂溝垂直相交將2細(xì)胞經(jīng)裂成大小均等的4個(gè)細(xì)胞(圖版Ⅰ-2)。受精后1 h 4 min開始第3次分裂，同樣為經(jīng)裂，在4個(gè)細(xì)胞的中央出現(xiàn)縱裂溝并不斷加深，相交成直角，將4細(xì)胞分裂成8個(gè)形態(tài)、大小略有差異的細(xì)胞(圖版Ⅰ-3)。受精后1 h 12 min開始第4次分裂，將胚胎經(jīng)裂為16個(gè)形態(tài)不規(guī)則的細(xì)胞(圖版Ⅰ-4)。受精后1 h 32 min開始第5次分裂，動物極分裂形成32個(gè)排列不規(guī)則的細(xì)胞，且細(xì)胞大小、形態(tài)明顯呈不規(guī)則狀態(tài)(圖版Ⅰ-5)。受精后1 h 47 min開始第6次分裂，分裂成64個(gè)排列不規(guī)則的細(xì)胞，細(xì)胞體積變小(圖版Ⅰ-6)。64細(xì)胞期以后，細(xì)胞依次分裂下去，細(xì)胞數(shù)量不斷增加，體積不斷減小，在受精后2 h 29 min細(xì)胞排列緊密，界限尚清，形似桑椹，已進(jìn)入多細(xì)胞期(圖版Ⅰ-7)。

2.1.3 囊胚階段

卵裂繼續(xù)進(jìn)行，且細(xì)胞分裂的更加細(xì)密，界限變得模糊不清，至4 h 19 min，在動物極胚盤隆起，色澤加深，形似一高帽狀結(jié)構(gòu)凸起于卵黃上，進(jìn)入高囊胚期(圖版Ⅰ-8)。此后胚盤四周細(xì)胞分裂明顯加快，邊緣細(xì)胞團(tuán)向周圍擴(kuò)展，并逐漸向植物極下包，胚盤隆起逐漸降低，至5 h 11 min，呈扁平狀，進(jìn)入低囊胚期(圖版Ⅰ-9)。

2.1.4 原腸胚階段

受精后5 h 49 min，囊胚層邊緣細(xì)胞團(tuán)繼續(xù)向植物極擴(kuò)展，并通過下包、內(nèi)卷的方式使邊緣細(xì)胞層不斷增厚，胚盤四周光線透過減弱，在顯微鏡下可見較暗的環(huán)狀的胚環(huán)結(jié)構(gòu)，進(jìn)入原腸初期(圖版Ⅰ-10)。受精后6 h 44 min，胚層細(xì)胞繼續(xù)下包、內(nèi)卷，胚環(huán)擴(kuò)大下包卵黃1/3，形成胚盾雛形，胚胎發(fā)育至原腸中期(圖版Ⅰ-11)。受精后7 h 34 min，胚盤下包卵黃達(dá)1/2，胚盤背側(cè)正中位置隆起形成神經(jīng)板，胚盾不斷延伸，胚體雛形初現(xiàn)，此時(shí)進(jìn)入原腸后期(圖版Ⅰ-12)。

2.1.5 神經(jīng)胚階段

受精后7 h 55 min，胚盤下包卵黃囊1/2以上，卵黃囊大部分被胚層包裹，神經(jīng)板兩側(cè)向背部隆起，在胚盾中央出現(xiàn)神經(jīng)索，胚體形成(圖版Ⅰ-13)。受精后8 h 19 min，胚盤下包2/3，胚體包卵黃1/3，并出現(xiàn)肌節(jié)3～4對，植物極大部分卵黃被胚層包裹，在胚孔末端仍有少量卵黃裸露形成卵黃栓(圖版Ⅰ-14)。

2.1.6 器官形成階段

受精后9 h 3 min，胚體包卵黃1/2，腦部開始分化，胚孔尚未關(guān)閉，肌節(jié)5～6對，在前腦兩側(cè)出現(xiàn)1對眼泡，眼囊形成(圖版Ⅰ-15)。受精后10 h 16 min，胚體中胚層不斷分化，與眼囊相對應(yīng)的另一端胚體收縮，胚孔完全封閉，此時(shí)胚體有頭尾之分，柯氏泡出現(xiàn)，肌節(jié)9～10對(圖版Ⅰ-16)。受精后11 h 24 min，眼囊中晶體出現(xiàn)，柯氏泡尚未消失，肌節(jié)13～15對(圖版Ⅰ-17)。受精后14 h 34 min，胚體包裹卵黃2/3，柯氏泡消失，肌節(jié)16～17對，原胚孔閉合端分化加快，胚體后端不斷伸長，形成椎狀尾芽(圖版Ⅰ-18)。受精后15 h 52 min，圓椎狀尾芽不斷延長，可見尾鰭褶形成并包裹尾芽，肌節(jié)27對，油球部分出現(xiàn)放射狀色素，胚體后部出現(xiàn)點(diǎn)狀紅色色素，進(jìn)入尾鰭褶形成期，而此時(shí)胚體頭部的結(jié)構(gòu)進(jìn)一步復(fù)雜化，腦室隆起，耳囊形成(圖版Ⅰ-19)。受精后16 h 25 min，心臟開始搏動，心率在90次·min-1左右，心臟位于胚體頭部后方，貼卵黃囊側(cè)，心臟已有心室、心房之分，跳動相對微弱(圖版Ⅰ-20)。受精后17 h 14 min，尾部從卵黃囊上分離出來，并延伸占胚體的1/3，肌節(jié)30對(圖版Ⅰ-21)。受精后18 h 52 min，心臟有節(jié)律的持續(xù)跳動，尾鰭分化明顯，伸長可接近頭部，尾部隨胚體作間斷性顫動，進(jìn)入肌肉效應(yīng)期(圖版Ⅰ-22)。

2.1.7 出膜階段

受精后20 h 20 min，卵膜變得松弛并出現(xiàn)褶皺，胚體頭部在膜內(nèi)擺動使卵膜不斷隆起，致使靠近頭部的卵膜最先破裂，此時(shí)心率110次·min-1左右，膜內(nèi)胚體的顫動不斷加強(qiáng)，尾部擺動更加劇烈，最后仔魚破膜而出，完成整個(gè)胚胎發(fā)育過程(圖版Ⅰ-23)。

2.2 仔魚發(fā)育階段

2.2.1 早期仔魚(0～8日齡)

風(fēng)險(xiǎn)是不確定性對目標(biāo)的影響，也可理解為損失的不確定性。只要某件事是否發(fā)生、是否致?lián)p以及致?lián)p程度存在多種可能性，這件事就存在風(fēng)險(xiǎn)。從概率學(xué)的角度來解釋，某件事?lián)p失必然發(fā)生的概率為1，必然不發(fā)生的概率0，如果損失發(fā)生的概率區(qū)間為(0,1)，則認(rèn)定該事件存在風(fēng)險(xiǎn)。

從初孵仔魚至卵黃囊和油球完全吸收，轉(zhuǎn)為外源性營養(yǎng)階段。

0日齡(圖版Ⅱ-1)，即初孵仔魚，全長(2.536±0.059) mm，卵黃囊長徑(1.253±0.064) mm，油球徑(0.412±0.072) mm。此時(shí)仔魚頭部彎曲緊貼卵黃囊，身體纖細(xì)呈透明狀態(tài)，沿脊椎有幾處放射狀黑色素分布；油球位于卵黃囊后側(cè)靠近消化道；眼球較突出，后腦發(fā)達(dá)；腸道直細(xì)無彎曲，口與肛門皆呈封閉狀；尾部細(xì)直為主要運(yùn)動器官，此時(shí)仔魚運(yùn)動能力差，靠卵黃懸浮于水體中部，偶爾尾部擺動加劇，在水體中做間歇性竄動。

1日齡(圖版Ⅱ-2)，全長(3.453±0.056) mm，卵黃囊長徑(1.191±0.040) mm，油球徑(0.489±0.136) mm。相比初孵仔魚卵黃略微縮小，油球仍位于卵黃囊后部；耳石明顯，眼囊突出(圖版Ⅱ-a)，無色素沉著，后緣有塊狀紅色色素；第16肌節(jié)處也有紅色色素；鰭褶膜略微增寬，有顆粒狀斑點(diǎn)；腸道開始增粗，無彎曲(圖版Ⅱ-A)。

2日齡(圖版Ⅱ-3)，全長(4.020±0.141) mm，卵黃囊長徑(1.170±0.116) mm，油球徑(0.483±0.037) mm，相比于1日齡仔魚卵黃囊明顯縮小，眼球變大，眼緣及肌節(jié)處色素?cái)U(kuò)散；聽囊及耳石更加明顯(圖版Ⅱ-B)；鰾原基出現(xiàn)，不明顯，未充氣；胸鰭出現(xiàn)，呈透明扇狀；腸道褶皺出現(xiàn)；血液循環(huán)明顯，在顯微鏡下可見紅細(xì)胞穿梭于血管；泄殖腔明顯。

3日齡(圖版Ⅱ-4)，全長(4.031±0.078) mm，卵黃囊長徑(0.756±0.031) mm，油球徑(0.445±0.057) mm，卵黃囊消耗所剩無幾，油球凸顯；眼囊出現(xiàn)色素沉著(圖版Ⅱ-b)，顏色加深；腦部較發(fā)達(dá)；口膜開裂，但無張合現(xiàn)象；鰭褶逐漸向后退縮，腸道褶皺增多。

4日齡(圖版Ⅱ-5)，全長(4.087±0.166) mm，卵黃囊長徑(0.744±0.099) mm，油球徑(0.440±0.025) mm，卵黃囊與油球緊貼；口裂加深、擴(kuò)大，出現(xiàn)張合現(xiàn)象，牙齒已見雛形，包裹于膜內(nèi)；整個(gè)眼球呈黑色，晶狀體并不清晰(圖版Ⅱ-c)；仔魚已能正常平游，作間歇性竄動；頭部與尾部紅色素明顯；鰾已充氣；脊椎骨彎曲；腸道出現(xiàn)彎曲，末端膨大。

5日齡(圖版Ⅱ-6)，全長(4.121±0.157) mm，油球徑(0.429±0.069) mm，卵黃囊吸收接近完全(圖版Ⅱ-C)；眼球和晶體呈黑色(圖版Ⅱ-d)；胸鰭發(fā)達(dá)；腸道形成一個(gè)“S”型彎曲(圖版Ⅱ-D)，腸道蠕動明顯；肛門與外界相通；此時(shí)仔魚開始主動攝食輪蟲，進(jìn)入混合型營養(yǎng)階段。

6日齡：全長(4.267±0.069) mm，腹部及油球位置出現(xiàn)放射狀黑色素；頭部出現(xiàn)隆起；牙齒基本發(fā)育完全(圖版Ⅱ-E)，攝食行為明顯加強(qiáng)；鰓蓋形成并可見清晰鰓耙。

8日齡：全長(4.298±0.218) mm，眼球徑(0.267±0.029) mm，油球耗盡；消化道可見褐色糞便(圖版Ⅱ-F)；尾部點(diǎn)狀色素增多。

2.2.2 晚期仔魚(9～25日齡)

從完全依賴外源性營養(yǎng)至各鰭鰭條已成定數(shù)、鱗片開始出現(xiàn)為止。

9日齡：全長(4.312±0.524) mm，眼球(圖版Ⅱ-e)長徑約0.333 mm，短經(jīng)約0.258 mm，此時(shí)油球消失(圖版Ⅱ-G)，混合型營養(yǎng)結(jié)束，；仔魚進(jìn)入完全依賴外源性營養(yǎng)階段，可見泄殖口排出褐色糞便；頭部硬棘明顯；鰓蓋上有硬棘，每個(gè)鰓蓋2個(gè)；腹部有放射狀色素向上延伸；尾部出現(xiàn)斜狀鰭條分化。

10日齡：全長(4.348±0.334) mm，仔魚頭部進(jìn)一步復(fù)雜化；上下頜分化繼續(xù)加強(qiáng)，出現(xiàn)絨毛狀細(xì)齒；此時(shí)仔魚可攝食豐年蟲，腸胃可見餌料食物。

12日齡(圖版Ⅱ-7)：全長約(4.510±0.314) mm，體高增高明顯；可見細(xì)長的鰾管，與食道相通；此時(shí)腸仍為一道彎曲；背鰭原基出現(xiàn)；尾鰭出現(xiàn)輕微上翹。

16日齡：眼球(圖版Ⅱ-f)長徑約0.538 mm，短經(jīng)約0.521 mm；攝食能力明顯加強(qiáng)，胃內(nèi)發(fā)現(xiàn)橈足類餌料，腸蠕動增強(qiáng)；胸鰭鰭條5～6條；背鰭發(fā)育尚不完善，鰭條約23條；臀鰭棘條2根，鰭條約11條；尾鰭發(fā)育完善，鰭條19～20條；仔魚游動能力加強(qiáng)，控制運(yùn)動方向更加靈活。

18日齡：口吻咬合能力突出，攝食橈足類為主；背鰭發(fā)育較完善，鰭棘8～9根，鰭條約25條；胸鰭已相當(dāng)發(fā)達(dá)，仔魚在水體中平衡能力增強(qiáng)；腹鰭已出現(xiàn)，發(fā)育尚不完善，鰭條2～3條。

20日齡：此時(shí)仍能清晰看到心臟搏動，仔魚多集群分布于水體中上層；腹鰭發(fā)育較完善；鰓蓋色彩絢麗；肛門后至尾鰭基部有點(diǎn)狀黑色素分布；鰓蓋后側(cè)及背部也出現(xiàn)點(diǎn)狀黑色素。

25日齡(圖版Ⅱ-8)：此時(shí)仔魚頭大而鈍短，額部隆起，已具枕骨棘；尾柄細(xì)且長，已具棘頭梅童魚典型特征，可明顯區(qū)分于同時(shí)期大黃魚(Pseudosciaenacrocea)。眼球與成魚無異，無眼瞼(圖版Ⅱ-g)；此時(shí)仔魚多分布于水層中下部，魚鰾作用明顯；且多集群于池角，善繞池壁游動，對光線敏感，趨光性強(qiáng)；可見脊椎下側(cè)動脈血液的流動，眼部上緣硬棘4根，沿上頜分布有大片色素區(qū)；下緣有不明顯硬棘8根；鰓蓋呈藍(lán)色，鰓蓋膜不與峽部相連；頭骨較松軟，黏液腔發(fā)達(dá)；胸腹部呈藍(lán)色不透明，背部點(diǎn)狀黑色素增多，腹部出現(xiàn)放射狀色素；背鰭、胸鰭、腹鰭、尾鰭、臀鰭都已出現(xiàn)骨質(zhì)鰭條，且發(fā)育完善；腹部可見鱗片出現(xiàn)。至此，標(biāo)志著棘頭梅童魚仔魚發(fā)育階段的結(jié)束，稚魚發(fā)育階段的開始。

3 討論

3.1 幾種石首魚類胚胎發(fā)育特征比較

同其它幾種常見的石首魚科魚類一樣，棘頭梅童魚的魚卵為圓球形的浮性卵，無色透明狀，中間有油球一個(gè)。由表2可知，幾種石首魚科魚類的魚卵在卵徑、油球徑和初孵仔魚全長存在種間差異。這種石首魚魚科類中卵徑和油球徑的種間特異性，被認(rèn)為可以作為區(qū)分黃魚屬和其它石首魚科魚類的判斷依據(jù)[20]。魚卵的大小對于魚類早期發(fā)育和存活具有重要的意義，對不同的魚類來說，卵徑較大的魚卵一方面發(fā)育速率可能越慢[21]，另一方面大的卵黃和油球會延長仔魚階段內(nèi)源性營養(yǎng)向外源性營養(yǎng)轉(zhuǎn)變的時(shí)間，這對仔魚建立初次攝食、提高存活率具有重要意義[8, 22]。卵的大小和仔魚的大小呈正相關(guān)，個(gè)體較大的仔魚生長快，攝食和避敵能力強(qiáng)，存活率相對較高[8]。從表2中可以看出，黃魚屬魚類的卵徑、油球徑和初孵仔魚要大于其它幾種石首魚科魚類。有學(xué)者認(rèn)為，初孵仔魚愈大，其口裂也相對較大，優(yōu)勢就是開口餌料相對容易獲取，這也是大黃魚的人工育苗比其它石首魚科幾種經(jīng)濟(jì)魚類更易成功的因素之一[20]。

適溫范圍內(nèi)，棘頭梅童魚的孵化時(shí)間與水溫之間呈負(fù)相關(guān)，即水溫愈高，孵化時(shí)間愈短。本研究中，當(dāng)孵化水溫在22.8 ～ 23.8℃時(shí)，孵化時(shí)間是22 h 30 min；水溫在24.5 ～ 25.0℃時(shí)，時(shí)間是21 h 58 min；水溫在25.4 ～ 25.5℃時(shí)，時(shí)間是20 h 20 min；水溫在25.8 ～ 26.5℃時(shí)，時(shí)間是17 h 39 min。但是高于或低于適當(dāng)水溫時(shí)，出現(xiàn)死卵數(shù)或孵出仔魚畸形率均有所升高。通過對石首魚科幾種魚類孵化溫度和孵化時(shí)間的比較(表3)發(fā)現(xiàn)，隨著孵化溫度的升高，胚胎發(fā)育的速率加快，發(fā)育時(shí)間相應(yīng)縮短，然而鹽度的作用并不明顯[20]。

3.2 幾種石首魚科魚類仔魚發(fā)育特征比較

魚類早期發(fā)育可分為胚胎期、仔魚期(早期仔魚或卵黃囊仔魚和晚期仔魚)、稚魚期和幼魚期；其主要依據(jù)是器官結(jié)構(gòu)的發(fā)育程度、營養(yǎng)和攝食特征的變化[7]。在早期仔魚時(shí)期，營養(yǎng)供應(yīng)方式分為內(nèi)源性和混合性，在晚期仔魚時(shí)期營養(yǎng)方式則為外源性的。當(dāng)仔魚尚未開口攝食，尚無攝食能力，營養(yǎng)依賴卵黃囊和油球的供應(yīng)，仔魚絕大部分體積被卵黃囊占據(jù)，移動避敵能力弱。當(dāng)仔魚建立初次攝食以后，一方面仔魚開始主動攝食，另一方面內(nèi)源性的營養(yǎng)尚未耗盡，依然承擔(dān)一部分營養(yǎng)的消耗。這一時(shí)期為混合性的營養(yǎng)方式，也說明與仔魚攝食、消化等相關(guān)的器官進(jìn)一步發(fā)育完善。當(dāng)內(nèi)源性的營養(yǎng)全部耗盡，則營養(yǎng)方式完全轉(zhuǎn)變?yōu)橥庠葱誀I養(yǎng)供給，外源性營養(yǎng)方式的建立標(biāo)志著這一階段仔魚的餌料搜尋、捕獲及消化吸收等器官功能的發(fā)育完善，同時(shí)也表明與運(yùn)動相關(guān)的器官進(jìn)一步完善[28]。

表4為幾種石首魚科魚類仔魚發(fā)育特征的比較，初次攝食的建立、卵黃囊的耗盡、油球的耗盡以及鰭條的完善，是石首魚類早期發(fā)育中比較關(guān)鍵的特征變化。如上所述，這些特征的改變不僅是劃分各時(shí)期的重要依據(jù)，同時(shí)也意味著與之對應(yīng)的視覺、攝食、消化和運(yùn)動等器官的形成。

表2 7種石首魚科魚類的受精卵和初孵仔魚全長比較Tab.2 Comparison of the zygote and whole length of newly hatched larvae of seven Sciaenidae fishes

表3 7種石首魚科魚類孵化水溫、鹽度與時(shí)間的關(guān)系Tab.3 Relationship between incubation temperature, salinity and time of seven Sciaenidae fishes

表4 6種石首魚科魚類仔魚階段主要特征的比較Tab.4 Comparison of main characteristics of six Sciaenidae fishes at larvae stage

3.3 仔稚魚發(fā)育時(shí)期的劃分依據(jù)

有關(guān)海水魚類仔稚魚發(fā)育時(shí)期劃分的問題，學(xué)者們的觀點(diǎn)不盡相同。目前對仔稚魚劃分方法使用較為廣泛的主要有3種[29]，第一種是根據(jù)卵黃囊、油球變化、體表形態(tài)和營養(yǎng)方式的改變，將棘頭梅童魚胚后發(fā)育劃分為早期仔魚、晚期仔魚和稚魚期。第二種是以主動開口攝食為依據(jù)來界定早期仔魚與晚期仔魚，早期仔魚即卵黃囊仔魚(yolk-sac larvae)是指從出膜至開口攝食前，晚期仔魚指從初次開口攝食到器官發(fā)育基本完全，包括混合營養(yǎng)期和外源營養(yǎng)期；支持該觀點(diǎn)的學(xué)者認(rèn)為主動開口攝食是仔魚發(fā)育階段一個(gè)重要的標(biāo)志，揭示仔魚消化器官發(fā)育基本完全、主動避險(xiǎn)能力加強(qiáng)等，是影響仔魚存活的關(guān)鍵因素之一[29]。第三種是根據(jù)尾椎的彎曲情況，將胚后發(fā)育劃分為前彎曲期、彎曲期、后彎曲期、稚魚等不同階段[21]，支持該觀點(diǎn)的學(xué)者認(rèn)為在仔魚的發(fā)育過程中，諸如鰭條形成、外部形態(tài)的塑造以及攝食和避險(xiǎn)能力的加強(qiáng)等特征均與脊索彎曲相關(guān)[30]。此外，通過鑒定石首魚科魚類頭部枕骨棘也是劃分仔稚魚的重要方法之一[9, 31]。棘頭梅童魚的枕骨棘從稚魚階段保留到幼魚時(shí)期；大黃魚和小黃魚(Pseudosciaenapolyactis)則在成魚時(shí)期消失；鮸魚(Miichthysmiiuy)在整個(gè)早期發(fā)育過程中并不出現(xiàn)枕骨棘。在硬骨魚類胚后發(fā)育研究中第一種方法使用較為廣泛，本研究也采用了第一種劃分依據(jù)，同時(shí)結(jié)合鰭條形成和鱗片發(fā)育等形態(tài)學(xué)特征，將棘頭梅童魚胚后發(fā)育過程劃分為早期仔魚、晚期仔魚以及稚魚期。

本研究中劃分早期仔魚和晚期仔魚的依據(jù)為內(nèi)源性營養(yǎng)是否耗盡，在已報(bào)道的一些文獻(xiàn)中對內(nèi)源性營養(yǎng)器官的界定僅僅局限在卵黃囊。但在生產(chǎn)實(shí)踐中發(fā)現(xiàn)，當(dāng)棘頭梅童魚至孵化后4 d時(shí)，卵黃囊已消耗殆盡；然而，油球仍然為正常的生長發(fā)育供給所需營養(yǎng)，直至8 d時(shí)才消耗完全。所以，內(nèi)源性營養(yǎng)器官應(yīng)包括卵黃囊和油球，兩者共同提供早期仔魚生命活動所需的能量。雖然8日齡時(shí)內(nèi)源性營養(yǎng)才消耗完全，但在5日齡時(shí)已主動攝食輪蟲，此時(shí)仔魚處在一個(gè)過渡型的營養(yǎng)階段，即混合型營養(yǎng)期?；旌闲蜖I養(yǎng)階段在早期仔魚向晚期仔魚的轉(zhuǎn)變過程中有特殊的意義，它能夠降低仔魚因生理機(jī)能或器官發(fā)育不協(xié)調(diào)所造成的較高死亡率。對棘頭梅童魚晚期仔魚與稚魚的劃分，采取了與大多數(shù)學(xué)者基本一致的觀點(diǎn)，即各鰭條形成和運(yùn)動器官發(fā)育完備，但稍有不同的是此時(shí)棘頭梅童魚稚魚腹部已出現(xiàn)鱗片。棘頭梅童魚仔魚初次攝食現(xiàn)象出現(xiàn)在5日齡，仔魚初次攝食所要求的餌料密度、大小和質(zhì)量等條件亦是影響仔魚存活的關(guān)鍵之一，所以仔魚餌料的科學(xué)配合以及微囊飼料研究得到極大關(guān)注。隨著日齡的不斷增加，尤其是消化器官的發(fā)育完善，對營養(yǎng)的需求不斷增大，在早期培育過程中適當(dāng)增加餌料的投喂量、投喂次數(shù)以及適時(shí)分池處理對提高成活率尤為重要。