熒光定量PCR檢測(cè)HBV-DNA與化學(xué)發(fā)光酶免疫法檢測(cè)乙肝五項(xiàng)相關(guān)性

乙肝為乙型肝炎病毒感染引起的慢性傳染性肝臟疾病，在我國(guó)有較高發(fā)病率，為影響我國(guó)人們健康主要傳染性疾病之一。研究指出，臨床中早期、全程、規(guī)律抗病毒治療，對(duì)延緩乙肝患者疾病發(fā)生、發(fā)展，改善患者預(yù)后非常關(guān)鍵[1]。臨床中診斷乙肝可從病原學(xué)及免疫學(xué)方面進(jìn)行檢測(cè)，包括檢測(cè)HBV-DNA病毒及病毒載量、檢測(cè)乙肝病毒所致抗原和抗體，不同檢測(cè)方法能反映患者不同感染情況和疾病狀態(tài)。熒光定量PCR法為檢測(cè)HBV-DNA主要方法，化學(xué)發(fā)光酶免疫法為檢測(cè)乙肝五項(xiàng)主要方法，兩種檢測(cè)方法具有經(jīng)濟(jì)、便捷、操作簡(jiǎn)便、靈敏度和特異性高等優(yōu)點(diǎn)[2]，為探究?jī)煞N檢測(cè)方法檢測(cè)HBV-DNA與乙肝五項(xiàng)的關(guān)聯(lián)性，研究如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2016年2月—2018年4月我院檢驗(yàn)科采用熒光定量PCR檢測(cè)HBV-DNA，陽(yáng)性血清標(biāo)本158份作為研究對(duì)象，標(biāo)本患者信息：男82例，女76例；年齡16～82歲，平均（48.2±6.2）歲；住院患者118份，門(mén)診患者40份。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）所有標(biāo)本經(jīng)熒光定量PCR檢測(cè)，其病毒載量≥5.0E+02 IU/ml，判定為HBVDNA陽(yáng)性；（2）標(biāo)本均有保存，能滿足再次采用化學(xué)發(fā)光酶免疫法檢測(cè)乙肝五項(xiàng)所需，且質(zhì)量合格；（3）標(biāo)本來(lái)源清晰；（4）向標(biāo)本患者講解本研究干預(yù)后，獲得患者同意采用化學(xué)發(fā)光酶免疫法檢測(cè)乙肝五項(xiàng)。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）標(biāo)本劑量不足或不合格；（2）標(biāo)本來(lái)源不能追蹤，未能獲得標(biāo)本提供患者同意者。

1.2 方法

熒光定量PCR檢測(cè)法：采用杭州安杰思醫(yī)學(xué)科技有限公司生產(chǎn)的AFD-4800型核酸擴(kuò)增實(shí)時(shí)熒光檢測(cè)系統(tǒng)，其配套試劑由中山大學(xué)達(dá)安基因有限公司提供，嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行檢測(cè)?；瘜W(xué)發(fā)光酶免疫法：采用強(qiáng)生公司生產(chǎn)VITROS 3600型號(hào)全自動(dòng)酶聯(lián)免疫分析儀及同公司配套試劑盒，嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行檢測(cè)。在檢測(cè)過(guò)程中，每檢測(cè)批次均設(shè)陰陽(yáng)性對(duì)照、臨界質(zhì)控品，檢測(cè)值均在控。

1.3 觀察指標(biāo)

（1）按照乙肝五項(xiàng)檢測(cè)后HBsAg、HBeAg、HBsAb、HBcAb、HBeAb陽(yáng)性將患者進(jìn)行分組，分析HBV-DNA檢測(cè)陽(yáng)性標(biāo)本乙肝五項(xiàng)檢測(cè)陽(yáng)性情況。（2）按照乙肝五項(xiàng)檢測(cè)陽(yáng)性情況將患者分為大三陽(yáng)組和小三陽(yáng)組、HBeAg陽(yáng)性組和HBeAb陽(yáng)性組，分別比較兩組患者中HBV-DNA病毒載量情況。根據(jù)HBV-DNA載量結(jié)果分為低載量（5.0E+02 IU/ml～1.0E+05 IU/ml）、中載量（1.0E+05 IU/ml～ 1.0E+07 IU/ml）、高載量（1.0E+07 IU/ml～ 1.0E+11 IU/ml）[3]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

用SPSS24.0統(tǒng)計(jì)軟件包對(duì)本研究收集和整理數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)量資料用（±s）表示；乙肝五項(xiàng)陽(yáng)性情況及病毒載量情況用Z檢驗(yàn)或χ2檢驗(yàn)。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 乙肝五項(xiàng)檢測(cè)陽(yáng)性組合情況

HBsAg、HBcAb、HBeAb（ 小 三 陽(yáng) ） 和 HBsAg、HBcAb、HBeAg（大三陽(yáng)）患者比例分別為43.04%、37.34%，顯著高于其它陽(yáng)性組患者（P＜0.05）。見(jiàn)表1。

表1 乙肝五項(xiàng)檢測(cè)陽(yáng)性組合情況

2.2 大三陽(yáng)組和小三陽(yáng)組HBV-DNA載量

大三陽(yáng)組和小三陽(yáng)組HBV-DNA載量比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表2。

表2 大三陽(yáng)組和小三陽(yáng)組HBV-DNA載量 [n（%）]

2.3 HBeAg陽(yáng)性組和HBeAb陽(yáng)性組HBV-DNA載量

HBeAg陽(yáng)性組和HBeAb陽(yáng)性組HBV-DNA載量比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表3。

表3 HBeAg陽(yáng)性組和HBeAb陽(yáng)性組HBV-DNA載量比較 [1（%）]

3 討論

熒光定量PCR和化學(xué)發(fā)光酶免疫法均為常用定量檢驗(yàn)方法，但兩種檢測(cè)方法從不同原理檢測(cè)標(biāo)本，結(jié)果不能進(jìn)行直接對(duì)比和比較。乙肝為我國(guó)常見(jiàn)慢性傳染性疾病之一，為引起肝硬化、肝癌主要病因，對(duì)患者健康、生活質(zhì)量造成嚴(yán)重影響。實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)為輔助診斷乙肝的主要方法，早檢查、早診斷并積極干預(yù)為延緩乙肝患者疾病發(fā)生、發(fā)展，改善患者預(yù)后的關(guān)鍵[4]。目前，臨床中定量檢測(cè)并診斷乙肝可通過(guò)分子技術(shù)和免疫技術(shù)進(jìn)行檢驗(yàn)，即檢驗(yàn)HBV-DNA載量和HBV病毒相關(guān)抗原和抗體水平[5-6]。臨床中通過(guò)判讀HBV病毒相關(guān)抗原、抗體陽(yáng)性情況能對(duì)機(jī)體感染HBV情況及對(duì)HBV免疫情況進(jìn)行判定，同時(shí)根據(jù)HBV-DNA載量情況能判定HBV感染情況和傳染情況[7-8]。

本研究分別采用熒光定量PCR檢測(cè)HBV-DNA，并將HBVDNA陽(yáng)性標(biāo)本再次采用化學(xué)發(fā)光酶免疫法檢測(cè)乙肝五項(xiàng)指標(biāo)，得出HBV-DNA陽(yáng)性標(biāo)本中檢測(cè)出HBsAg、HBcAb、HBeAb（小三陽(yáng)）和HBsAg、HBcAb、HBeAg（大三陽(yáng)）患者比例分別為43.04%、37.34%，顯著高于其它陽(yáng)性組患者（P＜0.05）。大三陽(yáng)和小三陽(yáng)均為臨床中反映乙肝感染的重要標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)HBV-DNA陽(yáng)性患者同時(shí)檢測(cè)乙肝五項(xiàng)指標(biāo)同樣有較高的陽(yáng)性率。同時(shí)本研究結(jié)果得出大三陽(yáng)組和小三陽(yáng)組、HBeAg陽(yáng)性組和HBeAb陽(yáng)性組HBV-DNA載量的差異比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。證實(shí)在不同乙肝感染和傳染情況中，患者HBV-DNA載量同樣存在差異。同樣有學(xué)者研究指出，乙肝患者HBV-DNA載量與乙肝患者肝炎活動(dòng)程度及傳染情況有相關(guān)性[9-11]。另有學(xué)者研究指出，乙肝大三陽(yáng)患者相對(duì)乙肝小三陽(yáng)患者HBV-DNA病毒載量顯著升高[12]。

綜上所述，熒光定量PCR檢測(cè)HBV-DNA和化學(xué)發(fā)光酶免疫法檢測(cè)乙肝五項(xiàng)在乙肝患者中有較高關(guān)聯(lián)性，臨床中分別采用兩種方法進(jìn)行檢測(cè)對(duì)輔助診斷和判定乙肝患者病情有重要臨床價(jià)值。