蕪湖水域麥穗魚感染華支睪吸蟲囊蚴的調(diào)查

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華支睪吸蟲[Clonorchissinensis(Cobbold，1875)Looss，1907]，又稱肝吸蟲(liverfluke)。華支睪吸蟲成蟲可在人體的肝膽管理系統(tǒng)內(nèi)寄生，引起華支睪吸蟲病(Clonorchiasis)，俗稱肝吸蟲病(liver fluke disease)[1-2]，是我國(guó)主要的食源性人獸共患寄生蟲病之一，且呈上升趨勢(shì)[3-5]，可引起膽結(jié)石、膽管炎、膽管癌等多種膽管并發(fā)癥，嚴(yán)重危害人類健康，降低生活質(zhì)量[6-8]。華支睪吸蟲第二中間宿主種類分布廣泛，我國(guó)已被證實(shí)的淡水魚宿主有15科59屬102種[9]。在我國(guó)華支睪吸蟲病流行區(qū)，流行病學(xué)上起傳播作用的主要是養(yǎng)殖的淡水鯉科魚類，常見(jiàn)的白鯇、黑鯇、鰱魚、鳙魚、鯪魚、鯉魚、鳊魚和鯽魚等經(jīng)濟(jì)魚類和常見(jiàn)的野生魚類，如麥穗魚[10-11]。以上多是居民經(jīng)常食用的魚類，因此，這些魚類在流行病學(xué)上有特別重要的意義。華支睪吸蟲所有第二宿主(淡水魚蝦)中囊蚴的感染率最高為麥穗魚[12-13]，且野生麥穗魚是蕪湖市民喜歡選購(gòu)的魚類。本文選擇麥穗魚以此探討了解淡水魚中囊蚴的感染情況。目前，尚未見(jiàn)蕪湖地區(qū)華支睪吸蟲病流行的報(bào)道，為此，本文旨在對(duì)蕪湖水域麥穗魚的感染情況進(jìn)行統(tǒng)計(jì)調(diào)查。

1 材料與方法

1.1樣品采集 根據(jù)淡水魚的生態(tài)習(xí)性，在蕪湖境內(nèi)選取牛屯河、扁擔(dān)河、漳河、奎湖和龍窩湖共5個(gè)水域請(qǐng)漁民進(jìn)行麥穗魚捕撈，從捕獲雜魚中選取麥穗魚，每個(gè)水域選取20條，放在水桶中帶回實(shí)驗(yàn)室，測(cè)量體長(zhǎng)和稱重后備用。麥穗魚見(jiàn)圖1(a)。

1.2囊蚴分離 魚肉直接壓片鏡檢法[14]：從每條魚的背部(前、中、后)、腹、尾5個(gè)部位各取綠豆大小的一塊肌肉置于處理后的載物片上，用另一塊處理后的載物片蓋上用力擠壓使其壓成透明均勻薄片，置光學(xué)顯微鏡下直接鏡檢囊蚴。胃蛋白酶消化法[15]：將處理后的魚肉剪碎置燒杯中，按1∶10的比例加入消化液(胃蛋白酶30 g，8 mL36%濃HCl，0.9%生理鹽水定容至1 000 mL)，搖勻，置搖床(37℃)中消化20 h。消化后的魚肉經(jīng)200目銅篩過(guò)濾, 濾渣用清水沖洗數(shù)次, 將用燒杯收集到的濾液靜置40 min，棄上清液，加滿生理鹽水后靜置30 min，反復(fù)沉淀4 次，將沉淀液分次吸入平皿中，在光學(xué)顯微鏡下鏡檢分離出的囊蚴并計(jì)數(shù)。

1.3家貓感染 家貓2只，雄，10個(gè)月齡，體重分別為2.3 kg(A)和2.9 kg(B)，實(shí)驗(yàn)室觀察家貓10日，糞便直接涂片法檢測(cè)家貓均為陰性，強(qiáng)制其進(jìn)食24 h,每只家貓經(jīng)口感染50個(gè)囊蚴，42 d后將貓?zhí)幩?，取出肝臟，用無(wú)菌生理鹽水冼滌數(shù)次，剖開膽管，擠壓肝臟，檢獲吸蟲成蟲。按文獻(xiàn)方法[16-19]將吸蟲制成玻片標(biāo)本，置顯微鏡下觀察肝吸蟲形態(tài)特征進(jìn)行蟲種鑒定。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 用SPSS 16.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，蕪湖地區(qū)部分水域(牛屯河、扁擔(dān)河、漳河、奎湖和龍窩湖)華支睪吸蟲囊蚴感染率和陽(yáng)性麥穗魚不同部位囊蚴的感染率比較用χ2檢驗(yàn),檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié) 果

2.1形態(tài) 華支睪吸蟲囊蚴成橢圓形，嚢壁分2層，見(jiàn)圖1(b)。成蟲似葵花子狀，大小為(15～25)mm ×(3～5)mm。口吸盤和腹吸盤清晰可見(jiàn)，口吸盤位于蟲體前端且略大于位于蟲體前1/5處的腹吸盤。分枝狀睪丸呈上下排列位于蟲體后1/3處，橢圓形受精嚢位于睪丸和卵巢之間見(jiàn)圖1(c)。

2.2家貓感染 共感染家貓2只，在肝臟中均發(fā)現(xiàn)蟲體，其中家貓 (A) 檢獲蟲體37條，家貓 (B) 檢獲蟲體39條，共計(jì)76條吸蟲經(jīng)鑒定均為華支睪吸蟲成蟲。

2.3囊蚴分離 共采集檢查麥穗魚100條，體長(zhǎng)：5.8 cm ± 0.5 cm，體重：4.5 g ± 0.5 g，囊蚴陽(yáng)性共34條，檢出率為34%，共檢出囊蚴4 085個(gè)，陽(yáng)性平均感染度為120.1個(gè)/條。5個(gè)水域麥穗魚囊蚴檢出情況見(jiàn)表1。

表1 不同水域麥穗魚中囊蚴的檢出情況Tab.1 Detection of metacercariae in Pseudorasbora parva in different waters

注：平均感染度=∑囊幼數(shù)/∑陽(yáng)性麥穗魚數(shù)×100%

2.4麥穗魚不同部位的囊蚴感染情況 陽(yáng)性麥穗魚前背肌肉、中背肌肉、后背肌肉、腹部肌肉、尾部肌肉5個(gè)部位寄生華支睪吸蟲囊蚴情況由高到低依次為：背部肌肉(均為100%)，腹部肌肉和尾部肌肉(見(jiàn)表2)。

表2 麥穗魚不同部位肌肉檢出華支睪吸蟲囊蚴的情況Tab.2 Detection of C. sinensis metacercariae in different parts of Pseudorasbora parva

3 討 論

我國(guó)華支睪吸蟲病主要流行在珠三角及東北三省，安徽省也是廣泛存在的[20-24]，但蕪湖有關(guān)該病的報(bào)道尚少。本次調(diào)查蕪湖5個(gè)水域中的麥穗魚均發(fā)現(xiàn)了華支睪吸蟲囊蚴。有的水域麥穗魚的感染率高達(dá)45%，感染度高達(dá)159個(gè)/條。揭示了蕪湖存在華支睪吸蟲病流行的可能，應(yīng)引起高度重視，以避免該病對(duì)市民健康的威脅。

郭家等[25]2004年在安徽淮南地區(qū)調(diào)查淡水魚的華支睪吸蟲囊蚴感染率為16.94%(183/1 080)，且淡水蝦也有其囊蚴寄生的可能，感染率為5.83%(21/360)，如：米蝦、沼蝦等。所以預(yù)防華支睪吸蟲病的有效途徑為：減少食用含有囊蚴的魚蝦，特別是生吃魚蝦；或?qū)Ⅳ~蝦煮熟煮透，殺死囊蚴后再食用[26-28]。因此了解淡水魚蝦中的華支睪吸蟲囊蚴感染情況，對(duì)于預(yù)防和控制華支睪吸蟲病的流行有非常重要的意義。

據(jù)調(diào)查顯示，蕪湖地區(qū)部分水域麥穗魚華支睪吸蟲囊蚴的感染率為：牛屯河35%(7/20)、扁擔(dān)河40%(8/20)、漳河25%(5/20)、奎湖45%(9/20)和龍窩湖25%(5/20)，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=2.853，P>0.05)，其平均感染率為34%?？赡芘c5個(gè)水域選擇較近有關(guān)。有報(bào)道麥穗魚中華支睪吸蟲囊蚴在安徽淮南地區(qū)的感染率為33.3%[29]，比較可知，平均感染率與其較一致，但低于流行區(qū)遼西地域麥穗魚的感染率82.8%[30]?？赡芘c調(diào)查季節(jié)、調(diào)查地區(qū)不同有關(guān)[31-32]。且陽(yáng)性麥穗魚不同部位感染率存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(χ2=64.229,P<0.01)，其背部肌肉均有囊蚴感染，腹部肌肉和尾部肌肉明顯降低，表明囊蚴對(duì)其有一定的選擇性。

華支睪吸蟲病重要的傳染源除該病患者外，貓、狗和豬等哺乳動(dòng)物也是其保蟲宿主[33-34]。因此防止生熟交叉污染，不用生魚喂貓狗等是一種重要防病措施。從流行病學(xué)的角度來(lái)看，調(diào)查華支睪吸蟲囊蚴宿主感染情況，對(duì)于防控該病在人畜間發(fā)生具有重要的參考意義。通過(guò)本次研究顯示，初步了解蕪湖部分水域野生麥穗魚華支睪吸蟲囊蚴感染情況，說(shuō)明該地區(qū)有可能是華支睪吸蟲病潛在的流行區(qū)，對(duì)于預(yù)防和控制該地區(qū)華支睪吸蟲病的流行具有非常重要的作用。建議相關(guān)部門采取積極有效的綜合措施，加強(qiáng)宣傳和防治工作，嚴(yán)防人畜感染，確保人民群眾身體健康。

致謝：本實(shí)驗(yàn)研究在皖南醫(yī)學(xué)院病原生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室完成，特此致謝。