食品中防腐劑的液相色譜分析

虞葉道 趙舒景

食品添加劑在飲料行業(yè)中具有重要作用。防腐劑是飲料中主要的添加劑，它們能夠抑制微生物的生長，延長飲料的保質(zhì)期。我國食品添加劑使用衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)中，對允許使用品種、使用范圍以及最大使用限量均有明確規(guī)定，但隨著飲料品種和添加劑種類的日益增多，存在食品添加劑濫用的趨勢，對人體健康造成一定的風(fēng)險。為保障食品安全，需要對飲料中這些食品添加劑的含量進(jìn)行檢測。近年來，有關(guān)食品添加劑的檢測方法研究很多，主要涉及有液相色譜法、氣相色譜法、液相色譜-質(zhì)譜法。本研究針對蘋果醋飲料中苯甲酸鈉、山梨酸鉀、水楊酸、鄰苯基苯酚、對氯間二苯酚等5種常見的防腐劑， 利用高效液相色譜法進(jìn)行檢測，方法操作簡單、快速，適用于食品防腐劑的檢測。

實(shí)驗(yàn)部分

實(shí)驗(yàn)儀器與試劑。高效液相色譜儀（1200LC安捷倫公司）；數(shù)控超聲波清洗機(jī)（TH- 600BQ濟(jì)寧天華電子儀器公司）。

苯甲酸鈉、山梨酸鉀、水楊酸、鄰苯基苯酚、對氯間二苯酚、乙酸銨試劑均為分析純，甲醇為色譜純。超市購買的蘋果醋。

溶液的配制。準(zhǔn)確稱取 0.77 g乙酸銨，加水溶解并定容至 500 mL容量瓶中，得到0.02 mol/L的乙酸銨溶液。

準(zhǔn)確稱取苯甲酸鈉，山梨酸鉀，水楊酸，鄰苯基苯酚，對苯基苯酚，對氯間二苯酚，聯(lián)苯各0.2 g，溶解后用甲醇定容至100 mL的容量瓶中，從中移取10 mL溶液，用甲醇定容至100 mL的容量瓶中得到各物質(zhì)濃度為200 mg/ L的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。

樣品處理。稱取蘋果醋5.0 g，置于50 mL離心管中，加入甲醇10 mL，超聲提取5 min，用稀氨水或鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH至7左右，用甲醇溶液定容至25 mL，再用0.45 μm濾膜過濾后進(jìn)行分析。

色譜條件。色譜柱：Eclipse XDB- C18（4.6 mm× 250 mm，5 μm）；柱溫：30℃；進(jìn)樣量：5 μL；波長：230 nm；A為甲醇，B為0.02 mol/L乙酸鈉溶液，pH為6.5，梯度洗脫條件見表1。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論

物質(zhì)的定性分析。通過液相色譜測得苯甲酸鈉，山梨酸鉀，水楊酸，鄰苯基苯酚，對苯基苯酚，對氯間二苯酚，聯(lián)苯標(biāo)準(zhǔn)溶液的出峰時間，然后根據(jù)各樣品的保留時間找出蘋果醋中相對應(yīng)峰的保留時間從而進(jìn)行定性分析。標(biāo)準(zhǔn)樣品各物質(zhì)的保留時間見表2。

將配制的標(biāo)準(zhǔn)系列混合樣注入液相色譜，得到圖1，按保留時間的順序，它們分別是苯甲酸鈉，山梨酸鉀，水楊酸，鄰苯基苯酚，對苯基苯酚，對氯間二苯酚，聯(lián)苯。

蘋果醋樣品的液相色譜圖見圖2。從保留時間（表3）對比分析，可以看出，蘋果醋中含有苯甲酸鈉，山梨酸鉀，水楊酸，鄰苯基苯酚，對氯間二苯酚。

定量分析。在用保留時間進(jìn)行定性分析后，在上述同樣操作條件和液相色譜條件下，用外標(biāo)法來對蘋果醋中的苯甲酸鈉，山梨酸鉀，水楊酸，鄰苯基苯酚，對氯間二苯酚的含量進(jìn)行測定。

配制5個不同質(zhì)量濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別為20，40，60，80和100μg/mL，在最佳色譜條件下進(jìn)行測定。結(jié)果表明，在 20～100μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，線性回歸方程和線性相關(guān)系數(shù)見表4。

因此，根據(jù)蘋果醋色譜圖中各峰的峰面積可以求出蘋果醋中各防腐劑的含量，見表5。

精密度和回收率的測定。在蘋果醋樣品中添加一定量的防腐劑標(biāo)準(zhǔn)溶液，樣品處理后，色譜進(jìn)樣分析，連續(xù)測定3次，測定結(jié)果見表6。結(jié)果表明該實(shí)驗(yàn)方法有較好的精密度和回收率。

本文利用高效液相色譜檢測的方法，對蘋果醋中苯甲酸鈉、山梨酸鉀、水楊酸、鄰苯基苯酚、對氯間二本酚進(jìn)行了分析測定，含量分別為 1.26 mg/kg，0.014 mg/kg，3.6 mg/kg，1.24 mg/kg，6.9 mg/kg，本實(shí)驗(yàn)方法檢測時間短，靈敏度高，檢測性能好，能夠滿足飲料中防腐劑的檢測要求。