血漿水通路蛋白5和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子在新生兒急性呼吸窘迫綜合征中的表達(dá)及意義

謝瑞玉　李維春　楊續(xù)

[摘要]目的 觀察血漿水通路蛋白5（AQP5）和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）在新生兒急性呼吸窘迫綜合征中（ARDS）的表達(dá)及變化。方法 選取2015年10月～2017年5月我院收治的37例新生兒ARDS患兒血漿標(biāo)本，同時(shí)，收集同期20例非呼吸系統(tǒng)疾病患兒標(biāo)本。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）測(cè)定AQP5與VEGF濃度并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果 ARDS組患兒的血清AQP5水平均顯著高于非呼吸系統(tǒng)疾病組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；ARDS組患兒入院72 h的AQP5水平顯著高于入院時(shí)、入院24 h，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；非呼吸系統(tǒng)疾病組患兒3個(gè)時(shí)間段的血清AQP5水平比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。ARDS組患兒的VEGF水平均顯著高于非呼吸系統(tǒng)疾病組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；ARDS組患兒入院24 h的VEGF水平顯著高于患兒入院時(shí)、入院72 h，72 h后趨于回落，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；非呼吸系統(tǒng)疾病組患兒入院時(shí)的血漿VEGF水平高于患兒入院24、72 h，且隨著出生時(shí)間延長(zhǎng)逐漸下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 AQP5和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子在新生兒急性呼吸窘迫綜合征時(shí)高表達(dá)，其可能參與了新生兒呼吸窘迫綜合征的發(fā)生、發(fā)展。

[關(guān)鍵詞]急性呼吸窘迫綜合征；新生兒；水通路蛋白5；血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子

[中圖分類號(hào)] R563.8 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-4721（2018）6（c）-0109-03

[Abstract]Objective To observe the expression and changes of plasma water pathway protein 5 （AQP5） and vascular endothelial growth factor （VEGF） in neonatal acute respiratory distress syndrome （ARDS）.Methods From October 2015 to May 2017，37 plasma samples of newborns with ARDS admitted to our hospital were selected and 20 samples of non-respiratory diseases were collected at the same time.AQP 5 and VEGF concentrations were determined by enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA） and statistically analyzed.Results Serum AQP 5 levels in ARDS group were significantly higher than those in non-respiratory diseases group，and the differences were statistically significant（P<0.05）.The level of AQP 5 in ARDS group at 72 h after adission was significantly higher than that in admission and 24 h after admission， and the difference was statistically significant（P<0.05）.There was no significant difference in serum AQP 5 levels among children with non-respiratory diseases for three time periods （P>0.05）.VEGF levels in ARDS group were significantly higher than those in non-respiratory diseases group， and the differences were statistically significant（P<0.05）.The VEGF level in ARDS group at 24 h after adission was significantly higher than that in admission and 72 h after admission，and it tended to decline after 72 h， the difference was statistically significant（P<0.05）.Plasma VEGF level of children with non-respiratory diseases was higher than that of children in 24，72 h after admission， and decreased gradually with the extension of birth time， with statistical significance （P<0.05）.Conclusion AQP5 and vascular endothelial growth factor are highly expressed in neonatal acute respiratory distress syndrome.They may be involved in the occurrence and development of neonatal respiratory distress syndrome.

[Key words]Acute respiratory distress syndrome；Neonatal；Water pathway protein 5；Vascular endothelial growth factor

新生兒急性呼吸窘迫綜合征（acute respiratory distress syndrome，ARDS）是由多種原因所引起的肺組織急性彌漫性炎癥綜合征，出生后數(shù)小時(shí)即出現(xiàn)進(jìn)行性呼吸困難、青紫和呼吸衰竭，是新生兒時(shí)期的常見危重癥，好發(fā)于早產(chǎn)兒、母親糖尿病、宮內(nèi)窘迫或窒息新生兒，也是新生兒尤其早產(chǎn)兒死亡的一個(gè)重要原因[1-3]。迄今為止，ARDS仍以臨床診斷為主，尚缺乏敏感特異的實(shí)驗(yàn)室診斷指標(biāo)，吳靈芝等[4]的研究發(fā)現(xiàn)，治療前患兒體內(nèi)外周血單個(gè)核細(xì)胞中CD24 mRNA 表達(dá)水平顯著高于對(duì)照組，經(jīng)過(guò)治療后表達(dá)下降，提示單個(gè)核細(xì)胞CD24可能參與疾病的發(fā)生。ARDS發(fā)生還與基因突變有關(guān)，洪達(dá)[5]等的研究發(fā)現(xiàn)，肺表面活性蛋白C基因發(fā)生變異可導(dǎo)致ARDS的發(fā)生，應(yīng)用表面活性物質(zhì)替代治療和正壓輔助通氣支持可明顯改善癥狀，這一基因改變均否認(rèn)有家簇遺傳史，呈散在發(fā)病[6]。另外，還有研究表明SP-B外顯子的多態(tài)性和TOLL樣受體表達(dá)水平與NRDS發(fā)生也可能存在相關(guān)性，但需要進(jìn)一步證實(shí)[7-8]。以上這些研究在臨床上有一定的參考意義，但都不能起到快速和早期診斷的作用，而與肺泡上皮細(xì)胞損傷的相關(guān)標(biāo)志物已經(jīng)引起人們的關(guān)注。本研究通過(guò)觀察不同時(shí)間段血漿水通路蛋白5（AQP5）和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子VEGF在新生兒急性呼吸窘迫綜合征中的表達(dá)水平，旨在探討其在新生兒急性呼吸窘迫綜合征中的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2015年10月～2017年5月我院收治的新生兒ARDS患兒37例，其中男22例，女15例；胎齡平均（36.52±6.26）周；平均體重（3.17±1.36）kg；ARDS的診斷標(biāo)準(zhǔn)參照實(shí)用新生兒學(xué)第四版[9]，入院時(shí)根據(jù)臨床及X線胸片診斷即進(jìn)行機(jī)械通氣與肺表面活性物質(zhì)治療。同時(shí)，收集同期20例非呼吸系統(tǒng)疾?。ò殠Ц腥尽ⅫS疸、濕疹）患兒標(biāo)本，其中男13例，女7例；胎齡平均（38.85±3.21）周；體重平均（3.42±1.56）kg，兩組患者的一般資料差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，并與患兒家長(zhǎng)簽署知情同意書。

1.2 研究方法

分別采集ARDS組、非呼吸系統(tǒng)疾病患兒入院時(shí)，24、72 h的血液標(biāo)本，3000 r/min離心15 min，血漿置-80°保存?zhèn)溆?。采用酶?lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）測(cè)定ARDS組、非呼吸系統(tǒng)疾病組的AQP5與VEGF水平，試劑盒由上海語(yǔ)純生物科技有限公司提供，嚴(yán)格按照使用說(shuō)明書進(jìn)行操作。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS 16.0分析數(shù)據(jù)，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以率表示，采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1 兩組患兒血清AQP5水平的比較

ARDS組患兒的血清AQP5水平均顯著高于非呼吸系統(tǒng)疾病組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；ARDS組患兒入院72 h的AQP5水平顯著高于入院時(shí)、入院24 h，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；非呼吸系統(tǒng)疾病組患兒3個(gè)時(shí)間段的血清AQP5水平比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）（表1）。

2.2 兩組患兒血清VEGF水平的比較

ARDS組患兒的VEGF水平均顯著高于非呼吸系統(tǒng)疾病組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；ARDS組患兒入院24 h的VEGF水平顯著高于患兒入院時(shí)、入院72 h的水平，72 h后趨于回落，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；非呼吸系統(tǒng)疾病組患兒的入院時(shí)血漿VEGF水平高于患兒入院24、72 h，且隨著出生時(shí)間延長(zhǎng)逐漸下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）（表2）。

3討論

新生兒呼吸窘迫綜合征是由肺表面活性物質(zhì)缺乏或破壞過(guò)多，肺泡表面張力增高，肺泡萎陷，進(jìn)行性肺不張，肺換氣不足，病情持續(xù)發(fā)展，可引起高碳酸血癥和低氧血癥，進(jìn)而酸中毒，并引起炎癥因子的釋放，最終導(dǎo)致肺泡上皮細(xì)胞和毛細(xì)血管內(nèi)皮損傷。肺泡上皮細(xì)胞由覆蓋其表面90%～95%的Ⅰ型肺泡上皮細(xì)胞和Ⅱ型上皮細(xì)胞構(gòu)成，AQP5定位于肺泡Ⅰ型上皮細(xì)胞，對(duì)生理和病理?xiàng)l件下的肺泡內(nèi)液體的清除起著重要作用。多種肺損傷的動(dòng)物模型研究表明[10-12]，內(nèi)毒素、脂多糖的誘導(dǎo)及腫瘤壞死因子的刺激，均可導(dǎo)致AQP5表達(dá)下調(diào)，進(jìn)而導(dǎo)致肺水腫，引起肺損傷，并將定位于肺泡Ⅰ型上皮細(xì)胞頂膜區(qū)的小分子AQP5釋放出來(lái)，通過(guò)肺-血屏障釋放到血液中，致血漿中的AQP5水平增高。胡金繪等[13]通過(guò)觀察不同通氣方式對(duì)新生兒血清AQP5水平的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)AQP5水平與ARDS的肺損傷程度及機(jī)械通氣時(shí)間有關(guān)。本研究顯示，ARDS組患兒的AQP5水平在入院時(shí)，入院24、72 h時(shí)顯著高于非呼吸系統(tǒng)疾病組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），提示AQP5參與新生兒ARDS的表達(dá)；ARDS組患兒RAGE水平在入院時(shí)，入院24、72 h時(shí)的血漿AQP5水平呈遞增趨勢(shì)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），入院72 h時(shí)水平最高，提示AQP5可能參與新生兒ARDS的發(fā)生、發(fā)展，觀察AQP5的變化有助于ARDS的療效觀察和預(yù)后判斷。

VEGF是特異作用于血管內(nèi)皮的生長(zhǎng)因子，又稱血管通透因子，肺組織中許多細(xì)胞如肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞、肺泡巨噬細(xì)胞等均可釋放VEGF，在維持肺的正常生理功能及抗損傷修復(fù)中具有重要意義。正常生理?xiàng)l件下，組織細(xì)胞中的VEGF并不直接釋放進(jìn)入血液中，在ARDS早期由于各種因素刺激，激活巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞，引起肺內(nèi)及全身的炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致肺泡-毛細(xì)血管廣泛損傷，肺泡氣-血屏障破壞，血管通透性增加，釋放大量VEGF，并由肺組織向血液釋放增加，引起血漿中的VEGF水平增高[14]。本研究顯示，ARDS組患兒的VEGF水平在入院時(shí)，入院24、72 h時(shí)顯著高于非呼吸系統(tǒng)疾病組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），提示VEGF參與新生兒ARDS表達(dá)；ARDS組患兒入院時(shí)，入院24、72 h VEGF水平的比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），以24 h時(shí)最高，72 h開始回落，與文獻(xiàn)報(bào)道一致[15]，可能與ARDS患兒經(jīng)治療后，炎癥反應(yīng)得到控制，修復(fù)的肺泡上皮細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞釋放的炎癥介質(zhì)減少有關(guān)[16]，提示血漿中VEGF水平可以反映ARDS的發(fā)生、發(fā)展，觀察VEGF的變化有助于臨床醫(yī)生對(duì)ARDS的治療效果和預(yù)后判斷[17]。

綜上所述，AQP5和VEGF在新生兒急性呼吸窘迫綜合征中的表達(dá)增加，其可能參與了新生兒呼吸窘迫綜合征的發(fā)生、發(fā)展。監(jiān)測(cè)血漿AQP5、VEGF水平在疾病的早期診斷、療效評(píng)價(jià)及預(yù)后判斷中具有一定的臨床價(jià)值。

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（收稿日期：2017-12-25 本文編輯：白 婧）