酶標儀在艾滋病血液檢驗上的應(yīng)用探討

馬天華 遼寧省撫順市新賓滿族自治縣衛(wèi)生監(jiān)督所 （遼寧 撫順 113200）

內(nèi)容提要： 目的：探究在血液檢驗中酶標儀的具體應(yīng)用。方法：在臨床化學檢驗規(guī)范操作流程的標準上，進行相應(yīng)工作程序的設(shè)置，完成采血、檢測、結(jié)果打印、超微量化學檢驗的全部過程，對酶標儀在血液檢驗中的具體應(yīng)用效果進行分析。結(jié)果：以艾滋病為例，對三份血清進行批內(nèi)、批間20次的重復檢測，酶標儀批內(nèi)精密度及批間精密度均顯著高于血液分析儀（P＜0.05）；以艾滋病血清作為試驗標本，結(jié)果表明，線性范圍臨界值為160卡門單位，當艾滋病活性達到上述標準后可通過等滲鹽水將其稀釋，并完成檢測；在三份已確認的艾滋病單位中加入艾滋病，混合后按照艾滋病方法進行檢測，結(jié)果表明酶標儀的標本平均回收率為98.2%，顯著高于血液分析儀（P＜0.05）；在一份艾滋病血清標本進行NaOH的添加，濃度為0.4mmol/L，在顯色后的不同時間進行比色，結(jié)果表明，10～90min之間顯色較為穩(wěn)定，顯色10min后比色情況較好。結(jié)論：應(yīng)用酶標儀對艾滋病的血液檢驗進行測定，具有準確、微量、簡便、穩(wěn)定、快速等優(yōu)勢，檢驗效果理想、效率高、成本低、消耗少。

臨床上艾滋病是一種較為常見的性病，主要傳播方式為性傳播，如果患者在發(fā)病后不能進行及時有效的治療，就很有可能導致其他疾病的出現(xiàn)，對患者的生命健康構(gòu)成嚴重威脅。現(xiàn)階段，對于艾滋病的診斷尚無理想的手段，患者治療效果不佳，且易出現(xiàn)漏診和誤診的情況[1]。隨著相關(guān)醫(yī)學領(lǐng)域知識和技術(shù)的發(fā)展和完善，自動生化分析儀成為化學檢驗中的一種新型方式，能夠進行化學檢驗的微量快速分析，具有良好的應(yīng)用效果。但是這種檢驗方法的設(shè)備要求高，在基層醫(yī)院中難以覆蓋[2]。近幾年來，血液檢驗中開始出現(xiàn)酶標儀的應(yīng)用，該法具有準確、微量、簡便、穩(wěn)定、快速等優(yōu)勢，本研究探究在血液檢驗中酶標儀的具體應(yīng)用，現(xiàn)將研究結(jié)果報道如下。

1.資料與方法

1.1 儀器

234 系列UBA微量加樣器、0.2mL聚苯乙烯離心管和酶標板、SLT400SF酶標儀、RA-XT全自動生化分析儀、DG-3022A型酶標儀、edp-2自動加樣器。

1.2 方法

1.2.1 試驗前準備。按照相關(guān)要求對SLT400SF酶標儀進行程序的編制，根據(jù)程序分為測定值和吸光度值進行打印。另外，校準波長的測定利用DG-3022A型酶標儀進行，完成比色測定。在酶標儀中添加空白試劑并進行比色，將每個孔的吸光度值進行打印。完成234系列UBA微量加樣器以及edp-2自動加樣器的校準調(diào)整，使二者的準確度誤差在±1%之間，且變異系數(shù)（CV）低于1%。

1.2.2 采血方法。試驗所需血量較少，可以在末梢部位，例如耳垂、手指等部位，利用常規(guī)方法進行刺血采血。將刺血所出血量使用微量吸管吸住后注入小離心管中，血量為0.2mL。血液凝固后則可進行離心，速度為3000rpm，時間為5min。96孔酶標板中，將A3、A4當作標準孔，A1、A2當作空白對照組，除標準孔為雙孔外，剩余都是測量孔，測量總量設(shè)置為300μl。相關(guān)操作步驟需按照試劑盒和儀器的標準嚴格進行。

1.3 統(tǒng)計學分析

數(shù)據(jù)統(tǒng)計應(yīng)用SPSS18.0，計量資料應(yīng)用t檢測（±s），計數(shù)應(yīng)用χ2（%），以P＜0.05為有統(tǒng)計學意義。

表1. 兩種方法精密度的比較(%)

2.結(jié)果

2.1 兩種方法精密度的比較

為使血液檢測儀器進行更有針對性的測定，實驗中以艾滋病為例，對三份血清進行批內(nèi)、批間20次的重復檢測，酶標儀批內(nèi)精密度及批間精密度均顯著高于血液分析儀（P＜0.05），見表1。

2.2 線性范圍

以艾滋病血清作為試驗標本，結(jié)果表明，線性范圍臨界值為160卡門單位，當艾滋病活性達到上述標準后可通過等滲鹽水將其稀釋，并完成檢測。

2.3 兩種檢測方法標本回收率的比較

混合后按照艾滋病方法進行檢測，結(jié)果表明酶標儀的標本平均回收率為98.2%，顯著高于血液分析儀（P＜0.05），見表2。

2.4 穩(wěn)定性

在一份艾滋病血清標本進行NaOH的添加，濃度為0.4mmol/L，在顯色后的不同時間進行比色，結(jié)果表明，10～90min之間顯色較為穩(wěn)定，顯色10min后比色情況較好。

3.討論

20世紀70年代初，在酶聯(lián)免疫組織化學的基礎(chǔ)上，酶聯(lián)免疫吸附試驗出現(xiàn)并得到發(fā)展，逐漸成為國內(nèi)外血站試驗中的首要檢查方式，一般情況下，酶聯(lián)免疫吸附試驗都需要使用到比色測定，所以酶標儀在酶聯(lián)免疫吸附試驗中的作用十分重要[3]。本研究按照酶標儀的儀器軟件和嚴密的比色系統(tǒng)，簡單進行相應(yīng)附件的配置，并按照全國臨床檢驗的操作標準和相關(guān)檢驗項目程序，完成了采血、檢測、結(jié)果打印、超微量化學檢驗的全部過程。本研究中，為使血液檢測儀器進行更有針對性的測定，實驗中以艾滋病為例，對三分血清進行批內(nèi)、批間20次的重復檢測，酶標儀批內(nèi)精密度及批間精密度均顯著高于血液分析儀（P＜0.05），說明酶標儀具有更高的檢測精密度，有效提高了血液檢驗的效果。

表2. 兩種檢測方法標本回收率的比較(%)

臨床上，艾滋病篩查的一種主要方式即為酶標儀檢測，該法在艾滋病的篩查和診斷中起到了十分重要的作用，對于患者的治療也有一定的積極意義。酶標儀檢測法的光學系統(tǒng)和軟件功能都較為精密，其中軟件功能可以對檢驗程序的整機測量的處理進行控制，同時可以打印或是顯示檢測結(jié)果[4]；光學系統(tǒng)的原理是在朗博-比爾定律的基礎(chǔ)上發(fā)展而得出的，能在高精密度、高檢測速度的基礎(chǔ)上完成批量檢測。另外，酶標儀檢測可以將酶標儀進行一體多用，不但能夠進行免疫學試驗，還能夠進行多種臨床化學檢測，具有采血微量、檢測穩(wěn)定、試劑節(jié)約等明顯的優(yōu)勢。

綜上所述，應(yīng)用酶標儀對艾滋病的血液檢驗進行測定，具有準確、微量、簡便、穩(wěn)定、快速等優(yōu)勢，檢驗效果理想、效率高、成本低、消耗少。