關(guān)于酶標(biāo)儀計(jì)量檢測(cè)的探討

潘琳

阿克蘇地區(qū)檢驗(yàn)檢測(cè)中心 新疆阿克蘇 843000

酶標(biāo)儀一般在食品工業(yè)、臨床檢驗(yàn)等方面被廣泛使用，其主要是對(duì)樣本進(jìn)行檢測(cè)，對(duì)樣本進(jìn)行定量或者定性的檢測(cè)，一般通過(guò)吸光度進(jìn)行確定。但在實(shí)際檢測(cè)的過(guò)程中，其會(huì)受到保溫、洗滌等多方面的因素影響，進(jìn)而使得測(cè)量結(jié)果發(fā)生變化。因此，如果想要提升測(cè)量結(jié)果的精準(zhǔn)性，就必須要對(duì)測(cè)量過(guò)程中的質(zhì)量嚴(yán)格的把控，對(duì)酶標(biāo)儀進(jìn)行定期的計(jì)量。但縱觀國(guó)際上還沒(méi)有對(duì)其性能檢測(cè)和評(píng)價(jià)的相關(guān)完善報(bào)道，與此同時(shí)，國(guó)家在計(jì)量檢測(cè)中相應(yīng)的規(guī)程沒(méi)有得到良好的應(yīng)用和實(shí)施，因此導(dǎo)致在諸多的臨床實(shí)驗(yàn)中，針對(duì)于酶標(biāo)儀沒(méi)有準(zhǔn)確且系統(tǒng)的計(jì)量檢測(cè)計(jì)劃。因此，通過(guò)筆者的實(shí)踐和探索，擬定了一套計(jì)量檢測(cè)的方式以供參考。

1 酶標(biāo)儀的結(jié)構(gòu)和工作原理

酶標(biāo)儀一般都是通過(guò)其產(chǎn)生的顯色反應(yīng)，并根據(jù)不同物質(zhì)對(duì)譜線的吸收原理，遵守朗伯比爾相關(guān)的定律，從而進(jìn)行相關(guān)分析的儀器，其主要通過(guò)比色法來(lái)進(jìn)行酶含量的確定。酶標(biāo)儀從某種方面來(lái)講就是一臺(tái)光電比色計(jì)，或者說(shuō)其為分光光度計(jì)，因?yàn)槠渲饕墓ぷ髟?、結(jié)構(gòu)都與光電比色計(jì)相同[1]。其主要由單色器、光源等系統(tǒng)組成。

2 酶標(biāo)儀計(jì)量檢測(cè)的必要性

在臨床工作中對(duì)血清或其他組織進(jìn)行測(cè)量，測(cè)量其中的酶的水平，對(duì)諸多疾病的診療都有著非常重要的作用。在測(cè)定酶的過(guò)程中，可以利用生物化學(xué)相關(guān)的方式對(duì)酶的活性進(jìn)行測(cè)量[2]。另外一種方式為將酶作為一種蛋白，繼而利用免疫方法來(lái)對(duì)其質(zhì)量進(jìn)行測(cè)定。相比來(lái)說(shuō)測(cè)量酶的活性是最廣泛應(yīng)用的方式，主要源于其迅速、靈敏等優(yōu)勢(shì)，因此被廣泛的使用，其主要是通過(guò)酶標(biāo)儀來(lái)進(jìn)行相關(guān)的測(cè)定工作。與此同時(shí)，近些年來(lái)酶標(biāo)儀相關(guān)的技術(shù)也有所提升，進(jìn)而也有效提升了酶免疫分析法的質(zhì)量，其精準(zhǔn)度、自動(dòng)化度明顯提高。最明顯的為近些年來(lái)進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)的酶標(biāo)儀的質(zhì)量有所提高，但通過(guò)相關(guān)探究發(fā)現(xiàn)，雖然酶標(biāo)儀的發(fā)展迅速，但是關(guān)于其計(jì)量測(cè)量相關(guān)的方法仍不多見(jiàn)。其中由于太過(guò)簡(jiǎn)單，或者太過(guò)具體，又或者過(guò)于籠統(tǒng)，從而導(dǎo)致沒(méi)有使用、通用的價(jià)值，也沒(méi)有良好的操作性。近些年來(lái)，酶標(biāo)儀已經(jīng)成為與臨床實(shí)驗(yàn)、食品工業(yè)相關(guān)的醫(yī)療機(jī)構(gòu)、食品廠家中的必備設(shè)備之一。但其在應(yīng)用中也是頻繁出現(xiàn)問(wèn)題，因此對(duì)酶標(biāo)儀進(jìn)行質(zhì)量方面、性能方面的研究已迫在眉睫[3]。但我國(guó)關(guān)于酶標(biāo)儀相關(guān)的計(jì)量檢測(cè)規(guī)程沒(méi)有在實(shí)際中進(jìn)行嚴(yán)格的落實(shí)，也沒(méi)有足夠的實(shí)用性，但在實(shí)際工作中又必須對(duì)其進(jìn)行質(zhì)量控制和計(jì)量檢測(cè)。因此針對(duì)于不同廠家的酶標(biāo)儀進(jìn)行論證并建立相對(duì)完善的計(jì)量、檢測(cè)方式十分有必要。

3 酶標(biāo)儀計(jì)量檢測(cè)的方式

3.1 檢測(cè)濾光片波長(zhǎng)的精準(zhǔn)度

濾光片的波長(zhǎng)準(zhǔn)確度是通過(guò)檢測(cè)值檢取標(biāo)定值所產(chǎn)生的數(shù)值，其應(yīng)控制偏差在510nm以內(nèi)。

3.2 檢測(cè)酶標(biāo)儀吸光的穩(wěn)定度

在酶標(biāo)儀的吸光度方面，其吸光度值會(huì)因?yàn)槠贫a(chǎn)生變化，其在十分鐘之內(nèi)產(chǎn)生的變化數(shù)值應(yīng)該控制在0.005A以內(nèi)，而對(duì)其電壓的變動(dòng)在百分之十的時(shí)候，酶標(biāo)儀相關(guān)的吸光度值應(yīng)該控制在0.003A以內(nèi)。

3.3 檢測(cè)酶標(biāo)儀在零點(diǎn)漂移值

在進(jìn)行該項(xiàng)檢測(cè)時(shí)，首先應(yīng)該準(zhǔn)備十個(gè)小孔杯，然后在小孔杯的通道中，在其相應(yīng)的位置中加入100ul的蒸餾水，同時(shí)將其調(diào)零，然后每過(guò)三十分鐘450nm時(shí)進(jìn)行一次測(cè)定，反復(fù)觀察到兩小時(shí)，所得出的測(cè)定值與原有的零點(diǎn)之間產(chǎn)生的差數(shù)值，則被視為零點(diǎn)漂移，其偏差應(yīng)該控制在0.003A以內(nèi)。

3.4 檢測(cè)酶標(biāo)儀吸光度的準(zhǔn)確值

首先要選取三塊標(biāo)準(zhǔn)干涉濾光片，這三塊濾光片要有不同的波長(zhǎng)，然后對(duì)隨意選擇的三個(gè)通道進(jìn)行相關(guān)的平行測(cè)定，該測(cè)定每天要進(jìn)行兩次，總共測(cè)定達(dá)到六天，分別進(jìn)行計(jì)算每批內(nèi)、每天的每批之間、隔日間產(chǎn)生的精密度以及總精密度相關(guān)的CV百分比，同時(shí)要對(duì)其偏差進(jìn)行控制，要控制在0.09A以內(nèi)。

3.5 檢測(cè)酶標(biāo)儀的線性

當(dāng)在450nm單波長(zhǎng)狀態(tài)中時(shí)，要使用蒸餾水來(lái)進(jìn)行調(diào)零的工作，然后再采用五塊標(biāo)準(zhǔn)干涉濾光片，同樣也要選取不同波長(zhǎng)的濾光片，然后隨意選擇對(duì)應(yīng)的五個(gè)通道進(jìn)行平行測(cè)定工作，同樣是總共測(cè)定六天，且每天要進(jìn)行兩次測(cè)定。然后進(jìn)行回歸方程的計(jì)算，在方程中利用r來(lái)表示相關(guān)的系數(shù)，用sy.x來(lái)表示其標(biāo)準(zhǔn)估計(jì)誤差。與此同時(shí)要控制器偏差在百分之五以內(nèi)。

4 結(jié)語(yǔ)

酶標(biāo)儀在我國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)、食品工業(yè)等方面有著越來(lái)越多的應(yīng)用，因此在實(shí)際對(duì)其應(yīng)用的過(guò)程中，需要定期的校準(zhǔn)，同時(shí)利用較為系統(tǒng)、完善的校準(zhǔn)方式進(jìn)行校準(zhǔn)工作，這是從事關(guān)于臨床實(shí)驗(yàn)相關(guān)工作的人員的首要任務(wù)，其可以提升相關(guān)檢測(cè)結(jié)果的精準(zhǔn)度和可比性。