• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    不同小麥品種葉銹菌的遺傳多樣性分析

    2018-09-28 05:49:20張夢(mèng)雅孟慶芳閆紅飛劉大群
    河南農(nóng)業(yè)科學(xué) 2018年9期
    關(guān)鍵詞:銹菌小種周口

    張夢(mèng)雅,孟慶芳,張 林,高 穎,閆紅飛*,劉大群,2*

    (1.河北農(nóng)業(yè)大學(xué) 植物保護(hù)學(xué)院/國家北方山區(qū)農(nóng)業(yè)工程技術(shù)研究中心/河北省農(nóng)作物病蟲害生物防治工程技術(shù)研究中心,河北 保定 071000; 2.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 研究生院, 北京 100081)

    由小麥葉銹菌(Pucciniatriticina)引起的小麥葉銹病是小麥生產(chǎn)上的重要病害之一,在世界各麥區(qū)均有發(fā)生且危害嚴(yán)重[1]。由于各麥區(qū)栽培品種、發(fā)病早晚不同,小麥葉銹病造成的產(chǎn)量損失在7%~30%,嚴(yán)重時(shí)達(dá)50%以上[2]。20世紀(jì)70年代我國曾多次流行小麥葉銹病,造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失[3]。近年來,隨著小麥葉銹菌群體組成、環(huán)境氣候和小麥品種的變化,該病害的發(fā)生日趨嚴(yán)重。2012年全國范圍小麥葉銹病發(fā)生嚴(yán)重,2013年山東、河南和新疆局部地區(qū)發(fā)生嚴(yán)重,2015年黃淮海地區(qū)發(fā)生大流行,尤其以河南、安徽等省發(fā)生嚴(yán)重。小麥葉銹菌新生理小種的出現(xiàn)、群體組成和結(jié)構(gòu)的變化對(duì)小麥葉銹病的發(fā)生流行起重要作用[4],研究小麥葉銹菌小種和寄主品種的關(guān)聯(lián)性對(duì)掌握小麥葉銹菌的群體遺傳結(jié)構(gòu)和流行動(dòng)態(tài)、病害防控及小麥抗病育種具有重要意義。

    目前,小麥葉銹菌遺傳多樣性研究主要基于毒性和分子生物學(xué)2個(gè)方面。毒性分析法需要進(jìn)行小種的分離純化、擴(kuò)繁和接菌鑒定等,雖然直觀,但步驟繁瑣、工作量大、耗時(shí)長,且容易受鑒別寄主、環(huán)境條件和人為因素的影響[5]。分子生物學(xué)手段快速、簡便和精準(zhǔn),且不易受發(fā)育時(shí)期限制和環(huán)境因素影響,已成為分析小麥葉銹菌遺傳多樣性的一種有效方法[6]。簡單重復(fù)序列標(biāo)記(SSR)[7]、隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性片段技術(shù)(RAPD)[8]、通用引物PCR技術(shù)(UP-PCR)[9]等均有應(yīng)用報(bào)道。趙盼盼等[10]曾利用21對(duì)EST-SSR(基于表達(dá)序列標(biāo)簽開發(fā)微衛(wèi)星的一種新型分子標(biāo)記)引物對(duì)不同地區(qū)、不同年份的小麥葉銹菌菌株進(jìn)行了分子多態(tài)性分析,發(fā)現(xiàn)葉銹菌群體間的親緣關(guān)系與地理分布具有一定的相關(guān)性,用分子手段證明小麥葉銹菌遺傳多樣性較高,但不同群體間多樣性水平有差異。這些分子生物學(xué)技術(shù)的廣泛應(yīng)用為小麥葉銹菌遺傳多樣性的研究提供了快速、簡便的方法。

    2015年小麥葉銹病在黃淮海地區(qū)大流行[11],河南省大部分地區(qū)發(fā)病更是嚴(yán)重。為了揭示不同小麥品種普遍發(fā)病的原因,以河南周口小麥試驗(yàn)田的品種為研究對(duì)象,采用分子快速檢測方法對(duì)區(qū)試田小麥葉銹菌的群體組成及遺傳結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析,為小麥葉銹病防控、小麥品種合理布局提供指導(dǎo)。

    1 材料和方法

    1.1 小麥葉銹菌樣品采集

    供試小麥葉銹菌樣品采集于周口市南、西的2塊周口市農(nóng)業(yè)科學(xué)院小麥品種區(qū)試苗圃,2015年隨機(jī)采取不同品種葉片上的葉銹菌,以樣本癥狀典型、發(fā)病充分、菌量大為標(biāo)準(zhǔn),直接將小麥葉片上葉銹菌夏孢子堆收集于1.5 mL離心管中,每管約50 mg,干燥后儲(chǔ)存于4 ℃冰箱中備用。共采集63份樣品,詳見表1。

    表1 小麥葉銹菌菌株編號(hào)及來源

    續(xù)表1 小麥葉銹菌菌株編號(hào)及來源

    注:菌株1—27來源于周口南地塊,28—63來源于周口西地塊。

    1.2 EST-SSR擴(kuò)增及電泳檢測

    參照康健等[12]的Chelex-100法對(duì)63份供試菌株提取DNA。試驗(yàn)采用Wang等[13]報(bào)道的17對(duì)EST-SSR引物。PCR反應(yīng)體系10 μL:模板DNA(30 ng/μL) 1.0 μL,TaqDNA聚合酶(2.5 U/μL)0.1 μL,10×PCR Buffer 1.0 μL,dNTPs(10 mmol/L) 0.2 μL,上、下游引物(5 mmol/L)各0.2 μL,無菌超純水7.3 μL。反應(yīng)程序:94 ℃預(yù)變性5 min;94 ℃變性30 s,54~61 ℃退火30 s,72 ℃延伸1 min,35個(gè)循環(huán);72 ℃延伸5 min;4 ℃保存。PCR產(chǎn)物經(jīng)10%非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測。

    1.3 數(shù)據(jù)分析

    統(tǒng)計(jì)PCR擴(kuò)增產(chǎn)物清晰可重復(fù)的條帶,構(gòu)建0、1矩陣(有帶為1,無帶為0)。利用NTSYS 2.1軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行UPGMA聚類分析,利用POPGENE軟件進(jìn)行群體遺傳多樣性分析,利用Arlequin 3.11軟件對(duì)小麥葉銹菌的分子變異進(jìn)行分析。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 小麥葉銹菌EST-SSR分析

    檢測結(jié)果表明,17對(duì)EST-SSR引物中僅Ptssr5649、Ptssr2948未擴(kuò)增出多態(tài)性條帶,表明該引物對(duì)葉銹菌小種不具有區(qū)分能力;而其余15對(duì)引物可在63個(gè)供試葉銹菌株基因組中擴(kuò)增出穩(wěn)定清晰的多態(tài)性條帶,用以區(qū)分不同的葉銹菌小種。63份小麥葉銹菌材料擴(kuò)增出62種帶型,代表62種分子小種,14號(hào)小麥品種俊達(dá)109與35號(hào)小麥品種糧源A8上收集的葉銹菌材料擴(kuò)增帶型完全一致,表明其為同種小麥葉銹菌的分子小種。

    2.2 小麥葉銹菌聚類分析

    利用NTSYS 2.1軟件對(duì)63個(gè)供試小麥葉銹菌株的EST-SSR引物擴(kuò)增結(jié)果進(jìn)行聚類分析,其相似系數(shù)為0.70~1.00,表明在小麥葉銹菌群體內(nèi)存在一定的遺傳多樣性,結(jié)果見圖1。在相似系數(shù)0.716處將63個(gè)菌株聚為V1、V2和V33組。V1組共包括6個(gè)菌株,其寄主品種為鄭麥369、豫農(nóng)306、安農(nóng)1206、泉麥890、渦麥1212、秋樂2128,除豫農(nóng)306和泉麥890外,其他4個(gè)品種親本來源相同,均為輝縣紅。V3組包括7個(gè)菌株,其寄主品種為皖科981、安科1403、綠雨1408、瑞星麥618、鄭品麥22、中育1152、新麥33,其中除皖科981和鄭品麥22外,其他5個(gè)品種的親本來源相同,均為豫麥2號(hào)。V2組的50個(gè)菌株在相似系數(shù)0.737處分為V2-1和V2-22個(gè)亞組。其中,V2-1共5個(gè)菌株,其寄主品種為偃高21、中金13、洛麥26、豫糧1688、商麥167,親本來源均為豫麥2號(hào)。V2-2的45個(gè)菌株在相似系數(shù)0.775處分為V2-2-1和V2-2-22個(gè)組,其中品種阜麥18上的葉銹菌株獨(dú)立形成V2-2-2組,與V2-2-1組的菌株遺傳相似性較低,親緣關(guān)系較遠(yuǎn)。V2-2-1組包含44個(gè)菌株,寄主品種徐麥0054、樂麥Z1311273和龍科1109上的葉銹菌株聚在同一分支,其親本來源相同,均來自豫麥2號(hào);俊達(dá)109、糧源A8、鄭麥113、金麥201、機(jī)麥211、耕豐麥1號(hào)、矮豐339上的7個(gè)菌株聚在同一分支,其寄主親本也均來自豫麥2號(hào)??∵_(dá)109和鄭育麥16兩個(gè)品種系譜來源完全相同,均來自豫麥2號(hào)/鄭91138//濟(jì)麥4號(hào),但2個(gè)菌株間的遺傳相似性低于俊達(dá)109和糧源A8之間的遺傳相似性。以上分析表明,葉銹菌遺傳多樣性與寄主品種的系譜來源有很大關(guān)系,一般情況下寄主品種的系譜來源越相似,其上的葉銹菌遺傳相似性越高,親緣關(guān)系越近。

    1—63代表小麥葉銹菌株

    2.3 小麥葉銹菌小種和寄主品種的相關(guān)性分析

    在遺傳相似系數(shù)0.96處,11號(hào)菌株(寄主品種徐麥0054)比40號(hào)菌株(寄主品種樂麥Z1311273)多一條238 bp條帶,少一條242 bp條帶,其寄主親本中均含有豫麥2號(hào)。在遺傳相似系數(shù)0.98處,23號(hào)菌株(寄主品種鄭麥113)比29號(hào)菌株(寄主品種金麥201)僅多一條238 bp的條帶,其寄主親本的來源為鄭91138和豫麥2號(hào)。在相似系數(shù)1.00處,14號(hào)菌株(寄主品種俊達(dá)109)與35號(hào)菌株(寄主品種糧源A8)帶型完全一致,其寄主親本的來源均為豫麥2號(hào)。由此可見,品系來源越相似,該品種上的小麥葉銹菌分子小種越相似,遺傳多樣性越小。據(jù)此推測每個(gè)品種上的小麥葉銹菌可能由多種不同的葉銹菌株混合而成,聚在一個(gè)組里表明這些品種上的小麥葉銹菌菌株相同或相似。

    2.4 小麥葉銹菌群體遺傳多樣性分析

    利用POPGENE軟件對(duì)河南周口2塊苗圃葉銹菌株進(jìn)行群體遺傳多樣性參數(shù)分析。在物種水平和群體水平上,Nei’s基因多樣性指數(shù)(H)均為0.22,多態(tài)位點(diǎn)百分率(P)分別為78.72%和73.41%,表明2塊苗圃供試小麥葉銹菌遺傳多樣性豐富。周口南和周口西地塊葉銹菌群體的Nei’s基因多樣性指數(shù)分別為0.21和022,Shannon信息指數(shù)(I)分別為0.32和0.34,多態(tài)位點(diǎn)百分率分別為72.34%和74.47%,表明周口西地塊葉銹菌群體比周口南的遺傳多樣性稍高(表2)。

    表2 小麥葉銹菌基于EST-SSR的群體遺傳多樣性參數(shù)

    2.5 小麥葉銹菌群體的遺傳變異分析

    利用POPGENE軟件對(duì)周口2個(gè)地塊的所有供試葉銹菌群體進(jìn)行遺傳多樣性分析,結(jié)果顯示,供試葉銹菌株總遺傳多樣性(Ht)為0.22,群體內(nèi)遺傳多樣性(Hs)為0.21,群體間遺傳多樣性(Dst)為0.01,遺傳分化系數(shù)(Gst)為0.05,群體內(nèi)遺傳多樣性占總遺傳多樣性的95.45%,而群體間遺傳多樣性僅占4.55%,說明葉銹菌群體內(nèi)遺傳多樣性顯著高于群體間。Nei’s遺傳相似系數(shù)為0.978 7,遺傳距離為0.021 5,表明2個(gè)地塊間不同寄主小麥品種的葉銹菌群體分子結(jié)構(gòu)類似。利用Arlequin 3.11軟件的AMOVA程序?qū)?個(gè)群體的分子變異分析表明,2個(gè)地塊的小麥葉銹菌遺傳變異發(fā)生在群體間和群體內(nèi),其中群體內(nèi)遺傳變異占總遺傳變異的94.44%,而群體間遺傳變異僅占總變異的5.56%,這表明小麥葉銹菌的遺傳變異主要發(fā)生在群體內(nèi)部(表3)。

    表3 小麥葉銹菌群體間和群體內(nèi)分子變異的AMOVA分析結(jié)果

    3 結(jié)論與討論

    小麥葉銹菌遺傳多樣性研究有毒性鑒定和分子標(biāo)記2種方法,前者主要依據(jù)病原菌對(duì)小麥苗期的致病能力劃分生理小種,操作繁瑣,費(fèi)工費(fèi)時(shí),準(zhǔn)確性易受環(huán)境條件影響;后者是從基因產(chǎn)生的變異反映病原菌個(gè)體的差異,從本質(zhì)揭示群體遺傳結(jié)構(gòu)等特性,操作簡便且準(zhǔn)確性高。2007年,Ordoez等[14]對(duì)北美硬粒小麥和普通小麥上葉銹菌群體的SSR分子遺傳多態(tài)性進(jìn)行了分析,結(jié)果發(fā)現(xiàn),北美硬粒小麥品系來源相似且單一,其葉銹菌遺傳多樣性遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于親本來源不同的普通小麥遺傳多樣性,因此,不同親本來源小麥品種可對(duì)小麥葉銹菌的遺傳多樣性造成一定的影響。劉二明[15]在研究稻瘟病菌遺傳多樣性時(shí)發(fā)現(xiàn),在某一水稻種植區(qū)內(nèi),水稻栽培品種越多,其上分離出的稻瘟病菌株越多,分屬的譜系和單元型越多,則該稻區(qū)的稻瘟病菌群體遺傳多樣性也更豐富,即稻瘟病菌群體的遺傳多樣性與水稻栽培品種的多樣性呈較明顯的正相關(guān)。在本研究中,聚類分析圖顯示小麥葉銹菌遺傳多樣性與寄主品種有一定關(guān)系,例如V2-1組包括偃高21、中金13、洛麥26、豫糧1688、商麥167上的菌株,而這5個(gè)菌株寄主的親本來源均包含豫麥2號(hào),表明品種系譜來源越相似,其上葉銹菌的遺傳相似性越高,親緣關(guān)系越近,遺傳多樣性越低。在遺傳相似系數(shù)0.844處,可將63個(gè)小麥葉銹菌株分為20個(gè)組(S1—S20),其中周口南地塊的27個(gè)菌株分屬于13個(gè)組,而周口西地塊的36個(gè)菌株分屬于15個(gè)組。利用POPGENE軟件對(duì)兩苗圃葉銹菌進(jìn)行群體遺傳多樣性分析表明,周口西地塊小麥葉銹菌群體遺傳多樣性水平稍高于周口南,由此可見,小麥葉銹菌遺傳多樣性與地理來源并無明顯關(guān)系。

    本研究通過EST-SSR分析表明,群體內(nèi)變異為小麥葉銹菌的主要變異來源,與群體間遺傳多樣性相比,群體內(nèi)遺傳多樣性明顯較高,這與Dadrezaie等[16]、Wang等[17]、許敏青等[6]、趙盼盼等[10]的研究結(jié)果一致,同樣證明葉銹菌存在豐富的遺傳多樣性。小麥寄主品種親本來源越相似,其上的葉銹菌小種類型越一致,親緣關(guān)系越近,遺傳多樣性越低。本研究揭示了寄主小麥品種及其親本來源與小麥葉銹菌遺傳多樣性的關(guān)系,為小麥的育種及抗病研究奠定理論基礎(chǔ),對(duì)小麥生產(chǎn)實(shí)踐具有現(xiàn)實(shí)的指導(dǎo)意義。

    猜你喜歡
    銹菌小種周口
    安徽省稻瘟病菌生理小種鑒定分析
    禾谷銹菌轉(zhuǎn)主寄主的研究進(jìn)展
    “一站一臺(tái)”連民心 繪出周口新畫卷
    為周口人民的健康事業(yè)做出更大貢獻(xiàn)
    越南黃檀銹菌與銹菌癭蚊關(guān)系*
    年際間干旱對(duì)晚疫病菌生理小種復(fù)雜性的影響
    中國馬鈴薯晚疫病菌生理小種研究進(jìn)展
    中國馬鈴薯(2017年1期)2017-03-02 09:15:51
    黃淮大豆主產(chǎn)區(qū)大豆胞囊線蟲生理小種分布調(diào)查
    一種楊樹銹病天敵昆蟲形態(tài)學(xué)及生物學(xué)特性研究
    二次多階段不確定系統(tǒng)的Bang-Bang最優(yōu)控制
    成人亚洲欧美一区二区av| tube8黄色片| 热99久久久久精品小说推荐| 午夜影院在线不卡| 亚洲第一青青草原| 欧美激情极品国产一区二区三区| 熟女av电影| 成年人免费黄色播放视频| 一级爰片在线观看| 三上悠亚av全集在线观看| 丝瓜视频免费看黄片| 晚上一个人看的免费电影| 热re99久久精品国产66热6| 欧美av亚洲av综合av国产av | av福利片在线| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 嫩草影院入口| 国产在视频线精品| 99九九在线精品视频| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 狂野欧美激情性bbbbbb| 久久久久久免费高清国产稀缺| 精品国产一区二区三区四区第35| 久久人妻熟女aⅴ| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 一二三四中文在线观看免费高清| 亚洲精品国产av蜜桃| 亚洲在久久综合| 只有这里有精品99| 日本爱情动作片www.在线观看| 国产乱来视频区| 考比视频在线观看| 人成视频在线观看免费观看| 丰满乱子伦码专区| 午夜激情av网站| 精品一区二区三卡| a级毛片在线看网站| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 日韩av在线免费看完整版不卡| 大码成人一级视频| 丝袜脚勾引网站| 欧美在线黄色| 精品福利永久在线观看| 777米奇影视久久| 毛片一级片免费看久久久久| 国产野战对白在线观看| 国产免费福利视频在线观看| xxx大片免费视频| 高清欧美精品videossex| 亚洲少妇的诱惑av| 成年美女黄网站色视频大全免费| 2018国产大陆天天弄谢| 一级黄片播放器| 久热这里只有精品99| 亚洲精品aⅴ在线观看| 精品久久蜜臀av无| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 国产淫语在线视频| 亚洲av国产av综合av卡| 欧美久久黑人一区二区| 三上悠亚av全集在线观看| 黄色一级大片看看| av福利片在线| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 18禁观看日本| 国产毛片在线视频| 搡老乐熟女国产| 久久久久久久久免费视频了| svipshipincom国产片| 成人影院久久| 国产精品久久久久成人av| 国产黄色视频一区二区在线观看| 激情视频va一区二区三区| 999精品在线视频| 老司机靠b影院| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 国产av一区二区精品久久| 99国产综合亚洲精品| 精品一区二区免费观看| 免费日韩欧美在线观看| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 午夜av观看不卡| av在线播放精品| 嫩草影视91久久| 亚洲av日韩精品久久久久久密 | 欧美精品一区二区免费开放| 校园人妻丝袜中文字幕| 午夜福利影视在线免费观看| 男男h啪啪无遮挡| 丰满少妇做爰视频| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 中文字幕精品免费在线观看视频| 九色亚洲精品在线播放| 丰满饥渴人妻一区二区三| 999久久久国产精品视频| 国产精品香港三级国产av潘金莲 | 男女免费视频国产| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 国产精品熟女久久久久浪| 久久久久久久国产电影| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 久久天堂一区二区三区四区| 国产毛片在线视频| 99精国产麻豆久久婷婷| 老鸭窝网址在线观看| 99热国产这里只有精品6| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久 | 老司机靠b影院| 波野结衣二区三区在线| 爱豆传媒免费全集在线观看| 国产精品一二三区在线看| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 免费观看a级毛片全部| 十八禁网站网址无遮挡| 国产麻豆69| 99久久综合免费| 精品亚洲成国产av| 1024视频免费在线观看| av在线播放精品| 欧美日韩亚洲高清精品| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线| √禁漫天堂资源中文www| 亚洲国产精品成人久久小说| 亚洲第一青青草原| 极品人妻少妇av视频| 2021少妇久久久久久久久久久| 两个人免费观看高清视频| 国产精品国产三级专区第一集| 精品少妇久久久久久888优播| 蜜桃国产av成人99| 高清视频免费观看一区二区| 欧美在线一区亚洲| 国产成人91sexporn| 大码成人一级视频| 在线观看免费高清a一片| 少妇 在线观看| 日韩电影二区| 少妇被粗大猛烈的视频| 亚洲综合精品二区| 男女床上黄色一级片免费看| 国产麻豆69| 亚洲一区中文字幕在线| 不卡视频在线观看欧美| 亚洲综合色网址| 狂野欧美激情性bbbbbb| 国产成人精品在线电影| svipshipincom国产片| 亚洲精品中文字幕在线视频| 大话2 男鬼变身卡| av在线播放精品| 波多野结衣av一区二区av| 天天操日日干夜夜撸| 中文字幕最新亚洲高清| 999久久久国产精品视频| 男女之事视频高清在线观看 | 高清不卡的av网站| 久久久国产欧美日韩av| 电影成人av| 亚洲 欧美一区二区三区| 久久久国产欧美日韩av| 国产精品一国产av| 亚洲精品日本国产第一区| 蜜桃在线观看..| 少妇被粗大猛烈的视频| 热99国产精品久久久久久7| 少妇被粗大的猛进出69影院| 亚洲伊人久久精品综合| 青春草国产在线视频| 女性生殖器流出的白浆| 一边亲一边摸免费视频| 成年av动漫网址| 男女免费视频国产| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 超色免费av| 亚洲国产欧美网| 美女午夜性视频免费| 亚洲美女黄色视频免费看| 大片免费播放器 马上看| 欧美97在线视频| 日本色播在线视频| a级毛片黄视频| 国产毛片在线视频| 高清av免费在线| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 国产成人精品久久二区二区91 | 欧美黑人精品巨大| 免费观看a级毛片全部| 最近手机中文字幕大全| 精品少妇黑人巨大在线播放| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 欧美成人精品欧美一级黄| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 综合色丁香网| 天天影视国产精品| 精品国产乱码久久久久久小说| 超碰成人久久| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 午夜激情久久久久久久| 自线自在国产av| 中文天堂在线官网| netflix在线观看网站| 1024香蕉在线观看| 午夜激情久久久久久久| 18禁观看日本| 成人手机av| 精品久久久精品久久久| 久久精品国产亚洲av涩爱| 亚洲欧洲国产日韩| 精品卡一卡二卡四卡免费| 久久久久久免费高清国产稀缺| 日韩视频在线欧美| 深夜精品福利| 视频在线观看一区二区三区| 中文字幕色久视频| 9191精品国产免费久久| 欧美成人精品欧美一级黄| 亚洲久久久国产精品| 亚洲天堂av无毛| 国产av国产精品国产| 黄色 视频免费看| 欧美激情极品国产一区二区三区| 欧美精品av麻豆av| 欧美精品高潮呻吟av久久| 91国产中文字幕| 日韩免费高清中文字幕av| 亚洲成av片中文字幕在线观看| av又黄又爽大尺度在线免费看| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 超色免费av| 超碰成人久久| 欧美日韩综合久久久久久| 国产精品女同一区二区软件| 搡老岳熟女国产| 免费观看a级毛片全部| av女优亚洲男人天堂| 岛国毛片在线播放| 国产一区二区 视频在线| 精品人妻一区二区三区麻豆| 日本一区二区免费在线视频| 亚洲精品国产区一区二| 一级片免费观看大全| 色播在线永久视频| 久久天堂一区二区三区四区| 国产激情久久老熟女| 久久精品国产a三级三级三级| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 热99国产精品久久久久久7| 欧美激情极品国产一区二区三区| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 精品视频人人做人人爽| 日韩一本色道免费dvd| av国产精品久久久久影院| 波多野结衣av一区二区av| 成年美女黄网站色视频大全免费| 一二三四中文在线观看免费高清| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 国产爽快片一区二区三区| 国产精品国产三级专区第一集| 日本欧美国产在线视频| 久久国产精品大桥未久av| 我的亚洲天堂| 免费看不卡的av| 成年女人毛片免费观看观看9 | 欧美人与性动交α欧美软件| 免费高清在线观看日韩| 在线观看免费高清a一片| 亚洲精品一二三| 成年女人毛片免费观看观看9 | 精品一品国产午夜福利视频| 成人国语在线视频| 国产在线一区二区三区精| 久久99精品国语久久久| 秋霞在线观看毛片| 国产福利在线免费观看视频| 在线观看免费高清a一片| 欧美黄色片欧美黄色片| 伦理电影免费视频| 成人午夜精彩视频在线观看| 亚洲成国产人片在线观看| 国产精品蜜桃在线观看| 国产 一区精品| 狂野欧美激情性bbbbbb| 一级片免费观看大全| 欧美人与性动交α欧美软件| 伦理电影大哥的女人| 国产精品一区二区在线不卡| 精品人妻在线不人妻| 十分钟在线观看高清视频www| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 国产 一区精品| 秋霞在线观看毛片| 国产黄色免费在线视频| 少妇人妻精品综合一区二区| 麻豆av在线久日| 亚洲精品日本国产第一区| 99精国产麻豆久久婷婷| 丰满少妇做爰视频| 叶爱在线成人免费视频播放| 天天躁日日躁夜夜躁夜夜| 老汉色av国产亚洲站长工具| 亚洲情色 制服丝袜| 日韩欧美一区视频在线观看| 成人三级做爰电影| 亚洲欧美色中文字幕在线| 亚洲av成人精品一二三区| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 电影成人av| 免费日韩欧美在线观看| 亚洲av日韩在线播放| 丰满少妇做爰视频| 成人亚洲精品一区在线观看| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 欧美黑人精品巨大| 欧美少妇被猛烈插入视频| 免费少妇av软件| 日韩大片免费观看网站| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 亚洲伊人久久精品综合| av在线app专区| av福利片在线| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 男人操女人黄网站| 美女视频免费永久观看网站| 制服诱惑二区| 亚洲精品在线美女| 国产精品偷伦视频观看了| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 在线看a的网站| 欧美人与性动交α欧美软件| 亚洲七黄色美女视频| 日韩欧美精品免费久久| 午夜福利免费观看在线| 在线观看免费高清a一片| 看免费成人av毛片| 日日爽夜夜爽网站| 啦啦啦 在线观看视频| 黄色怎么调成土黄色| 国产成人一区二区在线| 久久99热这里只频精品6学生| 欧美激情 高清一区二区三区| 久久久久精品国产欧美久久久 | 韩国av在线不卡| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 午夜激情av网站| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 亚洲精品第二区| 男的添女的下面高潮视频| 国产精品熟女久久久久浪| 亚洲第一区二区三区不卡| 欧美人与性动交α欧美软件| 国产成人精品无人区| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 欧美xxⅹ黑人| 欧美日韩av久久| 永久免费av网站大全| 热99国产精品久久久久久7| 久久人妻熟女aⅴ| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 99精国产麻豆久久婷婷| 不卡av一区二区三区| 制服丝袜香蕉在线| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 亚洲av欧美aⅴ国产| 国产精品久久久久久精品电影小说| 国产免费福利视频在线观看| 欧美日韩精品网址| 日韩av在线免费看完整版不卡| 国产精品免费视频内射| 91国产中文字幕| 亚洲精品国产区一区二| 又大又黄又爽视频免费| 亚洲av成人不卡在线观看播放网 | 日本av免费视频播放| 亚洲av综合色区一区| 欧美日韩视频精品一区| 国产爽快片一区二区三区| 人人妻人人澡人人看| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 国产国语露脸激情在线看| www.自偷自拍.com| 中国三级夫妇交换| 久久婷婷青草| 亚洲国产精品一区三区| 久久鲁丝午夜福利片| 国产1区2区3区精品| 久久精品人人爽人人爽视色| av国产久精品久网站免费入址| 国产在线免费精品| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 亚洲精品成人av观看孕妇| 亚洲成色77777| 中文字幕最新亚洲高清| 丝袜喷水一区| 中文欧美无线码| 欧美日韩av久久| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 午夜激情久久久久久久| 婷婷色av中文字幕| 亚洲精品自拍成人| 午夜日韩欧美国产| 赤兔流量卡办理| e午夜精品久久久久久久| 999精品在线视频| 1024视频免费在线观看| 无限看片的www在线观看| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 亚洲精品国产色婷婷电影| 日本欧美视频一区| 91国产中文字幕| 又黄又粗又硬又大视频| 久久久欧美国产精品| 日本wwww免费看| 韩国av在线不卡| 国产免费福利视频在线观看| 卡戴珊不雅视频在线播放| 久久av网站| 久久久国产一区二区| 亚洲少妇的诱惑av| 在线观看免费午夜福利视频| 免费黄色在线免费观看| 国产av精品麻豆| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 成人三级做爰电影| 国产野战对白在线观看| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 天堂俺去俺来也www色官网| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 天天躁日日躁夜夜躁夜夜| 黄色视频不卡| 校园人妻丝袜中文字幕| 国产高清不卡午夜福利| av女优亚洲男人天堂| 国产极品天堂在线| 免费黄网站久久成人精品| 亚洲伊人久久精品综合| 一区福利在线观看| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 国产在线视频一区二区| netflix在线观看网站| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 国产精品国产三级国产专区5o| 69精品国产乱码久久久| av在线app专区| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲 | 视频在线观看一区二区三区| 久久人人爽人人片av| 91aial.com中文字幕在线观看| 如何舔出高潮| 亚洲精品乱久久久久久| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 精品国产乱码久久久久久男人| 欧美日韩av久久| 香蕉国产在线看| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 久久天堂一区二区三区四区| 一二三四中文在线观看免费高清| 亚洲欧美精品自产自拍| 天堂俺去俺来也www色官网| 精品国产乱码久久久久久小说| 亚洲成人免费av在线播放| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 国产精品二区激情视频| 人妻人人澡人人爽人人| 婷婷色麻豆天堂久久| 黄色 视频免费看| 女人精品久久久久毛片| 久久毛片免费看一区二区三区| av国产精品久久久久影院| 国产有黄有色有爽视频| 99热全是精品| 精品一区二区三区四区五区乱码 | 在线精品无人区一区二区三| 人妻人人澡人人爽人人| 亚洲av国产av综合av卡| 国产深夜福利视频在线观看| 久久久国产一区二区| 男女床上黄色一级片免费看| 一本久久精品| 亚洲人成电影观看| 伊人久久国产一区二区| 男女国产视频网站| 国产免费现黄频在线看| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 亚洲天堂av无毛| 无遮挡黄片免费观看| 夫妻午夜视频| 美女高潮到喷水免费观看| 免费日韩欧美在线观看| 亚洲熟女精品中文字幕| 欧美精品高潮呻吟av久久| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 精品酒店卫生间| 啦啦啦在线免费观看视频4| 国产欧美亚洲国产| 精品第一国产精品| 18禁国产床啪视频网站| 可以免费在线观看a视频的电影网站 | 国产成人精品福利久久| 丝袜美足系列| 欧美日韩综合久久久久久| 丝袜美足系列| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 黄色怎么调成土黄色| 亚洲欧美成人精品一区二区| 激情五月婷婷亚洲| 国产又色又爽无遮挡免| 亚洲精品国产一区二区精华液| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 人人妻人人澡人人看| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 国产精品 国内视频| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 1024视频免费在线观看| 日韩 亚洲 欧美在线| 亚洲国产欧美一区二区综合| 午夜激情av网站| 交换朋友夫妻互换小说| 欧美日韩av久久| a级毛片在线看网站| 最近2019中文字幕mv第一页| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 曰老女人黄片| 男女边摸边吃奶| 丝袜脚勾引网站| 久久99精品国语久久久| 999久久久国产精品视频| 精品一区二区免费观看| 搡老岳熟女国产| 亚洲精品久久午夜乱码| 制服丝袜香蕉在线| 蜜桃国产av成人99| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 亚洲精品美女久久av网站| 成年人午夜在线观看视频| 中文字幕人妻熟女乱码| 午夜免费观看性视频| 久久韩国三级中文字幕| 1024视频免费在线观看| 男女午夜视频在线观看| 天堂8中文在线网| 国产免费福利视频在线观看| 久久久久久久大尺度免费视频| 精品久久蜜臀av无| 国产欧美亚洲国产| 国产精品一区二区精品视频观看| 国产麻豆69| 宅男免费午夜| 超碰成人久久| 少妇被粗大猛烈的视频| 两个人免费观看高清视频| 亚洲国产欧美网| 欧美日韩成人在线一区二区| 少妇精品久久久久久久| 久久青草综合色| 美女大奶头黄色视频| 18禁观看日本| 久久ye,这里只有精品| 香蕉丝袜av| 美女视频免费永久观看网站| 美女扒开内裤让男人捅视频| 久久精品人人爽人人爽视色| 欧美成人午夜精品| 国产精品人妻久久久影院| 国产欧美亚洲国产| 一二三四在线观看免费中文在| 99久久精品国产亚洲精品| 一本一本久久a久久精品综合妖精| 国产精品熟女久久久久浪| 操出白浆在线播放| 久久久欧美国产精品| 婷婷色综合www| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频 | 欧美精品高潮呻吟av久久| av国产精品久久久久影院| 日韩人妻精品一区2区三区| 日日啪夜夜爽| 观看美女的网站| 精品免费久久久久久久清纯 | 欧美日韩综合久久久久久| 久久久久久免费高清国产稀缺| av网站在线播放免费| 90打野战视频偷拍视频| 丰满饥渴人妻一区二区三| 久久久国产一区二区| 国产精品一区二区在线观看99| 丰满饥渴人妻一区二区三| 国产亚洲欧美精品永久| 亚洲成色77777| 在线观看www视频免费| 一边亲一边摸免费视频| 夫妻性生交免费视频一级片| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 亚洲综合色网址| 欧美最新免费一区二区三区| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 午夜激情久久久久久久| 国产男女超爽视频在线观看| 婷婷成人精品国产| 久久久精品94久久精品| 国产av码专区亚洲av| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久 | av片东京热男人的天堂| 久久久久精品人妻al黑| 久热爱精品视频在线9| 十分钟在线观看高清视频www| 岛国毛片在线播放| 亚洲欧美激情在线| 日韩av免费高清视频|