人誘導(dǎo)多潛能干細(xì)胞在體外分化成小膠質(zhì)細(xì)胞的研究進(jìn)展

高艷 ，張文靜 ，鄧文斌, ，趙保明 *

（1湖北文理學(xué)院醫(yī)學(xué)院形態(tài)學(xué)部， 2湖北文理學(xué)院醫(yī)學(xué)院分子醫(yī)學(xué)中心，襄陽(yáng) 441053; 3美國(guó)加州大學(xué)戴維斯分校生物化學(xué)與分子醫(yī)藥學(xué)部，加州薩克拉門(mén)托 95817）

小膠質(zhì)細(xì)胞是位于腦的巨噬細(xì)胞，為神經(jīng)元提供穩(wěn)定內(nèi)環(huán)境，包括在腦發(fā)育期間修剪無(wú)功能的突觸、清除死細(xì)胞和錯(cuò)誤折疊的蛋白質(zhì)及其它細(xì)胞碎片[1]。小膠質(zhì)細(xì)胞能被炎癥刺激激活，產(chǎn)生一系列細(xì)胞因子，包括具有潛在破壞性的腫瘤壞死因子α（TNFα），這種反應(yīng)可能導(dǎo)致一個(gè)慢性損傷周期的激活和神經(jīng)元損傷。許多與阿爾茨海默?。ˋD）、帕金森?。≒D）、運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元疾病/肌萎縮性側(cè)索硬化（MND / ALS）和額顳葉癡呆（FTD）等疾病相關(guān)的基因，如TREM2、CD33、LRRK2和C9orf72[2-4]在小膠質(zhì)細(xì)胞中有表達(dá)，使人們對(duì)小膠質(zhì)細(xì)胞生物學(xué)特性與神經(jīng)退行性疾病的相關(guān)性研究日益重視[5]。

由于被轉(zhuǎn)化的小膠質(zhì)細(xì)胞樣細(xì)胞系具有高度增殖能力，并不適合建立非增殖、分化細(xì)胞類型的模型，因此急需一種真實(shí)可靠的人類小膠質(zhì)細(xì)胞模型，而多潛能干細(xì)胞是由成人體細(xì)胞誘導(dǎo)或胚胎來(lái)的可無(wú)限自我更新、具有正常核型并能夠被誘導(dǎo)分化為最終細(xì)胞類型，它們也可來(lái)自于病人（保留病人的遺傳背景），并且可以用于基因編輯、質(zhì)詢感興趣的基因，是很好的研究資源。然而，直到最近兩年才有人使用人多能干細(xì)胞在體外重復(fù)小膠質(zhì)細(xì)胞的發(fā)育過(guò)程，分化出小膠質(zhì)細(xì)胞樣細(xì)胞。

1 小膠質(zhì)細(xì)胞的發(fā)育起源

在小鼠胚胎第7.5天（E7.5）和E8.25中，卵黃囊血島中產(chǎn)生兩波胚胎巨噬細(xì)胞，第一波遷移到發(fā)展中大腦并分化為小膠質(zhì)細(xì)胞[6-8]，這些卵黃囊來(lái)源的巨噬細(xì)胞不依賴Myb但依賴于PU.1和Irf8[9,10]。另外一波造血干細(xì)胞（HSCs）來(lái)自于E10.5的主動(dòng)脈-性腺-中腎區(qū)，構(gòu)成胎肝和骨髓，其中來(lái)自骨髓龕中HSCs分化為成年血細(xì)胞，其更新依賴于Myb的表達(dá)。因此，依賴Myb與否可區(qū)別卵黃囊源性巨噬細(xì)胞與成熟的、確定的、血液?jiǎn)魏思?xì)胞衍生的巨噬細(xì)胞。小膠質(zhì)細(xì)胞在發(fā)展中的大腦局部增生率低，通常不會(huì)被其它腦外巨噬細(xì)胞和單核細(xì)胞所取代，而大多數(shù)在其它組織居住的巨噬細(xì)胞與之相反（最初由卵黃囊衍生的巨噬細(xì)胞，但是部分或完全被胎肝或血液?jiǎn)魏思?xì)胞衍生的巨噬細(xì)胞替代）[11-16]。在發(fā)育過(guò)程中巨噬細(xì)胞集落刺激因子1（CSF1）對(duì)骨髓細(xì)胞增殖、分化和維持其活性起重要作用。在腦中，一種選擇性CSF1受體的配體—白細(xì)胞介素-34（IL-34）能支持小膠質(zhì)細(xì)胞存活、分化、分支形態(tài)和持續(xù)成熟[17]。

雖然人小膠質(zhì)細(xì)胞的發(fā)育研究受限，但是它的發(fā)育過(guò)程與小鼠的類似。卵黃囊源巨噬細(xì)胞出現(xiàn)在E17[18]，E31后進(jìn)入大腦[19,20]，并且與神經(jīng)元一起成熟成為功能完全的分支狀的小膠質(zhì)細(xì)胞，于妊娠第20周皮質(zhì)神經(jīng)元開(kāi)始顯示自發(fā)電活動(dòng)[21]。

2 誘導(dǎo) hiPSCs分化產(chǎn)生小膠質(zhì)細(xì)胞（hiPSC-MG）

2.1 卵黃囊來(lái)源的造血干細(xì)胞是hiPSCs分化成hiPSC-MG的關(guān)鍵

在胚胎發(fā)育早期，原始造血祖細(xì)胞生成于卵黃囊的血島[22,23]，小膠質(zhì)細(xì)胞來(lái)自于卵黃囊造血祖細(xì)胞但不同于胚胎來(lái)源的外周骨髓細(xì)胞[15]，這導(dǎo)致難以區(qū)分小膠質(zhì)細(xì)胞和外周來(lái)源的巨噬細(xì)胞。最近有研究證明，卵黃囊來(lái)源巨噬細(xì)胞的前體細(xì)胞不依賴MYB轉(zhuǎn)錄因子，而依賴RUNX1-和PU1[24,25]。為了從hiPSCs產(chǎn)生小膠質(zhì)細(xì)胞，只有先分化出HPCs才能得到反映體內(nèi)真實(shí)狀態(tài)的小膠質(zhì)細(xì)胞。盡管具有不同的分化效率和挑戰(zhàn)，許多有基質(zhì)細(xì)胞飼養(yǎng)層和無(wú)基質(zhì)細(xì)胞飼養(yǎng)層的實(shí)驗(yàn)方法都可以從hiPSCs生成HPCs[26-30]。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)HPCs大量表達(dá)CD235a，其表達(dá)受控于激活activin A/Nodal通路并同時(shí)抑制WNT/β-catenin信號(hào)。因此，在合適的培養(yǎng)條件下如小鼠OP9基質(zhì)飼養(yǎng)層[31]、限定培養(yǎng)液（BMP4、VEGF、SCF、IL-3、M-CSF 等）[32]或者低氧條件（5% O2）[33]，hiPSCs可誘導(dǎo)出Flk-1+和CD235a+HPCs，繼續(xù)在體外培養(yǎng)皿中誘導(dǎo)分化可產(chǎn)生小膠質(zhì)細(xì)胞樣細(xì)胞。

2.2 使用人誘導(dǎo)多能干細(xì)胞分化成小膠質(zhì)樣細(xì)胞(hiPSC-MG)

人體來(lái)源的小膠質(zhì)細(xì)胞有利于探索其在健康和疾病中的作用，然而與中樞系統(tǒng)其他類型細(xì)胞相比，培養(yǎng)出人多能干細(xì)胞分化的真實(shí)可靠的小膠質(zhì)細(xì)胞還處于探索階段。直到近兩年才有人使用多能干細(xì)胞誘導(dǎo)分化產(chǎn)生小膠質(zhì)細(xì)胞樣的吞噬細(xì)胞，并且提供了具體的分化步驟、功能檢測(cè)和基因組分析對(duì)其進(jìn)行鑒定[31,33-35]（表1）。

Muffat等從hESCs和hiPSCs產(chǎn)生小膠質(zhì)樣細(xì)胞[34]，將其命名為多能干細(xì)胞來(lái)源的小膠質(zhì)細(xì)胞樣細(xì)胞（pluripotent stem cell-derived microglia-like cells，pMGLs）。他們使用與腦脊液相似的無(wú)血清神經(jīng)-膠質(zhì)培養(yǎng)基可以培養(yǎng)多種類型神經(jīng)和膠質(zhì)細(xì)胞。為了選擇性培養(yǎng)小膠質(zhì)細(xì)胞，他們使用改良的聚苯乙烯培養(yǎng)板，可以使鼠新生小膠質(zhì)細(xì)胞和人胎小膠質(zhì)細(xì)胞粘附，而神經(jīng)祖細(xì)胞來(lái)源的神經(jīng)膠質(zhì)衍生物粘附較差。隨后使用IL-34和CSF1促進(jìn)小膠質(zhì)細(xì)胞的分化產(chǎn)生pMGLs。該方法中先將iPSCs在基質(zhì)飼養(yǎng)層上培養(yǎng)形成胚體（EBs），EBs包含中胚層細(xì)胞系和發(fā)展的神經(jīng)外胚層細(xì)胞，它們同時(shí)出現(xiàn)在其培養(yǎng)系統(tǒng)里。因此，該系統(tǒng)中其他類型的細(xì)胞提供了所有內(nèi)源分子，例如，神經(jīng)元和膠質(zhì)細(xì)胞能夠產(chǎn)生M-CSF、IL-34、CD200、CX3CL1和TGFβ等。此外他們的方法中為了篩選粘附的單個(gè)前體細(xì)胞，使用表面處理的聚苯乙烯的培養(yǎng)板（Primaria 6-well plate），但是也可能粘附其它類型細(xì)胞，如粘附的神經(jīng)外胚層源的星形膠質(zhì)細(xì)胞，星形膠質(zhì)細(xì)胞可產(chǎn)生骨髓細(xì)胞/小膠質(zhì)細(xì)胞所需的所有細(xì)胞因子。另外，粘附選擇這一步驟包含了持續(xù)暴露EBs粘附細(xì)胞達(dá)一個(gè)月，因此增加暴露那些粘附的骨髓細(xì)胞分化成中樞和中胚層條件培養(yǎng)基的可能性。值得注意的是，他們沒(méi)有添加轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1（Transforming growth factor β1，TGFβ-1）到培養(yǎng)基里，盡管有證據(jù)證實(shí)TGFβ-1可影響小膠質(zhì)細(xì)胞在體或離體產(chǎn)生和建立小膠質(zhì)細(xì)胞的信號(hào)[5]。驗(yàn)證產(chǎn)生的pMGLs，將pMGLs與3D神經(jīng)元共培養(yǎng)，并且用代表性的圖像和視頻記錄和顯示pMGLs的延伸投影，由此顯示其分支進(jìn)程。Muffat等的實(shí)驗(yàn)步驟試圖重復(fù)小膠質(zhì)細(xì)胞個(gè)體發(fā)生，通過(guò)使用卵黃囊樣EBs來(lái)產(chǎn)生它們的小膠質(zhì)細(xì)胞。這一進(jìn)展強(qiáng)調(diào)了可以在體外產(chǎn)生人類小膠質(zhì)樣細(xì)胞。

表1多潛能干細(xì)胞源小膠質(zhì)細(xì)胞樣細(xì)胞（hiPSCs-MG）培養(yǎng)Tab. 1 hiPSC-derived microglia culture

Pandya及其同事使用限定的培養(yǎng)基和星形膠質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)將hiPSCs分化成小膠質(zhì)細(xì)胞樣細(xì)胞。該方案分兩步進(jìn)行：第一步，將iPSCs誘導(dǎo)分化為HPC，使它們失去干細(xì)胞標(biāo)記Nanog和Tr-1-81而獲得CD34和CD43表達(dá)；第二步將誘導(dǎo)多能干細(xì)胞來(lái)源的HPC和星形細(xì)胞層共培養(yǎng)，同時(shí)還在培養(yǎng)液中添加GM-CSF、M-CSF和IL-3等細(xì)胞因子，使它們不表達(dá)CD34和CD43而表達(dá)CD11b和Iba1。該方案中第一步OP9飼養(yǎng)層或化學(xué)限定的方案產(chǎn)生HPC，繼而產(chǎn)生人誘導(dǎo)多能干細(xì)胞源小膠質(zhì)細(xì)胞（hiPSC-MG）。無(wú)論基質(zhì)飼養(yǎng)層源的還是無(wú)飼養(yǎng)層源的HPC都不完全具有小膠質(zhì)細(xì)胞特征，而在于使用G-CSF、GM-CSF和FLT3L等細(xì)胞因子進(jìn)行誘導(dǎo)分化。這些細(xì)胞因子產(chǎn)生于骨髓發(fā)生中，參與產(chǎn)生一般的骨髓祖細(xì)胞（CMPs）分化[26,30,36-39]。該方案第二步中將誘導(dǎo)多能干細(xì)胞來(lái)源的造血祖細(xì)胞（iPSHPC）和星形膠質(zhì)細(xì)胞一起培育在含有M-CSF的無(wú)血清的培養(yǎng)液里面。iPSC-MG的功能分析主要使用流式細(xì)胞儀分選（FACS）出表達(dá)CD39的 hiPSC-MG（CD39最近被報(bào)告出現(xiàn)在小膠質(zhì)細(xì)胞）[40]，從而將hiPSC-MG從星形膠質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)體系中分離出來(lái)，僅得到約8%CD39陽(yáng)性細(xì)胞。分離出來(lái)的hiPSC-MG可變?yōu)榘⒚装蜆蛹?xì)胞，可內(nèi)化pHrodo-red結(jié)合的大腸桿菌顆粒，通過(guò)免疫熒光圖像對(duì)大腸桿菌反應(yīng)產(chǎn)生的ROS進(jìn)行評(píng)估。Pandya等使用微陣列評(píng)估hiPSC-MG RNA表達(dá)，比較hiPSC-MG、巨噬細(xì)胞、樹(shù)突細(xì)胞、iPSCs和購(gòu)買(mǎi)的胎小膠質(zhì)細(xì)胞的特性。他們將鼠hiPSC-MG和膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞共同移植到免疫缺陷小鼠腦中發(fā)現(xiàn)，小鼠CX3CR1-GFP hiPSC-MG遷移到膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞。免疫熒光分析顯示，移植到小鼠腦中的hiPSC-MG類似阿米巴的形態(tài)。有趣的是，注射新生小鼠源小膠質(zhì)細(xì)胞或hiPSC-MG和皮下注射樹(shù)突狀細(xì)胞都可顯著提高膠質(zhì)母細(xì)胞瘤小鼠的存活率。由于移植研究只集中在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞存在的地區(qū)，而人類或小鼠的hiPSC-MG能否參與構(gòu)成免疫缺陷小鼠的大腦和表現(xiàn)出小膠質(zhì)細(xì)胞樣分支形態(tài)并未提及。小鼠或人類2D或3D培養(yǎng)成像分析可以進(jìn)一步研究hiPSC-MG對(duì)CNS環(huán)境的反應(yīng)。2D研究是非常可行的，因?yàn)樗麄兊姆桨敢呀?jīng)使用了星形膠質(zhì)細(xì)胞共同培養(yǎng)方案；小鼠3D培養(yǎng)研究亦是可行的研究，因?yàn)樾∈笾袠猩窠?jīng)系統(tǒng)織易于分離和培養(yǎng)，他們使用小鼠CX3CR1-GFP hiPSC-MG可在小鼠3D培養(yǎng)物中辨別hiPSC-MG和內(nèi)源性小膠質(zhì)細(xì)胞。

Muffat和Pandya的培養(yǎng)方案依賴于先將iPSCs形成不可控的EBs或者依賴共培養(yǎng)，得到有限的純化細(xì)胞。他們?cè)噲D從干細(xì)胞得到小膠質(zhì)細(xì)胞及它們的造血前體細(xì)胞，但是他們的培養(yǎng)方法更適合骨髓樣分化。這種缺陷可能導(dǎo)致難以區(qū)分與小膠質(zhì)細(xì)胞相似的外周來(lái)的巨噬細(xì)胞。這兩項(xiàng)研究在生產(chǎn)iPSCs來(lái)源的小膠質(zhì)細(xì)胞方面都有局限性，他們的細(xì)胞進(jìn)行了功能和轉(zhuǎn)錄組學(xué)分析，但是這兩種方案低產(chǎn)量限制了使用更多功能測(cè)定定量評(píng)估小膠質(zhì)細(xì)胞的能力。為了有效研究健康和疾病中的小膠質(zhì)細(xì)胞功能，hiPSCs盡可能大量衍生小膠質(zhì)細(xì)胞樣的hiPSC-MG是必要的。

Abud等人使用來(lái)自hiPSC的完全限定的小膠質(zhì)細(xì)胞分化方法，只需兩步且不與星型膠質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)，得到hiPSC分化的小膠質(zhì)細(xì)胞樣細(xì)胞（iMGLs）。他們認(rèn)為一個(gè)關(guān)鍵的先決條件是iPSCs向HPCs有效分化，該過(guò)程重復(fù)了小膠質(zhì)細(xì)胞發(fā)育過(guò)程， HPCs代表來(lái)源于卵黃囊的原始造血細(xì)胞最終可分化成小膠質(zhì)細(xì)胞。第一步，他們使用限定培養(yǎng)基和造血分化因子在5% O2（4d）和20% O2（6d）環(huán)境下10d后將iPSCs分化成CD43+/CD235a+/CD41+HPCs[39]。第二步，將HPCs在無(wú)血清含CSF-1、IL-34和TGFβ1的培養(yǎng)液中分化，分化第14d細(xì)胞表達(dá)轉(zhuǎn)錄因子PU.1和小膠質(zhì)細(xì)胞富有的蛋白TREM2，證實(shí)了早期向小膠質(zhì)細(xì)胞分化的命運(yùn)保證。至38d iMGLs類似人類小膠質(zhì)細(xì)胞但不是單核細(xì)胞或巨噬細(xì)胞，表達(dá)了小膠質(zhì)細(xì)胞富有的其他蛋白MERTK、ITGB5、CX3CR1、TGFBR1和PROS1。像嚙齒類小膠質(zhì)細(xì)胞的發(fā)展，iMGLs體外的生長(zhǎng)表達(dá)PU.1、TREM2和 CD11bint/CD45low。當(dāng)iMGLs體外成熟后變成與在體小膠質(zhì)細(xì)胞類似的多分支形態(tài)。為了驗(yàn)證分化的iMGLs，移植iMGLs到小鼠大腦研究細(xì)胞形態(tài)功能，使用RNA序列的全轉(zhuǎn)錄組分析和多種定量功能測(cè)定包括：比較性吞噬作用測(cè)定、遷移測(cè)定、鈣成像研究等。證實(shí)這個(gè)實(shí)驗(yàn)步驟分化的iHPCs和iMGLs都非常像它們的體內(nèi)對(duì)應(yīng)物。該分化方法需要低氧濃度的培養(yǎng)環(huán)境，要進(jìn)行幾次細(xì)胞重排、多種不同的細(xì)胞因子雞尾酒和流式細(xì)胞儀分選造血祖細(xì)胞，步驟相對(duì)比較繁瑣。

Haenseler等人首選建立了直接、高效、無(wú)血清和飼養(yǎng)層的方法將hiPSC誘導(dǎo)成HPSC[41]，并且已經(jīng)證明這種方法培養(yǎng)的是不依賴MYB轉(zhuǎn)錄因子，依賴RUNX1和PU.1的iHPSC，具有卵黃囊來(lái)源巨噬細(xì)胞的特征[24]。然后將HPSC與誘導(dǎo)多能干細(xì)胞來(lái)源的皮質(zhì)神經(jīng)元共培養(yǎng)，共培養(yǎng)可以保持神經(jīng)成熟和功能幾周，共培養(yǎng)產(chǎn)生的小膠質(zhì)細(xì)胞表達(dá)小膠質(zhì)細(xì)胞特有的標(biāo)記物和神經(jīng)退化疾病相關(guān)的基因，并且具有高度動(dòng)態(tài)的分支和吞噬功能[42]。他們發(fā)現(xiàn)共培養(yǎng)的小膠質(zhì)細(xì)胞下調(diào)了病理反應(yīng)通路，上調(diào)了自穩(wěn)功能通路，與單核細(xì)胞相比增加了促炎和促重構(gòu)的細(xì)胞因子反應(yīng)，證實(shí)了共培養(yǎng)是更好的真正的小膠質(zhì)細(xì)胞生理模型。

Douvaras使用限定的化學(xué)培養(yǎng)基在30d內(nèi)將人胚胎干細(xì)胞（hESCs）和誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（hiPSCs）分化產(chǎn)生表達(dá)CD14 / CX3CR1的小膠質(zhì)細(xì)胞祖細(xì)胞。小膠質(zhì)細(xì)胞祖細(xì)胞的進(jìn)一步分化產(chǎn)生動(dòng)態(tài)分支小膠質(zhì)細(xì)胞，表達(dá)典型的小膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)記物。 基因表達(dá)和細(xì)胞因子釋放分析顯示hiPSC衍生的（hiPSC-MG）與人原代小膠質(zhì)細(xì)胞之間有緊密相似性，以及與巨噬細(xì)胞的區(qū)別明顯。hiPSC-MG具有吞噬和響應(yīng)ADP刺激產(chǎn)生細(xì)胞內(nèi)Ca2+瞬變的功能，而巨噬細(xì)胞缺乏這種反應(yīng)。為了確保方案的穩(wěn)健性和可重復(fù)性，他們測(cè)試了來(lái)自不同疾病狀態(tài)、年齡和性別的個(gè)體共16個(gè)hiPSC系，并使用不同的重編程策略(如mRNA/microRNA, Sendai virus)，獲得來(lái)自所有細(xì)胞系的小膠質(zhì)細(xì)胞祖細(xì)胞，每一個(gè)未分化hiPSC的平均產(chǎn)量為2～3個(gè)祖細(xì)胞，該分化方案在16種多潛能干細(xì)胞系中是高度可重復(fù)的。并且證實(shí)祖細(xì)胞的產(chǎn)量與整個(gè)系統(tǒng)不相關(guān)，與特定疾病，重編程方法或供體的性別和年齡無(wú)關(guān)。由此方法產(chǎn)生的小膠質(zhì)細(xì)胞表達(dá)典型的標(biāo)記物，呈高度動(dòng)態(tài)分支，與人類原代小膠質(zhì)細(xì)胞有相近的吞噬效率。

總之，以上這些研究都從iPSCs得到了與人小膠質(zhì)細(xì)胞外形、功能及基因型類似的小膠質(zhì)細(xì)胞，為研究與小膠質(zhì)細(xì)胞相關(guān)的中樞疾病提供了很好的資源和模型。

3 hiPSC-MG應(yīng)用的展望

小膠質(zhì)細(xì)胞在大腦發(fā)育中起關(guān)鍵作用，如突觸的傳導(dǎo)和可塑性、神經(jīng)發(fā)生和神經(jīng)元生長(zhǎng)[43]等。小膠質(zhì)細(xì)胞介導(dǎo)的炎癥可損害大腦功能和結(jié)構(gòu)，也有很多證據(jù)表明小膠質(zhì)細(xì)胞激活對(duì)神經(jīng)退行性疾病有利，如阿爾茨海默?。ˋD）、帕金森?。≒D）和腎上腺腦白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)不良（ALD）[44,45]。 在ALD中，來(lái)自自體骨髓移植的吞噬細(xì)胞很可能通過(guò)替代突變小膠質(zhì)細(xì)胞來(lái)發(fā)揮它們的有益效果，因?yàn)樗鼈冏柚鼓┒松窠?jīng)炎癥和脫髓鞘作用[46]。此外，其他大腦功能障礙包括抑郁癥[47]，精神分裂癥和自閉癥已被認(rèn)為涉及小膠質(zhì)細(xì)胞功能障礙。

小膠質(zhì)細(xì)胞表達(dá)的基因突變被證實(shí)與多種人類疾病發(fā)病機(jī)制有關(guān)，人類小膠質(zhì)細(xì)胞疾病相關(guān)基因修飾或敲除的小鼠實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ鸵呀?jīng)證明小膠質(zhì)細(xì)胞在腦和脊髓各種疾病的發(fā)病機(jī)制方面發(fā)揮了重要作用。然而由于正常和疾病特異的人類來(lái)源小膠質(zhì)細(xì)胞短缺，阻礙了進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)室研究和臨床轉(zhuǎn)化?？朔@一障礙的一種解決方案是使用正常和疾病特異的hiPSCs-MG進(jìn)行疾病建模、藥物發(fā)現(xiàn)和研究及毒性篩選試驗(yàn)。

這些研究結(jié)果突出了來(lái)源于患者的細(xì)胞可成為再生資源的潛力，可研究人類小膠質(zhì)細(xì)胞在體內(nèi)的功能,探討神經(jīng)退行性疾病受到遺傳學(xué)和特定突變的遺傳影響，并將允許鑒定潛在的新型小膠質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)化療法。雖然hiPSC-MG的驗(yàn)證提出了小膠質(zhì)細(xì)胞在發(fā)育、健康和疾病等方面有關(guān)的一些新的問(wèn)題，但是這種新的可再生資源將允許這些問(wèn)題進(jìn)一步得到解決。